YTHDF3靶向PD-L1对肝细胞癌细胞增殖、迁移、侵袭和肿瘤干性的影响

目的:探究YTHDF3在肝癌中的表达水平和YTHDF3对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和肿瘤干性的影响及可能涉及的靶点。方法:RT-PCR和Western blot检测临床肝癌组织和癌旁组织中YTHDF3的表达水平,使用正常肝细胞和肝癌细胞检测YTHDF3在mRNA和蛋白水平的表达。干扰YTHDF3在两组肝癌细胞中的表达,通过CCK-8、划痕实验、Transwell实验检测肝癌细胞活力、迁移和侵袭能力。干扰YTHDF3后观察肝癌细胞的成球能力和流式细胞术测定CD133干性标记的变化。最后,下调YTHDF3检测PD-L1在mRNA和蛋白水平的变化。结果:与癌旁组织相比,YTHDF3在肝癌组织中表达显著上调。与LO2细胞相比,两组肝癌细胞中YTHDF3的表达升高。干扰YTHDF3在肝癌细胞中的表达后,肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭和成球能力减弱,CD133干性标记阳性率降低。下调YTHDF3在肝癌细胞中的表达,PD-L1的表达随之减少。结论:YTHDF3在肝癌中的高表达能够促进肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭和肿瘤干性等特征,可能是作用于PD-L1来实现肝癌细胞免疫逃逸。

m6A识别蛋白Ythdf3在精子发生中的作用研究

目的:通过基因敲除模型研究N6-甲基腺嘌呤(m6A)识别蛋白Ythdf3在小鼠精子发生过程的调控作用。方法:利用CRISPR/Cas9技术构建Ythdf3基因敲除小鼠,通过免疫荧光和HE染色对敲除小鼠进行表型分析,研究Ythdf3在调控小鼠精子发生过程中的作用。结果:免疫组化染色显示Ythdf3在精原及各级生精细胞核中均有表达;成功构建Ythdf3基因敲除小鼠模型;HE染色显示Ythdf3敲除小鼠睾丸各级生精时相及附睾尾精子与对照相比无明显异常。结论:在正常生理条件下,敲除Ythdf3不影响雄性小鼠精子发生。

非小细胞肺癌脑转移患者血清YTHDF3表达水平及其诊断价值

目的分析非小细胞肺癌(NSCLC)脑转移患者血清YTH结构域家族结合蛋白3(YTHDF3)的表达水平及其诊断价值。方法本研究为横断面研究。采用非随机抽样的方法,选取2022年6月至2023年6月就诊于空军军医大学唐都医院的NSCLC脑转移患者50例作为NSCLC脑转移组,NSCLCⅣ期非脑转移患者70例作为NSCLCⅣ期非脑转移组,NSCLC淋巴结转移患者60例作为NSCLC淋巴结转移组,体检健康者54名作为健康组,比较4组血清YTHDF3表达水平。收集并比较NSCLC脑转移组与NSCLCⅣ期非脑转移组血清传统肿瘤标志物[癌胚抗原(CEA)、铁蛋白(FR)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、糖类抗原50(CA50)、鳞状细胞相关抗原(SCCA)、细胞角蛋白19片段(CK19)]水平。采用受试者操作特征(ROC)曲线评估血清YTHDF3与传统肿瘤标志物的NSCLC脑转移的诊断效能。结果NSCLC脑转移组男24例,女26例;年龄(59.8±10.1)岁,年龄范围为36~83岁;腺癌29例(58.0%),鳞癌21例(42.0%)。NSCLCⅣ期非脑转移组男41例,女29例;年龄(58.5±10.1)岁,年龄范围为29~78岁;腺癌37例(52.9%),鳞癌33例(47.1%)。NSCLC淋巴结转移组男34例,女26例;(59.4±8.5)岁,年龄范围为27~80岁。健康组男25例,女29例,年龄(58.2±16.6)岁,年龄范围为24~89岁。各组性别和年龄比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。NSCLC脑转移组与NSCLCⅣ期非脑转移组病理类型比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.31,P>0.05)。4组血清YTHDF3表达水平比较差异有统计学意义(H=48.71,P<0.001);NSCLC脑转移组血清YTHDF3水平高于NSCLCⅣ期非脑转移组、NSCLC淋巴结转移组和健康组,差异均有统计学意义[1073.18(743.47,1168.14)μg/L比754.98(602.30,861.49)μg/L、734.95(653.25,842.68)μg/L、665.94(564.00,728.10)μg/L,均P<0.05]。NSCLC脑转移组与NSCLCⅣ期非脑转移组血清NSE表达水平比较差异有统计学意义[(16.72±6.66)μg/L比(15.50±4.47)μg/L,t=5.49,P<0.05],其他血清传统肿瘤标志物(CEA、FR、CA50、SCCA、CK19)水平比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。ROC曲线显示,单独检测血清YTHDF3的曲线下面积为0.754,最佳截断值为894.32μg/L,敏感度为82.60%,特异度为56.50%;CEA、FR、NSE、CA50、SCCA、CK19的曲线下面积和特异度均较低。血清YTHDF3与NSE、CK19、CA50、SCCA联合检测的曲线下面积、敏感度、特异度分别为0.769、70.20%、69.60%。结论NSCLC脑转移患者血清YTHDF3表达水平升高。检测血清YTHDF3对NSCLC脑转移具有较好的诊断价值。