西黄丸调控MDSCs改善乳腺癌肺转移的作用及机制研究

[目的]探讨西黄丸对三阴性乳腺癌肺转移的机制。[方法]构建三阴性乳腺癌4T1-BALB/c原位荷瘤小鼠,流式细胞术检测荷瘤小鼠血液、骨髓、肺组织内骨髓源性抑制细胞(MDSCs);通过苏木精-伊红(HE)染色确定小鼠肺转移微环境形成时间;利用蛋白质印迹(Western blotting)检测肺组织相关蛋白水平;通过对比各组小鼠肺转移微环境形成时间、肺组织骨髓及外周血中MDSCs数量、肺转移结节、肺转移组织相关蛋白探究西黄丸对乳腺癌肺转移的作用及机制。[结果]西黄丸及乳香、没药药对均在第14天对移植瘤有显著抑制作用;西黄丸能够延长乳腺癌肺转移出现时间(17 d vs. 14 d),且可以显著减少乳腺癌肺转移结节灶的数量;西黄丸能够抑制4T1-BALB/c荷瘤小鼠外周血及肺组织中MDSCs数量,且显著降低肺组织中基质金属蛋白酶9(MMP9)、S100A8/A9表达量。[结论]西黄丸可通过调控外周血及肺组织中MDSCs数量,抑制MMP9、S100A8/A9表达重塑乳腺癌肺转移微环境形成,达到抑制乳腺癌肺转移目的。研究为西黄丸临床抗肿瘤转移应用奠定基础。

西黄丸联合紫杉醇抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231的作用机制研究

目的研究西黄丸(Xihuang wan,XHW)联合紫杉醇(paclitaxel,PTX)对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、凋亡的影响及其分子机制。方法首先,通过低温浸提法获得西黄丸浸液,用不同浓度的西黄丸浸液单独或联合紫杉醇处理MDA-MB-231细胞系,通过CCK8实验检测细胞增殖,流式细胞术检测其凋亡的变化,ELISA检测细胞上清中前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)含量。结果单独使用西黄丸即可抑制MDA-MB-231增殖,联用紫杉醇抑制细胞增殖效果更明显;单用西黄丸可诱导MDA-MB-231凋亡,联用紫杉醇诱导凋亡效果也可获得提高;紫杉醇会诱导细胞外液中PGE2含量升高,联用西黄丸可降低升高的PGE2。结论西黄丸联合紫杉醇可更好地诱导人乳腺癌细胞系MDA-MB-231发生凋亡并抑制其增殖,同时还可以抑制受紫杉醇诱导而升高的PGE2,这可能是西黄丸联用化疗药防止肿瘤复发、转移的重要分子机制之一。

西黄丸防治宫颈癌放疗引起的急性放射性肠炎临床观察

目的观察西黄丸对宫颈癌放疗引起的放射性肠炎的作用及对患者生活质量的影响。方法选择宫颈癌放疗过程中出现放射性肠炎的患者58例,按随机数字表法分为两组,对照组28例予对症治疗,观察组30例给予西黄丸治疗,观察总体疗效、肠镜疗效、中医单项症状积分以及生活质量状况、变化情况。结果观察组与对照组肠道损伤分级差异无统计学意义(P>0.05);观察组肠镜缓解率为83.33%,明显优于对照组的64.33%(P<0.05),观察组中医单项症状积分及生活质量状况评分显著优于对照组(均P<0.05)。结论西黄丸治疗宫颈癌放疗引起的放射性肠炎具有较好的临床疗效。

西黄丸中总糖含量测定

目的：测定西黄丸中水溶性总糖含量。方法：以蒽酮-硫酸比色法,葡萄糖为对照,测定波长626nm。本实验对显色剂的浓度和总糖提取方法进行了改进,设计了四个浓度的显色剂,以一定的体积加入显色,分别在线性范围内做标曲,从整体上选择出最佳的显色剂浓度;总糖的提取方法改用称重补重的回流方法,在一定程度上提高了该提取方法的重复性。结果：葡萄糖在2.0-24.0μg/mL范围内呈良好的线性关系,标准曲线回归方程为Y=0.0555X＋0.0019,R^2=0.9996,Y为吸光度,X为浓度。平均回收率97.5%（n=6）,RSD=1.21%。结论：此法稳定可行,结果准确,专属性好,可用于测定西黄丸中总糖含量。

基于Wnt/β-catenin通路探讨西黄丸对三阴乳腺癌细胞4T1增殖及干性成球能力的影响

目的基于Wnt/β-catenin信号通路评价西黄丸对三阴乳腺癌细胞4T1的增殖及干性成球能力的影响。方法制备西黄丸浸提液,采用CCK8的方法,筛选最佳给药浓度,检测其对4T1细胞增殖能力的影响,采用无血清干细胞成球实验检测其对4T1细胞干性成球能力的影响,通过Transwell实验检测其对4T1细胞的迁移和侵袭能力的影响,RT-PCR实验检测Wnt/β-catenin信号通路介导的上皮细胞间充质转化(EMT)的相关mRNA的表达。结果西黄丸可以抑制细胞的增殖、干细胞成球能力和肿瘤细胞的迁移侵袭,RT-PCR结果显示E-cadherin相对上调,Vimentin、β-catenin表达下调,且西黄丸可协同Wnt/β-catenin通路活性抑制剂XAV939抑制细胞的增殖、干细胞成球能力和肿瘤细胞的迁移侵袭。结论西黄丸可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路介导的EMT,干预肿瘤细胞的"干性",从而防治肿瘤转移。

西黄丸通过影响甘氨酸代谢抑制乳腺癌小鼠肿瘤生长的机制研究

目的:研究西黄丸对荷4T1乳腺癌小鼠甘氨酸代谢的影响,观察肿瘤生长情况,进而探讨药物抑瘤作用新途径。方法:建立4T1小鼠乳腺癌荷瘤模型,造模第2天西黄丸连续灌胃给药14 d,第15天眼球取血,剥离荷瘤组织进行称质量、切片、匀浆。采用HPLC-MS检测血浆中甘氨酸浓度;称质量法计算抑瘤率;TUNEL染色测肿瘤细胞凋亡;体外实验测甘氨酸对肿瘤细胞增殖、凋亡的影响。结果:模型组血浆甘氨酸浓度明显低于正常组(P<0.05),西黄丸组血浆甘氨酸浓度明显高于模型组(P<0.01);西黄丸组抑瘤率为33.3%;TUNEL染色显示西黄丸组肿瘤细胞凋亡增加;含甘氨酸培养基较正常培养基肿瘤细胞增殖明显;早、晚期凋亡均减少。结论:西黄丸可通过抑制肿瘤细胞对甘氨酸的摄取,抑制细胞增殖、促进细胞凋亡,进而抑制荷瘤生长。

西黄丸联合三维适形放疗治疗骨转移癌痛的临床观察

目的:探讨西黄丸联合三维适形放疗治疗骨转移癌痛的临床疗效。方法:将47例骨转移癌患者随机分为观察组和对照组,观察组(n=24)采用口服西黄丸和三维适形放疗,对照组(n=23)采用三维适形放疗。治疗结束后观察两组患者的止痛效果,白细胞减少及生活质量KPS改善情况。结果:观察组患者疼痛缓解率、白细胞减少发生率及生活质量改善情况明显优于对照组,两组的差异具有显著性(P<0.05)。结论:西黄丸联合三维适形放疗治疗骨转移癌疼痛疗效明显,提高了患者耐受性,改善了患者的生活质量,值得临床推广。

四妙勇安汤合犀黄丸加减治疗溃疡型胃癌及对MTDH蛋白的影响

目的:观察四妙勇安汤合犀黄丸加减联合西药治疗溃疡型胃癌的临床疗效及对患者人异粘蛋白(MTDH)表达的影响。方法:将溃疡型胃癌患者76例随机分为对照组与观察组,各38例。对照组采用常规西药治疗,观察组在对照组的基础上加用四妙勇安汤合犀黄丸加减方治疗,观察患者症状及体征的改善情况,比较2组治疗效果,并检测治疗前后患者MTDH蛋白表达水平。结果:总有效率观察组为89.47%,对照组为63.16%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组患者胃脘痛、五心烦热、痞满、便干色黑症状积分均较治疗前降低(P<0.05),且观察组上述各项积分下降较对照组更显著(P<0.05)。治疗后MTDH过度表达率观察组为13.16%,对照组为36.84%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。2组治疗期间均未见严重不良反应。结论:采用中药四妙勇安汤合犀黄丸加减联合西药常规方案治疗溃疡型胃癌,可提高临床疗效,降低MTDH过度表达,安全性较高。

西黄丸含药血清对SW480人结肠癌细胞迁移及侵袭的影响

目的:研究西黄丸对人结肠癌细胞SW480迁移及侵袭的影响,并初步探讨其作用机制。方法:以人结肠癌细胞SW480为研究对象,细胞划痕试验检测不同剂量西黄丸含药血清对SW480细胞迁移的影响,并Transwell侵袭实验检测西黄丸含药血清对细胞侵袭能力的改变;用Western blot的方法检测细胞外调节蛋白激酶(ERK)和p-ERK蛋白表达水平,RTq PCR法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin),多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP-1)、波形蛋白(Vimentin)和转录因子Snail的mRNA水平。结果:与空白组比较,西黄丸含药血清可降低SW480细胞迁移及侵袭的能力,增加E-cadhenrin mRNA表达水平,并抑制PARP-1,Vimentin和Snail mRNA表达水平,明显降低ERK蛋白的磷酸化水平,均具有统计学意义(P<0.05)。结论:西黄丸含药血清可抑制SW480细胞的体外侵袭及迁移,并影响上皮-间皮转化(EMT)相关基因E-cadherin,PARP-1,Vimentin和Snail的mRNA表达,其机制可能与ERK/MAPK信号通路有关,本研究为西黄丸抑制结肠癌转移提供了科学证据。

西黄丸联合化疗治疗恶性肿瘤疗效的Meta分析

目的通过Meta分析评价西黄丸联合化疗治疗恶性肿瘤的临床疗效。方法检索中国学术期刊全文数据库(CNKI)、维普中文科技期刊数据库(VIP)、万方数据知识服务平台、Cochrane图书馆、Pub Med、EMbase数据库,检索日期截至2014年9月。纳入使用西黄丸联合化疗与单纯化疗对照治疗恶性肿瘤的随机对照试验研究,使用统一资料提取表提取患者一般资料、干预措施、观察指标等信息,采用Cochrane协作网提供的偏倚风险评估工具对纳入研究进行方法学质量评价,采用Revman 5.3软件对患者近期有效率、KPS评分改善率进行Meta分析。结果共纳入9项研究,涉及516例患者,均为中文文献,文献质量偏低。Meta分析结果显示,与单纯化疗比较,西黄丸联合化疗可提高恶性肿瘤患者近期有效率[OR=1.49,95%CI(1.03,2.15),Z=2.13,P=0.03,9篇文献]以及KPS评分改善率[OR=2.71,95%CI(1.47,4.97),Z=3.21,P=0.001,5篇文献]。结论西黄丸联合化疗与单纯化疗比较,可能会提高恶性肿瘤治疗近期有效率,并具有一定改善KPS评分的效果。