Y编码样睾丸特异性蛋白5在心肌缺血再灌注损伤中的保护作用

目的:观察过表达Y编码样睾丸特异性蛋白5(TSPYL5)对缺氧/复氧损伤后H9c2细胞的影响。方法:检测TSPYL5在小鼠心肌缺血再灌注及心肌细胞缺氧/复氧损伤后的表达水平。根据表达结果上调TSPYL5,以缺氧/复氧后普通H9c2细胞为对照组,相同模型中过表达TSPYL5的H9c2细胞为实验组,比较2组间凋亡水平的差异。结果:TSPYL5在体内、体外实验中表达水平均显著下降(P<0.001)。与对照组相比,缺氧/复氧模型中过表达组p53的蛋白表达水平显著下调(25.52±0.19对47.39±0.40,P<0.05),caspase-3显著下调(60.57±0.26对108.24±0.56,P<0.05),Bcl-2显著上调(45.65±0.22对28.92±0.01,P<0.05),Tunel染色凋亡阳性率显著下调(P<0.01)。结论:TSPYL 5在心肌缺血再灌注及细胞缺氧/复氧后表达下降;过表达TSPYL5可以减轻细胞在缺氧/复氧后的凋亡水平,从而起保护作用。

睾丸特异性Y编码蛋白5在心肌缺血损伤中的作用

目的:探讨睾丸特异性Y编码蛋白5(TSPYL5)在心肌缺血损伤中的作用及机制。方法:在体内实验中,构建心肌缺血小鼠模型,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western blot和免疫组织化学染色等方法检测正常对照组和心肌缺血组小鼠心肌组织中TSPYL5的表达情况。在体外实验中,将HL-1细胞分成4组:空白对照组、TSPYL5过表达组、化学缺氧组和TSPYL5过表达+化学缺氧组,采用流式细胞仪检测凋亡率,Western blot检测活化胱天蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、Bcl-2和p53的蛋白表达水平,qRT-PCR检测Bax和Bcl-2的mRNA表达水平。结果:与正常对照组相比,心肌缺血组小鼠心肌TSPYL 5的mRNA和蛋白表达水平均显著下降(P均<0.05)。使用500μmol/L氯化钴能够成功诱导HL-1化学缺氧,与空白对照组相比,化学缺氧组凋亡细胞比例和cleaved caspase-3、p53的蛋白表达水平显著升高,Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平显著下降,Bax的mRNA表达水平显著升高;与化学缺氧组相比,TSPYL5过表达+化学缺氧组cleaved caspase-3、p53蛋白水平显著下降,Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平显著升高,Bax的mRNA表达水平显著下降(P均<0.05)。结论:TSPYL5能够通过抑制p53通路减轻缺氧诱导的心肌细胞凋亡。

上调睾丸特异性Y样蛋白5的表达对LoVo细胞侵袭、迁移及STAT3蛋白表达的影响

目的:探讨上调睾丸特异性Y样蛋白5(TSPYL5)基因的表达对结直肠癌细胞侵袭、迁移及STAT3蛋白表达的影响。方法:将人结直肠癌LoVo细胞分为空白1组、空载体组和TSPYL5质粒组(转染pcDNA3.1-TSPYL5质粒)。转染48 h后,采用Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力,采用Western blot法检测TSPYL5、E-cadherin、Vimentin、STAT3和p-STAT3蛋白的表达。另取LoVo细胞分为空白2组、AG490(STAT3信号抑制剂)组和AG490+TSPYL5质粒组。转染48 h后,采用Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力,采用Western blot法检测E-cadherin和Vimentin蛋白的表达。结果:与空白1组和空载体组相比,TSPYL5质粒组细胞侵袭及迁移能力降低,TSPYL5蛋白表达水平升高,E-cadherin蛋白表达水平升高,Vimentin及p-STAT3蛋白表达水平降低(P均<0.05)。与空白2组相比,AG490组细胞侵袭和迁移能力、Vimentin蛋白表达水平均降低,E-cadherin蛋白的表达水平升高;与AG490组相比,AG490+TSPYL5质粒组细胞侵袭、迁移能力及Vimentin蛋白的表达水平进一步降低,E-cadherin蛋白的表达水平升高(P均<0.05)。结论:上调TSPYL5的表达可能抑制STAT3蛋白的表达,逆转结直肠癌细胞EMT,从而降低细胞侵袭和迁移能力。

黄芪糖蛋白干扰lncRNA GAS5/miR-21/TLR4信号轴抑制细胞焦亡改善佐剂性关节炎大鼠心肌损伤

目的基于长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5/微小RNA 21/Toll样受体4(lncRNA GAS5/miR-21/TLR4)信号轴探究黄芪糖蛋白(HQGP)对佐剂性关节炎(AA)大鼠心肌损伤的作用及机制。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、甲氨蝶呤(MTX)组、HQGP组,每组6只。复制AA模型,第19天开始给药,连续4周。检测各组AA大鼠足趾肿胀度、关节炎指数(AI),HE染色观察大鼠心肌组织病理变化,透射电镜观察心肌组织超微结构的变化及焦亡小体情况,ELISA检测血清白细胞介素6(IL-6)、IL-18、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测心肌组织LDH释放量,实时荧光定量PCR检测心肌组织核因子κB p65(NF-κB p65)、胱天蛋白酶1(caspase-1)、含pyrin结构域核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)的mRNA以及lncRNA GAS5/miR-21/TLR4信号轴分子的表达,Western blot法检测心肌组织TLR4、NF-κB p65、caspase-1、NLRP3和GSDMD蛋白水平。结果与正常对照组相比,模型组大鼠足趾肿胀度、AI显著升高;大鼠心肌纤维溶解、断裂,肌节结构模糊,心肌纤维排列紊乱,组织间有炎性细胞浸润,线粒体嵴明显断裂稀疏,焦亡小体数量增加;血清促炎细胞因子IL-6、IL-18、IL-1β和TNF-α表达显著升高;心肌组织中GAS5表达显著降低,miR-21表达显著升高,LDH释放量、TLR4、NF-κB p65、caspase-1、NLRP3、GSDMD的mRNA和蛋白表达水平显著升高。与模型组比较,HQGP组大鼠足趾肿胀度、AI和心肌组织病理状态明显改善;血清IL-6、IL-18、IL-1β和TNF-α表达显著降低;心肌组织中GAS5表达显著升高,miR-21表达显著降低,LDH释放量、TLR4、NF-κB p65、caspase-1、NLRP3的mRNA和蛋白表达水平显著降低,GSDMD的mRNA表达降低且蛋白水平显著降低。结论HQGP通过上调lncRNA GAS5抑制miR-21/TLR4信号传导,抑制细胞焦亡,减少促炎细胞因子表达,改善AA大鼠心肌损伤。

胃癌细胞中TSPYL5 mRNA表达与其迁移能力的相关性

目的探讨睾丸特异性Y样蛋白5(TSPYL5)表达对胃癌生物学行为的影响。方法采用RT-PCR方法检测36例胃癌组织、癌旁正常胃黏膜组织中TSPYL5mRNA的表达,采用细胞划痕实验研究TSPYL5对胃癌细胞株AGS迁移能力的影响。结果 36例中,25例(69.4%)胃癌组织中TSPYL5mRNA表达显著下调。TNMⅡ、Ⅲ期以及无腹腔和远处转移者TSPYL5mRNA表达明显下调(P<0.05)。体外实验显示,TSPYL5对AGS细胞迁移的抑制作用呈浓度依赖性加强。结论 TSPYL5mRNA表达下调可能与胃癌的发生发展相关。

抑癌基因TSPYL5在结肠癌中的表达及意义

目的探讨抑癌基因睾丸特异性Y样蛋白5(TSPYL5)在结肠癌中的表达及与临床病理特征之间的关系。方法选择原发性结肠癌标本40例,每例标本均有癌旁正常黏膜作为对照,采用实时荧光定量PCR分析抑癌基因TSPYL5的表达情况。结果 40例抑癌基因TSPYL5在反应体系中能有效的扩增,结肠癌组织中抑癌基因TSPYL5相对表达量较癌旁正常黏膜降低(P<0.05),其表达随TNM分期及浸润深度增加而下调明显(P<0.05)。结论抑癌基因TSPYL5可能参与了结肠癌的发生发展。