种肥混播对夏玉米产量、酶活性和土壤微生物的影响

探索夏玉米种子与控释肥混播对夏玉米产量、氮磷钾养分吸收、施肥经济效益、酶活性及土壤微生物的影响,为夏玉米轻简化生产和化肥减施增效提供技术支撑。以夏玉米品种‘郑单958’为材料进行了大田试验,试验设不施氮对照、常规施肥、种子控释肥混播和氮磷钾减量50%控释肥种子混播共4个处理,分析调查了夏玉米产量、氮磷钾吸收、叶片酶活性及根际土壤微生物功能基因。与常规施肥相比,2个控释肥处理的夏玉米产量增加7.7%~22.1%,夏玉米氮、磷、钾吸收量分别增加0.75%~33.3%、16.3%~27.1%、4.78%~36.5%,氮肥吸收利用率提高20.7%~24.6%,氮肥偏生产力提高14~74.1 kg/kg,氮肥农学利用率提高14.1~20.2 kg/kg,夏玉米每公顷净收益(扣除肥料投入)比常规施肥增加9.67%~19.6%。吐丝期根际土壤硝化和反硝化微生物基因数、叶片硝酸还原酶、谷氨酰胺合成酶、谷氨酸合成酶和谷氨酸脱氢酶与常规施肥没有显著差异。种肥混播在夏玉米上实现了增产增收,提高了氮磷钾养分吸收量和氮肥利用效率,降低了环境污染风险。

基于线粒体12S rRNA基因鉴别混合牛肉及制品的牛种来源

线粒体基因组具有种内高度保守性。它的12SrRNA基因同时具有抗腐蚀、耐高温的特点,而被用于饲料、鲜肉及肉制品的来源追踪和物种成分鉴别等研究。利用牦牛、普通牛、水牛作为研究材料,在牛线粒体12SrRNA基因通用引物扩增片段区域发现3种特异的酶切位点,可用于混合鲜牛肉及制品的牛种来源的鉴别。结果显示:牦牛12SrRNA扩增片段被酶切为203bp和250bp,普通牛为134bp和318bp,水牛为86bp和367bp,通过测序验证了特异性位点和酶切的正确性;对样品经过不同温度(100℃、120℃、140℃、160℃和180℃)处理均能扩增到目的条带,但条带从120℃开始变淡。该方法在鲜牛肉及制品的牛种来源鉴别上具有简单、快速、廉价等优点。

血管紧张素转换酶基因多态性与脑出血的关系

目的 高血压是脑出血最主要的危险因素 ,与血压水平或高血压相关的基因可能通过血压和其它途径在脑出血的发生、发展中起重要作用。本文通过大样本病例 -对照研究 ,拟探讨血管紧张素转换酶 (ACE)基因I/ D多态性与脑出血的相关性。方法 多中心病例对照研究 ,从 7个研究中心收集 4 75例脑出血病例 ,匹配 4 75例对照 ,病例和对照均接受心脑血管病标准问卷调查、血生化检查。PCR检测 ACE基因 I/ D多态性。结果 脑出血组和对照组 ACE基因 I/ D多态性基因型频数分布符合 Hardy- Weinberg平衡。两组 ACE基因 I/ D多态性基因型和等位基因频率分布差异无明显统计学意义 (基因型 :χ2 =0 .172 ,P=0 .918;等位基因 :χ2 =0 .0 8,P=0 .773)。多因素分析调整传统危险因素后 ,ACE基因 ORDI/ II=1.0 9(95 % CI 0 .6 8～ 1.78) ,ORDD/ II=1.10 (95 % CI 0 .6 9～ 1.77) ,表明 ACE基因 I/ D多态性和脑出血无关。结论 ACE基因 I/ D多态性和脑出血不存在关联关系 ,ACE基因I/ D多态性可能不是中国人脑出血的遗传影响因素。

柑橘等果实糖代谢及其生态调控研究进展

综述了果实内糖的运输及蔗糖代谢相关酶对柑橘等果实的糖代谢的调控机制,以及生态因子对糖代谢过程中糖跨膜运输及果实内蔗糖代谢相关酶基因的调控方式,并指出运用分子生物学手段研究果实糖代谢相关酶基因的调控机理和生态因子对果实内糖代谢的影响为今后研究的重点方向。

环境生物技术信息学进展

环境生物技术信息学通过计算机将生物信息学的技术与成果用于环境生物技术 ,控制污染。降解污染物基因DNA的碱基组成 -结构 -功能的核酸信息 ,降解污染物酶的氨基酸组成 -结构 -功能的蛋白多肽信息 ,为应用环境生物技术控制污染 ,注入了新的灵魂与力量。构建遗传工程特效菌株 ,高效降解危险有机污染物 ;创造高效工艺系统 ,去除危险有机污染物 ;有效降低或消除污染物对人体健康的危害 ,维护生态环境安全 ;

植物细胞的编程性死亡

植物细胞受基因调控死亡，这种编程性定位的细胞死亡具有积极的生理功能，形成有利于自身发展的结构。基因调控细胞内的酶活动，细胞器产生变化，导致细胞死亡。外部因素可调节植物基因及基因调控产物的表达。

加兰他敏合成途径的研究进展

加兰他敏是一种广泛用于治疗阿尔茨海默氏症等疾病的药物,但研究发现,植物中加兰他敏含量极少,故科研人员一直致力于加兰他敏的合成研究。迄今为止,研究工作者已提出多种加兰他敏化学合成策略,但因其化学合成方法存在产率低、成本高、步骤复杂等诸多缺陷,不利于投入实际生产,探索其生物合成途径是目前最有效替代办法。本文综述了近年来加兰他敏合成的相关研究,且着重介绍了其生物合成途径及其相关酶研究进展,并对其后续研究进行展望。

系列木聚糖降解酶基因同向串连表达的研究

采用分子克隆操作方法,通过设计多个SD序列的多克隆位点,首次成功构建了一个木聚糖降解酶系列基因同向串连表达载体,经筛选鉴定获得具有极耐热性的α-阿拉伯呋喃糖苷酶基因(XarB)、葡萄糖醛酸酶基因(aguA)和木聚糖酶基因(XynB)同向串连的pHsh/XarB-aguA-XynB一株克隆菌.酶学分析表明重组菌株具有较好的阿拉伯糖苷酶、木糖苷酶、葡萄糖醛酸酶和木聚糖酶活性.酶活单位分别为:阿拉伯糖苷酶11.8 U/mL,β-木糖苷酶6.87 U/mL,α-葡萄糖醛酸酶1.53 U/mL,木聚糖酶6.58 U/mL.

α-硫辛酸对滩羊肌纤维类型和肉品质的影响及其调控机理

为研究α-硫辛酸对滩羊股二头肌肌纤维特性和肉品质的影响及其调控机理,该试验选取初始质量为(20.64±1.15)kg的4月龄健康滩羊12只,随机分为对照组(基础日粮)和α-硫辛酸组(基础日粮中添加600 mg/kgα-硫辛酸),饲喂试验预试期7 d,饲喂期60 d。以股二头肌为试验材料,分别测定肉品质、肌纤维特性、能量代谢酶活性和调控肌纤维类型转化相关基因的表达量,探究α-硫辛酸对滩羊肌纤维特性和肉品质的影响及其调控机理。结果表明:α-硫辛酸显著提高了滩羊的平均日增重(Average Daily Gain,ADG)(P<0.01),降低了料肉比(Feed Conversion Ratio,FCR)(P<0.01)、羊肉的b*值(P<0.01)、剪切力值(P<0.01)、失水率(Water loss rate)(P<0.05);肌纤维分析结果显示α-硫辛酸显著提高了IIA肌纤维比例(P<0.05),降低IIB型肌纤维比例(P<0.01);α-硫辛酸显著增强了肌肉中肌酸激酶(Creatine Kinase,CK)(P<0.01)和琥珀酸脱氢酶(Succinate Dehydrogenase,SDH)活力(P<0.05),降低了乳酸脱氢酶(Lactic Dehydrogenase,LDH)活力(P<0.01)。此外,α-硫辛酸显著提高了腺苷酸活化蛋白激酶α2(AMP-activated protein kinaseα2,AMPKα2)(P<0.01)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1-α(Peroxisome proliferator-activated receptor gamma co-activator 1-alpha,PGC-1α)(P<0.01)、肌细胞增强因子2(Myocyte Enhancer Factor 2C,MEF2C)(P<0.05)和核呼吸因子1(Nuclear respiratory factor 1,NRF1)(P<0.05)基因表达量,并显著激活了AMPK酶活性(P<0.01)。综上所述,日粮添加α-硫辛酸可能通过激活AMPK-SIRT1-PGC-1α信号通路,提高AMPKα2、PGC-1α、MEF2C和NRF1基因表达量促进骨骼肌线粒体生物合成,增强肌肉的氧化代谢能力,促进滩羊的肌纤维类型发生转化,进而改善滩羊的肉品质。

基于FOK1酶体系的PCR防污染法及在产前诊断中的应用

目的:建立一种有效、实际操作强的聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)防污染法并用于产前检测叶酸利用能力。方法:在1条引物的5′端加入限制性内切酶FOK1的识别序列,将FOK1酶加入PCR扩增反应体系中,切断污染的前PCR产物,考察体系中FOK1酶的用量、酶切扩增一体式反应体系成分的比例及污染量的可控程度,并应用于亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)基因上C677T突变位点的分析。结果:FOK1酶最佳反应体系却抑制PCR扩增;在TaKaRa反应体系中,0.5 U FOK1酶可完全切割≤0.1μL含有酶切位点的前扩增产物,且成功扩增,而不加入FOK1酶无法控制假阳性结果。FOK1酶切防污染法成功用于MTHFR C677T的测序检测。结论:本方法有效便捷,完全实现了闭管防止PCR污染,不影响后续测序反应,不仅可适用于以PCR扩增为基础的产前诊断等测序分析,更可广泛应用于所有涉及核酸扩增诊断的实验室防治PCR污染中。

高CO_(2)气调处理对刺芹侧耳采后木质化的影响

以大气环境为对照(CK,21%O_(2)+0.03%CO_(2)),通过测定感官指标、生理指标和木质化相关基因表达量,研究3组高CO_(2)气调处理(CA1:2%~4%O_(2)+16%~18%CO_(2);CA 2:2%~4%O_(2)+18%~20%CO_(2),CA3:2%~4%O_(2)+20%~22%CO_(2))对低温贮藏(0℃)3、6、9、12 d刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)木质化的影响。结果表明:与CK相比,CA2和CA3抑制子实体采后色泽变暗和表皮皱缩,可有效保持其感官品质;与其他处理相比,CA3推迟子实体硬度和木质素含量上升,同时对木质素合成关键酶PAL和CAD的活性具有抑制作用;CA3对木质素合成相关的PePAL、PeCAD、PeC4H、Pe4CL基因的表达具有抑制作用。2%~4%O_(2)+20%~22%CO_(2)的气体环境能延缓刺芹侧耳冷藏期间的木质化进程。

一株具木聚糖酶活链霉菌的鉴定及其木聚糖降解酶系分析

分离得到一株具木聚糖酶活性的放线菌菌株pp2,该菌株具有典型链霉菌属的形态学特征.通过对其进行形态学、生理生化特性以及16SrRNA基因序列等方面的分类学研究,菌株pp2初步鉴定为链霉菌属的一个潜在新种.通过对菌株pp2的酶系研究发现该菌株胞外发酵液具木聚糖酶活性,细胞破碎液中具α-L-阿拉伯糖苷酶活性和β-D-木糖苷酶活性.其中木聚糖酶酶活力为30·3U/mg,酶反应最适温度为65℃,最适pH为5·4;37℃下稳定性很好,60℃下酶活性衰减很快.α-L-阿拉伯糖苷酶酶活力为1·81U/mg,酶反应最适温度为55℃,最适pH为6·0,55℃下稳定性能很好.β-D-木糖苷酶酶活力为0·04U/mg.

理脾调脂胶囊对血脂失调症大鼠及ApoE基因敲除小鼠PPARs mRNA的调控作用

目的研究理脾调脂胶囊对血脂失调症大鼠及ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠PPARα、γmRNA的调控作用,探讨其调节脂质代谢的作用机制。方法 48只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、理脾调脂胶囊治疗组(理脾调脂组)、血脂康对照组(血脂康组),造模4周,将ApoE-/-小鼠30只随机分为空白组、血脂康组、理脾调脂组。理脾调脂组大鼠、ApoE-/-小鼠(以下简称大、小鼠)每日灌胃理脾调脂胶囊,血脂康组每日灌胃血脂康,用药8周。酶法测定大、小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)浓度,沉淀法测定大、小鼠血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);内参照模板法荧光定量PCR检测大、小鼠肝脏PPARα、γmRNA的表达。结果理脾调脂组大、小鼠血清TC、TG、LDL-C浓度较模型组、空白组显著降低(P<0.01),HDL-C浓度显著提高(P<0.01),大、小鼠PPARα、γmRNA表达较模型组(或空白组)显著提高(P<0.01);与血脂康组比较,理脾调脂组大、小鼠血清TC、TG、LDL-C浓度均降低(P<0.05),HDL-C浓度均显著提高(P<0.01,P<0.05),PPARα、γmRNA表达明显提高(P<0.05)。结论理脾调脂胶囊能显著提高实验性血脂失调症大、小鼠肝脏PPARα、γmRNA的表达,具有调控核因子而影响血脂代谢的作用。

聚合酶3′外切活性对3′硫化修饰引物聚合反应的影响

目的 探讨硫化修饰的次 3′末端不配对引物能否引发高保真 DNA聚合酶介导的聚合反应的非成熟性终止 ,即所谓聚合反应的“关”效应。方法 采用配对及非末端不配对的 3′硫化修饰引物 ,研究其对不同保真度 DNA聚合酶引物延伸反应的影响。结果 非末端不配对的 3′硫化修饰引物也能引发高保真 DNA聚合酶介导的聚合反应非成熟性终止 ,而对低保真 DNA聚合酶所介导的聚合反应则无明显影响。同时 ,3′硫化修饰的配对引物对不同保真度 DNA聚合酶引物延伸反应均无影响。结论 硫化修饰的次 3′末端不配对引物与 3′末端不配对引物对引物延伸的影响相似 ,同样能引起高保真 DNA聚合酶介导的聚合反应的“关”的效应。显然 ,在单基因遗传病的诊断及单核苷酸多态性 (single nucleotide polymorphism,SNP)的高通量分析等方面 ,硫化修饰的碱基特异性引物与高保真 DNA聚合酶所构成的对 SNP敏感的“开 /关”系统 ,具有广阔的应用前景。

木聚糖降解酶系基因代谢调控研究进展

木聚糖是半纤维素的主要组成部分,是一类数量很大的再生生物资源,工业利用前景广阔。木聚糖降解需要多种酶的参与,主要有木聚糖酶、木糖苷酶、α-葡萄糖醛酸酶、乙酰木聚糖酯酶、阿拉伯糖酶、阿魏酸酯酶、p-香豆酸酯酶等。主要综述了木聚糖降解酶系基因代谢调控的研究进展,主要包括转录激活因子XlnR、抑制蛋白CreA、不同诱导物、pH值、HAP-CCAAT复合物等对木聚糖降解酶系基因表达的影响,最后探讨了木聚糖降解酶系基因代谢调控存在的问题,并对今后的研究进行了展望。

血管紧张素转换酶基因多态性与2型糖尿病肾病相关性的Meta分析

目的通过Meta分析评估血管紧张素Ⅰ转换酶(ACE)基因内含子16插入(I)/缺失(D)多态性与2型糖尿病肾病之间的相关性,进而评估小样本研究的偏倚及研究间异质性。方法计算机检索MEDLINE、EBSCO、EMbase、PubMed、CHKD、CNKI、CBM、VIP和WanFang Data中关于ACE基因插入/缺失多态性与糖尿病肾病(DN)相关性的病例对照研究,同时辅以文献追溯。检索时限均从1994年1月至2011年3月18日。由2位评价者按照纳入和排除标准独立选择文献、提取资料、评价质量,然后采用RevMan 5.0.0软件对纳入研究进行Meta分析。结果最终纳入61个病例对照研究,共计9 979例2型糖尿病肾病患者,7 252例对照。Meta分析结果显示:与DD+ID基因型相比,Ⅱ基因型2型糖尿病患者发生DN的风险较低[OR=0.65,95%CI(0.57,0.74)]。亚组分析结果显示,中国、日本和巴西2型糖尿病患者中,Ⅱ基因型有较低的DN发病风险,而在高加索、中东、印度、墨西哥、韩国、马来西亚2型糖尿病患者中,并未显示出这种相关性。结论在2型糖尿病患者中,ACE基因插入/缺失多态性与DN相关,Ⅱ基因型个体DN患病率相对其他基因型更低,但不同种族间其相关性存在一定差异。

2型糖尿病易感位点的功能性L1逆转录转座子的研究

目的 通过一种新的策略寻找 2型糖尿病的易感基因。方法 应用美国生物技术信息中心提供的 BL AST(basic local alignmentsearch tool)检索工具 ,对已报道的 2型糖尿病易感位点的核酸序列进行检索分析 ,发现功能性 L1逆转录转座子可能是易感基因。然后应用逆转录 -聚合酶链反应检测 2 5例 2型糖尿病患者和 2 2名正常对照的 L1逆转录转座子表达水平 ,用 SPSS10 .0软件包进行统计学分析 ,并对6例患者和 4名正常人的 L 1逆转录转座子进行定位克隆、基因组序列测定。结果 对人类基因组及 Gen-Bank数据库进行全面搜索分析发现 L 1逆转录转座子分布在除 19号、2 1号和 Y染色体外的其它染色体上。这种分布情况与已报道的易感位点在染色体上的分布情况有相似性。功能性 L1逆转录转座子在 2型糖尿病患者组的表达水平明显低于正常对照组 (P<0 .0 0 1)。L1逆转录转座子在 2型糖尿病患者有不同程度的缺失和 (或 )无意义突变 ,而在正常对照无突变。结论 功能性 L1逆转录转座子可能是 2型糖尿病的某一易感基因或者是其易感基因的重要调节因子之一。功能性 L 1逆转录转座子表达水平的高低可能可以作为筛选 2型糖尿病的一个生物学指标。

马铃薯苗期氮代谢关键酶及其基因表达对聚氨酯包膜尿素的响应

选用马铃薯"费乌瑞它"进行盆栽试验,研究施用普通尿素与聚氨酯包膜尿素对马铃薯氮代谢关键酶及其基因表达、氮素积累量的影响。结果表明:在施氮量相同的情况下,控释肥能显著提高硝酸还原酶(NR)、亚硝酸还原酶(NiR)和天冬酰胺合成酶(AS)的活性。对于氮代谢相关基因的表达量的研究结果表明,硝酸还原酶基因(StNR)和天冬酰胺合成酶基因(StAS)的表达量在苗期中后期均高于N0处理,且StNR和StAS基因的表达均与马铃薯苗期氮素积累量呈显著正相关,可以作为马铃薯植株氮素状况的指标。而对于植株氮素积累量的研究表明,在施氮量相同的情况下,施用控释氮肥比施用尿素更能促进植株氮素的积累,从而促进马铃薯植株的生长。