肠胃清对长春新碱诱导的人结肠癌耐药细胞株Y盒结合蛋白核移位及P-糖蛋白表达的影响

目的观察肠胃清对长春新碱诱导的人结肠癌耐药细胞株HCT8/V的Y盒结合蛋白(YB-1)核移位、多药耐药基因MDR1及P-糖蛋白(P-gp)表达的影响,进一步探讨该方逆转肿瘤多药耐药的分子机制。方法制备大鼠灌胃后的肠胃清药物血清,以Western blot方法检测肠胃清药物血清作用下HCT8/V细胞胞浆、胞核YB-1表达情况,EMSA法分析YB-1与MDR1基因启动子结合活性,RT-PCR检测MDR1、YB-1、多药耐药相关蛋白(MRP)mRNA转录水平,流式细胞仪检测细胞膜表面P-gp表达。结果在1.25%、2.5%、5%药物血清作用下,HCT8/V细胞核内YB-1表达逐渐减弱,细胞质内YB-1表达则逐渐增强;YB-1与MDR1基因启动子结合活性逐渐下降(P<0.01);MDR1 mRNA转录水平逐渐降低(P<0.05,P<0.01),YB-1和MRPmRNA的水平无明显变化(P>0.05);细胞膜表面P-gp表达荧光强度值减弱(P<0.05,P<0.01)。结论肠胃清可通过影响耐药细胞YB-1的核移位、降低MDR1/P-gp的表达,逆转结肠癌细胞的耐药。

沉默Y盒结合蛋白-1表达抑制SH-SY5Y细胞增殖促其凋亡的作用与机制

目的:观察短发夹RNA(shRNA)沉默Y盒结合蛋白-1(YB-1)对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖、凋亡的影响及其调控机制。方法:构建针对YB-1的短发夹RNA真核表达载体,利用Lipofectamine^(TM)2000脂质体转染SH-SY5Y细胞,检测蛋白表达水平,鉴别干扰效果;四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测干扰与否对SH-SY5Y细胞增殖的影响;流式细胞技术分析干扰与否对SH-SY5Y细胞凋亡的影响;Western blot法检测CyclinD1、Bcl-2及Bax在蛋白水平的变化。结果:Western blot结果显示转染组YB-1表达低于对照组和无效转染组,后两组无显著差异;MTT法检测显示转染组细胞增殖水平低于对照组,无效转染组细胞增殖水平接近对照组;流式细胞术检测结果显示转染组凋亡细胞数占总细胞数的(23.21±1.90)%,高于对照组(5.05±0.83)%(P<0.01),无效转染组(6.24±1.05)%与对照组无显著性差异(P>0.05);Western blot技术检测转染组CyclinD1、Bcl-2蛋白水平较对照组明显下降,Bax升高,无效转染组同对照组无明显差异。结论:shRNA介导的YB-1表达沉默可抑制SH-SY5Y细胞CyclinD1、Bcl-2表达,促进Bax表达,进而抑制细胞增殖、促进凋亡。

Y盒结合蛋白1及其对肿瘤发生的双刃剑作用

Y盒结合蛋白1(YB-1)是一类包含冷休克结构域的蛋白家族成员,YB-1从结构上分为三部分:N端的单链DNA结构域、冷休克结构域和C端结构域。它与DNA及RNA的相互作用、转录调节、翻译调控等有关。YB-1参与肿瘤细胞的转化、多重耐药及转移。YB-1对肿瘤具有促进和抑制作用,可作为诊断肿瘤的重要指标,是治疗肿瘤的重要的分子靶点。总之,YB-1不仅在肿瘤细胞的生长中起重要作用,而且在肿瘤相关的血管内皮细胞生长中也扮演着重要的角色。该文就YB-1的功能及其对肿瘤发生的促进及抑制等方面进行概述。

酵母双杂交文库筛选及hTRIP15与Y盒结合蛋白-1相互作用的探讨

为探讨甲状腺素受体相互作用蛋白(hTRIP15)是否与其他核蛋白发生相互作用,以hTRIP15作为诱饵,用酵母双杂交技术筛选人肝cDNA文库,在高严格度选择培养基(SD-Trp-Leu-Ade-His)上长出的克隆773个,再经β-gal表达和PCR等技术进一步缩小范围,经Blastn搜寻最终显示2个重复克隆编码一种共调节辅因子——Y盒结合蛋白-1(YB-1).将插入序列与全长YB-1比较发现进入ORF内230bp,插入序列编码82aa,该蛋白称为YB-1-p,经蛋白体外翻译及GST-pulldown试验证实YB-1-p与hTRIP15发生相互作用.提示hTRIP15可通过与YB-1相互作用,参与调控MHCII及TSH受体等甲状腺细胞重要基因表达.

索拉菲尼调控Y盒结合蛋白1抑制肾细胞癌增殖、趋化和侵袭的初步探讨

目的探讨索拉菲尼在调控Y盒结合蛋白1(YB1)表达以及影响肾癌细胞系SW839的增殖、趋化和侵袭中的作用。方法构建慢病毒介导的YB1干扰载体p LKO.1-sh YB1,建立YB1降表达的稳定SW339细胞系;用不同浓度的索拉菲尼处理SW839细胞后,western blot验证YB1的干扰效率以及索拉菲尼对YB1蛋白质表达水平的影响;MTT实验、Transwell趋化实验和Matrigel侵袭实验分别检测YB1基因敲减和索拉菲尼处理对SW839细胞增殖、趋化和侵袭能力的影响。结果成功构建YB1降表达的稳定细胞系SW839-sh YB1;western blot检测结果发现,SW839-sh YB1组YB1蛋白表达水平低于SW839-scr(阴性对照)组和SW839组(P<0.05);与SW839组相比,4、8μmol/L索拉菲尼处理组YB1蛋白质的表达水平均下降(P<0.05)。MTT实验结果表明,敲减YB1基因(t分别为6.13、4.61和17.18)或经8、12、16μmol/L索拉菲尼作用后(t分别为4.04、7.54和16.38)SW839细胞的增殖能力降低(P均<0.05);Transwell结果表明,与对照组比较,经表皮生长因子(EGF)诱导后,SW839-sh YB1组和索拉菲尼处理组的细胞趋化能力降低(t分别为11.52和17.94,P均<0.05),侵袭能力亦降低(t分别为6.64和4.83,P均<0.05)。结论 YB1在调节肾癌细胞系SW839的增殖、趋化和侵袭中起重要作用,索拉菲尼可能通过抑制SW839细胞中YB1表达来抑制肾癌细胞的增殖、趋化和侵袭。

真核表达的人Y盒结合蛋白1(YB-1)促进人HepG2肝癌细胞的增殖和迁移

目的构建带有FLAG标签的Y盒结合蛋白1(YB-1)真核表达载体,转染至HepG2肝癌细胞探究YB-1对肝癌细胞增殖和迁移的影响。方法以人卵巢文库为模板并采用PCR扩增出YB-1基因片段,经双酶切后与pcDNA3.0-FLAG载体连接,构建pcDNA3.0-FLAG-YB-1真核表达载体;将其转染至HepG2细胞,通过Western blot法验证YB-1在HepG2细胞的表达;CCK-8法和集落形成实验验证YB-1对HepG2细胞生长的影响;划痕实验验证YB-1对HepG2细胞迁移的影响。结果成功构建出pcDNA3.0-FLAG-YB-1真核重组表达载体,且能在HepG2细胞中表达YB-1蛋白;YB-1能够促进HepG2细胞的增殖和迁移。结论YB-1促进HepG2细胞的增殖和迁移。

小干扰RNA沉默Y盒结合蛋白-1基因对肺腺癌A549细胞株表皮生长因子受体表达的影响

目的观察Y盒结合蛋白-1（YB-1）小干扰RNA（siRNA）对肺腺癌A549细胞株表皮生长因子受体（EGFR）的影响。方法针对YB-1mRNA设计特异性siRNA及ControlsiRNA序列转染至A549细胞株，采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Westernblot检测空白组、单纯Lipofectamine2000处理组、ControlsiRNA组及YB-1siRNA组细胞中YB-1和EGFR在mRNA和蛋白水平的表达；通过噻唑蓝（MTT）、侵袭实验观察各组细胞的生物学行为变化。结果RT-PCR和Westernblot结果显示实验组YB-1与EGFR的mRNA和蛋白表达降低（分别为0．3820±0．0094、0．4690±0．0032和0．1820±0．0073、0．4210±0．0049），与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。MTT检测转染72h后YB-1 siRNA组吸光度值为1．34±0．11，同时转染48h后YB-1siRNA组侵袭能力较对照组明显降低（P〈0．05）。结论YB-1siRNA能抑制肺腺癌A549细胞株中EGFR的表达，影响肿瘤增殖和侵袭能力。

Y盒结合蛋白1在SK-BR-3乳腺癌细胞增殖中的作用

目的探讨Y盒结合蛋白1（YBl）在乳腺癌细胞增殖中的作用。方法收集河北大学附属医院2013年6-8月的乳腺浸润性导管癌及癌旁正常乳腺组织标本，实时定量PCR（qRT-PCR）分析YBl基因的mRNA水平；培养乳腺上皮细胞HBL-100和乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231和SK-BR-3，qRT-PCR观察YBl的表达水平，MTS法分析细胞增殖活力；血小板源性生长因子BB（PDGF-BB）刺激SK-BR-3细胞，观察YBl的表达水平；应用特异性小干扰RNA敲低内源性YBl或应用GFP-YBl腺病毒载体过表达外源性GFP-YBl，MTS法观察敲低或过表达YBl对细胞增殖的影响。结果与癌旁正常乳腺组织相比，乳腺癌组织中YBl表达水平显著增高（P〈0．05），增殖能力较强的MDA-MB-231和SK．BR．3乳腺癌细胞株中YBl的表达水平显著高于乳腺上皮细胞HBL-100（P〈0．05）。PDGF．BB可上调SK-BR-3细胞中YBl表达水平。敲低内源性YBl可抑制SK-BR-3细胞增殖，而过表达外源性YBl可促进SK-BR-3细胞增殖活性。结论YBl在乳腺癌组织中表达升高并促进乳腺癌细胞增殖。

短发夹RNA稳定沉默Y盒结合蛋白-1基因的人肺腺癌A549细胞株的建立及增殖能力研究

目的 构建稳定沉默Y盒结合蛋白1（YB-1）基因的人肺腺癌A549细胞株并观察其增殖能力.方法 以脂质体将两种沉默YB-1基因的shRNA真核表达载体转染人肺腺癌细胞株A549,G418筛选稳定转染细胞株.逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）及Westem blot法检测YB-1基因表达;噻唑蓝（MTT）法绘制细胞生长曲线.结果 稳定转染细胞株稳定表达绿色荧光蛋白（GFP）;RT-PCR、FQ-PCR和Western blot法检测结果显示稳定转染组细胞株A549-746与A549-326 YB-1 mRNA和蛋白表达（0.41±0.01与0.39±0.06、0.43±0.10与0.20±0.24、0.49 ±0.06与0.24±0.02）较对照组明显下降（P＜0.05）;噻唑蓝（MTT）检测稳定转染组较对照组生长速度降低（P＜0.05）.结论 成功建立稳定表达GFP,并稳定沉默YB-1基因的人肺腺癌细胞株A549-746和A549-326,沉默YB-1可抑制A549细胞增殖能力.

Y盒结合蛋白1与上皮-间质转化

在上皮-间质转化（EMT）过程中，细胞间连接被破坏，细胞失去顶一底极性，获得抗凋亡能力及迁移、侵袭能力。Y盒结合蛋白1（YB-1）是冷休克蛋白超家族的一员，包含结构和功能高度保守的冷休克结构域。研究表明，YB-1可以通过调控EMT促进肿瘤的发生发展。在YB-1介导的EMT中，多种转录因子及信号通路发挥着重要作用。

Y盒结合蛋白1表达上调与宫颈癌上皮-间质转化之间的相关性研究

目的：探讨Y盒结合蛋白1（YB-1）在宫颈癌中表达的临床病理意义及与上皮-间质转化的相关性。方法选取202例标本，包括50例正常宫颈组织，100例宫颈上皮内瘤变（CIN）及52例鳞状细胞癌（SCC），进行 YB-1和上皮型-钙黏蛋白（E-cadherin）的免疫组织化学分析。结果 E-cadherin 在正常宫颈组及膜表达率为100%，CINⅡ～Ⅲ组为64%，SCC 组仅为3.85%，正常宫颈/ CINⅠ组比 CINⅡ～Ⅲ、正常/ CINⅠ比 SCC、CINⅡ～Ⅲ比 SCC 分别为χ^2=40.909；χ^2=119.088；χ^2=25.274；均 P 〈0.05。E-cadherin阴性及畸形表达率在转移 SCC 组和非转移 SCC 组中分别为100.0%（20/20）和68.75%（22/32），连续性校正性χ^2=5.857，P =0.016。YB-1在 SCC 病例胞质中表达为94.23%（49/52），CINⅡ～Ⅲ组表达率为10.00%（5/50），正常宫颈组和 CINⅠ组表达率为0（0/100），正常宫颈/ CINⅠ组比 CINⅡ～Ⅲ、正常/ CINⅠ比 SCC、CINⅡ～Ⅲ比 SCC 分别为χ^2=72.591；χ^2=139.059；χ^2=5.857；均P 〈0.05。在宫颈癌的进展过程中，YB-1在早期 SCC 胞质表达率为60.71%（17/28），晚期 SCC 为91.67%（22/24），两组相比差异有统计学意义（χ^2=6.603，P =0.01）。转移组和非转移组中分别为100.00%（20/20）和59.38%（19/32），两组相比差异有统计学意义（χ^2=10.833，P =0.001）。结论 YB-1过表达和宫颈上皮的恶性转化、分期进展及转移能力相关，YB-1过表达也与 E-cadherin 低表达相关，可能是预测CIN 癌变和宫颈癌侵袭转移的标志物。

Y盒结合蛋白1与上皮-间质转化标志物在结直肠癌中表达的研究

目的：检测结直肠癌组织中 Y 盒结合蛋白1与上皮-间质转化标志物（E 钙黏蛋白和 N 钙黏蛋白）的表达，分析 Y 盒结合蛋白1与临床病理参数之间的关系并评价其与 E 钙黏蛋白、N 钙黏蛋白之间的相关性。方法用蛋白免疫印迹和免疫组织化学染色法检测120例结直肠癌组织和相对应的癌旁正常组织中 Y 盒结合蛋白1、E 钙黏蛋白和 N 钙黏蛋白表达情况，并对其结果进行分析。结果结直肠癌组织中 Y 盒结合蛋白1、E 钙黏蛋白和 N 钙黏蛋白表达情况与癌旁正常组织相比差异有统计学意义（χ2=47.373，P ﹤0.05；χ2=83.145，P ﹤0.05；χ2=41.832，P ﹤0.05）。结直肠癌组织中 Y 盒结合蛋白1表达情况与肿瘤分化程度、肿瘤侵犯、淋巴结转移及远处转移有关（χ2=8.077，P =0.008；χ2=8.178， P =0.006；χ2=15.152，P ﹤0.001；χ2=7.368，P =0.011），与 E 钙黏蛋白表达呈负相关（r =-0.238，P =0.009），与 N 钙黏蛋白表达呈正相关（r =0.361，P ﹤0.001）。结论 Y 盒结合蛋白1可能通过参与上皮-间质转化促进结直肠癌的发生发展。

Y-box结合蛋白1过表达对肝内胆管癌患者术后辅助化疗预后的影响

目的探讨Y-box结合蛋白(YB)1过表达与肝内胆管癌患者术后辅助化疗预后的关系。方法收集2010年1月-2015年1月于安徽医科大学第一附属医院行手术治疗并辅助术后化疗的58例肝内胆管癌患者的石蜡标本。使用免疫组化方法检测肝内胆管癌组织中YB-1表达情况,使用噻唑蓝方法检测YB-1质粒转染肝内胆管癌细胞对吉西他滨药物敏感性的改变。q PCR检测YB-1质粒转染肝内胆管癌细胞后多药耐受基因表达改变情况。计量资料2组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析;计数资料组间比较采用χ~2检验;Kaplan-Meier方法计算生存曲线,生存分析采用log-rank检验。结果58例患者中44例(75.9%)患者YB-1在肝内胆管癌组织细胞胞浆中呈高表达(YB-1胞浆阳性组),14例(24.1%)YB-1胞浆阴性(YB-1胞浆阴性组);44例YB-1胞浆阳性患者中有18例(40.9%)癌组织的细胞中出现YB-1核染色阳性(YB-1胞核阳性组),其余40例为YB-1胞核阴性组。YB-1胞核阴性组患者术后辅助化疗生存时间显著长于YB-1胞核阳性组患者(63个月vs 28个月,χ~2=17.99,P<0.05)。对照质粒组HCCC-9810对吉西他滨的半数抑制量(IC_(50))为0.054μmol,YB-1过表达后p SG5-YB-1质粒转染组IC_(50)增加至0.460μmol,较前者升高近10倍,差异有统计学意义(P<0.05)。p SG5-YB-1质粒转染HCCC-9810细胞后,YB-1转录水平明显升高(t=19.02,P<0.05)。HCCC-9810细胞在过表达YB-1之后多药耐受蛋白(MDR)1、多药耐受相关蛋白(MRP)1转录水均明显升高,差异均有统计学意义(t值分别为13.34、11.35,P值均<0.05)。结论 YB-1在大多数肝内胆管癌组织中呈过表达,其中YB-1胞核阳性表达可能预示术后辅助化疗效果不佳,与MDR1、MRP1多药耐受基因表达后多药耐受性的增加有关。

Y-box结合蛋白1在慢性肝病发生发展中的作用

慢性肝病的病因多种多样,临床长期预后较差。Y-box结合蛋白1系一种多功能蛋白,近年来随着对其研究的深入,发现其在肝纤维化、肝细胞癌等慢性肝脏疾病的发生、发展等过程中均发挥着关键作用。总结了Y-box结合蛋白1在肝纤维化、肝细胞癌(增殖、凋亡、转移、疾病预后和耐药)及肝功能衰竭等慢性肝病中发挥的作用,为慢性肝病的诊治提供一定的理论依据。

人类YB-1蛋白表达对肺腺癌术后患者预后及复发的影响

背景与目的：人类Y盒结合蛋白，即YB-1蛋白是多功能蛋白之一，在转录与翻译两个水平调控基因表达，可作为预测人类恶性肿瘤多药耐药及判断预后的生物标记物。本文通过检测肺腺癌患者YB-1蛋白表达水平，评估YB-1蛋白在肺腺癌术后患者中的表达和对预后及复发的影响。方法：共收入174例接受肺腺癌切除术患者。其中99例男性，75例女性，平均年龄65．0岁（32～85岁）。采用S-P法进行免疫组织化学染色（抗YB-1多克隆抗体）。利用矿检验进行统计学分析，Kaplan—Meier法绘制生存曲线，log—rank检验比较曲线间差异，Cox比例危险模型进行单因素及多因素分析。结果：在174例肺腺癌患者中，92例（52．9％）YB-1蛋白细胞质表达阳性。YB-1蛋白表达阳性组肿瘤细胞的分化较差（P=0．0031，病理分期较晚（P〈0．001），淋巴结转移较显著（P=0．005），肿瘤复发较早（P〈0．001）。单因素及多因素分析表明，YB-1蛋白表达阳性组预后明显较YB-1蛋白表达阴性组差（总体生存风险分别为P〈0．001和P=0．035）。此外，在对其中102例Ⅰ期肺腺癌患者各临床病理因子的多因素分析提示，YB-1蛋白表达阳性是预测患者预后不良及肿瘤早期复发的独立危险因子（分别为P=0．048，HR=2．370和P=0．057，HR=2．242）。结论：YB-1蛋白表达水平可作为预测肺腺癌术后患者（尤其是Ⅰ期肺腺癌患者）Ⅰ预后及复发的指标。

YBX1在组织器官纤维化中作用的研究进展

YBX1作为多功能结合蛋白,参与多种细胞过程,通过TGF-β通路、炎性因子、介导上皮间质转化、调节胶原蛋白的表达等多种机制,发挥致纤维化作用,YBX1有可能成为治疗纤维化的新靶点。

胞外Y-盒结合蛋白1通过Notch3受体促进肝癌细胞HepG2的增殖与转移

目的 阐明应激状态下肝癌细胞HepG2是否主动分泌Y-盒结合蛋白1（YB-1）,并初步探讨胞外YB-1的病理意义与作用机制. 方法 浓度梯度的脂多糖（LPS）、阿霉素刺激处理HepG2,离心收集培养上清液,采用已建立的化学发光免疫分析法（CLIA）实时定量检测上清液中YB-1水平;免疫共沉淀技术检测胞外YB-1是否特异结合Notch3受体,Western blot分析Notch-跨腹受体表达;浓度梯度的重组YB-1与HepG2共培养,四甲基偶氮唑盐法与细胞迁移实验检测HepG2细胞的增殖与侵袭转移.多组间数据比较采用单因素方差分析. 结果 CLIA检测结果显示培养液上清液中胞外YB-1水平显著高于对照组（F=10.54,P＜0.001）,分泌表达量在刺激培养（LPS：8 ng/ml和阿霉素：10 ng/ml）4 h后达高峰;免疫共沉淀与Westem blot结果证实胞外YB-1特异结合并上调表达Notch3;四甲基偶氮唑盐法与细胞迁移实验表明胞外YB-1显著促进HepG2细胞的增殖与侵袭转移（F=9.405,P＜0.001）.结论 化疗药物等应激状态下肿瘤细胞HepG2可经非经典途径主动分泌YB-1,胞外YB-1特异结合并上调表达Notch3受体,进而促进HepG2细胞的增殖与侵袭转移.为阐明肝细胞肝癌发病机制及进一步探讨胞外YB-1与恶性肿瘤的生物学关系奠定了基础.

YB-1沉默点突变载体对YB-1基因敲除表型的回复

目的 Y盒结合蛋白-1(YB-1)在多种肿瘤中表达,并在转录和翻译水平调控相关癌基因中表达。为了进一步研究肺鳞癌细胞中YB-1的功能,构建了4个YB-1短发夹RNA(shRNA)干扰质粒pYr-1.1-YB-1-shRNA及YB-1沉默点突变质粒pYr-ads-1-YB-1 M。方法 pYr-1.1-YB-1-shRNA瞬时转染NIH293细胞,RT-PCR检测YB-1mRNA,筛选抑制效率最高的质粒,并稳定转染人肺鳞癌细胞株SK-MES-1,Western blot检测YB-1及PARP蛋白,免疫荧光检测核酸内切酶G(Endo G)亚细胞定位。针对干扰效率最高的靶序列,应用点突变PCR在YB-1基因表达质粒pYr-ads-1-YB-1上构建包含靶序列两个沉默点突变的质粒pYr-ads-1-YB-1 M。将pYr-1.1-YB-1-shRNA与pYr-ads-1-YB-1或pYr-ads-1-YB-1 M共转染SK-MES-1细胞,Western blot检测YB-1及PARP蛋白的表达。结果 4个pYr-1.1-YB-1-shRNA中2个干扰效率在60%以上,最高抑制率为70.3%;pYr-1.1-YB-1-shRNA质粒稳定转染SK-MES-1细胞能有效抑制YB-1蛋白的表达,并促进PARP蛋白的剪切及Endo G蛋白易位入核;pYr-ads-1-YB-1 M能回复pYr-1.1-YB-1-shRNA质粒所致的YB-1蛋白表达抑制,PARP蛋白剪切。结论 pYr-1.1-YB-1-shRNA特异性地通过抑制SK-MES-1细胞中YB-1的表达诱导细胞凋亡。

YB-1通过调控Notch/Hes1促进胰腺癌PANC-1细胞增殖和侵袭

目的探讨YB-1对胰腺癌PANC-1细胞中增殖和侵袭的影响及其对Notch/Hes1信号通路的调控作用。方法构建腺病毒载体,采用转染技术,将实验分成3组,A组:空白对照组(PANC-1)、B组:阴性对照组(PANC-1+Ad-HK组)、C组:YB-1过表达组(PANC-1+Ad-YB-1组)。噻唑蓝(MTT)检测各组胰腺癌细胞的增殖情况;细胞划痕实验检测各组胰腺癌细胞的迁移能力;Transwell实验检测各组胰腺癌细胞的侵袭能力;Western印迹检测YB-1和Hes1蛋白的表达,并分析YB-1与Hes1的相关性。结果MTT检测发现C组24、48、72 h OD值明显高于B组和A组(P<0.01),且C组OD值随着时间变化增幅显著大于A组和B组(P<0.01);细胞划痕结果发现,C组胰腺癌细胞在各时间点迁移距离较A组及B组明显增大(F_(0 h)=82.98,F_(6 h)=101.46,F_(12 h)=42.84,均P<0.001),且随着时间变化C组迁移距离明显大于A组和B组(P<0.01);Transwell侵袭实验发现,C组穿透基底膜细胞数[(59.82±4.92)个]明显多于A组[(28.60±2.07)个]及B组[(29.63±1.18)个;F=148.31,P<0.01];Western印迹结果显示,C组中YB-1蛋白表达(0.92±0.02)明显高于A组(0.56±0.02)和B组(0.48±0.01;F=126.15,P<0.01);C组中Hes1蛋白表达(1.34±0.03)明显高于A组(1.09±0.02)和B组(1.12±0.02;F=98.65,P<0.01);Spearman等级相关性分析,胰腺癌PANC-1细胞中YB-1和Hes1蛋白表达呈正相关(r=0.275,P=0.031)。结论YB-1在胰腺癌PANC-1细胞中呈高表达,其机制可能通过上调Notch/Hes1通路的表达,从而促进胰腺癌PANC-1细胞的增殖和侵袭。

YB-1通过激活Notch受体信号通路抑制肺鳞癌细胞凋亡研究

目的探讨肺鳞癌中YB-1是否通过激活Notch受体信号通路发挥凋亡抑制作用。方法将YB-1干扰质粒pYr-1.1-YB-1-shRNA和野生表达质粒pYr-ads-1-YB-1分别转染肺鳞癌细胞株SK-MES-1,Western blot检测YB-1、RT-PCR检测Notch受体信号通路靶基因Hes1的表达;pYr-ads-1-YB-1瞬时转染SK-MES-1细胞,DAPT抑制Notch受体信号通路,Annexin V-PI双染法检测凋亡。结果 (1)YB-1可正调控Notch受体信号通路靶基因Hes1的转录;(2)YB-1过表达可显著抑制顺铂诱导的凋亡,DAPT抑制Notch受体信号通路后解除了YB-1的凋亡抑制作用。结论 YB-1可通过激活Notch受体信号通路抑制肺鳞癌细胞凋亡。