阳和汤含药血清对膝骨性关节炎兔膝软骨MMP-1、MMP-3和TIMP-1表达的影响

目的:阳和汤含药血清对膝骨性关节炎兔膝软骨MMP-1、MMP-3和TIMP-1表达的影响。方法:按照阳和汤药配方水煎阳和汤汤剂,将10只新西兰大白兔5只/组随机分为两组,含药血清制备组兔50ml/只,早晚各灌胃1次,连续3d;空白组灌胃等剂量蒸馏水。末次灌胃3h后,腹主动脉取血,分离血清~20℃备用。将30只白兔10只/组随机分为假手术组、模型组和阳和汤含药血清治疗组(治疗组),采用改良Hulth法制备关节炎模型,构建模型当日,治疗组兔子右膝关节腔注射1.5ml含药血清,每日1次;假手术组和模型组注射等剂量的普通血清,连续注射7d。兔处死后取右膝软骨组织通过HE染色进行病理分析和TUNEL染色进行凋亡分析,商业试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)水平;westernblot分析软骨组织中Bcl-2、Bad、cleaved-caspase-3、MMP-1、MMP-3和TIMP-1蛋白表达。结果:HE病理分析结果显示,与模型组相比,治疗组兔膝关节软骨损伤明显改善,Tunel显示凋亡细胞比例明显降低(P<0.05),同时软骨组织中MDA和血清中LDH的水平明显降低,SOD含量显著上升(P<0.05);Westernblot结果显示,与模型组相比,治疗组兔软骨组织中MMP-1的表达量明显降低,MMP-3和TIMP-1蛋白表达显著提高(P<0.05)。结论:阳和汤含药血清能够通过降低MMP-1的表达,上调MPP-3和TIMP-1的表达改善兔膝骨性关节炎软骨损伤。