解脂假丝酵母中神经酰胺的鉴别和定量分析

采用制备型薄层板分离解脂假丝酵母 (Yarrowialipolitica)中与神经酰胺标样近似的脂类成分 ,将其用于二级质谱分析 ,确认了其结构为脂肪酸碳链长度为 2 4的神经酰胺。结合高效液相色谱 蒸发光散射检测器 (HPLC ELSD)的检测方法 ,首次定量报道了解脂假丝酵母中神经酰胺的含量为 2 5‰。

氮源对解脂耶氏酵母合成共轭亚油酸的影响

为了提高解脂耶氏酵母重组菌株合成反-10,顺-12-共轭亚油酸的产量,以YNBDSa为发酵培养基进行摇瓶发酵,研究氮限制策略及氮源种类对菌株合成脂肪酶Lip2、亚油酸异构酶PAI及反-10,顺-12-共轭亚油酸产量的影响。结果表明:高氮培养基更利于菌体生长以及产物的合成,反-10,顺-12-共轭亚油酸产量达到4.3 g/L,是低氮培养基对应结果的8.6倍;采用有机氮为氮源时,Lip2酶活及PAI表达量显著高于无机氮的结果,反-10,顺-12-共轭亚油酸产量最高达到4.6 g/L,是无机氮结果的46倍。

解脂假丝酵母中神经酰胺合成的外部影响因素

为研究利用酵母发酵生产神经酰胺的可行性,利用高效液相色谱/蒸发光散射检测器作为分析手段,考察了解脂假丝酵母(Yarrowia lipolitica)在各种发酵条件下生产神经酰胺的能力.在各种可能的影响因素中,提高溶氧与乙醇刺激均能增加细胞内神经酰胺质量分数,在这两种条件下其占细胞干重的比例分别比对照提高2.5倍及3.3倍,最高可将其从占细胞干重的 0 25%提升到0 84%.其它培养条件对神经酰胺质量分数的影响则不明显或造成一定程度的下降.

外源底物亚油酸对解脂耶氏酵母重组菌株合成共轭亚油酸的影响

为了提高解脂耶氏酵母重组菌株的反-10,顺-12-共轭亚油酸(t10,c12-CLA)产量,采用YNBDL培养基进行摇瓶发酵,考察了在培养基中添加不同纯度的亚油酸对解脂耶氏酵母合成t10,c12-CLA的影响。结果表明:亚油酸纯度的提高对菌株的生长和产脂未产生影响,且t10,c12-CLA的产量随亚油酸纯度的增加而提高,最高产量可达3.7 g/L;用大豆油替代培养基中的亚油酸,t10,c12-CLA的转化率从20%提高至25%,菌株生长、产脂及t10,c12-CLA产量与添加纯度为65%亚油酸的结果相近。实验证明解脂耶氏酵母重组菌株能够高效转化富含亚油酸的植物油合成t10,c12-CLA。