目的探讨敲低YTH结构域N^6甲基腺嘌呤(m^6A)RNA结合蛋白2(YTHDF2)对人宫颈癌细胞增殖、周期和凋亡的影响。方法利用人蛋白图谱(Human Protein Atlas)数据库分析YTHDF2在宫颈癌中表达及与生存时间的关系。收集宫颈癌和正常宫颈组织各31例...目的探讨敲低YTH结构域N^6甲基腺嘌呤(m^6A)RNA结合蛋白2(YTHDF2)对人宫颈癌细胞增殖、周期和凋亡的影响。方法利用人蛋白图谱(Human Protein Atlas)数据库分析YTHDF2在宫颈癌中表达及与生存时间的关系。收集宫颈癌和正常宫颈组织各31例,采用免疫组织化学法检测YTHDF2的蛋白表达差异;利用敲低YTHDF2的短发夹RNA(shRNA)及空载质粒包装慢病毒,并感染至宫颈癌HeLa细胞和SiHa细胞,实时荧光定量PCR及Western blot法检测YTHDF2的mRNA及蛋白水平,敲低YTHDF2后,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,集落形成实验检测细胞集落形成能力;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况。结果检测数据库发现YTHDF2在宫颈癌中表达越高生存时间越短,与正常宫颈组织相比,YTHDF2在宫颈癌组织高表达。敲低YTHDF2后,抑制宫颈癌细胞增殖,促进细胞凋亡,使细胞阻滞于S期。结论YTHDF2在宫颈癌组织中高表达,敲低后抑制宫颈癌细胞增殖并促进其凋亡。展开更多
目的研究敲低YTH结构域N^6甲基腺嘌呤(m^6A)RNA结合蛋白2(YTHDF2)对MGC-803人胃癌细胞的增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法用UCSC Cancer Browser下载癌症基因组图谱(TCGA)数据库筛查YTHDF2 mRNA在胃癌中的表达情况。设计并构建能...目的研究敲低YTH结构域N^6甲基腺嘌呤(m^6A)RNA结合蛋白2(YTHDF2)对MGC-803人胃癌细胞的增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法用UCSC Cancer Browser下载癌症基因组图谱(TCGA)数据库筛查YTHDF2 mRNA在胃癌中的表达情况。设计并构建能够靶向敲低YTHDF2的短发夹RNA(shRNA)病毒载体;病毒感染MGC-803细胞,敲低YTHDF2水平后,实时荧光定量PCR检测YTHDF2 mRNA水平,Western blot法检测YTHDF2蛋白水平,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果通过TCGA数据库查询发现YTHDF2在胃癌组织中高表达。成功构建YTHDF2敲低的稳定转染MGC-803细胞。与对照组相比,YTHDF2敲低后,明显抑制细胞增殖;G1期细胞明显增加,S期细胞明显减少;细胞凋亡率升高。结论敲低MGC-803胃癌细胞YTHDF2水平,抑制胃癌细胞增殖并促进其凋亡。展开更多
目的研究N6-腺苷酸甲基化(N6-methyladenosine,m6A)结合蛋白YTH结构域蛋白2(YTH domaincontaining protein 2,YTHDC2)对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs)成骨及成脂分化的调控。方法通过小干扰RNA(...目的研究N6-腺苷酸甲基化(N6-methyladenosine,m6A)结合蛋白YTH结构域蛋白2(YTH domaincontaining protein 2,YTHDC2)对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs)成骨及成脂分化的调控。方法通过小干扰RNA(siRNA)体外对hBMSCs进行YTHDC2基因表达的敲降,并进行成骨及成脂诱导分化,以研究YTHDC2敲降后hBMSCs分化表型的改变。利用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和茜素红染色鉴定成骨活性和钙结节形成,尼罗红染色检测脂滴形成。利用荧光定量PCR(RT-qPCR)检测成骨和成脂相关基因的表达。通过RNA测序(RNA-seq)分析YTHDC2敲降后的转录组变化,探索YTHDC2调控hBMSCs分化的潜在机制。结果敲降YTHDC2促进hBMSCs成骨分化中的ALP活性及钙结节形成,并显著上调成骨相关基因表达;同时降低了hBMSCs在成脂分化中的脂滴形成能力,并显著下调成脂相关基因表达。RNA-seq的基因富集分析显示YTHDC2与核糖体功能及mRNA翻译有关信号通路显著相关。结论敲降YTHDC2可促进hBMSCs成骨分化,抑制成脂分化。敲降YTHDC2可能造成核糖体功能改变。展开更多
目的:探讨萆苓祛痛方对2型糖尿病(T2DM)合并痛风性关节炎(GA)患者血清NLRP3、P2X7R、FN及肝脂肪变性的影响。方法:选取2019年1月至2022年12月在安徽中医药大学第一附属医院就诊的T2DM合并GA患者64例,随机分为萆苓祛痛方组(中药组,32例)...目的:探讨萆苓祛痛方对2型糖尿病(T2DM)合并痛风性关节炎(GA)患者血清NLRP3、P2X7R、FN及肝脂肪变性的影响。方法:选取2019年1月至2022年12月在安徽中医药大学第一附属医院就诊的T2DM合并GA患者64例,随机分为萆苓祛痛方组(中药组,32例)和布洛芬组(西药组,32例),同期健康体检30例作为对照组。两组维持基础治疗,西药组加布洛芬,中药组加萆苓祛痛方治疗。连续治疗8周后评估患者治疗前后中医证候评分,比较治疗前后空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 h PG)、糖化血红蛋白A1c(HbA1c)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、血尿酸(SUA)、血肌酐(SCr)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密低脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆度醇(LDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、受控衰减参数(CAP)、肝脏硬度(LSM)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、嘌呤能离子通道型受体7(P2X7R)、血清纤维连接蛋白(FN)的差异,记录用药期间出现的药物不良反应。结果:与本组治疗前比较,中药组西药组患者关节红肿疼痛、关节灼热、尿色黄、舌红苔黄腻及中医证候总积分均明显降低(P<0.05,P<0.01),中药组患者口干口渴、多饮多尿、脉滑数积分显著降低(P<0.01);与西药组治疗后比较,中药组各证候积分及总积分下降更显著(P<0.05,P<0.01)。与本组治疗前比较,中药组西药组治疗后FPG、2 h PG、HbA1c、SCr、SUA、TG、TC、LDL-C水平下降(P<0.05,P<0.01),中药组患者HOMA-IR、ALT、AST、HDL-C水平下降(P<0.05,P<0.01);与西药组治疗后比较,中药组患者除HDL-C外各实验室检查指标均明显降低(P<0.05,P<0.01)。治疗前,中药组西药组NLRP3、P2X7R、FN水平均高于对照组(P<0.01);与本组治疗前比较,两组患者治疗后NLRP3、P2X7R水平均显著降低(P<0.01);中药组FN水平明显下降(P<0.01);与西药组治疗后比较,中药组NLRP3、P2X7R、FN水平明显降低(P<0.01)。治疗前,中药组西药组CAP、LSM水平均高于对照组(P<0.01);与本组治疗前比较,中药组西药组治疗后CAP、LSM水平降低(P<0.05,P<0.01);与西药组治疗后比较,中药组下降更为显著(P<0.01)。不良反应发生率比较,中药组为3.13%(1/32),西药组为15.63%(5/32),差异无统计学意义。结论:萆苓祛痛方对2型糖尿病合并痛风性关节炎患者的疗效更佳,能显著减轻患者关节红肿热痛、活动受限、口干多饮等症状,降低血糖、血尿酸、血脂,抑制NLRP3、P2X7R、FN的高表达,改善肝脂肪变性。展开更多
文摘目的探讨敲低YTH结构域N^6甲基腺嘌呤(m^6A)RNA结合蛋白2(YTHDF2)对人宫颈癌细胞增殖、周期和凋亡的影响。方法利用人蛋白图谱(Human Protein Atlas)数据库分析YTHDF2在宫颈癌中表达及与生存时间的关系。收集宫颈癌和正常宫颈组织各31例,采用免疫组织化学法检测YTHDF2的蛋白表达差异;利用敲低YTHDF2的短发夹RNA(shRNA)及空载质粒包装慢病毒,并感染至宫颈癌HeLa细胞和SiHa细胞,实时荧光定量PCR及Western blot法检测YTHDF2的mRNA及蛋白水平,敲低YTHDF2后,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,集落形成实验检测细胞集落形成能力;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况。结果检测数据库发现YTHDF2在宫颈癌中表达越高生存时间越短,与正常宫颈组织相比,YTHDF2在宫颈癌组织高表达。敲低YTHDF2后,抑制宫颈癌细胞增殖,促进细胞凋亡,使细胞阻滞于S期。结论YTHDF2在宫颈癌组织中高表达,敲低后抑制宫颈癌细胞增殖并促进其凋亡。
文摘目的研究N6-腺苷酸甲基化(N6-methyladenosine,m6A)结合蛋白YTH结构域蛋白2(YTH domaincontaining protein 2,YTHDC2)对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs)成骨及成脂分化的调控。方法通过小干扰RNA(siRNA)体外对hBMSCs进行YTHDC2基因表达的敲降,并进行成骨及成脂诱导分化,以研究YTHDC2敲降后hBMSCs分化表型的改变。利用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和茜素红染色鉴定成骨活性和钙结节形成,尼罗红染色检测脂滴形成。利用荧光定量PCR(RT-qPCR)检测成骨和成脂相关基因的表达。通过RNA测序(RNA-seq)分析YTHDC2敲降后的转录组变化,探索YTHDC2调控hBMSCs分化的潜在机制。结果敲降YTHDC2促进hBMSCs成骨分化中的ALP活性及钙结节形成,并显著上调成骨相关基因表达;同时降低了hBMSCs在成脂分化中的脂滴形成能力,并显著下调成脂相关基因表达。RNA-seq的基因富集分析显示YTHDC2与核糖体功能及mRNA翻译有关信号通路显著相关。结论敲降YTHDC2可促进hBMSCs成骨分化,抑制成脂分化。敲降YTHDC2可能造成核糖体功能改变。
文摘目的:探讨萆苓祛痛方对2型糖尿病(T2DM)合并痛风性关节炎(GA)患者血清NLRP3、P2X7R、FN及肝脂肪变性的影响。方法:选取2019年1月至2022年12月在安徽中医药大学第一附属医院就诊的T2DM合并GA患者64例,随机分为萆苓祛痛方组(中药组,32例)和布洛芬组(西药组,32例),同期健康体检30例作为对照组。两组维持基础治疗,西药组加布洛芬,中药组加萆苓祛痛方治疗。连续治疗8周后评估患者治疗前后中医证候评分,比较治疗前后空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 h PG)、糖化血红蛋白A1c(HbA1c)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、血尿酸(SUA)、血肌酐(SCr)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密低脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆度醇(LDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、受控衰减参数(CAP)、肝脏硬度(LSM)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、嘌呤能离子通道型受体7(P2X7R)、血清纤维连接蛋白(FN)的差异,记录用药期间出现的药物不良反应。结果:与本组治疗前比较,中药组西药组患者关节红肿疼痛、关节灼热、尿色黄、舌红苔黄腻及中医证候总积分均明显降低(P<0.05,P<0.01),中药组患者口干口渴、多饮多尿、脉滑数积分显著降低(P<0.01);与西药组治疗后比较,中药组各证候积分及总积分下降更显著(P<0.05,P<0.01)。与本组治疗前比较,中药组西药组治疗后FPG、2 h PG、HbA1c、SCr、SUA、TG、TC、LDL-C水平下降(P<0.05,P<0.01),中药组患者HOMA-IR、ALT、AST、HDL-C水平下降(P<0.05,P<0.01);与西药组治疗后比较,中药组患者除HDL-C外各实验室检查指标均明显降低(P<0.05,P<0.01)。治疗前,中药组西药组NLRP3、P2X7R、FN水平均高于对照组(P<0.01);与本组治疗前比较,两组患者治疗后NLRP3、P2X7R水平均显著降低(P<0.01);中药组FN水平明显下降(P<0.01);与西药组治疗后比较,中药组NLRP3、P2X7R、FN水平明显降低(P<0.01)。治疗前,中药组西药组CAP、LSM水平均高于对照组(P<0.01);与本组治疗前比较,中药组西药组治疗后CAP、LSM水平降低(P<0.05,P<0.01);与西药组治疗后比较,中药组下降更为显著(P<0.01)。不良反应发生率比较,中药组为3.13%(1/32),西药组为15.63%(5/32),差异无统计学意义。结论:萆苓祛痛方对2型糖尿病合并痛风性关节炎患者的疗效更佳,能显著减轻患者关节红肿热痛、活动受限、口干多饮等症状,降低血糖、血尿酸、血脂,抑制NLRP3、P2X7R、FN的高表达,改善肝脂肪变性。
