协日嘎-4味散成分组成分析及6种成分含量测定

目的分析协日嘎-4味散成分组成,并测定黄柏碱、绿原酸、栀子苷、小檗碱、芦丁、姜黄素的含量。方法高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱(HPLC-Q-Exactive-MS)定性分析采用Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相甲醇-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.35 mL/min;柱温35℃;电喷雾离子源;正负离子扫描。高效液相色谱串联三重四级杆质谱(HPLC-MS/MS)定量分析采用Shim-pack GIST-HP C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,3μm);流动相甲醇-0.1%甲酸;体积流量0.25 mL/min;柱温35℃;电喷雾离子源;正负离子扫描;多反应监测模式。结果共鉴定出65种成分,包括19种生物碱、13种有机酸、13种黄酮、7种姜黄素、6种环烯醚萜、4种脂肪酸、2种醛、1种氨基酸。6种成分在各自范围线性关系良好(r≥0.9991),平均加样回收率96.44%~102.37%,RSD 2.05%~3.74%。结论本研究可为协日嘎-4味散的质量控制提供参考。

Famous traditional Mongolian medicine Xieriga-4(Turmeric-4)decoction:A review

Xieriga-4 Decoction,composed of dried rhizomes of Curcumae longae,barks of Phellodendron chinense or Phellodendron amurense,fruits of Cardenia jasminoides,and fruits of Tribulus terrestris,is a famous prescription of traditional Mongolian medicine for the treatment of urinary system diseases such as frequent urination,urgent urination,urine occlusion,hematuria,bladder irritation and pain.This paper reviewed Xieriga-4 Decoction from the aspects of historical description,prescription principle,chemical components,pharmacology,clinical application and quality control.

紫外分光光度法测定蒙药复方协日嘎-4中总酚酸含量

目的建立测定复方协日嘎-4中总酚酸含量的方法。方法采用紫外可见分光光度法测定,检测波长为720 nm。结果姜黄素进样量在11.84～82.88μg范围内与吸光度呈良好线性关系,回归方程为Y=8.177 5 X+0.127 7(r=0.999 2),加样回收率为101.77%,RSD为1.92%(n=6)。结论该方法简便、灵敏、准确,可用于复方协日嘎-4中总酚酸的含量测定。

蒙药复方协日嘎-4不同配伍对总酚酸和姜黄素含量的影响

目的:研究协日嘎-4不同药味组合与总酚酸和姜黄素含量之间的关系。方法:采用RP-HPLC法和紫外分光光度法测定协日嘎-4复方不同配伍中总酚酸和姜黄素的含量,采用统计学方法得出结论。结果:全方组中总酚酸和姜黄素的提取量最高(P<0.05)。结论:协日嘎-4不同药味配伍的总酚酸和姜黄素溶出具有显著性差异(P<0.05)。

蒙药复方协日嘎-4利尿作用实验研究

目的探讨蒙药复方协日嘎-4有效部位的利尿作用。方法采用小鼠滤纸称重法进行利尿试验。结果不同剂量的蒙药复方协日嘎-4对水负荷小鼠均有不同程度的利尿作用,其中,中剂量组利尿作用最强,高剂量组利尿作用次之。结论蒙药复方协日嘎-4有效部位具有明显的利尿作用。

蒙药协日嘎-4片利尿作用的实验研究

目的:观察蒙药协日嘎-4片的利尿作用.方法:运用大鼠钟罩法和小鼠滤纸称重法,观察尿量、排尿次数并做尿液分析.结果:蒙药协日嘎-4片明显增加大鼠和小鼠排尿量和排尿次数.结论:蒙药协日嘎-4片有明显的利尿作用而且对尿液成份没有影响.

HPLC法同时测定蒙药复方协日嘎-4中5种有效成分的含量

目的:建立同时测定蒙药复方协日嘎-4中高良姜素、高良姜素-3-甲醚、双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Elite C18,流动相为0.5%磷酸-乙腈(梯度洗脱),流速为0.6 m L/min,检测波长为235 nm(高良姜素、高良姜素-3-甲醚)、420 nm(双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素),柱温为25℃,进样量为10μL。结果:高良姜素、高良姜素-3-甲醚、双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素检测进样量线性范围分别为0.047 2~0.472 0μg(r=0.999 9)、0.104 0~1.040 0μg(r=0.999 9)、0.030 4~0.304 0μg(r=0.999 9)、0.039 2~0.392 0μg(r=0.999 8)、0.232 0~2.320 0μg(r=0.999 7);定量限分别为11.41、12.73、4.92、5.29、5.39 ng,检测限分别为3.41、3.72、1.46、1.59、1.62 ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3%;加样回收率分别为97.24%~102.93%(RSD=2.01%,n=6)、95.10%~101.50%(RSD=2.34%,n=6)、95.23%~97.61%(RSD=0.97%,n=6)、97.10%~100.65%(RSD=1.24%,n=6)、98.69%~101.15%(RSD=0.99%,n=6)。结论:该方法简单、准确、重复性好,可用于蒙药复方协日嘎-4中高良姜素、高良姜素-3-甲醚、双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素含量的同时测定。

高效液相色谱法同时测定蒙药复方协日嘎-4中4种成分的含量

目的建立HPLC法同时测定蒙药协日嘎-4中4种成分的含量。方法采用Elite C18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)和0.5%醋酸水溶液(B),梯度洗脱,流速为0.8 m L·min-1,柱温30℃,检测波长270 nm和420 nm,进样量为10μL。结果黄芩苷、双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素的质量浓度在线性范围与其峰面积有良好的线性关系(R>0.9998);平均回收率分别为97.2%、97.1%、96.4%、96.8%,RSD分别为1.1%、1.4%、0.86%、1.0%;平均含量分别为0.0080%、0.0377%、0.0292%、0.0631%。结论经方法学验证,本方法可用于协日嘎-4中4种化学成分含量测定。

不同配伍对蒙药复方协日嘎-4总生物碱和盐酸小檗碱含量的影响

目的:探究蒙药复方协日嘎-4不同配伍组合对总生物碱、盐酸小檗碱含量的影响。方法:以组方中姜黄、黄柏、栀子、蒺藜的配伍为因素,配伍后处方提取液中总生物碱、盐酸小檗碱的含量为指标,分别研究不同配伍对总生物碱、盐酸小檗碱含量的影响。结果:通过统计分析,分别研究不同配伍组中总生物碱、盐酸小檗碱含量之间的关系,其中全方组中总生物碱最高(P<0.05),盐酸小檗碱的提取量较高(P<0.05)。结论:不同的药味组合中,总生物碱、盐酸小檗碱的溶出具有显著性差异(P<0.05)。

紫外可见分光光度法测定大鼠血清中蒙药协日嘎-4总酚酸的含量

目的:建立紫外可见分光光度法测定灌胃给予蒙药协日嘎-4大鼠血清中总酚酸含量的方法[1]。方法:采用紫外可见分光光度计,以姜黄素为对照品,三氯化铁-铁氰化钾为显色剂[2,3],在720nm处测定吸光度,测定灌胃给予蒙药协日嘎-4后大鼠血清中总酚酸的含量。结果:采用紫外分光光度法测定大鼠血清中总酚酸含量时,在1.03~3.61μg范围内线性关系良好,回归方程为Y=239.94 X-0.1439(R=0.9999),加样回收率为98.71%,RSD为2.76%。结论:该方法灵敏、可靠、准确,本方法可用于蒙药协日嘎-4大鼠血清中总酚酸的含量测定。

蒙药协日嘎四味滴丸的制备工艺及质量标准研究

目的:建立蒙药协日嘎四味滴丸的最佳成型工艺,并明确质量控制标准。方法:采用正交设计实验法,以滴丸的外观综合评分、溶散时限、丸重差异等为评价指标,筛选出协日嘎四味滴丸最佳成型工艺。采用HPLC对协日嘎四味滴丸中姜黄素进行定量研究。结果:以PEG4000与PEG6000的比例为1∶2,药物与基质的比例为1∶2,滴距为10 cm,料温为80℃,滴速为20~30滴/min时药物成型率最高。根据实验确定的成型工艺制备的3批样品,符合2020年版《中华人民共和国药典》关于滴丸的规定。协日嘎四味滴丸中姜黄素的回收率为100.17%,RSD值为0.54%,样品中姜黄素含量为13.47 mg/g,符合2020年版《中华人民共和国药典》对滴丸的含量规定。结论:该制备工艺合理、简便、易于控制,适用于本方药的滴丸制剂制备。

蒙药复方协日嘎四味的研究进展

建立对蒙药复方协日嘎四味的相关化学成分、药理作用、临床应用、质量控制、剂型改进等科学研究并进行文献综述,为进一步深入研究和开发应用该蒙药提供参考依据。

RP-HPLC法同时测定蒙药复方协日嘎-4中栀子苷、京尼平-1-O-β-D-龙胆二糖苷、西红花苷-1、西红花苷-3的含量

建立同时测定蒙药复方协日嘎-4药材中栀子苷、京尼平-1-O-β-D-龙胆二糖苷、西红花苷-1、西红花苷-3的高效液相色谱含量测定方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Elite C18(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相,流速1.0mL·min^(-1),检测波长分别为238nm、238nm、380nm、380nm,柱温20℃,进样量20μL.本方法可使京尼平-1-O-β-D-龙胆二糖苷、栀子苷、西红花苷-1、西红花苷-3有效分离,在检测范围内线性良好,精密度、稳定性和重复性良好,平均加样回收率分别为100.16%(RSD=0.69%),99.19%(RSD=1.29%),100.59%(RSD=0.80%),99.06%(RSD=1.02%),(n=6).经方法学验证,该方法可同时准确、简便、快速的测定蒙药复方协日嘎-4中栀子苷、京尼平-1-O-β-D-龙胆二糖苷、西红花苷-1、西红花苷-3的含量,可以作为蒙药复方协日嘎-4的质量控制方法.

蒙药协日嘎-4不同配伍对总萜和栀子苷含量的影响

采用RP-HPLC法和紫外分光光度法测定协日嘎-4不同配伍中栀子苷和总萜的含量,通过对结果进行统计分析,研究协日嘎-4不同药味组合与总萜和栀子苷含量之间的关系.结果表明,全方组中总萜和栀子苷的提取量最高(P<0.05).协日嘎-4不同药味配伍的总萜和栀子苷溶出具有显著性差异(P<0.05).

HPLC法测定蒙药复方协日嘎-4中栀子苷、姜黄素、盐酸小檗碱的含量

建立同时测定蒙药复方协日嘎-4中栀子苷、姜黄素、盐酸小檗碱的HPLC含量测定方法.建立的色谱系统为:用Elite C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.4%磷酸二氢钾水溶液(B)为流动相,柱温30℃,检测波长栀子苷238nm,姜黄素、盐酸小檗碱346nm,流速1.0mL·min-1.本方法可使栀子苷、姜黄素、盐酸小檗碱有效分离,在各自的检测范围内线性良好,精密度和重复性良好,加样回收率分别为98.83%(RSD=1.90%)、98.07%(RSD=2.03%)、99.36%(RSD=1.43%).经过方法学验证,该方法可同时、简便、快速、准确的测定蒙药复方协日嘎-4中栀子苷、姜黄素、盐酸小檗碱的含量,可以作为蒙药复方协日嘎-4的质量控制方法.

蒙药复方协日嘎-4的网络药理学研究

目的对蒙药复方协日嘎-4进行网络药理学研究,探索其治疗前列腺增生、前列腺癌等疾病的活性成分和作用靶点,运用计算机网络药理学技术对协日嘎-4所含化学成分的作用机制进行分析。方法通过中国知网,万方数据库等数据库筛选蒙药复方协日嘎-4所含化合物信息,通过Pubmed、Super Target、Drug Bank、TTD(Therapeutic Targets Database)等数据库收集蒙药协日嘎-4中化学成分对应的靶点,通过KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)、IPA(Ingenuity Pathway Analysis)等数据库收集相关信号通路,采用Cytoscape软件建立多成分-多靶点和多成分-多靶点-多疾病网络模型。结果药物与靶点之间存在的相关性为潜在靶点的探索提供了一条新途径。筛选结果显示蒙药复方协日嘎-4中有33种化合物与12种生物靶标存在网络交互作用,他们之间的相关性,揭示了网络药理学"多成分""多靶点"的特征。同时化合物与靶点连接最终共同作用于疾病即良性前列腺增生和前列腺癌,建立了蒙药复方协日嘎-4化学成分-靶点-疾病网络模型。通过数据库筛选得到两条主要信号通路,雄激素受体(AR)信号通路和Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路。结论本文建立了一条"疾病-靶点-药物"的蒙药复方网络药理学的研究模式,为蒙药的研究和发展提供了新的思路和方法。

蒙药协日嘎-4的分子对接研究

基于前期网络药理学的研究,对蒙药复方协日嘎-4中化学成分与前列腺增生和前列腺癌受体进行分子对接研究,共筛选出32个相关化合物,9个相关受体,分别对接.判断二者结合自由能的大小,并分析受体与配体的相互作用.结果显示,齐墩果酸与所有受体结合能都较低,汉黄芩素、姜黄素、山奈酚、异鼠李素等与多个受体结合能较低;通过对协日嘎-4中化学成分与受体的研究,为后期协日嘎-4对前列腺癌和前列腺增生的作用机制研究提供参考.

蒙药复方协日嘎-4在正常和前列腺炎症模型大鼠血清中总生物碱的含量比较研究

通过灌胃给予正常组和完全弗氏佐剂致前列腺炎症模型组大鼠相同剂量的蒙药复方协日嘎-4提取液,采用紫外可见分光光度法,以小檗碱为对照品,在419nm波长处测定大鼠血清中总生物碱吸光度,计算并比较蒙药复方协日嘎-4在正常和完全弗氏佐剂致前列腺炎症模型大鼠血清中总生物碱的含量.结果显示3个批次正常组大鼠血清中总生物碱的平均含量分别是0.0639mg.mL-1、0.0658mg.mL-1、0.0673mg.mL-1;3个批次完全弗氏佐剂致前列腺炎症模型组大鼠血清中总生物碱的平均含量分别是0.0546mg.mL-1、0.0569mg.mL-1、0.0594mg.mL-1.说明蒙药复方协日嘎-4中总生物碱类成份对非细菌性前列腺炎症大鼠有一定的调控作用,为蒙药复方协日嘎-4治疗非细菌性前列腺炎提供一定的科学依据.