基于高通量测序技术的玄参对大鼠有效性和安全性研究

目的研究玄参干预对大鼠基因表达谱的影响,探讨玄参干预对大鼠的潜在保护和毒性作用及其机制。方法将20只雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠随机分为玄参组和空白组,每组10只。玄参组大鼠给予玄参提取物1350 mg·kg-1灌胃,空白组灌胃给予等容积0.9%氯化钠溶液,均为1次/d,连续15 d。分别于灌胃15 d后,检测肝脏组织的基因表达谱,通过时间序列趋势分析软件(Short Time-Series Expression Miner,STEM)筛选具有趋势表达的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),并对其进行基因本体论(Gene Ontology,GO)功能注释和京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路分析。结果玄参组筛选76个DEGs,其中28个上调,48个下调,与对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05)。KEGG通路分析结果显示,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、无翅型小鼠乳腺肿瘤病毒整合位点(Wingless-Type MMTV Integration Site Family,Wnt)、转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)、非受体酪氨酸激酶家族-信号转导子和转录激活子(Janus Kinase-Signal Transducer and Ac-tivator of Transcription,Jak-STAT)、核因子激活的B细胞的κ-轻链增强(nuclear factor kappa-B,NF-κB)、Toll样受体(Toll-like receptor)、过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR)、催产素(Oxyto-cin)、神经生长因子受体(TNFRSF16)相关蛋白1[nerve growth factor receptor(TNFRSF16)associatedprotein 1,Ngfrap1]和神经营养因子受体相关死亡结构域(neurotrophin receptor associated death domain,Neurotrophin)这9条信号通路,包含Mecom、Amhr2、Pias2、Ticam2、Cyp7a1、Ngfrap1和Nfatc4这7个靶基因。经查阅文献,Mecom可能为表征玄参对大鼠潜在保护作用的靶基因,而另外6种则可能为表征玄参对大鼠潜在毒性作用的靶基因。结论玄参作用的两重性,既可对机体产生预防和治疗作用,也会产生潜在的不良反应。

2000-2023年玄参研究文献可视化分析

目的了解2000-2023年玄参研究热点及趋势,为相关研究提供参考。方法计算机检索中国知识资源总库(CNKI)、中文科技期刊数据库(VIP)、中国学术期刊数据库(万方数据)、中国生物医学文献数据库(CBM)2000年1月1日-2023年6月1日收录的玄参相关研究文献。采用NoteExpress3.7.0.9296软件管理文件及剔重,采用CiteSpace6.2.R4软件对作者、机构及关键词进行可视化分析。结果共纳入2240篇文献,年发文量整体呈波动上升趋势;发文较多的来源期刊有《陕西中医》《中医杂志》《时珍国医国药》等;核心作者有张宁、刘树民、刘斌等;主要研究机构有北京中医药大学、南京中医药大学、广州中医药大学等;高频关键词有“哈巴俄苷”“质量标准”“临床观察”等。结论玄参研究热点主要集中于化学成分、疾病治疗及配伍应用方面;通过数据挖掘、网络药理学和分子对接等现代技术探究玄参的用药规律和作用机制是该领域近年研究趋势。

玄参提取物对糖尿病视网膜病变微血管内皮细胞损伤的影响及其作用机制

目的:探讨玄参提取物抑制微小RNA-646(miR-646)改善微血管内皮细胞损伤缓解糖尿病视网膜水肿的影响及其作用机制。方法:根据简单随机化法将人视网膜微血管内皮细胞(HRMEC)细胞分为对照组、模型组(30 mmol/L葡萄糖)、观察组(30 mmol/L葡萄糖+100μg/mL玄参提取物组)、模型+Anti-NC(转染Anti-NC+30 mmol/L葡萄糖)、模型+Anti-miR-646(转染Anti-miR-646+30 mmol/L葡萄糖)组;将30只小鼠根据简单随机化法分为对照组、模型组(60 mg/kg的链脲佐菌素)、观察组(60 mg/kg的链脲佐菌素+100 mg/kg-的玄参提取物),每组10只。比较各组细胞增殖,迁移及miR-646、血管内皮生长因子A(VEGFA)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)表达;比较各组小鼠视网膜组织ICAM-1、CD31表达及视网膜组织水肿情况。结果:细胞实验结果显示,与对照组比较,模型组细胞miR-646、ICAM-1表达显著升高,VEGFA、CD31表达显著下降(均P<0.05);与模型组比较,观察组细胞miR-646、ICAM-1表达显著降低,VEGFA、CD31表达显著升高(均P<0.05);与模型+Anti-NC组比较,模型+Anti-miR-646组细胞增殖率、迁移细胞数及VEGFA表达显著增加,miR-646表达及凋亡率显著降低(均P<0.05)。动物实验结果显示,与对照组比较,模型组小鼠视网膜组织中miR-646、ICAM-1表达显著升高,VEGFA、CD31表达显著下降(均P<0.05),同时小鼠视网膜组织水肿情况加重;与模型组比较,观察组小鼠网膜组织中miR-646、ICAM-1表达显著降低,VEGFA、CD31表达显著升高(均P<0.05),同时小鼠视网膜组织水肿明显得到缓解。结论:玄参提取物可能通过miR-646/VEGFA机制调节HRMEC细胞增殖、迁移和凋亡,改善缓解糖尿病视网膜水肿。

玄参对照提取物的PULCON法定值研究和其在中药复方增液汤中的应用

目的采用氢核磁脉冲宽度定量法(Pulse length based concentration determination,PULCON)对玄参对照提取物中的哈巴苷、安格洛苷C和哈巴俄苷进行定性及定值研究,探讨玄参对照提取物代替相应对照品在提升玄参复方制剂质量控制水平的可行性。方法采用Bruker Avance III HD 700超导核磁共振波谱仪,以DMSO-d6为溶剂,苯甲酸为外标物,利用PULCON法比较苯甲酸定量峰(δ_(H)7.94)的峰面积和不同批次玄参对照提取物中3种化学成分的不同定量峰(哈巴苷δ_(H)6.24、安格洛苷Cδ_(H)7.08和哈巴俄苷δ_(H)5.97)的峰面积,测定不同批次中3种成分的含量,并采用配对t检验将测定结果与高效液相色谱法(High performance liquid chromatography,HPLC)的定值结果进行比对。分别以已知含量的玄参对照提取物和3个相应对照品为对照,建立增液汤的HPLC含量测定方法,采用配对t检验对2种方法所得结果进行比较。结果采用PULCON法测得3种成分的含量与HPLC法的定值结果基本一致,以玄参对照提取物为对照,3种成分的线性关系相关系数均大于0.9997,平均回收率为99.36%~102.31%。t检验结果显示,2种方法测定的哈巴苷、安格洛苷C、哈巴俄苷含量P值分别为0.279、0.105、0.623,均大于0.05,表明2种含量测定方法差异无统计学意义。结论PULCON法可在无对照品且无需分离的条件下,直接、快速、准确地分析玄参对照提取物成分的物质组成和含量,并将已标定准确含量的玄参对照提取物用于玄参复方制剂的质量控制,为中药对照提取物在中药质量研究中的应用提供了科学依据。

玄参化学成分及药理作用的研究进展

玄参作为大宗常用药材之一,具有清热养阴和软坚散结等功效。现代药理学研究表明,其活性成分主要有环烯醚萜苷、苯丙素、黄酮、多糖、三萜、倍半萜、苯甲醇苷及苯乙醇苷等,具有保护心血管系统、抗肿瘤、抗氧化、抗炎、降血糖和保肝等作用。本文通过分析归纳近年来与玄参相关的文献及报道,对其化学成分及药理作用进行综述,旨在阐明玄参的药用价值,为其临床合理用药提供参考。

响应面法优化玄参种芽超声提取哈巴苷、哈巴俄苷工艺

目的:优化玄参种芽提取工艺。方法:建立玄参种芽中哈巴苷、哈巴俄苷含量测定和方法,采用单因素试验,考察甲醇浓度、料液比和浸泡时间3个因素对哈巴苷、哈巴俄苷含量及总含量的影响。结合Box-Behnken响应面法,以哈巴苷、哈巴俄苷总含量为响应指标,考察甲醇浓度、料液比和浸泡时间3个因素对提取工艺的影响。结果:哈巴苷、哈巴俄苷分别在15.63~500.00μg/mL、10.63~340.00μg/mL范围内线性关系良好,哈巴苷、哈巴俄苷平均回收率分别为100.24%、100.56%,RSD分别为1.98%、1.19%。根据回归方程,结合实际操作确定的最佳提取工艺为甲醇浓度44%、料液比1∶51、浸泡25 min,理论总含量为1.84%。结论:甲醇浓度、料液比和浸泡时间对玄参种芽提取有显著影响,得到的工艺稳定可重复,与理论值接近,可为玄参种芽提取技术规范与标准提供理论基础。

中药玄参薄层色谱鉴别法的建立

目的 :建立中药玄参的薄层色谱鉴别法。方法 :以玄参的特征性有效成分哈巴俄苷 (harpagoside)以及另一主要成分哈巴苷 (harpagide)为对照品 ,采用薄层色谱法。 结果 :建立了玄参的薄层色谱鉴别法 ,并通过对不同产地玄参药材以及数种易混淆药材的检测证明了该方法的专属性。结论 :该方法操作简便、准确、可靠。

玄参提取物抗炎与抗动脉硬化作用的探索

目的观察玄参提取物对大鼠动脉硬化及其炎症相关细胞因子的影响。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、玄参提取物低剂量组、玄参提取物高剂量组和布洛芬组。模型组及各给药组采用一次性腹腔注射维生素D360万单位/kg,同时每天灌服10 ml/kg脂肪乳的方法制备大鼠动脉硬化模型。玄参低剂量组和高剂量组分别每天灌服玄参提取物20.5mg.kg-1.d-1和41.0 mg.kg-1.d-1,布洛芬组每天灌服布洛芬混悬液144 mg.kg-1.d-1,正常组和模型组每天灌服等量蒸馏水。给药70 d后处死大鼠,对血脂、TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-10及NF-кB进行测定,并观察动脉的病变情况。结果玄参提取物可明显降低模型大鼠胆固醇和低密度脂蛋白的水平,提高高密度脂蛋白与低密度脂蛋白的比值,降低炎症因子TNF-α,IL-1β,IL-6的浓度,提高抗炎因子IL-10的浓度,抑制动脉NF-кB过量表达,抑制模型大鼠动脉壁中膜的增厚。结论玄参提取物可通过抗炎和降血脂而发挥一定的抗动脉硬化的作用。

玄参多糖体外清除自由基和抗氧化作用的研究

采用超声波辅助-热水提取玄参多糖,通过脱脂、除色素、除脱蛋白、醇沉等步骤纯化得到部分纯化的玄参多糖,研究了部分纯化的多糖对羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2^-·)、亚硝酸盐(NO_2^-)的清除作用和对油脂氧化的抑制作用,并与抗坏血酸对照品进行比较。结果表明:部分纯化的玄参多糖对羟基自由基、超氧阴离子自由基以及亚硝酸盐具有不同程度的清除能力,清除效果与多糖浓度均呈现一定的量效关系,对油脂具有抗氧化作用,对植物油的抗氧化能力强于抗坏血酸。

玄参中4种主要活性成分的HPLC定量分析

目的建立应用HPLC—uV同时测定玄参中4种主要活性成分——哈巴俄苷、肉桂酸、安格洛苷C和acteoside含量的方法。方法采用Hypersil BDS—C18色谱柱（4、0mm×250mm，5μm），流动相为乙腈和1％醋酸水溶液，梯度洗脱，流速1mL·min^-1，检测波长278nm，柱温25℃。结果哈巴俄苷、肉桂酸、安格洛苷C和acteoside线性范围分别为15、12—302、4mg·L^-1，7、72—154．4mg·L^-1，24、84～496、8mg·L^-1，6．64—132．8mg·L^-1；平均回收率（n=5）分别为101、59％（RSD=2、40％），96．75％（1．32％），100．11％（3．95％），99、89％（2、08％）。结论本方法简单、快速、准确可靠，可作为玄参药材的质量控制方法。

高效液相色谱法测定元参、黄芩和杭白菊中的多菌灵残留

建立了一种测定元参、黄芩和杭白菊3种中药材中多菌灵残留的反相高效液相色谱分析方法(R-HPLC)。样品用丙酮提取,柱层析(弗罗里硅土-中性氧化铝=7∶4,质量比)和液液分配净化,以甲醇-水(体积比60∶40)为流动相,在波长281nm下对待测组份进行检测,外标法定量。结果表明,多菌灵在3种中药材中的添加回收率分别为元参:69.08%～88.31%,相对标准偏差(RSD)为3.35%～4.67%;黄芩:71.39%～88.40%,RSD为3.73%～8.62%;杭白菊:73.33%～97.31%,RSD为2.83%～9.44%;均符合农药残留分析的要求。该杀菌剂在0.05～10mg/L之间具有良好的线性关系,r=0.9997,仪器的最小检出量(按S/N=3计)分别为0.3、0.5和0.3ng,方法的最低检测浓度分别为0.01、0.05和0.01mg/kg。该方法简单易行,净化效果较好,适合各种中药材中多菌灵残留的检测。

基于UPLC-Q-TOF MS分析加工炮制对玄参化学成分的影响

为了全面阐明玄参加工工艺对其化学成分的影响,采用UPLC-Q-TOF MS技术对烘干玄参和传统加工玄参的化学成分进行分析比较,并运用主成分分析法(PCA)和正交偏最小二乘辨别分析法(OPLS-DA)进行数据统计,寻找差异性成分,同时依据一级质谱精确质荷比和二级质谱碎片信息进行成分解析。结果表明:与烘干玄参相比,传统加工玄参中共有26种成分的含量变化显著,实验鉴定出了其中的15种成分,包括9种环烯醚萜类化合物和6种苯丙素类化合物;含量降低的成分有桃叶珊瑚苷、6-O-甲基梓醇、哈巴俄苷、8-O-香豆酰基哈巴俄苷、8-O-阿魏酰基哈巴俄苷、阿格托苷、异阿格托苷、安格洛苷C和scrophuloside B1,其中scrophuloside B1为玄参中首次发现的成分;含量增加的成分有哈巴苷、哈巴俄苷同分异构体、6″-O-α-D-半乳糖哈巴俄苷、6-O-α-D-半乳糖哈巴俄苷、斩龙剑苷A和肉桂酸。本工作对研究玄参加工炮制机制有重要意义,同时可为阐明玄参药效的物质基础提供依据。

RPHPLC法同时测定玄参中肉桂酸、哈巴酯苷的含量

耳的建立中药材玄参的RP-HPLC法的质量控制方法。方法采用Diamonsil^TM C18色谱柱（200mm×4．6mm，5μm），流动相为体积分数为1％的乙酸水溶液-甲醇（体积比为49：51），检测波长为280nm，流速为0．90mL·min^-1，柱温为32℃，进样量为10μL，外标法同时测定中药材玄参中的肉桂酸和哈巴酯苷的含量。结果以色谱峰面积（A）对质量浓度（P）作图。肉桂酸和哈巴酯苷回归方程分别为：A=8．577×10^7ρ＋7．533×10^4（r=0．9993）、A=2．510×10^7ρ-2．633×10^4（r=0．9997）；线性范围分别为4．65～37．2mg·L^-1、20．6～164．8mg·L^-1；平均回收率分别为99．6％（RSD=1．4％，n=9）、100．1％（RSD=1．3％，n=9）；平均质量分数分别为3．116×10^-2％（RSD=1．4％，n=3）、0．1678％（RSD=0．77％，n=3）。结论本方法可作为玄参药材的质量控制方法。

色谱指纹图谱分析技术用于鉴别中药玄参产地的研究

目的采用高效液相色谱(HPLC)色谱指纹图谱分析技术鉴别中药玄参产地。方法采用HPLC法测定了重庆市武隆县玄参等14个不同产地玄参样品。色谱条件C18柱,甲醇-1%冰醋酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长290 nm,体积流量1.0 ml/min,柱温30℃。结果对重庆市武隆县10批次玄参样品的多个活性成分进行综合评价,筛选出重庆市道地药材玄参为建模对象,合成出玄参的标准HPLC色谱指纹图谱模型;并用此模型和特征成分的相对峰面积比值准确地区分浙江省磐安县等不同产地玄参。结论研究将有助于玄参药材的标准化种植及质量控制。

玄参“凉血滋阴”药效相关研究概况

目的：从现代药理学角度来阐述玄参“凉血滋阴”功效的药性理论。方法：通过查阅中国期刊全文数据库（CNKI），对（1994-2006）年玄参功效与药理相关文献的分析，对玄参“凉血滋阴”功效展开药理作用进展汇总。结果：与玄参“凉血”功效相关的药效主要有抗肿瘤、抗炎、解热等，而与“滋阴”功效相关的药效主要有增强免疫功能、降血糖、保肝等。结论：玄参“凉血滋阴”功效具有多种药理作用，为完善玄参的中药药性理论提供现代科学依据。

西南产玄参药材的HPLC指纹图谱研究

目的:建立西南不同产区玄参药材及市售玄参饮片甲醇提取物的HPLC指纹图谱,为其质量控制提供依据。方法:用HPLC分析测定重庆南川、酉阳及贵州道真产3批玄参药材及8批市售玄参饮片,色谱条件:C18柱,乙腈-0.4%冰醋酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长260 nm,流速1.0 mL/min,检测时间55 min。结果:以哈巴俄苷及肉桂酸为指标性成分,建立了玄参药材及饮片的HPLC指纹图谱共有模式图,对不同产地的样品进行相似度比较,相似度大于0.901。结论:该指纹图谱检测方法快速、简便,有助于全面评价玄参药材的品质,也为玄参规范化种植提供理论依据。

内皮细胞提取和高效液相色谱－电喷雾飞行时间质谱联用预测玄参中的活性成分

目的:应用内皮细胞提取和高效液相色谱-电喷雾飞行时间质谱联用(HPLC-ESI/TOF MS)预测玄参的活性成分。方法:应用内皮细胞作为靶细胞,中药提取液中的活性成分可选择性地与其结合,洗去未结合的成分,用HPLC-ESI/TOF MS对细胞解离液中的成分进行分析。结果:从玄参提取液中检测出6个可与内皮细胞结合的成分,其中3个鉴定为安格洛苷C(angoroside C)、肉桂酸(cinnamic acid)和哈巴俄苷(harpagoside)。结论:细胞解离液中检测到的成分为玄参中与内皮细胞有结合作用的成分,本方法可用于预测中药中与内皮细胞相结合的活性成分。

HPLC法测定不同产地玄参的肉桂酸含量

目的:对采收到的白川县、广东、浙江和宝庆县4个不同产地的玄参的有效成分肉桂酸进行含量测定,观察这4个不同产地的玄参的肉桂酸含量是否有明显区别。方法:采用HPLC分析法。色谱条件:色谱柱:kromasil ODS-I(250mm×4.6mm)。流动相:乙腈:水(20:80)。检测波长:272mm,柱温:30℃。结果:35份玄参样品得到的指纹图谱无明显区别,肉桂酸含量差异不显著。结论:这4种不同产地的玄参的生长环境、地理位置等自然因素对肉桂酸含量的影响不大。

玄参药材高效液相指纹图谱的建立

目的建立玄参药材的RP-HPLC指纹图谱,为玄参的鉴别及质量控制提供依据。方法采用高效液相色谱法,以DAD为检测器,KromasilKR100-5C18(4.6mm×250mm,5μm)为分析用色谱柱,甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,建立了玄参药材的指纹图谱。结果该指纹图谱法可使玄参样品中各色谱峰得到较好的分离。结论该指纹图谱检测方法简便、重现性好,可作为玄参药材质量评价的重要方法。

玄参饮片质量控制方法研究

研究中药质量评价中一测多评与指纹图谱结合的考察模式，以重庆市售玄参饮片为研究对象，以肉桂酸为参照物建立玄参饮片HPLC指纹图谱及其与其余成分的相对校正因子，并计算其含量，实现一测多评。结合建立的玄参HPLC指纹图谱，对饮片进行相似度评价，并进行聚类分析和主成分分析。结果建立了玄参饮片HPLC指纹图谱，标定了18个共有峰，指认了其中3个共有峰，11批饮片相似度在0.731～0.960之间，16批饮片中只有11批饮片含量符合药典规定，并将其有效地区分为三类。结果表明一测多评结合指纹图谱的质量控制模式适合于玄参饮片质量评价，重庆市售玄参饮片质量参差不齐，应加强中药饮片的规范化生产。