人类YAC库PCR三维筛选体系的建立及质量考核

为了在知道某个区域、位点、基因或ＤＮＡ片段的部分信息后，能从ＣＥＰＨＹＡＣ库中筛选出与其对应的ＹＡＣ克隆，为进一步研究奠定基础，需要建立一个筛选体系。本文概述了这一筛选体系的建立过程。随后，用两对与已知基因对应的引物进行了筛选验证工作，证明了这一体系的可用性，同时提出了以后筛选的途径，即首先筛选ＹＡＣ库的ＭｅｇａＹＡＣ部分，并以５块板为一组进行筛选。另外，运用荧光原位杂交技术（ＦＢＨ），对ＣＥＰＨＹＡＣ库的质量及其第一代人类基因组物理图谱进行了考察。我们取２６个ＹＡＣ克隆进行ＦＩＳＨ定位，结果其中嵌合体１３个，占５０％。定位错误的克隆有６个，占２３％。非嵌合体且定位正确的共９个，占３５％。