心脑舒通胶囊及有效成分对氧糖剥夺/复氧损伤脑微血管内皮细胞屏障完整性的影响及机制研究

目的探讨心脑舒通胶囊(Xinnao shutong,XNST)及其单体成分对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤脑微血管内皮细胞屏障结构及紧密连接蛋白表达的影响及机制。方法将小鼠脑微血管内皮细胞株bEnd.3接种于Transwell小室上层,建立OGD/R损伤模型,通过细胞跨膜电阻值及荧光素-钠透过率考察药物对内皮细胞屏障完整性的影响;采用Claudin-5免疫荧光染色观察内皮细胞间紧密连接结构变化;RT-PCR和Western blot法检测紧密连接蛋白Claudin-5、Occludin、ZO-1的mRNA和蛋白表达水平。Western blot法检测MAPKs(JNK、p38、ERK)、I kappa Bα、I kappa B激酶磷酸化蛋白表达水平,Western blot及免疫荧光法检测NF-κB/p65的入核表达。结果XNST及其3个单体成分均能明显增加内皮细胞电阻值,降低荧光素-钠透过率;Claudin-5荧光染色结果显示,模型组细胞间紧密连接明显破坏,而XNST及其单体成分能明显改善其紧密连接结构。RT-PCR及Western blot结果显示其能明显上调Claudin-5、Occludin和ZO-1的mRNA及蛋白表达,进一步对其机制研究表明,XNST及其单体成分能明显抑制JNK、p38、ERK的磷酸化,抑制I kappa Bα、I kappa B激酶磷酸化,并明显抑制NF-κB/p65的核转位。结论XNST及单体成分均可通过增加细胞间紧密连接结构促进屏障完整性发挥脑保护作用,其机制可能与抑制NF-κB和MAPKs信号通路激活有关。

心脑舒通胶囊对大鼠缺血再灌注脑损伤后细胞凋亡的影响

目的:探讨心脑舒通胶囊对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡,及其对凋亡调控因子蛋白表达的影响。方法:采用线栓法阻塞大脑中动脉致大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO),24 h后断头取脑,免疫组织化学法测定大脑皮层中Bax,Bcl-2,Fas,Fas-L以及caspase-3蛋白的表达,TUNEL法检测皮层区神经细胞凋亡。结果:缺血再灌注模型组大脑皮层内Bax,Fas,Fas-L和caspase-3蛋白明显升高,Bcl-2蛋白表达和Bcl-2/Bax明显降低,与假手术组比较,均有显著性差异(P<0.01)。心脑舒通胶囊能明显降低缺血侧大脑皮层内Bax蛋白表达,增加皮层内Bcl-2蛋白表达和Bcl-2/Bax;减少皮层内Fas和Fas-L蛋白表达,降低皮层内caspase-3蛋白和基因表达,显著减少凋亡的神经细胞数量,与模型组比较,有统计学意义(P<0.01)。结论:心脑舒通胶囊保护受损的脑组织,其机制可能与降低脑组织神经细胞凋亡,调节凋亡调控因子的蛋白表达有关。

心脑舒通胶囊对大鼠急性脑缺血损伤保护作用的研究

目的:观察与分析心脑舒通胶囊对急性脑缺血损伤过程中能量代谢障碍、自由基损伤及炎性因子表达等关键环节的影响,探讨缺血保护作用机制。方法:健康雄性W istar大鼠60只,随机分为正常组、假手术组、模型组、心脑舒通组、西药组,共5组,每组12只。心脑舒通组灌胃给予心脑舒通混悬液,西药组给予阿司匹林加尼莫地平混悬液,正常组、假手术组及模型组均给予等量蒸馏水。术前3 d开始连续灌胃给药10 mL.kg-1,每天1次,至术后3 d共7 d。采用同种系微栓子体外注入法制备大鼠多发性脑梗死模型,缺血72 h后断头取脑,常规HE染色光镜下观察患侧海马CA1区及皮层病理学改变,免疫组化SABC法染色光镜下观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-1β(IL-1β)在海马CA1区及皮层的表达,采用比色法测定海马组织中Na+-K+-ATP酶活性、乳酸脱氢酶(LDH)活力、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:心脑舒通胶囊能明显减轻急性多梗大鼠海马CA1区的病理形态改变,不同程度的减少海马CA1区及皮层神经细胞内TNF-α及IL-1β表达,显著提高海马组织中ATP酶活性(P<0.01)及LDH酶活力(P<0.01),能显著提高海马组织中SOD活性(P<0.01)、降低MDA含量(P<0.01)。结论:心脑舒通胶囊具有一定的缺血损伤保护作用,其机制与改善缺血组织的能量代谢障碍和自由基损伤,抑制炎性因子过表达,多环节阻抑和调节缺血级联反应有关。

心脑舒通胶囊对高脂血症大鼠心肌梗死后心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的观察心脑舒通胶囊(主要起效成分为蒺藜总皂苷)对高脂血症大鼠心肌梗死(MI)后心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2蛋白表达的影响,探讨蒺藜皂苷抗高脂大鼠MI后心室重构的作用机制。方法利用高脂血症心肌梗死复合模型,采用TUNEL和免疫组化SP法,观察蒺藜总皂苷对MI后大鼠心肌细胞凋亡、以及Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。结果(1)蒺藜总皂苷可减轻MI后心肌细胞损伤和心室重构的程度;(2)与高脂心梗组相比,蒺藜总皂苷大剂量、辛伐他汀均降低MI后心肌细胞凋亡指数,并能下调Bax蛋白表达(P<0．05),各治疗组之间作用比较,差异无显著性(P>0．05)。结论蒺藜总皂苷可通过调控Bax／Bcl-2蛋白表达比值,而抑制心肌细胞凋亡,可能是其抗MI后心室重构的作用机制之一。

心脑舒通对大鼠脑缺血再灌注损伤缺血周边区微血管新生及Ang/Tie系统表达的影响

目的观察心脑舒通胶囊对大鼠局灶性脑缺血再灌注(I/R)损伤缺血周边区脑组织微血管新生及血管生成素(Ang)/酪氨酸激酶受体(Tie)系统表达的影响。方法随机分为假手术组、脑I/R损伤模型组、心脑舒通胶囊(14、28、56 mg/kg)组,采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)缺血再灌注模型,缺血90 min后再灌注,分别于造模前30 min、缺血6 h、缺血24 h,每日给药1次,连续7 d。于灌注24 h、7 d后行神经功能评分,末次给药1 h后用水合氯醛(350 mg/kg)麻醉并断头取脑组织,采用Western印迹法测定I/R大鼠皮层缺血周边区Ang1、Ang2、Tie2表达,激光扫描共聚焦显微镜观察脑组织微血管形态及血流灌注量。结果与模型组比较,心脑舒通组大鼠神经功能改善,皮层缺血周边区微血管的数量较多(P<0.01,P<0.05),Ang1、Tie2蛋白表达量增多(P<0.01,P<0.05),Ang2蛋白表达量较少(P<0.05)。结论心脑舒通可调节大鼠Ang/Tie系统的表达,促进脑缺血后微血管新生,有利于脑缺血后神经功能的恢复。

心脑舒通胶囊治疗冠心病心绞痛有效性及安全性的Meta分析

目的 应用Meta分析的方法分析心脑舒通胶囊治疗冠心病心绞痛的疗效及安全性。方法 电脑查阅Cochrane试验资料库（2016年第1期）、Embase（1966年至2016年3月）、Pubmed（1966年至2016年3月）、中国学术文献总库（CNKI）（1979至2016年3月）、中文科技期刊数据库（1989年至2016年3月）、万方数字期刊库（1981年至2016年3月）,根据入选与剔除原则筛选文献、评价文献质量,从文献中提取相关数据,应用Rev Man 5.3软件对提取的数据进行Meta分析。结果 初步检索出101篇文献,根据选取标准共有7文献符合。从症状疗效来分析：χ^2=8.85,df=6,P=0.18,合并OR=3.06,95%CI[2.01,4.68],Z=5.18（P〈0.00001）;从心电图疗效来分析：χ^2=7.20,df=6,P=0.30,合并OR=1.95,95%CI[1.41,2.71],Z=4.02（P〈0.0001）。结论 心脑舒通胶囊治疗冠心病心绞痛在缓解症状及改善心电图方面效果更好,且无明显不良反应。

心脑舒通胶囊对高脂血症合并心肌梗死大鼠心肌细胞膜Na^+-K^+-ATPase、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATPase活性及乳酸含量的影响

目的观察心脑舒通胶囊(蒺藜总皂苷,GrossTotalSaponinsofTribulus,GSTT)对高脂血症大鼠急性心肌梗死(AcuteMyocardialInfarction,AMI)后心肌细胞能量代谢及乳酸代谢的影响。方法SD大鼠高脂饲料喂养15d,眼眶采血筛选高脂血症大鼠,结扎冠状动脉左前降支,体表心电图Ⅱ导示ST段弓背抬高,证实AMI形成后,将大鼠随机分为5组:正常组(10只);AMI高脂模型组(13只);AMI高脂加GSTT大剂量组(24.3mg·kg-1·d-1,13只);AMI高脂加GSTT小剂量组(12.15mg·kg-1·d-1,13只);AMI高脂加辛伐他汀组(3.6mg·kg-1·d-1,13只)于手术后第2日开始灌胃给药,连续28d。然后截取左室缺血区心肌,制备心肌线粒体,观察GSTT对心肌梗死后大鼠心肌细胞膜Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性及乳酸代谢的影响。结果模型大鼠心肌细胞膜Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性明显降低,而乳酸含量却明显增强;与模型组比较,GSTT可明显提高心肌细胞膜Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性(P<0.05和P<0.01),且能够降低缺血心肌乳酸含量(P<0.05)。结论GSTT可显著改善高脂血症大鼠AMI后心肌的能量代谢及乳酸代谢。

HPLC-ELSD测定心脑舒通胶囊中Terrestrinin A的含量

[目的]建立心脑舒通胶囊及其总皂苷中Terrestrinin A含量的测定方法。[方法]采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)法,色谱柱为Hedra-C_(18)柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相:乙腈-水,流速:1 mL/min,柱温:40℃,漂移管温度:60℃,气体(N2)压力:30 psi,增益值:100,进样量:20μL。[结果]线性范围:48.5~970.6μg/mL,回归方程:Y=1.693 1X+1.264 4(r^2≥0.999 0),精密度、重复性和稳定性实验的RSD值分别是1.21%、1.62%、1.90%,加样回收率是96.0%~103.2%,RSD值是2.40%。[结论]该法简便可靠,可以应用于心脑舒通胶囊及其总皂苷中Terrestrinin A的含量测定及质量控制标准建立。

心脑舒通胶囊对氧糖剥夺/复氧损伤原代神经元的保护作用

[目的]探讨心脑舒通胶囊对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤的原代神经元细胞活力及微管相关蛋白2(MAP-2)表达的影响。[方法]取新生24 h内SD大鼠的大脑皮质进行神经元原代培养,并通过免疫荧光法进行MAP-2目的蛋白鉴定;建立神经元OGD/R损伤的体外模型,CCK-8检测不同浓度的心脑舒通胶囊对体外正常培养和OGD/R损伤后神经元细胞活力的影响;选取最佳浓度的心脑舒通胶囊进行MAP-2的荧光表达强度实验,通过倒置荧光显微镜进行拍照处理,并通过软件对神经元突触长度进行测量及统计处理,Western blot法检测MAP-2的蛋白表达情况。[结果]神经元原代培养成功,且MAP-2染色阳性。CCK-8结果显示心脑舒通胶囊在10、25、50μg/mL浓度对正常培养神经元细胞有细胞毒作用(P<0.05),因此选取低于10μg/mL浓度的心脑舒通胶囊进行后续实验。而在OGD/R损伤条件下,与模型组比较,心脑舒通胶囊在3.125、6.25μg/mL浓度能显著增加OGD/R损伤神经元的细胞活力(P<0.05);免疫荧光实验结果显示,与对照组比较,模型组MAP-2荧光表达强度及神经元突触长度明显降低(P<0.05);与模型组比较,心脑舒通胶囊在3.125μg/mL浓度能显著增加MAP-2的荧光表达强度及神经元突触长度(P<0.05)。Western blot实验结果显示,与对照组比较,模型组MAP-2蛋白表达显著降低(P<0.05),与模型组比较,心脑舒通胶囊能显著增加MAP-2的蛋白表达(P<0.05)。[结论]心脑舒通胶囊能促进OGD/R损伤神经元活力,其作用机制与促进细胞骨架蛋白MAP-2表达及突触稳定性有关。

复方丹参滴丸与心脑舒通胶囊治疗不稳定型心绞痛的疗效比较

目的比较复方丹参滴丸与心脑舒通胶囊治疗不稳定型心绞痛的临床疗效。方法将180例不稳定型心绞痛患者按治疗方法的不同分为治疗组和对照组,每组90例。治疗组采用复方丹参滴丸治疗,对照组采用心脑舒通胶囊治疗。观察2组治疗前、治疗8周后血液流变学指标(红细胞比容、红细胞沉降率、血浆黏度、全血高切黏度、全血低切黏度及纤维蛋白原)、血脂指标(总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇)的变化及临床疗效、不良反应发生率。结果 2组总有效率比较差异无统计学意义(P>0.05)。与治疗前比较,2组治疗8周后红细胞比容、红细胞沉降率、血浆黏度、全血高切黏度、全血低切黏度及纤维蛋白原水平均明显降低(均P<0.05)。2组均未出现不良反应。结论复方丹参滴丸与心脑舒通胶囊治疗不稳定型心绞痛的疗效相当,均具有改善血液流变学特征的作用,复方丹参滴丸与心脑舒通胶囊均是治疗不稳定型心绞痛的安全、有效的药物。

心脑舒通软胶囊的溶出度考察

目的:评价心脑舒通软胶囊制剂的溶出度。方法:采用《中国药典》(2005版)溶出度测定法第二法对心脑舒通软胶囊的溶出度进行测定,以比色法对其中的总黄酮进行测定。结果:3批次心脑舒通软胶囊的溶出度分别为87.0%,(RSD%=0.3%,n=6),89.4%(RSD%=0.8%,n=6),88.8%(RSD%=1%,n=6)。结论:采用溶出度测定法第二法可测定心脑舒通软胶囊溶出度。

心脑舒通胶囊对氧糖剥夺/复氧星形胶质细胞神经营养因子分泌的影响及对神经元的保护作用

[目的]探讨心脑舒通胶囊对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)处理的星形胶质细胞(C8-D1A)神经生长因子分泌的影响,以及研究心脑舒通药物处理的OGD/R胶质细胞条件培养液对神经元细胞(Neuro-2A)的保护作用。[方法] CCK-8检测心脑舒通对正常培养和OGD/R胶质细胞活力的影响;酶联免疫吸附(ELISA)法检测心脑舒通对OGD/R胶质细胞的脑源性神经营养因子(BDNF)、胶质源性神经营养因子(GDNF)、睫状神经营养因子(CNTF)释放的影响;CCK-8检测心脑舒通处理的胶质细胞条件培养液对OGD/R神经元细胞活力的影响。[结果] 1)心脑舒通对正常培养的胶质细胞活力无显著影响,但可以提高OGD/R后胶质细胞的增殖活力。2)0.1μg/mL心脑舒通可以显著提高OGD/R胶质细胞BDNF的释放。3)0.1μg/mL心脑舒通药物处理的胶质细胞条件培养液可提高OGD/R神经元的存活能力。[结论]心脑舒通对OGD/R损伤后的胶质细胞有一定保护作用,其处理后的胶质细胞条件培养液对神经元有一定的保护作用。

心脑舒通胶囊及有效组分对原代培养大鼠星形胶质细胞的保护作用

星形胶质细胞(astrocytes,AS)是中枢神经系统的重要组成成分,在神经保护方面发挥重要作用。在缺血/再灌注等病理损伤下,AS形态和功能会发生相应变化:一方面,通过分泌炎症因子等,加重脑损伤;另一方面,激活的AS会释放大量神经营养因子,如脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)、胶质细胞源性神经营养因子(glial cell-derived neurotrophic factor,GDNF)、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)等,其大量表达能支持和营养受损神经元,从而发挥神经保护作用[1]。心脑舒通胶囊是由蒺藜地上全草部分经干燥提取后制成的胶囊剂,具有活血化瘀、扶正养生、预防脑动脉硬化的药理作用[2]。相关研究表明,心脑舒通胶囊具有改善缺血/再灌注损伤大鼠脑神经功能,调节小胶质细胞及AS功能的作用[3]。但心脑舒通胶囊发挥神经保护作用是否通过促进AS神经营养因子的表达,以及其发挥药效的物质基础并未研究。本实验通过原代培养得到AS,给予氧糖剥夺/再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)损伤处理,模拟脑缺血/再灌注损伤模型,探讨心脑舒通胶囊及其有效组分对损伤AS细胞活力及神经营养因子表达的影响。

心脑舒通胶囊对血管性痴呆大鼠的神经保护作用

[目的]研究心脑舒通胶囊对血管性痴呆大鼠的神经保护作用及部分机制。[方法]实验采用成年雄性Wistar大鼠体质量(300±20)g,11周龄,随机分为对照组、模型组和心脑舒通低、高剂量组(14、56 mg/kg)。采用永久性结扎大鼠双侧颈总动脉建立血管性痴呆模型,通过Morris水迷宫检测大鼠的学习和记忆能力,尼氏染色观察神经元的细胞形态变化,免疫组化染色观察海马区小胶质细胞(IBA-1)和星形胶质细胞(GFAP)的表达。[结果]心脑舒通各治疗组逃避潜伏期较模型组明显缩短(P<0.01),且呈剂量依赖性;心脑舒通高剂量组(56 mg/kg)能明显抑制海马CA1区锥体细胞死亡,及小胶质细胞IBA-1和星形胶质细胞GFAP的表达。[结论]心脑舒通胶囊可以改善血管性痴呆大鼠的学习和记忆能力,其机制可能是通过保护海马神经元免受缺血性损伤,同时抑制星型胶质细胞和小胶质细胞活化有关。

石杉碱甲联合心脑舒通对血管性痴呆患者的疗效评价

目的:评价石杉碱甲联合心脑舒通对血管性痴呆的疗效。方法:随机将61例血管性痴呆患者分成两组:心脑舒通组;联合用药组。心脑舒通组接受心脑舒通治疗,联合用药组接受石杉碱甲加心脑舒通治疗,共12wk。分别在0wk、6wk及12wk按简易精神状态检查、修订的长谷川痴呆量表进行评定,并比较治疗前后血脂的变化。结果:联合用药组的简易精神状态检查、修订的长谷川痴呆量表评分在治疗前后均有明显差异。联合用药组在认知评定方面较心脑舒通组明显改善。两组的总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白在治疗前后也有明显差异。结论:石杉碱甲联合并心脑舒通治疗血管性痴呆的疗效优于心脑舒通。

心脑疏通胶囊中两种丹参酮类成分的薄层鉴别与含量测定

目的:建立心脑疏通胶囊中两种丹参酮类成分的薄层鉴别与含量测定方法。方法:以丹参酮IIA、隐丹参酮为对照,建立薄层色谱鉴别方法;色谱条件:Waters XSelect C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液进行梯度洗脱,检测波长为270nm。结果:薄层色谱斑点清晰,阴性样品无相应特征斑点;丹参酮IIA、隐丹参酮线性关系良好(r>0.999),说明所用方法精密度、重复性符合要求。结论:该研究可为心脑疏通胶囊的质量控制提供参考。

心脑舒通胶囊联合西地那非治疗血瘀阻滞型阳痿的临床观察

目的:研究心脑舒通胶囊联合西地那非治疗血瘀阻滞型阳痿的效果。方法:2015年3月-2019年5月收治血瘀阻滞型阳痿患者76例,随机分为两组,各38例。对照组采取西地那非治疗;观察组在西地那非基础上联合心脑舒通胶囊治疗。比较两组治疗效果。结果:观察组治疗总有效率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后勃起功能指数(IIEF)、性生活日记(SEP)及总体评价问卷(GAQ)评分均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)评分均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:采用心脑舒通胶囊联合西地那非治疗血瘀阻滞型阳痿的效果显著,可显著改善IIEF、SEP、GAQ评分,降低患者负面情绪。

心脑疏通胶囊指纹图谱研究

目的:建立心脑疏通胶囊的HPLC指纹图谱。方法:Waters XSelect C18 (4. 6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0. 1%磷酸溶液进行梯度洗脱,检测波长270nm,柱温25℃。以丹参酮ⅡA为参照,绘制10批心脑疏通胶囊指纹图谱,采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(版本2004 A)"进行相似度评价。结果:10批样品相似度均在0. 95以上,确认共有峰20个,标示3个已知化合物(丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ),方法学考察结果符合指纹图谱技术要求。结论:该方法具有良好的精密度、重复性、稳定性和专属性,可为该制剂的质量控制提供一定参考。

老年急性缺血性脑卒中患者早期辅助服用心脑舒通胶囊的临床疗效观察

目的 探讨早期辅助服用心脑舒通胶囊对老年急性缺血性脑卒中患者的抗脑缺血作用及对神经功能缺损的影响.方法 80例老年急性缺血性脑卒中患者按随机数字表法分为治疗组和对照组,每组各40例;在基础治疗的基础上,治疗组加用心脑舒通胶囊3粒口服,每日3次,疗程30 d;治疗前,治疗后15 d、30 d对两组进行欧洲卒中量表（ESS）评分和临床疗效评价.结果 治疗组ESS评分在治疗前,治疗后15 d、30 d分别为56.24±10.48、65.41±11.82、72.52±13.21,对照组ESS评分在相应时间段分别为57.73±9.85、59.52±10.13、62.48±12.73,治疗后15 d、30 d两组ESS评分比较差异均有统计学意义（P＜0.05）.两组临床疗效比较差异有统计学意义（Z=-2.813,P=.005）.结论 心脑舒通胶囊具有一定的抗脑缺血作用,并能改善脑卒中后患者的神经功能缺损.