消瘀泄浊饮中活性成分鉴定以及HPLC法测定其中5种关键成分

目的利用高效液相色谱联合质谱技术鉴定消瘀泄浊饮中的活性成分,并利用HPLC法测定毛蕊异黄酮葡萄糖苷、大黄素、芦荟大黄素、杯苋甾酮、苦杏仁苷这5种成分的含量。方法采用液质联用技术测定消瘀泄浊饮中的生物活性成分,色谱柱:Waters HSS T3(100 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为0.1%甲酸-水溶液→0.1%甲酸-乙腈-异丙醇,梯度洗脱;流速:0.3 mL/min;柱温:40℃。高分辨质谱:鞘气40 Arb;辅助气10 Arb;离子喷雾电压3000 V/-2800 V;温度350℃;离子传输管温度320℃;扫描模式为Full-scan MS2模式。采用Progenesis QI进行基线过滤、峰识别、积分、保留时间校正、峰对齐,对比公共数据库和实验室自建数据库后得到消瘀泄浊饮中的生物活性成分。选择Sharpsil-U C_(18)色谱柱;流动相为甲醇→超纯水;梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;进样量:10μL;检测波长:210 nm(苦杏仁苷、杯苋甾酮),260 nm(毛蕊异黄酮葡萄糖苷、大黄素、芦荟大黄素)。结果从消瘀泄浊饮中共找到276种生物活性成分,其中负离子模式下找到119种,正离子模式下找到157种。选择毛蕊异黄酮葡萄糖苷、大黄素、芦荟大黄素、杯苋甾酮、苦杏仁苷为消瘀泄浊饮的指标成分。各成分均能有效检出,分离度良好,阴性无干扰;5种成分在测定的进样浓度范围内与峰面积线性关系良好;平均加样回收率为99.94%~101.07%;RSD为0.78%~2.27%。结论液质联用技术可以有效鉴定消瘀泄浊饮中的生物活性成分,所建立的HPLC法稳定性好,特异性强,可以为消瘀泄浊饮的质量控制和评价提供参考依据。

消瘀泄浊饮治疗慢性肾脏病气虚夹瘀证临床疗效观察

[目的]观察消瘀泄浊饮治疗慢性肾脏病（chronic kidney disease,CKD）气虚夹瘀证的临床疗效。[方法]选取CKD3-4期气虚夹瘀证患者60例,按随机化方法随机分成西医组（30例）和中西医结合组（30例）,西医组予以西医基础治疗,中西医结合组在西医基础治疗上加用消瘀泄浊饮。连续治疗12周,所有患者在服药时、服药后12周检查24h尿蛋白定量、肾功能、内生肌酐清除率eGFR。评价治疗前后的中医证候积分变化,对比总结临床疗效。[结果]两组治疗12周后临床疗效及中医证候疗效比较,中西医结合组均显著优于西医组（P〈0.05）。两组治疗后主要实验室指标均有改善,治疗后两组比较,血肌酐、血尿素氮、中医证候积分,中西医结合组显著低于西医组（P〈0.05）,eGFR显著高于西医组（P〈0.05）。[结论]西医基础治疗加用消瘀泄浊饮治疗CKD气虚夹瘀证患者,可更好的改善患者的肾功能及临床症状。

消瘀泄浊饮对肾间质纤维化大鼠的肾脏保护作用研究

目的:探讨消瘀泄浊饮对UUO模型大鼠的保护作用及作用机制。方法:实验采用UUO大鼠模型,将32只SD大鼠随机分为假手术组(S组)、模型组(M组)、洛汀新治疗组(B组)、消瘀泄浊饮组(X组)。分组用药并监测体重,给药14天后处死大鼠。测定大鼠左肾指数,血清肌酐、尿素氮、白蛋白水平;肾组织HE染色观察病理改变;用免疫组织化学方法检测肾组织α-SMA的表达。结果:消瘀泄浊饮能够明显降低实验大鼠血清肌酐、尿素氮水平,升高白蛋白水平,能降低肾组织中α-SMA蛋白表达,与模型组比较有显著性差异,形态学观察也显示其肾脏损害轻于模型组。结论:消瘀泄浊饮能有效地延缓肾间质纤维化的进程,可通过抑制α-SMA的表达,减少肌成纤维细胞的活化和形成,从而起到抗肾纤维化的作用。

李学铭运用消瘀泄浊饮治疗肾病的经验

全国名老中医李学铭从医近60载,擅治肾病及内科杂症。经过多年临证实践自拟消瘀泄浊饮,用于治疗慢性肾衰竭气虚夹瘀浊的病证。从该方的起源、组成、功用、临床运用加减及注意事项等方面全面介绍李老的经验方,与世医分享。

消瘀泄浊饮对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织TGF-β_1表达的影响

目的:通过研究消瘀泄浊饮及其化裁方痰瘀同治方对单侧输尿管(UUO)大鼠肾间质TGF-β1表达的影响,探讨其抗肾间质纤维化的可能机制。方法:实验采用UUO大鼠模型,将40只SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、洛汀新治疗组、消瘀泄浊饮组、痰瘀同治组。药物治疗14天后测定大鼠血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平;肾组织HE染色观察病理改变;采用免疫组织化学方法检测肾组织TGF-β1的表达;RT-PCR检测肾组织TGF-β1mRNA的表达;Western-blot检测肾组织TGF-β1蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠Scr、BUN、TGF-β1表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);消瘀泄浊饮、痰瘀同治方能够明显降低实验大鼠血清肌酐、尿素氮水平,能降低肾组织中TGF-β1表达,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05),形态学观察也显示其肾脏损害轻于模型组。从实验数据来看,痰瘀同治方治疗组有优于消瘀泄浊饮治疗组的趋势。结论:消瘀泄浊饮、痰瘀同治方能通过下调TGF-β1的表达,从而延缓肾间质纤维化的进展。痰瘀同治方的作用可能优于消瘀泄浊饮。

消瘀泄浊饮对实验性慢性肾衰竭动脉粥样硬化大鼠主动脉病理变化的影响

目的:观察消瘀泄浊饮对慢性肾衰竭(Chronic renal failure,CRF)动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)大鼠主动脉病理变化的影响。方法:40只SD雄性SPF级大鼠,随机选取10只作为正常组,其余大鼠采用5/6肾切除同时予高脂饮食制作CRF AS大鼠模型,造模10周后检测肾功能及血脂,随机分为消瘀泄浊饮组10只、立普妥组10只、模型组10只。治疗8周后,分别检测肌酐、尿素氮、总胆固醇、甘油三脂水平,用光学显微镜观察主动脉组织病理学改变。结果:与正常组比较,其余各组大鼠肌酐、尿素氮、甘油三酯、胆固醇水平显著升高(P <0.01);与模型组比较,消瘀泄浊饮组大鼠肌酐、尿素氮、甘油三酯、胆固醇水平显著降低(P <0.05,P <0.01),主动脉内膜的病变程度明显减轻。结论:CRF合并AS大鼠模型成功建立。消瘀泄浊饮在保护CRF大鼠肾功能的同时,可以改善脂代谢紊乱,防治AS。

消瘀泄浊饮对慢性环孢素肾病患者ACE2-Ang(1-7)-Mas轴相关组分的干预作用

目的观察消瘀泄浊饮对慢性环孢素肾病(CCN)患者血管紧张素转化酶2-血管紧张素(1-7)-Mas受体[ACE2-Ang(1-7)-Mas]轴相关组分的干预作用.方法选取2019年12月至2020年12月再生障碍性贫血(AA)伴CCN患者42例,随机分为对照组和干预组,每组各21例.对照组给予西医治疗,干预组在对照组基础上加用消瘀泄浊饮,治疗8周,比较治疗前后肾功能、ACE2-Ang(1-7)-Mas轴相关组分的变化.结果干预组治疗后肾功能优于对照组(P<0.01).干预组治疗后ACE2水平高于对照组(P<0.01).对照组治疗后转化生长因子-β(TGF-β)水平明显高于干预组(P<0.05).结论消瘀泄浊饮通过激活ACE2-Ang(1-7)-Mas轴,改善CCN患者的肾功能,延缓肾间质纤维化.

消瘀泄浊饮加味治疗肾癌术后肾功能不全患者临床观察

目的:观察消瘀泄浊饮加味治疗肾癌术后肾功能不全患者的临床疗效。方法:以消瘀泄浊饮为基础方,并根据中医证型不同随证配伍,对32例肾癌术后肾功能不全患者进行治疗,每天1剂,早、晚分服,每7天进行1次辨证论治,治疗3月为1疗程,治疗1月时进行肾功能检测,治疗1疗程后进行疗效评价及分析。结果:治疗后,疲乏、畏寒、腰酸症状评分,Karnofsky评分,肾小球滤过率(GFR)分别与治疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。肾功能情况总效率治疗1月时为90.6%,治疗3月时为93.8%。结论:消瘀泄浊饮加味治疗肾癌术后肾功能不全有良好疗效。

基于网络药理学研究消瘀泄浊饮治疗慢性肾功能衰竭的作用机制

目的:利用网络药理学方法研究消瘀泄浊饮治疗慢性肾功能衰竭(Chronic Renal Failure,CRF)的分子机制。方法:采用TCMSP与化学专业数据库及文献收集消瘀泄浊饮的有效活性成分和作用靶点。在GeneCards、OMIM、DrugBank、TTD数据库中获得CRF相关靶点,对消瘀泄浊饮药物靶点和CRF相关基因取交集。使用Cytoscape 3.7.2软件构建“药物活性成分-CRF-靶点”网络,将交集靶点导入STRING数据库,构建蛋白质相互作用网络(PPI),借助Metascape在线工具对关键靶点进行GO功能富集分析、KEGG通路富集分析,并用Autodock vina和Chimera-1.14软件对蛋白和活性成分进行分子对接。结果:通过筛选获得消瘀泄浊饮主要活性成分68个,249个靶点基因;CRF相关基因共1533个;交集靶点101个。消瘀泄浊饮治疗CRF的关键靶点为黄芪、川牛膝、车前草的共同主要成分AKT1,IL-6,以及大黄、黄芪、桃仁、川牛膝、车前草的共同主要成分PTGS2等。KEGG富集分析筛选出包括HIF-1信号通路、PI3K/Akt信号通路、NF-κB信号通路、JAK-STAT信号通路在内的185条通路,生物过程主要涉及对氧化应激的反应、凋亡、活性氧代谢等。分子对接结果显示,消瘀泄浊饮中槲皮素、木犀草素、芦荟大黄素等关键化合物与IL-6、PTGS2等关键靶点有较好的结合能力。结论:消瘀泄浊饮治疗CRF的作用机制可能是通过槲皮素、木犀草素、芦荟大黄素等活性成分,经HIF-1、PI3K/Akt、NF-κB、JAK-STAT等信号通路,作用于IL-6、PTGS2以调节细胞凋亡、氧化应激、脂多糖反应、活性氧代谢等多个生物过程,最终达到延缓CRF进展的作用。