辛开苦降方对初发2型糖尿病KKay小鼠肝脏胰岛素抵抗及IRS-2/PI3K通路的影响（英文）

目的:研究辛开苦降方中药对KKay 2型糖尿病(T2DM)小鼠肝脏胰岛素抵抗及胰岛素受体底物-2/磷脂酰肌醇3-激酶通路(IRS-2/PI3K)的影响,探讨其改善肝胰岛素抵抗(IR)的分子机制。方法:将T2DM KKay小鼠按血糖轻重程度分层随机分为4组,即模型组,辛开苦降组、辛开苦降大剂量组、罗格列酮组。正常组选10周龄雄性C57BL/6J小鼠10只。正常组及模型组给予0.5%羧甲基纤维素钠溶液(CMC)灌胃。各组连续灌胃给药4周后取材,采用葡萄糖氧化酶法测血浆葡萄糖(FPG),放射免疫分析法测血浆胰岛素浓度(FINS),免疫蛋白质印迹法测定肝组织IRS-2、磷酸化胰岛素受体底物-2(p-IRS-2)、PI3K、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、胰岛素受体底物-3(IRS-3)、胰岛素受体底物-4(IRS-4)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR法测定肝组织PI3K、IRS-2、IRS-3、胰岛素受体(Ins R)的m RNA表达水平。结果:与正常组相比,模型组胰岛素敏感指数明显降低(P<0.01),FPG、FINS均明显升高(P<0.01)。辛开苦降组及其大剂量组两组FINS、胰岛素敏感指数均高于模型组(P<0.01,P<0.05)。免疫蛋白质印迹结果显示:与正常组相比,模型组小鼠肝脏IRS-2、p-IRS-2、PI3K、p-PI3K蛋白表达均明显减少(P<0.01),IRS-3、IRS-4蛋白表达与正常组比较明显增多(P<0.01)。辛开苦降组和辛开苦降大剂量组与模型组相比,小鼠肝脏IRS-2、p-IRS-2、PI3K、p-PI3K蛋白表达均明显增多(P<0.01,P<0.05),IRS-3、IRS-4蛋白表达明显减少(P<0.05),辛开苦降组和辛开苦降大剂量组两组之间无明显统计学差异。实时荧光定量PCR结果显示:与正常组相比,模型组小鼠肝组织PI3-K、IRS-2、IRS-3及Ins R m RNA表达均降低(P<0.01)。与模型组相比,辛开苦降组PI3K m RNA表达升高(P<0.05)。结论:辛开苦降方可改善KKay T2DM小鼠的IR,增加胰岛素的敏感性,调节KKay小鼠肝脏IRS-2、p-IRS-2、PI3K、p-PI3K、IRS-3、IRS-4蛋白和PI3K m RNA表达水平,提示调整肝脏的IRS2/PI3K通路相关的蛋白表达可能是辛开苦降方改善KKay T2DM小鼠的IR作用靶点,且单纯加大剂量并对相关蛋白及基因表达影响不大。

不同剂量黄连的辛开苦降方降糖效应研究及思考

目的:观察不同黄连剂量的辛开苦降方对初发2型糖尿病(T2DM)KKay小鼠血糖的影响。方法:10周龄雄性初发T2DM KKay小鼠40只随机分为4组:模型组、罗格列酮组、辛开苦降组、辛开苦降倍黄连组,每组10只。正常组选10周龄雄性C57BL/6J小鼠10只。正常组及模型组给予0.5%羧甲基纤维素钠溶液(CMC)灌胃。各组连续灌胃给药4周后取材,测定其空腹血糖(FPG)。结果:与正常组相比,模型组FPG明显升高(P<0.01);与模型组相比,罗格列酮组、辛开苦降倍黄连组FPG明显降低(P<0.01,P<0.05),而辛开苦降组FPG未见显著变化;与辛开苦降组相比,辛开苦降倍黄连组FPG明显降低(P<0.05)。结论:辛开苦降方降低T2DM KKay小鼠血糖的疗效与黄连用量密切相关,基于辛开苦降配伍的黄连降糖作用存在量效关系。