拉米夫定耐药与HBV YMDD变异关系的研究

探讨拉米夫定耐药与HBVYMDD变异之间关系。对拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎进行肝功能、乙肝病毒血清学指标、YMDD耐药基因变异检测。 10 2例慢性乙型肝炎血清中 ,HBVDNA阴性 6 3例 (6 1 8% ) ,39例阳性 ,其中HBVYMDD变异 2 2例 ,变异率为 5 6 4 % ,并与用药时间长短有关 ,9- 17个月和 18- 30个月变异检出率分别为5 1 7%和 70 % ,HBVYMDD变异组ALT为 (5 9 94± 8 6 0 )U/L ,显著高于无HBVYMDD变异组的 (5 0 6 0± 6 12 )U/L。基因芯片技术检测HBVYMDD变异有一定的临床意义 ,YMDD变异是HBV对拉米夫定耐药的原因之一。

拉米夫定治疗2年时乙肝病毒的YMDD变异情况

观察核苷类似物拉米夫定治疗慢性乙肝病人２年时ＹＭＤＤ变异情况及其与血清ＨＢＶＤＮＡ，ＡＬＴ水平等指标的关系。第一阶段（１－１２周）为随机、双盲、安慰剂对照研究，７２名ＨＢｓＡｇ．ＨＢｅＡｇ阳性至少６个月，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性的慢性乙肝患者分别口服拉米夫定１００ｍｇ／ｄ（ｎ＝５４）或安慰剂（ｎ＝１８）；第二阶段（１３－１０４周）所有患者均服用拉米夫定 １００ｇ／ｄ。５２周和 １０４周检查病毒的 ＹＭＤＤ变异．其总变异率分别为 １３．７％（８／５８）和 ３９．７％（２３／５８）。１０４周时变异组血清 ＨＢＶＤＮＡ，ＡＬＴ水平高于无变异组（３９４．９±７２７．９比 １６．３±５０．９，Ｐ＝０．００４８；６２．７±５７．９比２６ ４±２７．５，Ｐ＝０．００３），ＨＢＶＤＮＡ阴转率低于未变异组（１７．４％比４８．６％，Ｐ＜０．０５）；服用拉米夫定的慢性乙肝患者的ＹＭＤＤ发生率与服药时间长短有关，血清ＨＢＶＤＮＡ及ＡＬＴ水平与ＹＭＤＤ相关。

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎发生病毒学反弹患者YMDD变异分析

选取402例服用拉米夫定后出现乙型肝炎病毒(HBV)DNA反弹的慢性乙型肝炎(CHB)患者血清样品,应用荧光PCR法定性检测YMDD变异情况。402例中有309例(76.87%)检测出YMDD变异,其中120例为YVDD变异,74例为YIDD变异,115例为YVDD+YIDD联合变异;309例YMDD变异患者中同时检测出变异株与野生株占69.26%(214/309),仅检测出变异株占30.74%(95/309)。另外,93例为YMDD野生型阳性。

HBV-YMDD变异患者与中医虚实辨证关系初探

目的 :初步探讨服用拉米夫定后HBV -YMDD变异患者中医辨证虚证、实证之间的关系。方法 :对服用拉米夫定半年以上的乙型慢性病毒性肝炎患者采用联合基因集团上海博华基因技术有限公司出品的迈科锐乙型肝炎病毒突变检测基因芯片 ,进行HBV -YMDD变异检测。出现HBV -YMDD者 ,根据中医基础理论 ,将其分为实证、虚证 ,来探讨HBV -YMDD变异患者中医虚、实辨证的关系。结果 :HBV -YMDD变异患者中实证变异率(38/ 4 8)明显高于虚证 (10 / 4 8) ,具有统计学意义。结论 :HBV -YMDD变异与虚、实辨证之间具有相关性。

拉米夫定治疗中国乙型肝炎患者中发现YMDD耐药变异株

为了监测拉米夫定临床治疗过程中耐药性的产生 ,更好地指导临床用药。采用 PCR产物克隆后测序的方法 ,对 2 0例服用拉米夫定病人进行随访观察 ,检测其体内乙型肝炎病毒 (HBV)聚合酶基因 (P gene) )酪氨酸 -蛋氨酸 -天门冬氨酸 -天门冬氨酸 (YMDD)区域变异情况 ,同时观察其 HBV DNA定量和肝功能指标变化。结果发现 ,1例病人在服用拉米夫定 9个月时出现 HBV YMDD变异株 ,并由混合感染逐渐进展为单一的变异株感染 ,出现耐药时伴有 HBV DNA定量反跳和 AL T的上升。表明拉米夫定长期治疗 (>6个月 )可能出现耐药 ,耐药变异株由弱势株逐渐演变为优势株 ,耐药出现时可伴有 HBV

阿德福韦酯联合拉米夫定对YMDD变异的失代偿期乙型肝炎肝硬化临床观察

目的观察比较阿德福韦酯联合拉米夫定和单用阿德福韦酯治疗YMDD变异的失代偿期乙型肝炎肝硬化的疗效和安全性。方法将30例在拉米夫定治疗过程中出现YMDD变异的失代偿期乙型肝炎肝硬化患者随机分为两组(各15例),联合组:继续接受拉米夫定100mg/d治疗,全程联合阿德福韦酯10mg/d口服;单用组:拉米夫定100mg/d和阿德福韦酯10mg/d联合治疗3月后单用阿德福韦酯10mg/d口服,疗程1年以上,两组在保肝基础治疗上无差异。结果治疗48周时结果显示,联合组肝功能ALT、ALB改善优于单用组(t分别为3.30、4.06,P<0.01),HBV DNA阴转率显著高于单用组(x2=3.89,P<0.05)。结论阿德福韦酯对YMDD变异的失代偿期乙型肝炎肝硬化患者有良好的疗效和安全性,联合拉米夫定疗效更显著,能明显提高患者的生存质量,改善预后。

乙肝肝硬化发生HBV YMDD自然变异的意义探讨

目的探讨乙肝肝硬化情况下,乙肝病毒发生YMDD自然变异的几率及对肝硬化发展的影响。方法对106例未应用过抗病毒药物的乙肝肝硬化病例,检测其YMDD变异,乙肝病毒载量,HBVM,肝功;根据YMDD变异情况,分为YMDD变异组与未变异组,进行对比分析。结果106例乙肝肝硬化患者中检出YMDD自然变异株者28例(26.41%),发生YMDD变异组与未变异组比较,在性别、HBeAg、病毒载量方面未显示有差异性,而肝功能指标中ALT及AST高,二组有显著性差异。结论在乙肝肝硬化患者中存在着HBV YMDD自然变异株,发生YMDD变异的患者肝内炎症稍重。

阿德福韦酯联合拉米夫定治疗YMDD变异的慢性乙型肝炎疗效相关因素分析

目的研究分析影响阿德福韦(ADV)联合拉米夫定(LAM)治疗YMDD变异的慢性乙型肝炎疗效的相关因素。方法应用ADV联合LAM治疗71例YMDD变异的患者48周,采用Logistic回归分析影响疗效的相关因素。结果治疗48周时,HBV DNA转阴率为78.9%(56/71),ALT复常率为80.3%(57/71),HBeAg阳性患者HBeAg转阴或血清转换率为26.7%(12/45);治疗24周和48周HBV DNA转阴、48周HBeAg转阴或血清转换和48周ALT复常者较相应时间点未转阴者的基线HBV DNA水平低(P<0.05);Logistic回归分析结果显示,基线HBV DNA低水平、24周HBV DNA转阴、12周YMDD变异转阴是48周获得较好疗效的相关因素。结论采用ADV联合LAM治疗YMDD变异的慢性乙型肝炎患者,其基线HBV DNA低水平、24周HBV DNA转阴、12周YMDD变异转阴是48周疗效较好的预测因素,发生病毒学突破而无生化学突破的患者早期联合治疗可获得更佳的疗效。

拉米夫定治疗乙型肝炎时其病毒发生YMDD变异的临床影响及处理

目的 研究拉米夫定治疗慢性乙型肝炎时病毒发生ＹＭＤＤ变异对临床的影响及处理措施。方法 随机选择６６例病人用拉米夫定治疗（１００ｍｇ／ｄ）４８周，２０例病人服用安慰剂作对照共１２周，１２周结束后继续服用拉米夫定１００ｍｇ／ｄ共３６周。每隔４周检测一次血清ＨＢＶ ＤＮＡ、ＡＬＴ和ＹＭＤＤ变异，到治疗４８周为止。结果 治疗４８周结束时，共有１８例病人出现ＹＭＤＤ变异，变异率为２０．９％。其中２例在服药３６周时发生变异，其余１６例在服药４８周时发生。服药４８周时，变异者和非变异者的ＡＬＴ和ＨＢＶ ＤＮＡ的检测结果：变异者分别为（３６．２±４６．１）Ｕ／Ｌ和（１４．３ ± ２７．２）ｐｇ／ｍｌ，非变异者分别为（２０．４ ± １２．５）Ｕ／Ｌ和（２．５ ± ６．１）ｐｇ／ｍｌ，经Ｗｉｌｃｏｘｓｏｎ检验均有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。发生变异的１８例病人继续服药，其中２例病人出现病情的急性发作，分别于８０周和９２周停药。经临床对症治疗，ＡＬＴ均恢复正常。其余１６例病人继续服药至１０４周。结论 拉米夫定治疗慢性乙型肝炎过程中，必须严密观察ＹＭＤＤ变异，一旦病人因ＹＭＤＤ变异出现病情急性发作，应停用拉米夫定。

乙型肝炎病毒YMDD变异与基因型相关性的研究

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)发生YMDD基因变异与HBV基因型的关系。方法首先HBV 6个主要基因型(A^F)特异性多引物用巢式PCR法对175例接受拉米夫定抗病毒治疗患者的血清HBV DNA进行基因分型和分析,再采用实时荧光PCR法对标本进行YMDD变异检测。结果在175例标本中B、C、D基因型阳性率分别为9.1%、88.6%、2.3%;103例标本发生YMDD变异,YMDD总变异率、B、C基因型标本YMDD变异率分别为58.9%、62.5%5、8.1%;HBV B、C两基因型间的YMDD的变异率差异无统计学意义(P>0.05);在10例B基因型YMDD变异的标本中,有2例发生YIDD变异;其余8例发生YVDD(YMDD+YVDD)变异;68例C基因型YMDD变异的标本中,有44例发生YIDD(YMDD+YIDD)变异、24例发生YVDD(YMDD+YVDD)变异;HBV B、C两基因型间的YMDD不同变异类型发生率差异有统计学意义。结论在拉米夫定抗病毒治疗2~4年,HBV YMDD变异率为58.9%;HBV B、C基因型标本间发生YMDD变异率差异无统计学意义;HBV B、C基因型标本基因变异类型差异均有统计学意义(χ2=5.5,P<0.05)。

乙型肝炎病毒YMDD变异与ALT,HBeAg及病毒载量的关系探讨

目的研究拉米夫定治疗慢性乙型肝炎期间乙肝病毒YMDD变异的情况及其与临床的关系。方法选择治疗前YMDD变异阴性者拉米夫定治疗18mo的病例271例,测定ALT,YMDD变异,HBeAg及HBV-DNA定量,观察其YMDD变异发生的情况。结果YMDD变异阳性组的HBV-DNA复制量和ALT明显高于YMDD变异阴性组,HBeAg转阴率%则明显低于YMDD变异阴性组。结论用拉米夫定治疗慢性乙型肝炎可能发生YMDD变异,YMDD变异可使患者的肝功能恶化,HBV病毒复制水平提高并影响拉米夫定对乙型肝炎的治疗效果。

乙型肝炎病毒感染者YMDD自然变异研究

目的了解未经抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者中HBVP基因YMDD变异情况,并观察YMDD自然变异组与非变异组临床病情轻重的关系。方法采用PCR和荧光探针杂交检测技术,检测60例慢性乙型肝炎患者血清HBV YMDD自然变异情况。结果在60例患者中,YMDD变异阳性5例(8.33%),阴性55例,5例变异中2例为YIDD阳性,3例为YVDD阳性。结论未经抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者存在YMDD自然变异株;YMDD自然变异的患者没有临床病情加重的趋势。

慢性乙型肝炎YMDD变异后的治疗

目的:评价阿德福韦酯(ADV)和恩替卡韦(ETV)治疗慢性乙型肝炎YMDD变异患者2年的疗效和安全性.方法:2005-06/2007-06我院门诊和住院经拉米夫定治疗后出现YMDD变异的乙型肝炎患者120例,随机分为4组.A组单用ADV10mg/d,治疗96wk;B组采用ADV10mg/d、拉米夫定100mg/d,联合治疗12wk,后单用ADV10mg/d,治疗84wk;C组采用ADV10mg/d、拉米夫定100mg/d,联合治疗96wk;D组接受ETV1mg/d,治疗96wk.患者在治疗前和12、24、48、72、96wk检测肝功能、HBVDNA、HBV标志物、电解质(血磷)、肾功能,对HBVDNA阳性患者检测YMDD变异株,病毒学无应答或反弹的患者进行HBVP区测序.结果:治疗96wk时4组患者间ALT水平、HBeAg阳性患者血清转换率比较,差异均无统计学意义(P>0.05).C组患者ALT复常率、HBVDNA达到检测水平以下的百分率与A组患者比较,差异有统计学意义(χ2=7.500,6.648,P<0.05);4组患者96wk的基因型耐药率分别为16.7%(5/30)、13.3%(4/30)、0及13.3%(4/30).A组1例患者出现重型肝炎.结论:YMDD变异后采用ADV与拉米夫定联合治疗更安全有效.

LAM联合ECV治疗慢性乙肝发生YMDD变异的危险因素分析

目的分析拉米夫定(LAM)联合恩替卡韦(ECV)治疗慢性乙肝(CHB)发生HBV DNA聚合酶酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸(YMDD)变异的危险因素。方法选择治疗前YMDD未变异的CHB患者364例,LAM联合ECV治疗96周,根据是否发生YMDD变异分为YMDD变异组101例、YMDD未变异组263例。对两组基本资料(如性别、年龄、病程)及HBV相关检查结果(HBV基因型、HBe Ag、ALT、CD4+/CD8+及HBV DNA载量)进行单因素及多因素分析。结果单因素分析显示,性别、年龄、病程、HBV基因型与联合用药后发生YMDD变异无关,与HBe Ag阳性、用药前ALT低于40 U/L、CD4+/CD8+低于1.5、HBV DNA载量高于1×105copy/m L有关(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,ALT低于40 U/L、外周血CD4+/CD8+低于1.5、HBV DNA载量高于1×105copy/m L、HBe Ag阳性是LAM联合ECV治疗慢性CHB发生YMDD变异的危险因素(P均<0.05)。结论 ALT、CD4+/CD8+、HBV DNA载量、HBe Ag是LAM联合ECV治疗慢性CHB发生YMDD变异的危险因素。

中医辨证治疗对减少乙型肝炎病毒YMDD变异的疗效观察

探讨辨证运用柴芍六君汤对减少乙型肝炎病毒YMDD变异的疗效观察。方法将360例慢性乙型肝炎患者分为对照组60例,治疗组300例,分别给予拉米夫定、柴胡六君汤联合拉米夫定治疗18个月,观察患者ALT复常率、HBeAg阴转率、HBeAg血清转换率、HBV-DNA阴转率及治疗1年及1年半的YMDD变异率。结果治疗组较对照组在ALT复常率、HBeAg阴转率及HBeAg血清转换率、治疗18个月时YMDD变异率方面均明显优于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论辨证运用柴芍六君汤联合拉米夫定对改善患者肝功能有良好的作用,能提高拉米夫定抑制病毒复制作用,减少病毒YMDD变异。

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎后YMDD变异患者追踪观察

探讨拉米夫定治疗慢性乙型肝炎过程中YMDD变异发生情况及变异后继续服用拉米夫定治疗的短期疗效观察。76例经拉米夫定治疗48周后病毒阳性的患者,对其治疗前和治疗后的血清进行YMDD变异检测,对变异患者继续治疗12周以观察其疗效。治疗前YMDD变异检测未发现变异株,治疗48周时14例HBVDNA阳转的患者中有11例检测到YMDD变异(8例为YMDD,3例为YIDD变异),其中2例ALT正常,9例ALT异常。2例ALT正常的患者在观察下继续拉米夫定治疗12周后,HBVDNA持续阳性;9例ALT异常的患者联合使用干扰素后,7例ALT降至正常,病毒转阴。2例ALT仍持续波动,病毒持续阳性(但数值低于治疗前的水平)。长期拉米夫定治疗的患者出现病毒反跳与YMDD变异有关,变异后继续拉米夫定治疗不会加重病情,联合治疗可能会取得较好的疗效。

HBVP基因YMDD变异的检测及临床应用的初步研究

目的采用错配PCR扩增方法进行HBVP基因YMDD变异的检测,对其临床意义进行初步的研究。方法应用分子克隆方法,构建YMDD、YVDD和YIDD变异的阳性质粒,并对该方法进行敏感性及特异性试验。对65例未经抗病毒治疗的乙型肝炎患者检测YMDD变异情况。结果经PCR方法、酶切鉴定及直接测序鉴定出YMDD、YVDD和YIDD质粒构建成功,且该方法具有较好的敏感性和特异性。65例未经拉米夫定治疗的乙型肝炎患者存在YMDD变异,出现变异6例,阳性率为9.07%;其中YIDD和YI/YMDD各1例,YVDD3例,YV/YMDD1例。结论本检测方法简便、实用,在未经抗病毒治疗的患者中可存在YMDD变异,其与野生株一样是自然存在的,抗病毒药物压力不是导致HBVYMDD变异的唯一因素。

PCR-荧光探针法检测乙型肝炎病毒YMDD变异与DNA序列分析法的比较

目的评估聚合酶链反应(PCR)-荧光探针法用于乙型肝炎病毒基因聚合酶区YMDD变异检测的敏感性、特异性和准确性。方法采用PCR-荧光探针法和DNA序列分析法,平行比对检测202份标本中HBVYMDD变异情况。结果以DNA序列检测分析为相对标准,PCR-荧光探针法检测YMDD变异的相对灵敏度为99.06%,相对特异性为97.92%,YMDD变异位点检测的准确性为98.51%。PCR-荧光探针法检测YMDD位点混合变异株稍优于序列分析法。结论 PCR-荧光探针法与DNA序列分析法检测HBV YMDD变异具有较好的一致性,说明对单个位点变异的检测该方法临床应用性能较好。

复方甘草酸苷联合膦甲酸钠治疗YMDD变异慢性乙型肝炎患者30例

目的观察复方甘草酸苷联合膦甲酸钠治疗YMDD变异慢性乙型肝炎的疗效。方法YMDD变异慢性乙型肝炎患者60例,分为治疗组和对照组各30例。治疗组给予复方甘草酸苷注射液100 mL,加入10%葡萄糖注射液500 mL中静脉滴注,qd,同时联用膦甲酸钠注射液250 mL,b id,疗程为4周。疗程结束后继续服用复方甘草酸苷片2片,tid,至16周。对照组在使用膦甲酸钠注射液基础上给予甘草酸二铵30 mL,静脉滴注,qd,共4周,继用甘草酸二铵胶囊3粒,tid,至16周。结果治疗组肝功能改善较对照组明显(P<0.05)。治疗组4,16周HBV-DNA阴转率分别为36.7%和53.3%,对照组分别为16.7%和20.0%,两组比较差异均有显著性(P<0.05)。治疗组显著提高辅助性T细胞(CD4+)和CD4+/CD8+比例。结论复方甘草酸苷联合膦甲酸钠治疗YMDD变异慢性乙型肝炎具有很好的疗效。