Y染色体性别决定区相关高速泳动族框因子9和周期素依赖性激酶4在结直肠息肉、结直肠癌中的表达及意义

目的 探究Y染色体性别决定区相关高速泳动族框因子9(SOX9)和周期素依赖性激酶4(CDK4)在结直肠息肉、结直肠癌中的表达及意义。方法 选取中国人民解放军第八十二集团军医院2015年1月至2017年6月收治的结直肠癌病人病理组织标本(结直肠癌组)94例及癌旁正常结直肠组织(正常结直肠组)39例,另取同时期结直肠息肉病人结直肠息肉组织(结直肠息肉组)51例。采用免疫组织化学SP染色法检测SOX9、CDK4的表达情况,分析SOX9、CDK4表达与结直肠癌病人临床病理参数之间的关系;对结直肠癌病人进行术后复查随访,分析结直肠癌病人生存情况。结果 SOX9在正常结直肠组织、结直肠息肉组织和结直肠癌组织中的阳性表达率分别为10.26%(4/39)、27.45%(14/51)、76.59%(72/94),差异有统计学意义(P<0.05);CDK4在正常结直肠组织、结直肠息肉组织和结直肠癌组织中的阳性表达率分别为7.69%(3/39)、21.57%(11/51)、54.84%(51/94),差异有统计学意义(P<0.05);正常结直肠组织中SOX9、CDK4蛋白表达水平低于结直肠息肉组织、结直肠癌组织(P<0.05),结直肠息肉组织中SOX9、CDK4蛋白表达水平低于结直肠癌组织(P<0.05)。结直肠癌病人病理组织SOX9、CDK4表达与肿瘤分化程度、临床分期、是否合并淋巴结转移有关(P<0.05);结直肠癌组织SOX9与CDK4表达呈正相关(r=0.58,P<0.001),由TCGA数据库检索结直肠癌组织SOX9、CDK4基因表达相关性显示,二者之间亦呈正相关(r=0.40,P<0.001);SOX9高表达、低表达病人术后3年累积生存率分别为44.6%、72.4%,两组比较Log-rank检验差异有统计学意义(χ^(2)=8.31,P=0.004);CDK4高表达、低表达病人术后3年累积生存率分别为25.6%、76.5%,两组比较Log-rank检验差异有统计学意义(χ^(2)=36.36,P<0.001)。结论 SOX9和CDK4在结直肠癌组织、结直肠息肉组织、正常结直肠组织中的阳性表达率逐渐降低,与结直肠癌肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移情况及预后有关,可能参与结直肠癌的发生发展过程。

Y染色体性别决定区(Sry):性别决定关键开关

性发育异常在人类遗传性疾病中很常见,因此性别决定在临床和生物学研究中非常重要。Y染色体性别决定区(sex-determining region of Y-chromosome,Sry)即哺乳动物Y染色体上的睾丸决定基因片段,与性别决定密切相关。本文对Sry基因的结构功能和表达调节及其相关的性别决定分子机制进行了综述。

利用孕妇外周血浆小片段游离胎儿DNA检测Y染色体性别决定区基因

目的探索从孕妇外周血浆中提取小片段游离胎儿DNA(cffDNA)提高检测胎儿Y染色体性别决定区(SRY)基因准确率的方法,评估利用小片段cffDNA进行无创性产前诊断可行性。方法收集117例孕妇外周血,利用柱吸收方法提取其血浆cffDNA,经琼脂糖凝胶电泳分离富集小片段cffDNA,使用二重PCR反应(dulex-PCR)检测SRY基因和磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因。结果来源于66例孕男胎孕妇血浆标本小片段cffDNA均检出SRY和GAPDH基因,来源于50例孕女胎孕妇血浆标本小片段cffDNA仅检出GAPDH基因。与绒毛/羊水标本检测结果相符。特异性和敏感性均为100%。结论利用琼脂糖凝胶电泳,切胶回收,可选择性富集孕妇外周血小片段cffDNA,相对提高胎儿DNA水平,结合二重PCR扩增SRY基因技术可用于无创性产前性连锁遗传疾病和单基因突变疾病产前诊断。

应用PCR扩增Y染色体性别决定区序列鉴定山羊胚胎性别

在对山羊的Y染色体性别决定区(SRY)序列进行分析的基础上,设计出特异于山羊SRY序列的PCR引物,对山羊胚胎的分割胚的SRY序列进行扩增,以鉴定胚胎性别。胚胎移植后的妊娠及产羔情况证实,性别鉴定结果可靠。

Y染色体性别决定基因相关的高速泳动蛋白家族9和胃动蛋白1在胃癌中的表达及其与预后的关系

目的探讨Y染色体性别决定基因相关的高速泳动蛋白家族9(SOX9)和胃动蛋白1(GKN1)在胃癌中的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组织化学染色法检测SOX9和GKN1在70例胃癌组织及相应癌旁组织(27例肠上皮化生和43例正常胃黏膜组织)中的表达情况,分析SOX9和GKN1在胃癌中的表达与患者临床病理因素和预后的关系。结果SOX9在胃癌组织、肠化生组织和正常胃黏膜组织中的高表达率分别为92.9%(65/70)、77.8%(21/27)和55.8%(24/43),差异有统计学意义(χ^2=21.722,P<0.001)。胞核与胞浆均可见阳性染色。单独观察胞核内染色发现,SOX9在胃癌组织细胞核内的高表达率为67.1%,明显高于肠化生组织的37.0%(P=0.007)和正常胃黏膜组织的23.3%(P<0.001);GKN1的染色定位于胞浆,其在正常胃黏膜中的高表达率为76.7%,明显高于肠化生组织的44.4%(P=0.006)和胃癌组织的37.1%(P<0.001)。胃癌组织中,SOX9在胞核内的表达与组织分化程度相关(P=0.007),而GKN1的表达与组织分化程度(P=0.002)和病理类型是否为印戒细胞癌相关(P=0.009)。SOX9在胃癌组织细胞核内的表达与GKN1的表达呈显著负相关(χ^2=15.424,P<0.001)。70例胃癌患者中,SOX9在胞核内高表达组和低表达组的5年生存率(33.8%比67.5%,P=0.016)及GKN1高表达组和低表达组的5年生存率(60.0%比35.6%,P=0.044)差异均有统计学意义。37例SOX9胞核内高表达且GKN1低表达的胃癌患者5年生存率为28.8%。Cox多因素分析结果显示,TNM分期晚(Ⅱ期:HR=7.435,95%CI:1.313~42.096,P=0.023;Ⅲ期:HR=12.214,95%CI:2.677~55.721,P=0.001)和SOX9在细胞核的高表达(HR=3.297,95%CI:1.199~9.065,P=0.021)是影响胃癌患者预后的独立危险因素。结论SOX9和GKN1的表达变化可能在胃癌的恶性生物学行为中发挥重要作用。SOX9可能是胃癌患者的潜在预后标志物,联合检测SOX9和GKN1的表达情况并进一步研究其分子作用机制可能为胃癌的早期诊断、靶向治疗以及预后评估提供新思路。

Y染色体性别决定区相关高迁移率组盒蛋白1联合电压门控钙通道抗体阳性的副肿瘤综合征1例报告并文献复习

目的探讨1例抗Y染色体性别决定区相关高迁移率组盒蛋白1(SOX1)、电压门控钙通道(VGCC)阳性的副肿瘤综合征(PNS)患者的临床特点。方法回顾性分析1例抗SOX1、VGCC阳性的PNS患者的临床资料,并进行文献复习。结果患者为中老年男性,亚急性起病,主要表现为双下肢无力,伴言语含糊。神经系统专科检查示构音障碍,腱反射减弱,左侧病理征阳性,左侧共济运动差。血清及CSF抗SOX1抗体阳性,血清VGCC抗体明显升高。予以糖皮质激素、丙种球蛋白治疗有效,之后予以依托泊苷、顺铂化疗。随访半年患者病情稳定,临床症状改善明显。结论本例PNS表现为Lambert-Eaton肌无力综合征、副肿瘤小脑变性、副肿瘤性周围神经病等叠加综合征,同时存在两种副肿瘤性自身抗体阳性,提示PNS可表现为多系统的神经损害。

小片段游离胎儿DNA检测Y染色体性别决定区的临床意义

目的研究从早孕妇女外周血中提取小片段游离胎儿DNA检测胎儿Y染色体性别决定区(SRY)的方法,提高PCR检测的特异性和敏感性,评估利用小片段游离胎儿DNA对性连锁遗传病进行无创性产前诊断可行性。方法收集80例孕妇外周血,提取游离的胎儿DNA和提纯小片段游离胎儿DNA,PCR检测SRY基因。结果80例受试者中2种样本敏感性和特异性比较差异有统计学意义。结论可利用孕妇外周血中小片段游离胎儿DNA检测胎儿Y染色体性别决定区,敏感性和特异性优于总游离DNA,可用于孕早期性连锁遗传疾病和单基因突变疾病产前诊断。

性染色体异常患者的性别决定基因检测

Y染色体性别决定基因是睾丸决定因子的重要候选成分,位于Y染色体的短臂上,应用PCR方法可以检测该基因的存在与否,本室应用性别决定Y染色体基因的特异引物检测了7例性染色体异常患者,其中二例47,XXY男性和一例47,XYY男性的性别决定Y染色体基因均阳性,二例46,XX男性中,一例阳性,另一例阴性,一例46,XY女性未检出性别决定Y染色体基因,另有一例Y染色体异全的患者未见Y染色体性别决定基因的丢失.

不要因果蝇的Y染色体误判其性别

人类的性别决定主要由Y染色体发挥作用，而果蝇的Y染色体对其性别决定不起作用，但与精子生成有关。

Y染色体性决定区的研究

1959年首次发现,小鼠(Welshons 等,1959)和人(Jacobs 等,1959;Ford 等,1959)的雄性决定因子是 Y 染色体。7年后(Jacobs等,1966)人方面的探索范围缩小到 Y 染色体短臂。Jones 等(1981)发现于蛇类的性别特异性的高度保守的重复 DNA

版纳微型猪近交系性别决定基因(SRY)原核表达载体的构建及蛋白高效表达

为了构建版纳微型猪近交系SRY的原核表达载体pET-32a(+)-SRY,并通过诱导使其在大肠杆菌中获得高效表达,研究采用添加限制性内切酶位点的引物特异性扩增SRY,连入pMD19-T simple载体,转化入大肠杆菌DH5α,克隆后提取pMD19-T-SRY阳性重组质粒,使用相同的内切酶同时对pMD19-T-SRY质粒和原核表达pET-32a(+)载体进行酶切,连接后使SRY定向克隆到pET-32a(+)表达载体中。经PCR、酶切和测序鉴定后,重组质粒转化大肠杆菌感受态DH5α,提取质粒后再次转化大肠杆菌Rosetta(DE3),用不同浓度的异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并通过15%SDS-PAGE鉴定。结果显示,不同浓度IPTG诱导的SRY均在大肠杆菌中进行了高效特异性融合表达。

Y染色体异常的临床表现与细胞遗传学分析

人类Y染色体是一个小的近端着丝粒染色体,长约50Mb。Y染色体上有与男性性别决定密切相关的基因存在。故若Y染色体发生数目异常或结构改变则会引起男性性发育异常或生殖异常等遗传效应。同时,在人群中Y染色体的长度具有变异性,这种长度变异性是否具有临床效应仍然是一个存在争议的问题,值得进一步的研究。

1例Y染色体与常染色体易位病例报道

人类Y染色体在性别决定、性器官发育和精子生成中扮演着十分关键的作用,但Y染色体主要功能区域仅位于短臂及Yq11区域,其余大部分为多态性异染色质区,不行驶功能。Y染色体与常染色体的易位较多发生于Y染色体长臂与近端着丝粒染色体(13、14、15、21、22号染色体)短臂较常见,而 Y 染色体和非近端着丝粒染色体的易位很少见。本文将阐述1例Y染色体长臂与17号染色体短臂易位的胎儿产前诊断过程,为今后遗传咨询工作提供一定的参考。

染色体缩合调控子2对食管癌小鼠细胞增殖的影响及其机制研究

目的探讨染色体缩合调控子2(RCC2)对食管癌小鼠细胞增殖的影响及其作用机制。方法提取食管癌小鼠食管组织及原代细胞,分组进行转染,采用CCK-8检测细胞增殖水平,RT-PCR和Western blotting检测RCC2、SOX2及增殖细胞核抗原(PCNA)、锌指蛋白(Snail)的表达,荧光素酶实验分析RCC2与SOX2的靶向关系。结果RCC2在食管癌组织中表达上调(P<0.05);过表达RCC2后食管癌小鼠细胞增殖水平升高,而抑制RCC2表达后细胞增殖水平降低(P<0.05);过表达RCC2后细胞中SOX2和SOX2靶基因PCNA、Snail相对表达量升高(P<0.05),而抑制RCC2表达后SOX2、PCNA、Snail相对表达量降低(P<0.05);荧光素酶实验结果显示RCC2与SOX2存在靶向调控关系。结论RCC2通过上调SOX2及其靶基因表达,提高食管癌小鼠细胞增殖能力,促进肿瘤细胞的发生、发展。

人类性别决定的遗传学研究进展

人类性别决定的机制是复杂的,自从Fisher于1930年提出性别决定假说以来,至今已有60年的历史。这一方面的研究也取得众多成果。本文仅就有关方面的进展加以概述。一、XY型性别决定生物界中有两种性别决定类型,即 XY型和ZW型。人类的性别决定为XY型性别决定。在男性的体细胞内,除了含有成对的常染色体外,还含有两个相异的性染色体,以XY表示;在女性。

Y染色体性别决定基因监测BMSCs治疗兔股骨头坏死的实验研究

目的探讨BMSCs移植治疗兔股骨头坏死(osteonecrosis of the femoral head,ONFH)后细胞在体内的存活情况及坏死股骨头内新骨形成情况。方法4～5月龄新西兰大白兔49只,雌性48只,雄性1只,体重2.0～2.5kg。取兔股骨及胫骨内骨髓,采用密度梯度离心法行BMSCs分离培养并传代。取第3代细胞行1,1’-双十八烷-3,3,3’,3’-四甲基吲哚羰花青-高氯酸盐(1,1’-dioctadecyl-3,3,3’,3’-tetramethylindocarbocyanine perchlorate,DiI)荧光标记,制备浓度为2.5×108个/mL细胞悬液。采用局部液氮注射冷冻法制备兔右侧ONFH模型。将雌兔随机分为3组,每组16只,A组单纯造模为对照,B组造模后注射自体DiI荧光标记BMSCs悬液4μL,C组造模后注射雄兔异体DiI荧光标记BMSCs悬液4μL。术后2、4、6、8周各组分别处死4只动物,行双侧股骨头X线观察,取股骨头标本行HE染色及Masson染色,测定新生骨小梁在股骨头所占的体积百分比。取心脏、肺、肝、脾、肾组织及股骨头标本组织,荧光显微镜下观察各组织中DiI荧光标记细胞的表达,PCR检测各组织中Y染色性别决定基因(sex determining region of the Y,Sry)的表达。结果术后动物均存活至实验完成。X线片示A组股骨头随时间延长逐渐出现骨坏死;B、C组股骨头骨密度逐渐增加,未出现骨坏死。组织学观察示B、C组随时间延长骨组织修复明显,A组无明显变化。各时间点B、C组新生骨小梁占股骨头体积百分比均高于A组,比较差异均有统计学意义(P<0.01),B、C组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。术后各时间点B、C组心脏、肺、肝、脾、肾组织均未见DiI荧光标记细胞。PCR结果显示,3组各时间点心脏、肺、肝、脾、肾组织中均未见Sry基因表达;C组各时间点股骨头标本可见Sry基因的表达,A、B组未见。结论异体BMSCs移植后细胞可在股骨头局部存活并诱导新骨形成,并未见体内其他组织中再分布。