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cDNA Cloning, Bioinformatic and Tissue-specific Expression Analysis of Porcine JARID1C Gene
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作者 伊璐 郝振华 +3 位作者 杨彤彤 王邵兵 邢宝松 徐银学 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1088-1096,共9页
Jumonji, AT-rich interactive domain 1C (JARID1C) protein belongs to the highly conserved ARID protein family, which is involved in chromatin remodeling and transcriptional regulation during cell growth, differentiat... Jumonji, AT-rich interactive domain 1C (JARID1C) protein belongs to the highly conserved ARID protein family, which is involved in chromatin remodeling and transcriptional regulation during cell growth, differentiation, and development. In humans, this gene plays a vital role in normal brain development and function. Using an in silico approach in combination with 5' rapid amplification of cDNA ends (5' RACE), the full-length cDNA of JARIDIC (GenBank accession No. EF139241) from porcine ovary, which contains 5,908 bp nucleotides, with an open reading frame (ORF) of 4,548 bp, has been cloned. The putative porcine JARID 1C protein, which is located in the nucleus, encodes 1,516 amino acids with a molecular weight of 170 kDa and a pI of 5.44. Bioinformatic prediction indicates that the protein contains several conserved domains: a JmjN domain, an ARID domain, a JmjC domain, a C5HC2 zinc finger domain, and a PHD zinc finger domain. Similarity comparisons for nucleic and amino acid sequences reveal that the porcine JARID1C protein shares a high identity with its dog, mouse, rat, and human counterparts. The phylogenetic tree of the JARID1 subfamily proteins has been constructed to reveal the evolutionary relationship of various species. Real-time PCR analysis shows that the JARIDIC gene is expressed in various tissues, but at different levels. The expression levels of this gene are higher in the brain and gonad than in other tissues, suggesting that the JARID1C protein plays a role in porcine brain and gonad functions. 展开更多
关键词 PIG JARID1C gene cDNA cloning bioinformatic analysis gene expression
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牦牛HORMAD1基因的克隆及生物信息学分析
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作者 金帅 齐社宁 +9 位作者 阎萍 梁春年 郭宪 包鹏甲 裴杰 褚敏 丁学智 刘文博 吴晓云 刘建 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期95-100,共6页
利用分子克隆技术获得了牦牛HORMAD1基因编码区序列,并采用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白的基本理化性质、疏水性、信号肽、二级结构等方面进行了预测和分析。结果表明,牦牛HORMAD1基因包含一个长度为1 182 bp的开放阅读框,编码39... 利用分子克隆技术获得了牦牛HORMAD1基因编码区序列,并采用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白的基本理化性质、疏水性、信号肽、二级结构等方面进行了预测和分析。结果表明,牦牛HORMAD1基因包含一个长度为1 182 bp的开放阅读框,编码393个氨基酸;其编码蛋白属于亲水性蛋白,无明显的信号肽,含有很多个磷酸化位点。二级结构主要以无规则卷曲和α螺旋为主。HORMAD1基因编码产物氨基酸邻接系统树表明,牦牛HORMAD1与黄牛、马和猪等物种的HORMAD1氨基酸遗传距离较近,具有高度相似性。 展开更多
关键词 牦牛 hormad1基因 克隆 生物信息学分析
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牦牛DJ-1基因克隆、生物信息学及组织表达分析 被引量:1
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作者 申金伟 路建卫 +3 位作者 赵雪 扎老 成述儒 梁春年 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期192-199,共8页
为了研究牦牛DJ-1基因的结构及功能,为后续深入研究牦牛DJ-1基因的生物学功能提供了重要的理论依据。以美仁牦牛脂肪组织cDNA为模板,利用RT-PCR克隆牦牛DJ-1基因的编码区序列(CDS),并且利用基因序列进行生物信息学分析,预测结构域及蛋... 为了研究牦牛DJ-1基因的结构及功能,为后续深入研究牦牛DJ-1基因的生物学功能提供了重要的理论依据。以美仁牦牛脂肪组织cDNA为模板,利用RT-PCR克隆牦牛DJ-1基因的编码区序列(CDS),并且利用基因序列进行生物信息学分析,预测结构域及蛋白质理化性质等,再利用RT-qPCR技术进行组织表达分析。结果表明,美仁牦牛DJ-1基因的CDS区全长570 bp,共编码189个氨基酸;牦牛DJ-1结构域预测显示,在DJ-1氨基酸序列的29—168位中有1个含有Pfam的PfpI结构域;通过对DJ-1蛋白结构和功能进行预测,结果显示,无跨膜结构且无信号肽区域,分子质量20.03531 ku,原子总数2870,理论等电点6.84,不稳定系数28.37,表示为稳定的蛋白质;脂肪系数101.11,总平均亲水系数-0.004,为亲水蛋白,共有11个磷酸化位点;同时,亚细胞定位预测结果表明,美仁牦牛DJ-1蛋白主要分布于细胞质和线粒体中,系统进化树表明,美仁牦牛与野牦牛和欧洲牛亲缘关系最近,与北极狐和宽吻海牛亲缘关系最远;RT-qPCR结果表明,在成年美仁牦牛的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肌肉、脂肪和睾丸组织中均有所表达,在心脏组织和肌肉组织中表达水平最高,在肝脏和睾丸组织中表达水平最低。 展开更多
关键词 美仁牦牛 DJ-1基因 生物信息学分析 系统进化
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桑桑牦牛MYL7基因克隆及生物信息学分析
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作者 马荣 洛桑顿珠 +4 位作者 平措占堆 卓玛次仁 尼玛加措 成述儒 梁春年 《中国草食动物科学》 CAS 北大核心 2024年第4期15-21,共7页
克隆西藏桑桑牦牛肌球蛋白轻链7(Myosin light chain 7,MYL7)基因CDS区,进行生物信息学分析并检测该基因在各组织中的表达差异,为探究该基因功能提供一定的理论依据。以桑桑牦牛肌肉组织cDNA为模板,利用PCR技术克隆其CDS区序列,并利用... 克隆西藏桑桑牦牛肌球蛋白轻链7(Myosin light chain 7,MYL7)基因CDS区,进行生物信息学分析并检测该基因在各组织中的表达差异,为探究该基因功能提供一定的理论依据。以桑桑牦牛肌肉组织cDNA为模板,利用PCR技术克隆其CDS区序列,并利用多种在线生物软件及工具进行生物信息学分析。结果表明,桑桑牦牛MYL7基因CDS区长447 bp,共编码148个氨基酸,该基因编码的蛋白分子式为C743H1155N187O237S7,原子数为2329个,理论等电点为4.37,不稳定系数和总平均亲水性分别为36.02和-0.364,属于稳定的亲水性蛋白;具有特异性的磷酸化位点11个,其中5个丝氨酸、5个苏氨酸和1个酪氨酸。MYL7蛋白无信号肽和跨膜螺旋结构,属于非分泌性蛋白。通过亚细胞定位发现,桑桑牦牛MYL7基因在线粒体、细胞核、细胞质、细胞膜中均有所分布。蛋白高级结构主要是α-螺旋和无规则卷曲。通过构建系统进化树发现,桑桑牦牛与野牦牛亲缘关系最近,符合实际情况,说明MYL7基因在进化过程中具有一定的保守性。 展开更多
关键词 桑桑牦牛 MYL7基因 基因克隆 生物信息学分析
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西藏桑桑牦牛CXCR2基因克隆及生物信息学分析
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作者 申金伟 洛桑顿珠 +4 位作者 平措占堆 卓玛次仁 尼玛加措 成述儒 梁春年 《中国草食动物科学》 CAS 北大核心 2024年第5期57-63,共7页
为了研究牦牛CXCR2基因的结构、生物学功能及影响牦牛生长发育的机制,以西藏桑桑牦牛脂肪组织cDNA为模板,利用RT-PCR克隆牦牛CXCR2基因的编码区序列(Coding sequence,CDS),并对其进行生物信息学分析、结构域预测及蛋白理化性质预测,利用... 为了研究牦牛CXCR2基因的结构、生物学功能及影响牦牛生长发育的机制,以西藏桑桑牦牛脂肪组织cDNA为模板,利用RT-PCR克隆牦牛CXCR2基因的编码区序列(Coding sequence,CDS),并对其进行生物信息学分析、结构域预测及蛋白理化性质预测,利用RT-qPCR技术进行组织表达分析。结果表明,桑桑牦牛CXCR2基因的CDS区全长876 bp,共编码291个氨基酸;结构域预测结果显示,在CXCR2氨基酸序列的1~245位有1个Pfam家族的7tm_1结构域;CXCR2蛋白分析预测结果显示,该蛋白有5个跨膜结构,无信号肽区域,分子量32855.55 Da,原子总数4726个,分子式为C_(1524)H_(2416)N_(392)O_(374)S_(20),不稳定性指数29.45,表明该蛋白质为稳定蛋白,理论等电点9.86,脂肪系数120.27,总平均亲水系数-0.657,为疏水性蛋白,共有21个磷酸化位点;亚细胞定位预测结果显示,桑桑牦牛CXCR2基因主要分布于内质网(55.6%)、线粒体(22.2%)和细胞核(22.2%)中;系统进化树结果显示,桑桑牦牛与瘤牛亲缘关系最近,与水牛亲缘关系最远。 展开更多
关键词 桑桑牦牛 CXCR2基因 克隆 生物信息学分析
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牦牛TRIB3基因克隆、生物信息学及组织表达差异分析
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作者 MEHRAN Sidra 董宝霞 荆海霞 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第5期1-9,共9页
旨在克隆牦牛毛球族同源蛋白3(TRIB3)基因并进行生物信息学分析,检测其在牦牛各组织中的表达情况,为后续探究该基因在牦牛中的功能提供理论依据。试验采集牦牛乳腺组织并以其cDNA为模板,克隆牦牛TRIB3基因序列,通过生物信息学分析了解... 旨在克隆牦牛毛球族同源蛋白3(TRIB3)基因并进行生物信息学分析,检测其在牦牛各组织中的表达情况,为后续探究该基因在牦牛中的功能提供理论依据。试验采集牦牛乳腺组织并以其cDNA为模板,克隆牦牛TRIB3基因序列,通过生物信息学分析了解其生物学特征和结构,运用荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测TRIB3基因在牦牛心脏、肝脏、肺脏、骨骼肌、乳腺及脂肪组织中的表达情况。结果显示:牦牛TRIB3基因CDS区全长为1074 bp,共编码357个氨基酸,为不稳定性亲水蛋白;同源性对比结果显示,牦牛TRIB3编码氨基酸与野牦牛的同源性最高;系统进化树显示,野牦牛和野牛与牦牛TRIB3基因亲缘关系最近,最远是小鼠;TRIB3蛋白属于不稳定亲水性蛋白,主要存在于细胞核中,不含信号肽和跨膜结构域;TRIB3蛋白二级结构含有α-螺旋、延伸链、β-转角、无规则卷曲,分别占35.85%、9.52%、448%和50.14%;蛋白互作分析结果显示,TRIB3与组成型光形态建成蛋白1(COP1)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、CCAAT增强子结合蛋白β(CEBPβ)、激活转录因子3(ATF3)、DNA损伤诱导转录因子3(DDIT3)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶2(AKT2)、AKT3和Twist相关蛋白1(TWIST1)之间均有紧密联系。RT-qPCR检测发现TRIB3基因在牦牛的不同组织中均有表达,乳腺组织中的表达量最高。研究结果为进一步探究TRIB3基因在牦牛乳腺中的作用和其生物功能提供一定的理论数据。 展开更多
关键词 牦牛 毛球族同源蛋白3 基因克隆 生物信息学分析 组织表达
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Cloning and analysis of 1-hydroxy-2-methyl-2-(E)-butenyl-4-diphosphate reductase genes HsHDR1 and HsHDR2 in Huperzia serrate 被引量:3
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作者 Haizhou Lv Xin Zhang +6 位作者 Baosheng Liao Wanjing Liu Liu He Jingyuan Song Chao Sun Hongmei Luo Shilin Chen 《Acta Pharmaceutica Sinica B》 SCIE CAS CSCD 2015年第6期583-589,共7页
We cloned and analyzed the two genes of the 1-hydroxy-2-methyl-2-(E)-butenyl-4-diphosphate reductase(HDR) gene family from Huperzia serrate.The two transcripts coding HDR,named Hs HDR1 and Hs HDR2,were discovered in t... We cloned and analyzed the two genes of the 1-hydroxy-2-methyl-2-(E)-butenyl-4-diphosphate reductase(HDR) gene family from Huperzia serrate.The two transcripts coding HDR,named Hs HDR1 and Hs HDR2,were discovered in the transcriptome dataset of H.serrate and were cloned by reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR).The physicochemical properties,protein domains,protein secondary structure,and 3D structure of the putative Hs HDR1 and Hs HDR2 proteins were analyzed.The full-length c DNA of the Hs HDR1 gene contained 1431 bp encoding a putative protein with 476 amino acids,whereas the Hs HDR2 gene contained 1428 bp encoding a putative protein of 475 amino acids.These two proteins contained the conserved domain of 1-hydroxy-2-methyl-2-(E)-butenyl-4-diphosphate reductase(PF02401),but without the transmembrane region and signal peptide.The most abundant expression of Hs HDR1 and Hs HDR2 was detected in H.serrate roots,followed by the stems and leaves.Our results provide a foundation for exploring the function of Hs HDR1 and Hs HDR2 in terpenoid and sterol biosynthesis in Huperziaceae plants. 展开更多
关键词 1-Hydroxy-2-methyl-2(E)-butenyl-4-diphosphate reductase Huperzia serrate Terpenoid gene clone bioinformatics analysis
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天祝白牦牛ADIPOQ基因的克隆及生物信息学分析
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作者 若周么 石斌刚 +2 位作者 王向彦 祁有鹏 胡江 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第13期105-110,115,共7页
脂联素(ADIPOQ)是一种主要由脂肪组织分泌的内源性细胞因子,在调节脂类代谢中发挥重要作用,该基因通过调控脂质代谢影响动物机体脂肪沉积。为探讨ADIPOQ基因编码蛋白序列特征及组织表达模式,试验对天祝白牦牛ADIPOQ基因编码序列(CDS)进... 脂联素(ADIPOQ)是一种主要由脂肪组织分泌的内源性细胞因子,在调节脂类代谢中发挥重要作用,该基因通过调控脂质代谢影响动物机体脂肪沉积。为探讨ADIPOQ基因编码蛋白序列特征及组织表达模式,试验对天祝白牦牛ADIPOQ基因编码序列(CDS)进行克隆测序,获得天祝白牦牛ADIPOQ基因CDS区,利用生物信息学软件预测天祝白牦牛ADIPOQ基因及其编码氨基酸序列特征。结果表明:天祝白牦牛ADIPOQ基因CDS区全长723 bp,编码240个氨基酸,其中甘氨酸含量(14.17%)最高,具有亲水性,蛋白质二级结构和三级结构以无规则卷曲和延伸链为主。ADIPOQ基因编码蛋白具有一个信号肽,无跨膜结构,属于分泌蛋白,其可能与ADIPOR1、ADIPORZ、RETN、PLIN1和LEP等10个蛋白质存在相互作用,与山羊的氨基酸序列相似性为91.6%,与绵羊、山羊亲缘关系最近,具有一定的保守性。说明试验成功克隆了天祝白牦牛ADIPOQ基因的CDS区,ADIPOQ基因可能在脂肪沉积过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 天祝白牦牛 ADIPOQ基因 克隆 CDS区 生物信息学分析
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广藿香DXS基因克隆及表达分析
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作者 曾晴 严雅玲 +2 位作者 严寒静 何梦玲 张宏意 《山东农业科学》 北大核心 2024年第4期28-35,共8页
1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶(DXS)是调控萜类合成途径中MEP途径的第一个关键酶,为探究广藿香DXS基因参与其主要萜类成分广藿香醇合成调控的分子机制,本研究依据本课题组前期获得的转录组DXS基因序列,以广藿香cDNA为模板,克隆得到PcDXS基... 1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶(DXS)是调控萜类合成途径中MEP途径的第一个关键酶,为探究广藿香DXS基因参与其主要萜类成分广藿香醇合成调控的分子机制,本研究依据本课题组前期获得的转录组DXS基因序列,以广藿香cDNA为模板,克隆得到PcDXS基因,对其进行生物信息学分析,构建pET-28a-PcDXS原核表达载体诱导蛋白表达,并采用荧光实时定量PCR法检测广藿香根、茎、叶、芽中DXS基因表达情况。结果表明,从广藿香叶中克隆到开放阅读框全长为2151 bp和1908 bp的PcDXS1、PcDXS2基因序列,分别编码716、635个氨基酸。预测PcDXS1蛋白分子量78.33 kDa,为稳定非跨膜非分泌蛋白,主要定位于叶绿体;PcDXS2蛋白分子量67.92 kDa,为不稳定非跨膜非分泌蛋白,主要定位于叶绿体。PcDXS1、PcDXS2均含有DXP_synthase_N、Transket_pyr和Transketolase_C结构域模块,属于DXS超家族。PcDXS1、PcDXS2分别与半枝莲、糙苏的DXS基因序列具有较高同源性。使用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导的PcDXS1、PcDXS2融合蛋白主要在沉淀中表达。PcDXS1、PcDXS2基因表达量均在根中最低,PcDXS1基因在叶中显著高表达,PcDXS2基因在叶、芽、茎中高表达。本研究结果可为后续深入研究DXS基因在广藿香萜类化合物合成途径中的生物学功能及广藿香萜类代谢途径的基因调控奠定基础。 展开更多
关键词 广藿香 1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶(DXS) 基因克隆 生物信息学分析 表达分析
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牦牛MITF-M基因序列分析及其在皮肤组织中表达水平 被引量:4
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作者 张建一 梁春年 +3 位作者 裴杰 郭宪 沈友明 阎萍 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期1-7,共7页
研究牦牛MITF-M基因编码区序列及其编码蛋白的结构,以及其在皮肤组织中mRNA的表达水平,探讨MITF-M基因与牦牛毛色形成相关性,以期为揭示牦牛毛色形成分子机理奠定基础。采用RT-PCR技术扩增,成功获得了牦牛MITF-M基因编码区序列。采用生... 研究牦牛MITF-M基因编码区序列及其编码蛋白的结构,以及其在皮肤组织中mRNA的表达水平,探讨MITF-M基因与牦牛毛色形成相关性,以期为揭示牦牛毛色形成分子机理奠定基础。采用RT-PCR技术扩增,成功获得了牦牛MITF-M基因编码区序列。采用生物信息学方法,预测分析MITF-M基因及其编码蛋白的基本理化性质、二级结构等;采用半定量PCR检测技术,检测出MITF-M基因mRNA在牦牛各组织器官中表达水平;通过荧光定量PCR技术检测出在牦牛不同颜色皮肤组织中MITF-M基因mRNA表达水平。结果表明,扩增得到的MITF-M基因的编码区是一条长为1 460 bp的DNA序列。将牦牛的MITF-M基因序列命名为YAK MITF-M,并且在NCBI数据库中注册该基因的登录号为KM985448。牦牛MITF-M序列基因含有一个长度为1 242 bp的开放性阅读框,编码413个氨基酸,二级结构主要以α螺旋和无规则卷曲为主,β折叠和延伸链较少。MITF-M基因编码产物氨基酸邻接系统树表明,牦牛MITF-M与黄牛、绵羊等物种的MITF-M氨基酸具有高度相似性。在牦牛各组织器官中,MITF-M基因mRNA仅在皮肤组织中特异性表达,且在不同毛色牦牛皮肤组织中,MITF-M在黑色被毛皮肤组织中mRNA表达量显著高于白色被毛皮肤组织(P<0.01)。 展开更多
关键词 牦牛 MITF-M基因 克隆 生物信息学分析 表达水平
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牦牛Agouti基因的克隆及编码区多态性研究 被引量:3
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作者 张建一 梁春年 +4 位作者 吴晓云 张良斌 郭宪 裴杰 阎萍 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2014年第5期59-65,共7页
以Agouti基因作为牦牛毛色调控的候选基因,探索Agouti基因编码区序列多态性,以期为阐明Agouti与毛色形成的相关性及毛色形成机理奠定基础。根据GenBank已发表序列(NM_206843)设计1对引物,以天祝白牦牛和黑色被毛甘南牦牛皮肤总RNA为模板... 以Agouti基因作为牦牛毛色调控的候选基因,探索Agouti基因编码区序列多态性,以期为阐明Agouti与毛色形成的相关性及毛色形成机理奠定基础。根据GenBank已发表序列(NM_206843)设计1对引物,以天祝白牦牛和黑色被毛甘南牦牛皮肤总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增,成功获得了牦牛Agouti基因编码区序列。采用生物信息学方法预测分析Agouti基因及其编码蛋白的基本理化性质、信号肽、疏水性、二级结构等;采用DNA混合池测序法和直接测序法,检测牦牛Agouti基因编码区的序列变异。结果表明,扩增得到的Agouti基因的编码区是一条长为593 bp的DNA序列。黑色甘南牦牛和天祝白牦牛皮肤的Agouti基因序列相同,并与黄牛基本一致。将牦牛的Agouti基因序列命名为YAK ASIP,并且在NCBI数据库中注册该基因的登录号为KJ630463。该基因含有一个长度为402 bp的开放性阅读框,编码133个氨基酸。Agouti基因编码蛋白属于亲水性蛋白,有一个明显的信号肽,含有多个磷酸化位点。其二级结构主要以α螺旋和无规则卷曲为主。Agouti基因编码产物氨基酸邻接系统树表明,牦牛Agouti与黄牛、绵羊等物种的Agouti氨基酸具有高度相似性,并且牦牛Agouti基因编码区中无多态性位点。 展开更多
关键词 牦牛 Agouti基因 克隆 生物信息学分析 多态性
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牦牛病毒性腹泻病毒E1基因的克隆及生物信息学分析 被引量:3
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作者 王文伯 刘亚刚 +4 位作者 胡炳峰 杨晓农 于吉锋 冯英阳 王盼盼 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第3期94-98,共5页
参考GenBank中发表的BVDV毒株的基因组序列设计2对引物,利用套式RT-PCR方法首次成功克隆牦牛体内分离鉴定出的牛病毒性腹泻病毒E1基因,并扩增出预期的585 bp目的片段。将扩增产物克隆至pMD18-T Vector,经质粒PCR鉴定及酶切鉴定获得阳性... 参考GenBank中发表的BVDV毒株的基因组序列设计2对引物,利用套式RT-PCR方法首次成功克隆牦牛体内分离鉴定出的牛病毒性腹泻病毒E1基因,并扩增出预期的585 bp目的片段。将扩增产物克隆至pMD18-T Vector,经质粒PCR鉴定及酶切鉴定获得阳性重组质粒并进行测序。测序结果经BLAST同源性比较分析,克隆得到的E1基因与Osloss株同源性最高,但核苷酸同源性仅为73.3%,推导氨基酸同源性仅为82.6%,表明牦牛病毒性腹泻病毒存在较大的基因突变。这可能是该病毒为适应牦牛这种特有生物体和牦牛所生活的高原生态环境的结果,或该病毒也可能具有独立的遗传衍化来源。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 牦牛 E1基因 克隆 生物信息学分析
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牦牛A-FABP基因的克隆与生物信息学分析 被引量:2
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作者 秦文 阎萍 +2 位作者 裴杰 吴晓云 李天科 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期86-91,共6页
以牦牛的脂肪型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)基因为研究对象,根据GenBank收录的牛的A-FABP基因的mRNA序列设计一对特异性引物,以牦牛背最长肌为材料,采用RT-PCR方法克隆牦牛A-FABP基因的CDS区,并对其进行生物信息学分析。结果表明,牦牛A-FAB... 以牦牛的脂肪型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)基因为研究对象,根据GenBank收录的牛的A-FABP基因的mRNA序列设计一对特异性引物,以牦牛背最长肌为材料,采用RT-PCR方法克隆牦牛A-FABP基因的CDS区,并对其进行生物信息学分析。结果表明,牦牛A-FABP基因的CDS区全长399 bp,编码132个氨基酸;其编码的蛋白属于亲水性蛋白。二级结构主要由α-螺旋、β-折叠、延伸链以及无规卷曲组成,含有11个磷酸化位点。牦牛A-FABP基因编码的氨基酸序列与黄牛和水牛的同源性最高且都为97%,与其他物种的同源性也较高,说明在进化关系上A-FABP氨基酸序列较保守,此蛋白序列具Cytosolic fatty-acid binding家族蛋白功能结构域,无信号肽。 展开更多
关键词 牦牛 A—FABP基因 克隆 生物信息学分析
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天祝白牦牛IGF-1基因克隆、生物信息学及差异表达分析 被引量:2
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作者 常永芳 包鹏甲 +4 位作者 张永峰 付东海 吴晓云 褚敏 阎萍 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1934-1941,共8页
旨在获得天祝白牦牛 IGF-1基因序列,分析其分子结构特征及在牦牛毛囊发育周期中的表达规律,为解析白牦牛毛囊发育及被毛生长提供理论依据。以天祝白牦牛体侧皮肤为试验材料,通过PCR扩增及测序技术克隆 IGF-1基因CDS区序列,并与黄牛序列... 旨在获得天祝白牦牛 IGF-1基因序列,分析其分子结构特征及在牦牛毛囊发育周期中的表达规律,为解析白牦牛毛囊发育及被毛生长提供理论依据。以天祝白牦牛体侧皮肤为试验材料,通过PCR扩增及测序技术克隆 IGF-1基因CDS区序列,并与黄牛序列比对,进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测天祝白牦牛毛囊发育不同时期 IGF-1基因的mRNA表达水平。结果表明,天祝白牦牛 IGF-1基因的CDS区长465 bp,编码154个氨基酸;IGF-1基因编码蛋白的分子质量为17 065. 81 ku,理论等电点为9.36;蛋白质二级结构以无规卷曲(57.79%)和α-螺旋(27.27%)为主,序列分析表明,天祝白牦牛IGF-1蛋白为不稳定亲水蛋白;qPCR检测结果表明, IGF-1基因在牦牛毛囊发育的生长期、退行期和休止期均有表达,生长期和退行期表达量显著高于休止期。 展开更多
关键词 IGF-1基因 天祝白牦牛 克隆 生物信息学
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麦洼牦牛HOXA6基因编码区的克隆、组织表达特征及生物信息学分析 被引量:1
15
作者 李宇 熊显荣 +1 位作者 宋虎 李键 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期88-93,共6页
利用分子克隆技术成功获得麦洼牦牛HOXA6基因编码区序列,并结合内参基因通过实时相对定量PCR法检测HOXA6基因在麦洼牦牛各组织中的表达分布。采用生物信息学方法对该基因及其编码的蛋白进行基本理化性质、疏水性、二级结构等分析,并构... 利用分子克隆技术成功获得麦洼牦牛HOXA6基因编码区序列,并结合内参基因通过实时相对定量PCR法检测HOXA6基因在麦洼牦牛各组织中的表达分布。采用生物信息学方法对该基因及其编码的蛋白进行基本理化性质、疏水性、二级结构等分析,并构建原核重组表达系统。结果表明,该基因包含一个大小为702 bp的开放阅读框,编码233个氨基酸;所编码的蛋白属于亲水性蛋白,二级结构主要由无规则卷曲和α螺旋为主。HOXA6基因的编码产物氨基酸进化树表明,HOXA6基因进化极其保守,牦牛HOXA6与牛、绵羊、马等物种氨基酸遗传距离较近。对其编码区序列比对显示,该序列具有高度保守性,与其他物种同源性较高。 展开更多
关键词 麦洼牦牛 HOXA6基因 克隆 组织表达 生物信息学分析
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西藏牦牛ATGL基因克隆及生物信息学分析 被引量:1
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作者 杨琴 柴志欣 +4 位作者 宋乔乔 张思源 陈攀攀 廖珂 钟金城 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第3期39-44,228,共7页
为了研究西藏牦牛ATGL基因的理化特性及分子结构,试验采用PCR扩增和DNA测序技术以及生物信息学分析软件对西藏类乌齐牦牛ATGL基因进行克隆测序和生物信息学分析。结果表明:西藏类乌齐牦牛ATGL基因编码区全长为1 461 bp,可编码486个氨基... 为了研究西藏牦牛ATGL基因的理化特性及分子结构,试验采用PCR扩增和DNA测序技术以及生物信息学分析软件对西藏类乌齐牦牛ATGL基因进行克隆测序和生物信息学分析。结果表明:西藏类乌齐牦牛ATGL基因编码区全长为1 461 bp,可编码486个氨基酸,其中A、T、G、C碱基含量分别为17.2%、17.9%29.0%、35.9%,A+T为35.1%,G+C为64.9%;相对分子质量为53 417.9,理论等电点为6.83,在构成该蛋白所编码的氨基酸中亮氨酸(Leu)和脯氨酸(Pro)的含量最高,分别为13.4%和9.5%,总的带正电(Arg+Lys)和负电(Asp+Glu)残基分别为46和47;西藏类乌齐牦牛ATGL基因编码区核苷酸序列与普通牛、野猪、人、绵羊、山羊、绿头鸭、原鸡、小家鼠的核酸序列一致性分别为99.58%、87.52%、87.78%、96.26%、95.93%、67.63%、64.44%、82.65%;西藏类乌齐牦牛ATGL基因编码氨基酸序列与普通牛、野猪、人、绵羊、山羊、绿头鸭、原鸡、小家鼠的氨基酸序列一致性分别为99.79%、87.45%、87.66%、95.06%、96.09%、73.14%、69.56%、87.53%;ATGL蛋白为不稳定的跨膜蛋白,无信号肽;其二级结构主要以α-螺旋、β-折叠以及无规卷曲为主,其中94个氨基酸残基参与了16个α-螺旋的形成(占39.11%),35个氨基酸残基参与了9个β-折叠的形成;在三级结构中,其N端存在1个Patatin结构域。说明西藏牦牛ATGL基因在编码区序列存在明显的碱基偏倚性,在进化关系上ATGL基因无论核苷酸序列还是氨基酸序列都有较高的保守性。 展开更多
关键词 西藏牦牛 ATGL基因 克隆测序 同源性比对 生物信息学分析
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小麦TaXRCC1基因的克隆及生物信息学分析 被引量:6
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作者 张蕾 于永昂 杨天佑 《河南科技学院学报(自然科学版)》 2015年第6期1-7,共7页
为了研究X线修复交叉互补基因1(X-ray repair cross complementing 1,XRCC1)的结构和功能,利用RT-PCR方法克隆了小麦XRCC1基因,命名为TaXRCC1(Gen Bank登录号:KP772259),并对其进行生物信息学分析.序列分析结果显示,TaXRCC1基因开放阅... 为了研究X线修复交叉互补基因1(X-ray repair cross complementing 1,XRCC1)的结构和功能,利用RT-PCR方法克隆了小麦XRCC1基因,命名为TaXRCC1(Gen Bank登录号:KP772259),并对其进行生物信息学分析.序列分析结果显示,TaXRCC1基因开放阅读框长1 033 bp,编码350个氨基酸;TaXRCC1蛋白相对分子质量为38 040,p I为5.37.该蛋白序列无信号肽,是亲水性蛋白,二级结构中以无规则卷曲(41.71%)和α-螺旋(40.0%)为主.聚类分析结果显示,TaXRCC1基因与水稻和玉米XRCC1基因亲缘关系最近.为进一步研究XRCC1基因的功能奠定了基础. 展开更多
关键词 小麦 X线修复交叉互补基因1(XRCC1) 基因克隆 生物信息学分析
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东北雷公藤DXR HMGR基因克隆及生物信息学分析 被引量:3
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作者 郭思远 闫琦 李佳 《中国现代中药》 CAS 2019年第11期1482-1488,共7页
目的:克隆东北雷公藤萜类物质生物合成关键酶基因3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase,HMGR)基因和1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate reductoisomerase,D... 目的:克隆东北雷公藤萜类物质生物合成关键酶基因3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase,HMGR)基因和1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate reductoisomerase,DXR)基因全长,并对其进行生物信息学分析。方法:根据东北雷公藤转录组数据,设计特异性引物,采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术克隆东北雷公藤DXR、HMGR基因编码区的全长序列,并进行一系列生物信息学分析。结果:成功克隆东北雷公藤DXR、HMGR基因各1条,分别命名为TrDXR和TrHMGR,两者分别长1410、1770 bp,编码469个和589个氨基酸。TrDXR为亲水性蛋白,亚细胞定位在叶绿体,无跨膜结构,转运肽定位于叶绿体,含有2个结合功能域和2个活性位点基序;TrHMGR为疏水性蛋白,亚细胞定位在内质网,有跨膜结构,无转运肽,含有4个结合功能域。TrDXR和TrHMGR与不同物种同源序列的相似性高,保守性强。结论:克隆获得TrDXR、TrHMGR基因cDNA全长,并对其生物功能进行了初步预测,为基因功能鉴定及东北雷公藤萜类物质分子形成机制研究奠定基础。 展开更多
关键词 东北雷公藤 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶 1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶 基因克隆 生物信息学分析
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香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基克隆与生物信息学分析 被引量:4
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作者 魏军亚 刘德兵 +3 位作者 陈业渊 魏守兴 谢子四 刘国银 《中国园艺文摘》 2015年第1期16-18,26,共4页
通过PCR技术成功克隆1个香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因的全长序列,并登录GeneBank,登陆号为FJ973633。利用生物信息学方法,分析香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因序列,对其推导的氨基酸的理化性质、亲水性/疏水... 通过PCR技术成功克隆1个香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因的全长序列,并登录GeneBank,登陆号为FJ973633。利用生物信息学方法,分析香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因序列,对其推导的氨基酸的理化性质、亲水性/疏水性、跨膜结构、导肽、二级结构进行预测,并对香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基的氨基酸做进化发育分析,为进一步了解香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基在香蕉光合吸收中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 香蕉1 5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基 克隆 序列分析
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麦洼牦牛TLR3基因编码区的克隆及生物信息学分析
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作者 陈亚冰 兰道亮 +3 位作者 林宝山 黄偲 黄勇 李键 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期184-188,共5页
利用分子克隆技术成功获得麦洼牦牛TLR3编码区基因序列,采用相关分析及预测软件对基因及其编码的蛋白质进行基本理化性质、二级结构及结构域等分析预测。结果表明该基因包含了1个2 715 bp的开放阅读框,编码904个氨基酸;所编码的蛋白质... 利用分子克隆技术成功获得麦洼牦牛TLR3编码区基因序列,采用相关分析及预测软件对基因及其编码的蛋白质进行基本理化性质、二级结构及结构域等分析预测。结果表明该基因包含了1个2 715 bp的开放阅读框,编码904个氨基酸;所编码的蛋白质二级结构主要由α螺旋及无规则卷曲为主;TLR3基因进化树及基因同源性比对结果表明TLR3基因及其保守,牦牛TLR3基因与黄牛、绵羊和马等哺乳动物遗传距离很近。 展开更多
关键词 麦洼牦牛 TLR3基因 克隆 生物信息学分析
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