溪黄草破壁饮片指纹图谱及化学成分含量测定研究

目的:建立溪黄草破壁饮片的指纹图谱含量测定方法,为溪黄草破壁饮片的质量控制提供参考依据。方法:采用同一HPLC建立溪黄草破壁饮片指纹图谱及咖啡酸与迷迭香酸的含量测定方法,以Platisil C_(18) (5μm,4.6×250 mm)为色谱柱,流动相选择乙腈-含0.1%磷酸的水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,柱温为35℃,检测波长为327 nm。色谱数据采用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价分析系统,生成标准指纹图谱。结果:10批溪黄草破壁饮片有7个共有峰,相似度为0.867~0.983,并指认出2个色谱峰。咖啡酸在0.0354~0.1239 mg/mL(R^(2)=0.9999)、迷迭香酸在0.0866~0.3030 mg/mL(R^(2)=0.9999)范围内呈良好的线性关系。重复性试验、稳定性试验和精密度试验的RSD均<2%,加样回收率为咖啡酸91.4%~94.6%,RSD=1.3%、迷迭香酸93.6%~97.5%,RSD=1.6%。结论:本方法准确可靠,重现性好,为溪黄草的质量控制提供科学依据。

RAPD技术在溪黄草类原植物鉴别中的应用

采用ＲＡＰＤ技术对中药溪黄草类４种原植物进行鉴定研究，结果表明ＲＡＰＤ技术是一种有效的中药鉴定方法，对药材的“地道性”

中药溪黄草及其药用近缘种的RAPD分析

运用１４个有效的１０ｍｅｒ寡核苷酸引物对中药溪黄草原植物线纹香茶菜Ｉｓｏｄｏｎｌｏｐｈａｎｔｈｏｉｄｅｓ及其药作近缘种基因组ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增，共检出１９４个位点．其中单态位点１４个，占７２％；多态位点１８０个，占９２８％；分类群特有位点１０８个，占５５７％．用ＵＰＧＭＡ法对分类群间的Ｊａｃａｒｄ相似性系数和遗传距离进行聚类分析．结果表明，狭基线纹香茶菜和细花线纹香茶菜与溪黄草的亲缘关系较近，而溪黄草与线纹香茶菜、狭基线纹香茶菜、细花线纹香茶菜之间的亲缘关系远．可用ＲＡＰＤ技术对中药的正本清源、真伪品及质量进行研究．

广东溪黄草药材的原植物调查及商品鉴定

对广东主要中药溪黄草产地进行了原植物采集和调查,鉴定出其基源植物为狭基线纹香茶菜、线纹香茶菜、细花线纹香茶菜和溪黄草4种;并通过商品鉴定查明广东市场流通的溪黄草药材主要来自狭基线纹香茶菜和溪黄草2种。

溪黄草与虎杖煎剂利胆作用的实验研究

目的研究溪黄草与虎杖水煎剂对大鼠的利胆作用。方法采用十二指肠给药,进行胆总管插管术,观察溪黄草与虎杖水煎剂对大鼠胆汁流量以及对胆汁成分的影响。结果溪黄草水煎剂、虎杖水煎剂均明显增加大鼠胆汁流量(P(0.01);溪黄草水煎剂可明显降低胆汁中胆固醇含量,对胆红素和胆汁酸含量无影响;虎杖水煎剂明显降低胆汁中胆固醇和胆红素含量,并能显著增加胆汁酸含量。结论溪黄草与虎杖水煎剂有明显的利胆作用,并对胆汁成分有一定影响。

溪黄草茶浸膏对化学性肝损伤的保护作用

目的观察溪黄草茶浸膏对小鼠和大鼠的化学性肝损伤的保护作用和退黄作用。方法以0.1%CCl4花生油溶液腹腔注射,制备小鼠急性化学性肝损伤模型,测定血清谷丙转氨酶(SGPT);以α-萘异硫氰酸酯(ANIT)造成大鼠黄疸模型,测定血清总胆红素水平。结果该药对CCl4所致小鼠急性肝损伤和ANIT所致大鼠黄疸模型引起的血清谷丙转氨酶及血清总胆红素(STBIL)的升高有明显的降低作用(P<0.01)。病理检查证实,该药具有明显的减轻肝细胞的肿胀、脂变、坏死、炎性浸润等症状的作用。结论溪黄草茶浸膏有一定的降酶利胆和保肝护肝的作用。

中药溪黄草及其药用近缘种的花粉形态

用光学显微镜和扫描电镜对中药溪黄草４种基源植物的花粉形态进行了观察和比较研究．结果表明：光学显微镜下该四种植物的花粉形态相似，赤道面观长球形至扁球形，极面观６裂圆形，具６沟，外壁具粗网状纹饰，而扫描电镜下４种花粉在外壁纹饰、萌发沟等方面存在着明显差异，这些差异可为近缘种的鉴定以及该类生药的鉴定提供依据．

溪黄草配伍虎杖煎剂对大鼠实验性肝损伤的保护作用

目的观察溪黄草配伍虎杖煎剂对大鼠肝损伤的协同保护作用及其机制。方法60只大鼠随机分为5组,即对照组(不用药)、模型组(CCl4损伤)、溪黄草组(CCl4损伤+溪黄草煎剂)、虎杖组(CCl4损伤+虎杖煎剂)、配伍组(CCl4损伤+溪黄草煎剂和虎杖煎剂);用药8周后,用比色分析法测定大鼠血清天冬氨酸转氨酶(ALT)、丙氨酸转氨酶(AST)的活性;测定大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)的含量。结果溪黄草组和虎杖组血清ALT,AST的活性、肝组织MDA明显降低;而肝组织SOD,GSH-Px的活性明显增高(P<0.01);配伍组降低血清ALT,AST的活性,提高SOD,GSH-Px的活性,降低MDA含量的作用远较溪黄草组和虎杖组明显(P<0.01)。结论溪黄草水煎剂配伍虎杖水煎剂对CCl4所致大鼠急性肝损伤有协同保护作用,优于单味药物的保肝作用。

线纹香茶菜叶上腺毛发育的细胞学研究

为进行中药溪黄草基原植物的品种鉴定,采用光镜和电镜对线纹香茶菜(原变种)[Isodon lophanthoides var.lophanthoides]叶上腺毛的发育进行细胞学研究。结果表明,线纹香茶菜具有头状腺毛和盾状腺毛2种类型。头状腺毛无色透明,由1个基细胞、1个柄细胞和1或2个头部分泌细胞构成;盾状腺毛为红色,由1或2个基细胞、1个柄细胞和4~8个分泌细胞构成头部。2种腺毛均由原表皮细胞经两次平周分裂形成,后因柄细胞和头部细胞所处的分化状态不同而形成两类腺毛。2种腺毛超微结构表明,质体、高尔基体和粗面内质网为主要分泌物产生和运输的细胞器。当盾状腺毛成熟时,角质层下间隙充满了分泌物,其分泌物的性质很可能决定了线纹香茶菜腺毛的颜色。

溪黄草、虎杖煎剂对家兔胆囊运动及胆道括约肌紧张性的影响

[目的]研究溪黄草、虎杖水煎剂对家兔的利胆作用。[方法]采用十二指肠给药,观察溪黄草与虎杖水煎剂对家兔胆囊收缩频率以及对家兔胆道括约肌紧张性的影响。[结果]溪黄草水煎剂、虎杖水煎剂均显著增加胆囊收缩频率(P(0.01),显著降低胆道括约肌紧张性(P(0.01)。[结论]溪黄草与虎杖水煎剂对胆囊运动有加强作用,对胆道括约肌有明显舒张作用,说明溪黄草与虎杖有明显的利胆作用。

溪黄草口服液制备工艺研究

目的：制备质量稳定、澄清的溪黄草口服液。方法：以口服液中总黄酮含量为指标，用正交试验优选提取工艺，用甲壳质与乙醇作澄清工艺比较优选澄清工艺。结果：溪黄草加水１５ 倍，提取３ 次，每次１ｈ ，用３５０ｐｐｍ 浓度甲壳质吸附澄清，总黄酮含量高、稳定性好。结论：用水提取、甲壳质吸附澄清制备的口服液质量稳定、澄明度好。

溪黄草配伍虎杖煎剂利胆作用的实验研究

目的:观察溪黄草与虎杖水煎剂配伍对大鼠的利胆作用。方法:采用十二指肠给药,进行胆总管插管术,观察溪黄草与虎杖水煎剂配伍对大鼠胆汁流量以及对胆汁成分的影响。结果:溪黄草水煎剂、虎杖水煎剂均明显增加大鼠胆汁流量(P<0.01);配伍组增加大鼠胆汁流量的作用远较溪黄草组和虎杖组明显(P<0.05),也显著降低胆汁中胆固醇和胆红素含量,增加胆汁酸含量。结论:溪黄草与虎杖水煎剂配伍有显著的利胆作用,优于单味中药的利胆作用,并对胆汁成分有一定影响。

溪黄草袋泡茶和其茶水中微量元素分析

用火焰原子吸收分光光度法和可见分光光度法测定了溪黄草袋泡茶和其茶水中微量元素的含量。结果显示溪黄草袋泡茶和其茶水含有丰富的人体必需的微量元素。

溪黄草多酚提取工艺研究

溪黄草多酚的最优提取工艺,选用溪黄草粉末为原料,利用乙醇作为提取溶剂,同时用超声波进行辅助。实验考察了溶剂的体积分数、料液比、提取温度以及超声时间四个因素,进行单因素试验,研究其对溪黄草多酚提取率的影响。为了进一步优化多酚的提取工艺,基于单因素试验的结果设计了四因素四水平正交试验。得出溪黄草多酚的最优提取工艺为乙醇体积分数为75%,超声辅助提取时间为30min,料液比为1:50,提取的温度为35℃。

中药溪黄草四种基源植物的染色体数初报

采用酶解去壁低渗法对中药溪黄草(Isodon serra(Maxim.)Hara)4种基源植物的体细胞染色体进行研究。结果表明,线纹香茶菜(I.lophanthoides(Buch.-Harn.ex D.Don)Hara)体细胞染色体数为2n=3x=36,推测其为三倍体植株;其余3种基源植物,溪黄草(I.serra(Maxim.)Kudo)、狭基线纹香茶菜(I.lophanthoides var.gerardiana(Benth.)H.Hara)和细花线纹香茶菜(I.lophanthoides var.graciliflora(Benth.)H.Hara),均为2n=2x=24,为二倍体。该4种基源植物染色体数均为首次报道,其中,线纹香茶菜三倍体居群的首次发现为中药溪黄草基源种的鉴定、遗传育种提供依据。

溪黄草药材质量标准研究

目的:研究溪黄草药材的薄层鉴别及含量测定方法,提升溪黄草药材现有质量控制标准。方法:用薄层色谱法鉴别溪黄草药材中的迷迭香酸,利用高效液相色谱法测定齐墩果酸、熊果酸含量。结果:建立的薄层色谱方法能够准确定性溪黄草药材,HPLC方法能够准确测定溪黄草药材中齐墩果酸、熊果酸含量,加样回收率分别为99.78%(RSD=0.56%)、100.68%(RSD=0.67%)。结论:该方法操作简便、数据准确、重复性良好,可用于溪黄草药材的质量控制。

HPLC法测定复方溪黄草颗粒中咖啡酸的含量

目的:建立复方溪黄草颗粒中咖啡酸含量测定的方法。方法:采用HPLC法,色谱柱:Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μL),流动相:甲醇-0.01 mol·L-1磷酸二氢钠溶液(pH值=4.0,20∶80),检测波长323 nm,流速:1.0 mL·min-1,柱温:25℃。结果:咖啡酸在10.56-105.6μg的浓度范围呈良好的线性关系,r=0.9998。平均回收率为99.95%,RSD%为1.08%。结论:该方法简便、准确、重现性好,可用于复方溪黄草颗粒的质量控制。

中西医结合方案治疗慢性乙型肝炎的临床研究

目的:探讨中西医结合方案治疗慢性乙型肝炎(CHB)的临床疗效。方法:76例CHB患者随机分成观察组39例和对照组37例。对照组采用派罗欣180μg/次,1次/周,sc,观察组在此基础上根据不同中医证候加用十味溪黄草颗粒或人参健脾丸。疗程均为48周。观测两组肝功能、中医证候积分、HBV-DNA定量及乙肝病毒血清标志物。结果:疗后24,48周观察组血清HBV-DNA水平低于对照组(P<0.05,P<0.01);疗后12,24,48周观察组中医证候积分明显低于对照组(P<0.01);疗后24,48周观察组门冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶(ALT),总胆红素(TBil)水平低于对照组(P<0.05,P<0.01);疗后48周观察组肝功复常率及HBV-DNA转阴率均优于对照组(P<0.05)。结论:中西医结合治疗CHB较单纯的西医治疗有更明显的临床优势,值得推广使用。

基于UPLC-Q-TOF-MS和UPLC-DAD的不同品种溪黄草主要化学成分分析

采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)鉴定不同品种溪黄草中主要化学成分,通过超高效液相色谱-二极管阵列检测器法(UPLC-DAD)同时测定不同品种溪黄草中5种活性成分(咖啡酸、迷迭香酸、夏佛塔苷、异夏佛塔苷、冬凌草甲素)的含量。实验采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以甲醇(B)-0.1%甲酸水(A)为流动相梯度洗脱进行色谱分离,流速0.3 mL·min^(-1),柱温30℃;Q-TOF-MS在电喷雾正离子模式下采集数据,分流比为1∶1;采用UPLC-DAD定量,检测波长245 nm。UPLC-Q-TOF-MS鉴定了不同品种溪黄草中的32种主要化学成分,其中溪黄草(Rabdosia serra)19种,显脉香茶菜9种,线纹香茶菜10种,纤花香茶菜15种,狭基线纹香茶菜10种,长叶香茶菜7种。成功建立了同时测定不同品种溪黄草中5种活性成分的UPLC-DAD方法,各成分的线性关系良好(r>0.9990),精密度、重复性和稳定性良好,回收率在97.01%~102.7%(n=6),RSD均小于3.0%。UPLC-Q-TOF-MS分析结果在一定程度上为长叶香茶菜作为溪黄草药材使用及狭基线纹香茶菜等同纤花香茶菜入药提供了科学依据;建立的UPLC-DAD同时测定不同品种溪黄草中5种活性成分的定量分析方法简便、快捷、准确;该研究也为综合评价不同品种溪黄草的质量提供参考。

4种溪黄草药材基原植物种子状果实形态特征的比较

本研究采用体视镜和扫描电镜相结合的方法,对4种溪黄草药材基原植物种子状果实的形态特征进行观察比较。线纹香茶菜、纤花香茶菜及长叶香茶菜种子状果实的形状特征相似,呈卵型,大小为0.88~1.17 mm×0.54~0.77 mm,大小顺序依次为线纹香茶菜>纤花香茶菜>长叶香茶菜;表面具有网状纹饰,但网壁隆起高度不同,高度依次为线纹香茶菜>纤花香茶菜>长叶香茶菜;遇水后出现粘液质,其中线纹香茶菜与纤花香茶菜的果实均具有较多粘液质,长叶香茶菜只有少数果实具有粘液质,且量多少不一。溪黄草种子状果实形态特征与上述3种植物明显不同,呈阔卵圆型,大小为1.24~1.60 mm×0.89~1.33 mm;种子状果实表面的网状纹饰粗糙且多皱缩,具有散在的腺点和白色非腺毛,多分布于顶端,由1~3个细胞组成;遇水后无粘液质出现。结果表明,上述4种植物种子状果实在形状、大小、表面纹理及粘液质有无等方面存在较为明显的差异。种子状果实形态特征的差异可为4种植物提供一定的分类依据。