基于TLR4/NF-κB/NLRP3通路介导滑膜细胞焦亡探讨宣痹通络膏对急性痛风性关节炎的作用机制

目的:探究宣痹通络膏对急性痛风性关节炎(AGA)大鼠滑膜细胞焦亡的作用及机制。方法:将40只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、宣痹通络膏组(36 g/kg)、秋水仙碱组(阳性对照药,0.3 mg/kg),每组各10只。除对照组大鼠外,其余各组大鼠均采取踝关节腔内注射尿酸钠构建AGA模型,并于造模成功后当天对大鼠进行分组灌胃给药干预,1次/d,连续3 d。分别于4、24、48 h测定各组大鼠踝关节肿胀指数;苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠踝关节滑膜组织病理学变化;TUNEL染色检测滑膜细胞焦亡指数;免疫组化及酶联免疫吸附法(ELISA)检测滑膜组织及血清IL-1β和IL-18表达;免疫荧光及Western blotting检测滑膜组织TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路相关蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠踝关节肿胀指数明显升高(P<0.05),滑膜组织明显增厚,并伴有炎性细胞大量浸润,滑膜细胞焦亡指数明显增加(P<0.05),且滑膜组织IL-1β、IL-18蛋白及TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路蛋白(TLR4、MyD88、NF-κB、NLRP3、ASC、Caspase-1)表达均明显升高(P<0.05),血清IL-1β和IL-18水平明显升高(P<0.05)。与模型组相比,宣痹通络膏组和秋水仙碱组大鼠踝关节肿胀指数明显降低(P<0.05),滑膜组织损伤减轻,滑膜细胞焦亡指数明显降低(P<0.05),且滑膜组织IL-1β、IL-18蛋白及TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路蛋白表达均明显下调(P<0.05),血清IL-1β和IL-18水平明显降低(P<0.05)。结论:宣痹通络膏可能通过调节TLR4/NF-κB/NLRP3通路,抑制滑膜细胞焦亡,从而发挥抗AGA的作用。

基于NLRP3相关炎症因子探讨宣痹通络膏治疗急性痛风性关节炎的作用机制研究

目的 观察宣痹通络膏对急性痛风性关节炎(Acute Gouty Arthritis, AGA)大鼠的作用机制及NLRP3相关蛋白的表达影响。方法 将40只SPF级Wistar大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、中药组、西药组,每组各10只。中药组给予宣痹通络膏3.2 g/(kg·d)灌胃;西药组给予苯溴马隆7 mg/(kg·d)灌胃;正常组和模型组20 ml/(kg·d)生理盐水灌胃。观察大鼠踝关节肿胀程度、干预48 h后血清血尿酸水平、ELISA检测IL-1β、WB检测滑膜组织中NLRP3、Caspase-1相关蛋白含量。结果 模型组大鼠踝关节肿胀度造模4 h后开始升高,模型组与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。造模12 h后,模型组高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。造模24 h后中药组肿胀程度低于西药组、模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。造模48 h后,西药组、中药组肿胀程度均低于模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与正常组比较,模型组血尿酸水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,西药组、中药组给药后尿酸水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与正常组比较,模型组血清IL-1β蛋白含量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,西药组、中药组血清IL-1β蛋白含量均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与西药组比较,中药组抑制IL-1β的表达接近,差异无统计学意义(P>0.05)。与正常组比较,模型组滑膜组织NLRP3、Caspase-1表达均升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,西药组、中药组滑膜组织NLRP3、Caspase-1表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05);中药组滑膜组织NLRP3、Caspase-1表达均优于西药组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 宣痹通络膏可能通过抑制NLRP3炎症体信号通路减少NLRP3、Caspase-1蛋白表达,抑制IL-1β分化成熟,从而抑制组织炎症。

吴氏手法配合宣痹膏治疗腰椎间盘突出症急性期机制初探

目的观察吴氏手法配合宣痹膏治疗腰椎间盘突出症急性期的临床疗效并初步探讨其作用机制。方法患者80例按随机数字表法分为两组各40例,其中对照组采用电脑腰椎三维牵引配合双氯酚酸二乙酰乳胶剂外敷治疗,治疗组采用吴氏手法配合宣痹膏治疗。两组患者疗程均为2周。观察两组治疗前后视觉模拟量表(VAS)评分、日本骨科学会的下腰痛评分(JOA)、SF-36生存质量评分及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)变化,并评价两组患者的临床疗效。结果疗程结束后治疗组总有效率为92.50%,明显高于对照组的75.00%(P<0.05);治疗后两组VAS评分以及血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平均较治疗前显著降低(P<0.05),且治疗组的评分低于对照组(P<0.05);两组JOA评分、SF-36生存质量评分均上升(P<0.05),且治疗组的评分高于对照组(P<0.05)。结论吴氏手法配合宣痹膏治疗腰椎间盘突出症急性期患者疗效显著,抑制炎症反应可能为其机制之一。

宣痹止痛膏治疗膝关节急性创伤性滑膜炎的临床研究

目的 观察宣痹止痛膏治疗膝关节急性创伤性滑膜炎的临床疗效及对关节液中炎症因子的影响。方法 将70例本病患者随机分为治疗组与对照组各35例。在基础治疗的基础上,治疗组采用宣痹止痛膏,对照组采用双氯芬酸二乙酰乳胶剂外用。治疗2周后观察两组治疗前后疼痛视觉模拟量表(VAS)评分、活动度、Lysholm评分、WOMAC评分,并运用肌骨超声观察两组治疗前后膝关节滑膜厚度和关节积液深度,同时抽取治疗前后关节液,采用ELISA法检测关节液中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)、人基质金属蛋白酶-3(MMP-3)并进行组间对比及进行临床疗效比较。结果 两组治疗后VAS评分、WOMAC评分较治疗前均降低(P <0.05),活动度、Lysholm评分较治疗前均增加(P <0.05),且治疗组优于对照组(P <0.05);膝关节滑膜厚度、关节积液深度数值较治疗前均降低(P <0.05),且治疗组优于对照组(P <0.05);关节液中IL-1β、TNF-α、hs-CRP、MMP-3含量均降低(P <0.05),且治疗组优于对照组(P <0.05);治疗组总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 宣痹止痛膏治疗膝关节急性创伤性滑膜炎的临床疗效确切,其作用机制初步可能与降低炎性因子含量有关。

宣痹止痛膏治疗风寒湿痹型膝骨性关节炎的临床疗效及机制初探

目的:观察宣痹止痛膏治疗风寒湿痹型膝骨性关节炎的临床疗效及初步探讨其作用机制。方法:将100例患者随机分为治疗组50例和对照组50例。治疗组采用宣痹止痛膏;对照组采用双氯芬酸二乙酰乳胶剂外用。治疗4周后观察两组治疗前后疼痛视觉模拟评分(VAS)、活动度、Lequesne指数评分、WOMAC评分变化,并运用肌骨超声观察两组治疗前后膝关节滑膜厚度和关节积液深度,同时抽取治疗前后关节液,采用ELISA法检测IL-1β、TNF-α及CollagenⅡ并进行组间对比。结果:两组治疗后VAS评分、Lequesne指数评分、WOMAC评分较治疗前均降低,差异有统计学意义(P<0.05),活动度较治疗前均增加,差异有统计学意义(P<0.05),且治疗组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);膝关节滑膜厚度、关节积液深度数值较治疗前均降低,差异有统计学意义(P<0.05),且治疗组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);关节液中IL-1β、TNF-α含量均降低,差异有统计学意义(P<0.05),CollagenⅡ含量升高,差异有统计学意义(P<0.05),且治疗组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:宣痹止痛膏治疗风寒湿痹型膝关节骨性关节炎的临床疗效确切,其作用机制初步可能与降低炎性因子IL-1β、TNF-α,增加CollagenⅡ蛋白的含量,促进关节软骨的增殖修复有关。

宣痹通络膏对急性痛风性关节炎大鼠MyD88表达及踝关节滑膜组织形态的影响

目的:观察宣痹通络膏对急性痛风性关节炎(AGA)模型大鼠髓样分化因子88(MyD88)表达的影响。方法:将60只雄性Wistar大鼠随机分为6组:宣痹通络膏低、中、高剂量组(简称为低、中、高剂量组),秋水仙碱组,模型组,空白组,每组各10只。于大鼠踝关节局部注射尿酸钠晶体混悬液制备AGA模型,造模后当天开始进行药物干预,连续3 d。观察各组大鼠不同时间点的关节肿胀度,血清及滑膜组织中MyD88蛋白表达水平,踝关节滑膜组织病理形态学变化。结果:关节肿胀度比较,24 h时,模型组较空白组上升;48h时,高剂量组、秋水仙碱组较模型组降低;72 h时,各给药组均较模型组降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠血清、滑膜组织MyD88含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组血清MyD88含量以及高、中剂量组和秋水仙碱组滑膜组织MyD88蛋白含量均降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与模型组相比,各药物组的踝关节滑膜组织病理形态得到改善。结论:宣痹通络膏可能通过下调MyD88蛋白表达,从而改善AGA模型大鼠的踝关节滑膜损伤。