无精子症病理学分型及其染色体核型和Y染色体无精子因子微缺失分析

目的探讨无精子症病理学分型及其染色体核型和Y染色体无精子因子(AZF)微缺失结果。方法回顾性分析2017年1月至2021年12月在广东省生殖医院接受睾丸穿刺活检的575例无精子症患者的临床资料,其中244例患者进行了染色体核型和AZF检测。分析患者的睾丸病理结果、染色体核型以及AZF检测结果,再基于主要病理形态学特征进行分型,分析不同类型无精子症的染色体核型以及AZF结果。结果睾丸病理活检结果显示,575例无精子症患者中梗阻性无精子症237例(41.22%)、非梗阻性无精子症338例(58.78%)。其中非梗阻性无精子症包括唯支持细胞综合征198例、精子成熟阻滞121例、生精小管透明变性19例,不同类型患者生精小管内生精细胞和支持细胞的发育特征和分布不同。244例患者中染色体核型正常212例,染色体核型异常32例,其中染色体数目异常3例、Y染色体异常3例、性反转1例,染色体多态25例。AZF微缺失结果显示,244例患者中正常235例,异常9例,均为非梗阻性无精子症,AZFa+b+c区均缺失1例,AZFb+c区同时缺失3例,AZFb区缺失2例,AZFc区缺失3例。结论染色体核型异常和AZF微缺失主要存在于非梗阻性无精子症患者,说明遗传因素是生精细胞发育障碍的重要原因。因此,规范明确的病理分型是无精子症临床诊疗和研究的重要基础,遗传学检查和咨询亦必不可少。

QF-PCR筛查男性不育患者Y染色体无精子症因子微缺失

为评估定量荧光PCR(Quantitative fluorescent polymerase chain reaction,QF-PCR)技术在快速筛查无精子症因子(Azoospermia factor,AZF)微缺失中的应用,文章对1218例非梗阻性无精子症、少精子症的男性不育患者,采用多重QF-PCR结合毛细管电泳技术,检测Y染色体长臂AZF区9个序列标签位点(Sequence tagged site,STS)以及性染色体短臂的AMEL(Amelogenin)和SRY(Sex-determining region of Y chromosome)位点,辅以常规染色体G显带方法进行核型分析。结果显示,1218例患者中105例可见AZF区微缺失(8.62%),其中AZFc区缺失(67.62%)最常见,其次为AZFb,c区缺失(20.95%);AZFb区缺失(7.62%)和AZFa区缺失(3.81%)则较少见;另有5例患者为AZFa,b,c区缺失合并AMEL-Y缺失,提示可能缺少Y染色体,经核型分析验证为46,XX(性反转)。105例AZF区微缺失患者的染色体核型分析显示染色体异常16例,其中"Yqh-"12例。根据AMEL-X/AMEL-Y比值,可见1218例患者中86例可能存在性染色体异常,经核型分析验证,68例为性染色体非整倍体。多重QF-PCR技术,一个反应即能检测样本的多个位点,并可提示性染色体是否存在异常,有助于男性不育患者尽早明确病因,也为后续的检查和治疗提供依据。

Y染色体无精子症因子区及男性不育相关基因研究进展

本文综述Y染色体无精子症因子(AZF)区及其与精子生成相关候选基因的研究进展。在人类Y染色体有一段与无精子症相关的缺失区域,即AZF区,它分为a、b和c区。AZFa缺失一般表现为唯支持细胞综合征(SCOS),区域内有USP9Y、DBY和UTY等与精子生成相关的候选基因;AZFb区的缺失一般为从SCOS到生殖细胞阻滞等表型,区域内有RBMY、SMCY、EIF1AY和CDY2等候选基因;AZFc区缺失的性状较分散,主要候选基因有DAZ、CDY1等。不育男性中AZF区总缺失率约为8.2%,不同报道结果不同,这可能与人种、研究方法和病例的纳入标准有关。在卵胞浆内单精子注射(ICSI)等辅助生育技术日益普及的今天,进行不育男性Y染色体微缺失筛查对防止这种基因缺陷的遗传具有重要意义。

Y染色体无精子症因子微缺失的筛查与临床探讨

目的：筛查男性不育患者Y染色体无精子症因子（AZF）微缺失发生率，并分析缺失类型与临床表型的关系。方法选取2013年1～12月于佛山市妇幼保健院男科就诊的男性不育症患者200例，其中非梗阻性无精子症141例，重度少精子症59例；另选取100例正常孕育男性作为阳性对照；100例正常孕育女性作为阴性对照。采用聚合酶链反应分析男性Y染色体 AZF微缺失。结果特发性不育组AZF微缺失率显著高于非特发性不育组，差异有统计学意义（P＜0．05）。在所有AZF微缺失类型中以AZFc最常见，占55．6％；非梗阻性无精子症组与重度少精子症组微缺失率及微缺失类型分布情况比较，差异无统计学意义（ P＞0．05）。结论 Y 染色体 AZFa、AZFb、AZFc区微缺失与男性不育具有密切的相关性。

Y染色体无精子症因子缺失与男性不育的关系

目的探讨Y染色体无精子症因子(AZF)缺失与男性不育的关系。方法随机选取男科门诊不育症患者728例,其中正常精子密度46例,少精子症459例,严重少精子症93例,非梗阻性无精子症71例,梗阻性无精子症45例,射精功能障碍14例;另设正常对照组50名。应用PCR对Y染色体序列标准位点sY84、sY86、sY127、sY134、sY254及sY255进行检测。结果728例不育症患者中,AZF缺失共18例,缺失发生率为2.47%,与正常对照组(0%)比较有统计学差异(P=0.000)。其中严重少精子症8例(8.60%),非梗阻性无精子症10例(14.08%)。结论AZF缺失是男性不育症,特别是无精子症和严重少精子症发病的重要原因之一,其基因检测为男性不育的病因诊断、治疗及预后提供了一定依据。

无精子症和少精子症不育患者Y染色体AZF微缺失检测

目的:探讨无精子症和少精子症患者Y染色体AZF微缺失与男性不育的关系。方法:采用多重PCR技术和毛细管电泳,对167例无精子症和少精子症患者进行Y染色体AZF微缺失检测,并以50例已生育的正常男性和10例正常女性作对照。结果:167例无精子症和少精子症患者中共发现AZF微缺失11例,总缺失率6.59%(11/167),其中无精子症患者65例,AZF微缺失4例,缺失率6.15%(4/65);严重少精子症患者50例,AZF微缺失7例,缺失率14.00%(7/50)。52例少精子症患者和50例已生育正常男性均未发现AZF微缺失。AZF微缺失的缺失类型及比例:AZFc缺失10例,占总缺失的90.91%(10/11);AZFb+c缺失1例,占总缺失的9.09%(1/11),11例缺失患者中未发现AZFa缺失。结论:染色体AZF微缺失是引起生精功能障碍导致男性不育的主要原因之一,AZF微缺失主要集中在无精子症和严重少精子症患者中,以AZFc缺失为主。

Y染色体AZFc区缺失患者使用睾丸取精精子与射出精子行ICSI的结局比较

目的 比较Y染色体长臂无精子症因子(AZF)c区缺失患者使用新鲜射出精子与睾丸取精精子行卵胞浆内单精子注射(ICSI)后的受精情况和妊娠结局。方法 采用回顾性队列研究,分析2017年1月至2022年12月因AZFc区缺失于西北妇女儿童医院行自精ICSI助孕患者的临床资料。根据女方取卵日男方不同取精方式分为两组:男方行睾丸手术取精的患者纳入睾丸取精组(n=68),男方新鲜射出精子的患者纳入对照组(n=242),比较两组的一般资料和ICSI结局。结果 睾丸取精组的男方LH水平显著高于对照组(P<0.05)。两组间的卵裂数、双原核(2PN)数、可用胚胎数、优质胚胎数比较均无显著性差异(P>0.05);睾丸取精组的囊胚形成数显著低于对照组(P<0.05)。睾丸取精组、对照组的首个新鲜移植周期数分别为30个周期和125个周期,睾丸取精组的受精率、正常受精率、卵裂率、可用胚胎率、囊胚形成率均显著低于对照组(P<0.05),两组间的种植率、临床妊娠率、流产率及活产率比较均无显著性差异(P>0.05)。单因素Logistic分析结果显示,取精方式与受精率、正常受精率、可用胚胎率、优质胚胎率、囊胚形成率、种植率、临床妊娠率、流产率及活产率不具有显著关联性(P>0.05),但会显著影响卵裂率[OR=2.62,95%CI(0.87,4.36),P=0.003];多因素Logistic回归分析显示,在校正囊胚形成数及男方LH水平这两个混杂因素后,对照组的卵裂率仍显著高于睾丸取精组[OR=-3.002,95%CI(-5.182,-0.821),P=0.007]。结论 对于AZFc区缺失患者,相较于新鲜射出精子,采用睾丸取精精子行ICSI时的卵裂率明显降低,虽然二者的妊娠结局没有明显差异,但考虑到手术取精的风险及经济成本,仍建议优先选择射精精子来进行ICSI。

原发无精子症患者Y染色体AZF微缺失研究

目的:研究原发无精子症患者Y染色体无精子症因子(AZF)基因微缺失频率,为细胞质内单精子注射(ICSI)辅助生育治疗前的临床检验及不育症的遗传咨询提供方法和依据。方法:采用多重PCR法,对天津地区染色体核型均正常的正常生育者30例(正常组)和68例原发无精子症患者(患者组)进行Y染色体AZF区6个位点微缺失检测。结果:患者组存在AZF区微缺失共12例(17.65%)。其中缺失位点在AZFa的sY84者3例(4.41%),AZFb的sY127有1例(1.47%),AZFc的sY254或sY254和sY255共6例(8.82%),AZFb+c的sY134和sY254有1例,sY127、sY254和sY255的1例。正常组各位点均无缺失,2组微缺失率差异有统计学意义(χ2=6.033,P<0.05)。结论:天津地区原发无精子症患者AZF区6位点微缺失检测,缺失率较高。

特发性无精子症及少弱精子症患者Y染色体AZF微缺失筛查分析

目的 探讨特发性无精子症及少弱精子症不育男性与Y染色体AZF微缺失的关系。方法 用双重PCR技术对 6 3例患者 (无精子症 4 1例 ,少弱精子症 14例 ,严重少精子症 8例 )进行Y染色体AZFa、AZFb、AZFc、SRY的微缺失筛查。同时对 2 6例无精子症患者行睾丸活检、组织学评估。结果 6 3例中AZF微缺失 7例 ,缺失率为 11 1%。其中无精子症 5例 ,严重少精子症 2例。AZFc缺失 4例 ,AZFb缺失 2例 ,AZFb +AZFc缺失 1例 ,未发现AZFa区缺失。 6 3例及对照组 30例SRY基因扩增均阳性。 2 6例无精子症患者行睾丸活检、组织学检查 ,无 1例精子发生正常。结论 Y染色体微缺失 ,特别是AZFc区DAZ基因的微缺失 ,是引起无精子和严重少弱精子等生精障碍而致男性不育较为重要的遗传学因素。

对无精子症和严重少精子症患者Y染色体畸变和微缺失的研究及评估

目的研究无精子症和少精子症患者染色体畸变及Y染色体(Yq11区)无精子症因子(azoospermicfac-tor,AZF)微缺失情况,建立Y染色体微缺失的临床筛查方法。对原发性无精子及少弱精症患者与AZF微缺失的关系。方法对145例患者(无精子症102例,严重少精子症43例)经染色体核型分析及AZF的3个位点8对引物PCR扩增,检测染色体畸变和Y染色体微缺失率。选取6个Y染色体特异性序列标签位点(STS),用PCR技术检测145例精子发生障碍患者AZF区微缺失情况。结果145例中染色体核型异常12例,占8.3%。AZF区微缺失21例,缺失率为14.5%。无精子症和严重少精子症AZF缺失率分别为14.70%和11.62%。145例中AZF区微缺失21例,表现为无精子症。缺失均在AZFc区,7例为DAZ(sY254、sY255)缺失,另2例为DNA加sY157缺失。结论染色体畸变和Y染色体微缺失是导致无精子症和严重少精子症的主要原因之一。无精子症缺失率高于严重少精子症患者。AZF3个位点8对引物PCR扩增可作为Y染色体微缺失的临床筛查方法。

伴及不伴精索静脉曲张的无精子、严重少精子症患者Y染色体微缺失对比研究

目的:比较精索静脉曲张(VC)无精子症和严重少精子症与不伴VC无精子症和严重少精子症患者Y染色体微缺失发生率,探讨他们不育的内在原因。方法:A组为VC无精子症和严重少精子症的患者137例,其中无精子症70例(A1组),严重少精子症67例(A2组);B组为不伴有VC的特发性无精子症和严重少精子症患者135例,其中无精子症69例(B1组),严重少精子症66例(B2组)。C组(对照组)为30例正常生育男性。采用多重PCR技术对受试者进行Y染色体微缺失检测。结果:1 A组137例中有23例检测到Y染色体微缺失,缺失率16.8%。B组135例中有23例检测到Y染色体微缺失,缺失率17.0%;C组未检测到Y染色体微缺失;2 A1组、A2组、B1组和B2组Y染色体微缺失率分别为为22.9%、10.4%、20.3%和13.6%;3严重少精子症A2组和B2组共133例中16例检测出Y染色体微缺失,发生率为12.0%;4A组与B组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Y染色体微缺失发生率在伴有及不伴有精索静脉曲张的无精子、严重少精子症患者中无显著差异,Y染色体微缺失是精索静脉曲张伴有的无精子、严重少精子症病因之一。

安徽地区1163例男性不育患者Y染色体无精子因子基因微缺失分析

目的通过分析安徽地区1 163例不育男性的Y染色体无精子因子(AZF)微缺失情况及特点,探讨其在诊治男性不育症中的临床价值。方法采用多重聚合酶链式反应(m PCR)技术扩增1 163例精子数目、活力异常的男性不育患者AZF基因的15个序列标签位点(STS),并使用琼脂糖凝胶电泳对目的片段进行鉴别分析。结果 1 163例不育患者中130例(11.18%)患者AZF基因位点发生微缺失。在AZF微缺失组合类型中,AZFc+AZFd位点微缺失最多,共97例(8.34%,97/1 163);其次为AZFb+AZFc+AZFd的组合缺失,共21例(1.81%,21/1 163);AZFa+AZFb+AZFc+AZFd四个AZF区域均发生缺失的患者,以及仅仅在AZFa区域发生微缺失的患者分别为6例,各占总不育患者的0.52%(6/1 163)。结论 Y染色体AZF区域微缺失是部分男性不育症的重要遗传致病因素,有必要对精液质量异常的男性不育患者进行AZF基因微缺失检测,将有助于明确病因并指导后续治疗。

200例无精症患者染色体核型分析及Y染色体AZF基因微缺失情况观察

目的观察无精症患者染色体核型及Y染色体长臂上的无精子因子(azoospermia factor,AZF)基因微缺失情况。方法对200例无精症患者进行外周血染色体核型分析,采用多重PCR电泳技术和荧光定量PCR技术对Y染色体AZF的6个标签序列位点进行检测。结果 200例受检无精症患者中,染色体核型异常9例(其中性染色体异常8例、常染色体易位1例);Y染色体AZF基因微缺失18例(其中AZFb+c区缺失11例、AZFc区缺失5例、AZFb区缺失1例、AZFa区缺失1例),多重PCR电泳技术和荧光定量PCR技术对Y染色体AZF的6个标签序列位点的检测结果一致。结论无精症患者染色体核型异常及Y染色体AZF基因微缺失多见,可能是男性不育的重要原因;多重PCR电泳技术与荧光定量PCR技术检测对Y染色体AZF基因的检测结果一致,后者因省时省力,可作为Y染色体AZF基因微缺失的筛查方法。

陕西地区不明原因无精子症和少精子症患者Y染色体长臂微缺失分析

目的: 评估陕西地区不明原因无精子症和少精子症不育男性患者Y染色体长臂微缺失的频率,探讨精子密度与Y染色体微缺失发生率的相关性. 方法: 以Y染色体特异性无精子症因子区STS- AZFa、AZFb、AZFc和SRY 4个基因5个片段设计引物,采用PCR方法对64例无精子症和少精子症患者以及20例正常生育男性进行微缺失检测,并比较不同精子密度患者Y染色体微缺失的发生率. 结果: 20例精子密度正常的生育男性未检出Y染色体微缺失,而64例特发性无精子症/少精子症患者AZFc区的缺失率为17.2%(11/64),AZFc和AZFb联合缺失1例,未发现AZFa区缺失,SRY基因均为阳性.其中无精子症组缺失率为21.43%(3/14);精子密度＜1×106/ml组,缺失率为20.0%(2/10);精子密度(1～5)×106/ml组缺失率为17.9%(5/28);精子密度(5～10)×106/ml组缺失率为8.3%(1/12).各组缺失率经卡方检验差异有显著性(χ2=70.144,P＜0.005). 结论: 无精子症和少精子症不育患者Y染色体AZFc缺失率明显较高,PCR扩增AZF基因是诊断Y染色体微缺失的简单方法.

成都地区男性原发性无精症患者Y染色体AZF区域微缺失基因诊断的研究

目的建立原发性无精子症患者的Y染色体微缺失基因诊断方法。方法采用多重PCR技术,对123例原发性无精子症患者和34例正常已生育男性对照进行Y染色体微缺失检测。结果123例原发性无精子症患者中,16例发生了Y染色体微缺失,缺失率13.01%。其中无精症因子(AZFa)区sY86缺失4例(3.25%);AZFb区sY134缺失2例(1.63%);AZFc区sY255缺失8例(6.5%);sY86和sY134同时缺失2例(1.63%)。34例已生育男性均未检测到Y染色体微缺失。结论研究所确定的6个STS位点缺失与男性原发性无精子症密切相关,利用上述STS位点建立的多重PCR技术进行微缺失分析简便、快速、准确,值得推广应用。

Y染色体AZF基因缺失与原发性无精子症的相关性研究

原发性无精子症患者除有精子异常,精液检查发现无精子外,其余情况包括睾丸体积、内分 泌功能、其他精液检查指标等均正常,即患者出现精子异常的原因不明。原发性无精子症原因极其复 杂,除输精管梗阻、腮腺炎病毒感染等明确病因外,研究认为遗传缺陷是其中的重要因素之一,因此有 关原发性无精子症的遗传因素分析日益受到重视。分子生物学的研究证实,人类Y染色体长臂上存在 着控制精子生成的基因-无精子因子AZF,原发性无精子症患者检测到了不同比率、不同区域的AZF 基因缺失,表明Y染色体AZF基因缺失与原发性无精子症密切相关。

Y染色体上无精子因子检测的临床意义及相关实验技术

Y染色体微缺失是导致男性不育的一个重要遗传因素。Yq11.23上含有与精子发生相关的基因,称为无精子因子(AZF)。AZF进一步分为AZFa、AZFb和AZFc3个区域。由于AZF区域有大量的回文序列,这些序列在减数分裂期不同的重组导致了AZF缺失区域的不同,而不同区域的微缺失引起不同程度的精子发生障碍。现就其临床意义和相关实验室检测技术作一综述。