基于TGF-β1/p38MAPK/CREB信号通路探讨心衰康胶囊对糖尿病大鼠心肌纤维化的改善作用

目的探究心衰康胶囊是否通过调控TGF-β1/p38MAPK/CREB信号通路改善糖尿病大鼠心肌纤维化。方法清洁SPF级雄性大鼠32只,随机分为对照组、模型组、心衰康胶囊组(1.0 g·kg^(-1)·d^(-1))、缬沙坦组(30 mg·kg^(-1)·d^(-1))。除对照组外,按30 mg/kg体质量腹腔注射浓度为1 mg/mL的链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病模型大鼠,对照组和模型组均0.9%氯化钠溶液灌胃。采用苏木素-伊红(HE)染色观察糖尿病大鼠心肌组织病理变化;免疫组织化学法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白表达水平;酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法检测大鼠TGF-β1、大鼠B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白水平;Western Blot法检测心肌组织中TGF-β1、磷酸化-丝裂原活化蛋白激酶p38抗体(p-p38MAPK)、cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)蛋白表达水平的变化。结果与对照组比较,模型组大鼠心肌排列紊乱,组织肿胀,有大量炎性细胞浸润,Bcl-2、p-CREB蛋白表达水平明显降低(P<0.01),TGF-β1、Caspase-3、p-p38 MAPK蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组相比,心衰康胶囊组大鼠心肌纤维排列较整齐,炎性浸润减少,组织间隙无明显水肿,TGF-β1、p-p38 MAPK、Caspase-3蛋白表达水平明显降低(P<0.01,P<0.05),p-CREB、Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05,P<0.01)。结论心衰康胶囊可抑制糖尿病大鼠的心肌纤维化以及细胞凋亡,其改善作用可能与调控TGF-β1/p38MAPK/CREB信号通路有关。

心衰康治疗阳虚水泛型心衰研究进展

心衰是各种原因导致心脏结构或者功能的异常改变,使心室收缩或者舒张功能发生障碍,从而引起的一组复杂临床综合征,是心脏疾病的终末阶段。其再住院率和病死率居高不下、连年攀升,西药治疗存在价格昂贵、依存性差等问题,西医西药联合中医中药治疗成为越来越多临床医师和患者的选择。中药复方制剂心衰康为内蒙古自治区中医医院院内制剂,在临床治疗慢性心衰中取得较好疗效,此文简要就阳虚水泛型心衰的中医发病机制、西医发病机制、中药复方制剂心衰康药物组成方义及心衰康相关实验研究论述如下,以探索其发挥疗效的中医、西医机制,为中医药治疗慢性心衰提供理论依据,拓宽治疗思路。

心衰康胶囊对糖尿病大鼠肾脏保护作用及其机制初步研究

目的验证心衰康胶囊对糖尿病大鼠肾脏的保护作用并初步研究其可能机制。方法将28只无特定病原体级健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组7只和模型组21只。模型组大鼠采用高脂饲料及尾静脉注射链脲佐菌素致糖尿病大鼠模型,模型制备成功后,随机分为模型组、心衰康胶囊组、阳性药物缬沙坦组,每组7只。心衰康胶囊按照1 g·kg^(-1)·d^(-1)的剂量、阳性药物缬沙坦组按照30 mg·kg^(-1)·d^(-1)剂量均灌胃10周。对照组及模型组灌胃0.9%氯化钠注射液,定期测定各组大鼠血糖、体质量,采用苏木素-伊红染色和马松染色观察肾组织病理变化;免疫组织化学法测定肾组织中转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达水平。结果与正常组比较,糖尿病组大鼠体质量增加缓慢,肾脏组织中TGF-β1表达明显上调(P<0.01),肾组织可见明显胶原组织沉积、纤维化改变,肾结构破坏明显;与模型组比较,心衰康组糖尿病大鼠体质量增长较快(P<0.05),肾组织中TGF-β1表达明显减少(P<0.01),胶原组织沉积减少、纤维化减轻,肾结构破坏不明显。结论心衰康胶囊可能通过抑制糖尿病大鼠肾脏TGF-β1表达,从而减缓糖尿病大鼠肾间质改变,保护改善肾功能。

心衰康胶囊对糖尿病大鼠心肌纤维化的改善作用研究

目的:研究心衰康胶囊对糖尿病大鼠心肌纤维化的改善作用,并初步判断其机制。方法:选用清洁级、雄性SD大鼠32只,随机取8只为对照组,余大鼠以1%链脲佐菌素(STZ)溶液经尾静脉注射制备糖尿病模型,造模成功者随机分为模型组、心衰康胶囊组、缬沙坦组,每组8只。对照组和模型组均给予生理盐水灌胃;心衰康胶囊组和缬沙坦组分别给药灌胃,定期监测血糖、体质量,10W治疗结束后检测大鼠左室射血分数(EF)、短轴缩短率(FS),计算心脏及左室指数,后处死大鼠取左心室。通过苏木素-伊红(HE)染色和Masson染色观察心肌组织病理形态表现,采用免疫组织化学法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组血糖水平、TGF-β1水平均显著升高(P<0.05,P<0.01);体质量、心脏指数、左室指数、EF及FS均显著降低(P<0.05,P<0.01);HE:心肌结构破坏明显;Masson:胶原沉积明显;免疫组织化学法:心肌纤维化明显,TGF-β1蛋白表达明显增强。与模型组比较:药物组血糖无明显下降(P>0.05),差异无统计学意义;余指标均有不同程度逆转(P<0.05,P<0.01)。结论:心衰康胶囊可通过抑制TGF-β1蛋白表达,延缓糖尿病大鼠心肌纤维化进程,改善心功能。

心衰康抑制慢性心衰大鼠心肌自噬及MAPK/ERK1/2信号通路

目的:探究心衰康对慢性心衰大鼠心肌自噬的影响及其与MAPK/ERK1/2通路的关系。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为假手术(sham)组、模型(model,结扎左冠状动脉前降支法复制大鼠慢性心衰模型)组、心衰康低、中和高剂量(TL、TM和TH)组及卡托普利(captopril)组,每组12只,采用彩色多普勒超声仪评估大鼠心脏功能;HE染色观察心肌组织形态学变化;TUNEL染色法检测心肌细胞凋亡情况;免疫荧光法检测心肌组织中微管相关蛋白1轻链3II(LC3-Ⅱ)表达情况;Western blot法检测心肌组织p-ERK、p-p38 MAPK、LC3-Ⅱ、beclin-1和p62的蛋白水平。结果:与sham组相比,model组左心室舒张末期内径(LVEDD)和左心室收缩末期内径(LVESD)升高,舒张末期左室后壁厚度(LVPWTd)、收缩末期左室后壁厚度(LVPWTs)和左心室射血分数(LVEF)降低,心输出量(CO)、左心室舒张压(LVDP)、左心室收缩压(LVSP)和左心室压力最大上升/下降速率(+dp/dtmax/-dp/dtmax)降低(P<0.05);心肌细胞变形、坏死,心肌纤维断裂,伴有炎性细胞浸润;细胞凋亡率升高,LC3-II阳性率升高,p-ERK、p-p38 MAPK、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和beclin-1的蛋白水平均升高,p62蛋白表达降低(P<0.05)。与model组相比,心衰康各组与卡托普利组的LVEDD和LVESD降低,LVPWTd、LVPWTs和LVEF升高,CO、LVSP、LVDP、+dp/dtmax和-dp/dtmax升高(P<0.05);心肌细胞形态逐渐恢复正常,炎性细胞浸润减轻;细胞凋亡率降低,LC3-Ⅱ阳性率降低,p-ERK、p-p38 MAPK、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和beclin-1的蛋白水平均降低,p62蛋白表达升高(P<0.05)。结论:心衰康能够抑制心肌自噬,发挥心肌保护作用,其机制可能与抑制MAPK/ERK1/2通路有关。

中药心衰康对阿霉素心衰大鼠治疗机理的研究

目的 :研究中药心衰康对心衰的治疗作用。方法 :采用腹腔注射盐酸阿霉素的方法复制心衰大鼠模型 ,心衰康连续治疗 2 8d ,测定和分析各组大鼠的心功能 ,观察各组大鼠心肌的病理学变化。结果 :心衰康治疗组和模型对照组比较左心室收缩内压显著升高 ,心衰康治疗组心肌细胞的变性坏死明显减轻。结论 :中药心衰康可以减轻盐酸阿霉素对心衰大鼠心肌的毒性作用 ,明显改善心衰大鼠的心功能 ,具有良好的抗心衰作用。

心衰康冲剂对实验性兔心力衰竭心功能及心钠素的影响

以红参、附子、川芎、葶苈子等药制成心衰康冲剂。选用３５只日本大耳白兔，随机分为５组，其中４组由耳缘静脉注射盐酸阿霉素造成充血性心力衰竭，以心衰康大剂量、小剂量作为治疗组，以心宝为治疗对照组，１５天为１个疗程。结果表明：造模后各组体重均有所增加，以造模组体重增加最为明显；心衰康及心宝均可明显降低兔的体重，改善一般状况，减慢心率，提高心脏功能，降低血浆心钠素水平，以心衰康大剂量的效果最好，心衰康小剂量与心宝作用相当。说明心衰康能改善充血性心力衰竭兔的心脏功能及心脏的内分泌功能，对充血性心力衰竭有一定的疗效。

心衰康及其拆方不同干预周期对心衰大鼠肾脏皮髓质AVPR1a、AVPR2的影响

目的观察心衰康及其拆方4周、8周疗程对充血性心力衰竭(CHF)大鼠肾脏皮髓质中精氨酸加压素受体1A(AVPR1a)、精氨酸加压素受体2(AVPR2)的影响。方法对大鼠行冠状动脉结扎术造成心梗后心衰模型,随机分为6组,分别为模型组、心衰康全方组、益气组、温阳组、活血组、利水组。连续灌药4周及8周后观察动物尿量,并采用实时定量PCR法检测心衰康及其拆方对心衰大鼠肾脏皮髓质中AVPR1a、AVPR2的影响。结果心衰康全方及其拆方中的温阳、活血、利水药物均能降低下丘脑精氨酸血管加压素(AVP)mRNA表达;心衰康全方及其拆方中的活血、利水药物能明显降低心衰大鼠肾脏皮质、髓质AVPR1a mRNA、AVPR2 mRNA的表达。且随着用药时间的延长,益气、温阳药物对上述指标的抑制作用逐渐增强。结论心衰康全方及其拆方中的活血、利水药物能够通过降低心衰大鼠肾脏皮质、髓质AVPR1a mRNA、AVPR2 mRNA的表达,从而产生明显的利尿作用,达到减轻心脏前负荷,改善心功能的作用,随着用药时间的延长,益气、温阳药物对上述指标的抑制作用逐渐增强。

心衰康对实验性心力衰竭的影响及作用机理的研究

以一定量的戊巴比妥钠形成犬在体及大鼠离体心脏实验性心力衰竭模型,观察心衰康对实验性心力衰竭的影响;同时,采用大鼠代谢笼法观察了心衰康对水负荷正常大鼠的利尿作用。结果:(1)心衰康能增加犬衰竭心脏的心肌收缩力,升高左室内压及左室压最大上升速率;增加心输出量及血压;缩短 R-dp/dt_(max),降低左室舒张末期压(P<0.05～0.001)。(2)能明显对抗戊巴比妥钠所致离体大鼠心脏的心力衰竭,延长离体衰竭心脏出现停搏的时间,并能有效地加快停搏心脏的复跳(P<0.05)。(3)对水负荷正常大鼠有明显利尿作用(P<0.05～0.01)。提示:心衰康对实验性心力衰竭有明显的改善作用。

心衰康颗粒对“心梗”后大鼠心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达影响的研究

目的:观察心衰康颗粒对急性心梗后大鼠心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响,阐释心衰康颗粒干预左室重构的作用机理。方法:采用结扎Wistar大鼠左冠状动脉根部建立心梗后左室重构动物模型,随机分为正常组、假手术组、模型组、心衰康大剂量组、心衰康小剂量组和卡托普利对照组,分别药物干预2月后,观察大鼠心肌Ⅰ、Ⅲ胶原mRNA表达的变化。结果:①模型组Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达明显高于正常组及假手术组(P<0.05)。②与模型组比较,所有给药组I、Ⅲ型胶原mRNA表达明显下降(P<0.05),大剂量组与西药组相比无统计学意义(P>0.05),与小剂量组比较有显著差异(P<0.05)。③小剂量组与西药组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:心衰康大剂量组能够抑制心肌间质Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达,此应为干预实验性心梗后大鼠左室重构的机制之一。

心衰康煎液对实验心衰大鼠左心室内压的影响

目的 :观察中药复方心衰康煎液抗心衰的作用。方法 :取 4 0只成年Wistar大鼠 ,利用腹腔注射盐酸阿霉素的方法 ,连续 6周 ,复制心衰大鼠模型 ,再用心衰康煎液连续治疗 2 8d。利用北京微信达设计制造的Pclab实验记录分析系统观察和分析各组大鼠左心室内压、心电图 ,并观察心肌细胞的病理变化。结果 :心衰康煎液大、小剂量组和模型对照组比较左心室收缩内压显著性升高 (P <0 .0 1) ,病理学观察可见大、小剂量组心肌细胞的变性坏死均有明显减轻。结论 :心衰康煎液可减轻阿霉素对心肌的毒性作用 ,可明显改善心衰大鼠的心功能 ,表明该方有良好的抗心衰作用。

心衰康煎液对大鼠心室肌细胞动作电位影响的观察

目的 :为了观察心衰康煎液对大鼠心室肌细胞动作电位的影响。方法 :利用细胞内微电极记录技术 ,观察了 16例大鼠心室肌细胞动作电位用药前后的特征。结果 :心衰康煎液可以明显延长刺激引起动作电位的潜伏期及明显缩短动作电位时程。结论 :心衰康煎液对心肌细胞电活动有明显影响。

心衰康治疗冠心病心衰阳虚血瘀证的临床研究

目的探讨心衰康口服液治疗冠心病心衰阳虚血瘀证的临床疗效。方法选取牡丹江市某医院2012年6月-2013年10月收治的86例冠心病心衰阳虚血瘀证患者,随机分成对照组和观察组,每组各43例。对照组服用心宝丸,观察组服用心衰康口服液,治疗4周后,比较2组患者心率及气短而喘、自汗等临床症状的改善情况。结果 2组患者的心率均明显降低,观察组患者心率降低更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者气短而喘和自汗等单项临床症状消失,对照组单项临床症状改善不明显。结论心衰康能显著改善冠心病心衰阳虚血瘀证患者的心率和单项临床症状,疗效显著。

心衰康对阿霉素心衰大鼠治疗机理的实验研究

目的:研究心衰康对实验性心力衰竭(心衰)大鼠左室舒缩功能及血浆血管紧张素(ANGⅡ)和心钠素(ANP)的影响。方法:腹腔注射阿霉素(ADR)复制大鼠心衰模型,左心室插管术测定血流动力学指标;放免法测定ANGⅡ和ANP浓度。结果:心衰康治疗组和模型组比较,左心室收缩内压显著升高;ANP水平和ANGⅡ水平明显降低;均有显著性差异(P<0.05);心衰康治疗组心肌细胞变性坏死明显减轻。结论:心衰康能改善心衰大鼠左室舒缩功能,降低血浆ANGⅡ,影响ANP分泌。

心衰康及其拆方不同干预周期对心衰大鼠尿液水通道蛋白2的影响

目的:观察心衰康及其拆方对充血性心力衰竭(CHF)大鼠尿液水通道蛋白2(AQP2)的影响,并评价心衰康及其拆方不同用药周期对心衰大鼠水液代谢作用机制及差异。方法:对大鼠行冠状动脉结扎术造成心梗后心衰模型,按超声评价的左室射血分值分为6组,分别为模型组、心衰康全方组、益气组、温阳组、活血组、利水组。连续灌药4周及8周后观察动物尿量,并采用实时定量PCR法检测心衰康及其拆方对心衰大鼠尿液AQP2的影响。结果:心衰大鼠进行药物干预4周后,大鼠尿液中AQP2的含量较模型组比较均降低,其中心衰康全方组作用最明显,利水组次之,且利水组较其他拆方组比较均有差异(P<0.05);而药物干预8周后,心衰康全方组的效果同样最为明显,而利水组效果与益气、温阳、活血组类似(P>0.05)。结论:短期应用心衰康全方及利水中药能够降低心衰大鼠尿液AQP2的表达,而益气、温阳、活血中药对心衰大鼠尿液AQP2无明显影响。随着用药时间的延长,益气、温阳、活血药对AQP2的作用逐渐增强,而利水药作用无明显改变。

心衰康胶囊对心力衰竭模型大鼠心肌组织SERCA2a、miR-25表达的影响

目的探讨心衰康胶囊治疗心力衰竭的可能作用机制。方法将60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、地高辛组及心衰康低、中、高剂量组,每组10只。除空白组外,其余各组大鼠使用阿霉素腹腔注射2周建立心力衰竭模型。造模成功后空白组、模型组大鼠给予l ml/(100g·d)纯净水灌胃;地高辛组给予地高辛片0.02 mg/(kg·d)灌胃;心衰康低、中、高剂量组分别给予心衰康胶囊150、300、450 mg/(kg·d)灌胃,各组每日灌胃1次,连续4周。采用超声诊断仪检测心功能指标[包括左室射血分数(LVEF)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室短轴缩短率(LVFS)、左室收缩末期内径(LVESD)];ELISA法检测血浆N末端B型钠尿肽(NT-proBNP)水平;RT-PCR法检测心肌组织肌质网钙离子ATP酶2a(SERCA2a)、miR-25基因表达;Western blot法检测心肌组织SERCA2a蛋白表达;HE染色观察心肌组织病理变化。结果与空白组比较,模型组大鼠LVEF、LVFS、SERCA2a蛋白及基因表达降低,LVEDD、LVESD、血浆NT-proBNP水平、miR-25基因表达升高(P<0.05或P<0.01),且模型组大鼠心肌组织结构重度异常,肌间质可见胶原纤维明显增生、少量炎症细胞弥散分布,心肌纤维排列紊乱、可见断裂。与模型组比较,心衰康低、中、高剂量组和地高辛组LVEF、LVFS、SERCA2a蛋白及基因表达升高,LVEDD、LVESD、血浆NT-proBNP水平、miR-25基因表达降低(P<0.05或P<0.01),各药物干预组大鼠心肌组织病理损伤均有一定程度改善,且以心衰康高剂量组改善程度最明显。地高辛组在降低血浆NT-proBNP水平方面优于心衰康各剂量组,而心衰康各剂量组随剂量的增加NT-proBNP水平递减(P<0.05或P<0.01)。与心衰康中、高剂量组比较,心衰康低剂量组SERCA2a蛋白及基因表达降低,miR-25基因表达升高(P<0.05);与心衰康高剂量组比较,心衰康中剂量组SERCA2a蛋白及基因表达降低(P<0.05)。结论心衰康胶囊能够改善心力衰竭大鼠的心肌结构及心功能,且以高剂量效果最佳,其作用机制可能与降低miR-25基因表达、升高SERCA2a表达有关。

心衰康颗粒对心衰大鼠心室重塑的影响

目的:观察心衰康颗粒对心衰大鼠心室重塑的影响;方法:腹主动脉缩窄建立慢性心衰大鼠模型,放射免疫法测血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、心钠素(ANP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、内皮素(ET)及酶联免疫法测去甲肾上腺素NE,测左室肥厚度,并进行心脏病理形态学观察;结果:与模型组相比,各给药组大鼠一般体征明显改善,神经体液因子血浆AngⅡ,NE显著降低,心衰康高、中剂量组大鼠血浆TNF-α,IL-6,ET显著降低,各给药组左室肥厚度显著降低;结论:心衰康颗粒能逆转心衰大鼠心室重塑,其调节神经体液因子,细胞因子的作用可能是其机制之一。