牛磺酸缓解脂质氧化日粮对黄河鲤生长性能和肠道健康的负面影响

为了探究牛磺酸对脂质氧化饲料饲喂下黄河鲤生长性能和肠道健康的影响,实验先用等量的氧化鱼油(记为OFO)替换基础日粮(记为FO)中的新鲜鱼油,接着将不同含量(0.4%、0.8%和1.2%,质量分数)的牛磺酸分别加入OFO组饲料中(分别记为T0.4、T0.8和T1.2),对初始体重为(8.74±0.01)g的黄河鲤进行为期10周的养殖实验。结果显示,与FO组相比,OFO组的终末体重、增重率、特定增长率和饲料效率均显著降低。上述所有指标在T0.4、T0.8和T1.2组中均显著高于OFO组。适量牛磺酸可抑制氧化脂质饮食引起的nrf2 mRNA表达水平的降低和keap1 mRNA表达水平的升高,并且显著提高受Nrf2调控的下游转录因子(gr、gpx和sod)的mRNA表达水平。牛磺酸还能缓解氧化脂质饲料引起的肠道消化酶活性、绒毛高度、绒毛宽度和肌层厚度的降低。另外,OFO组中肠道微生物组成的丰度和多样性显著降低,条件致病菌丰度明显升高,而有益菌的丰度却有所下降,这些不良现象在牛磺酸组中均得到明显改善。研究表明,牛磺酸可缓解脂质氧化饲料对黄河鲤造成的生长性能抑制、肠道组织结构破坏、消化功能下降及肠道菌群紊乱等不良影响。结合本研究结果,在氧化脂质饲料中牛磺酸的建议添加剂量为0.4%~0.8%。本研究为进一步探索牛磺酸对鱼类肠道的生物学功能奠定理论基础。

2种制备黄河鲤鱼染色体方法的比较及条件优化

以黄河鲤鱼为材料,采用体外肾细胞培养及空气干燥法制作染色体标本,通过对不同培养时间,不同秋水仙素处理时间获得的染色体分裂指数的比对,以期获得最佳的染色体制备条件.结果表明:在秋水仙素浓度及处理时间一定时,培养时间3d后分裂指数最高,为1.46%,且分裂相在前3d逐渐增多,第4d开始减少;同时发现,在培养时间一定时,秋水仙素处理时间为2h时分裂指数最高,为1.49%.因此认为最佳染色体制备条件为:培养时间3d,秋水仙素处理2h;与传统的体内注射PHA短期培养法制备的染色体标本相比,体外肾细胞培养法制备的标本背景清晰,染色后形态可辨,且染色体分散良好,彼此间没有交联,放大后染色体的测量较易完成,可以进行核型分析.

甲苯咪唑对黄河鲤过氧化氢酶活性的影响

为探讨甲苯咪唑对鲤鱼的致毒机理,采用静态水质接触染毒法,研究在不同暴露浓度(0、0.1、0.2、0.4、0.6 mg/L甲苯咪唑)和不同暴露时间(24、72、120、168 h)下甲苯咪唑对黄河鲤(Cyprinus carpio L.var.haematopterus Temminck et Schlegel)鳃、肝胰脏和肾脏里过氧化氢酶活性的影响。结果显示,甲苯咪唑对鲤鱼过氧化氢酶活性具有明显的诱导作用,呈现一定的剂量效应与时间效应,且随浓度的升高和时间的延长,过氧化氢酶活性呈先升高、后降低的变化趋势,特别是在暴露于甲苯咪唑72 h后,各处理浓度对黄河鲤鳃、肝胰脏和肾脏里过氧化氢酶活性的影响均达极显著水平。甲苯咪唑引起黄河鲤中毒的主要靶分子可能是过氧化氢酶,过氧化氢酶活性可作为鲤鱼甲苯咪唑中毒的指示指标。

壳寡糖对黄河鲤鱼肌肉营养成分的影响

为探究壳寡糖对黄河鲤鱼(Cyprinus carpio)肌肉营养成分的影响,选取270尾体重为(34±3)g的健康黄河鲤鱼幼鱼为研究对象,随机分为6个组,分别饲喂壳寡糖添加量为0%(对照组)、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%的饲料8周。结果表明,饲粮中添加适量的壳寡糖可以提高黄河鲤鱼肌肉中粗蛋白质和粗灰分的含量,降低水分含量及改善氨基酸含量的组成,在一定程度上提高了黄河鲤鱼肌肉品质,且对肌肉风味没有明显的影响。壳寡糖在黄河鲤鱼中的最适添加量为0.6%。

高糖饲料中添加沙棘粉对黄河鲤生长性能、抗氧化能力和非特异性免疫的影响

为研究沙棘粉对黄河鲤生长性能、抗氧化能力和非特异性免疫的影响,实验选用初始体重约为7.55 g的黄河鲤450尾,随机分为5组,即对照组(control组)、高糖组(HG组)、高糖+0.1%沙棘粉组(G-LSP组)、高糖+0.3%沙棘粉组(G-MSP组)和高糖+0.5%沙棘粉组(G-HSP组),开展为期10周的养殖实验。结果显示,与高糖组相比,G-HSP组黄河鲤的增重率(WGR)显著提高。与对照组相比,高糖组黄河鲤血清和肝胰脏中丙二醛(MDA)含量升高,过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和总抗氧化能力(TAOC)降低,而补充沙棘粉可减轻这些负面影响。高糖饲料抑制了肝胰脏和肌肉中nrf2mRNA的表达水平,上调了keap1 mRNA的表达水平。沙棘粉对高糖引起的nrf2 mRNA表达水平的降低和keap1 mRNA表达水平的升高有显著的抑制作用。沙棘粉可显著提高受Nrf2调控的下游转录因子(gr、cat、gpx和sod)的mRNA表达水平。此外,添加0.5%的沙棘粉能显著提高血清、脾脏和肠道中碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、溶菌酶(LZM)活性和白蛋白(Alb)含量。另外,沙棘粉可以恢复因高糖饲料造成的脾脏和肠道中nf-κb、il-1β和tnf-α的mRNA异常表达。研究表明,沙棘粉可以缓解高糖饲料造成的氧化应激和炎症损伤,同时促进黄河鲤生长、增强其抗氧化能力和免疫力。结合本研究结果,在饲料中的建议添加剂量为0.5%。

黄河鲤肌肉发育关键因子的多克隆抗体制备及验证

目前,水产养殖动物肌肉发育的研究多集中于转录水平,而蛋白质水平的研究较少,这种局限性制约了对水产养殖动物肌肉发育及生长的深入研究。本研究以黄河鲤白肌为原材料,采用原核表达的技术获得含抗原决定簇的配对盒转录因子7(Pax7)、肌肉转录调节因子(MyoD)、肌细胞生成素(MyoG)和生肌调节因子4(MRF4)4种融合蛋白,经纯化后免疫新西兰大耳兔,获得相应黄河鲤兔源多克隆抗体。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测效价,并以此抗体为工具,随机选取3尾黄河鲤,检测其白肌中Pax7、MyoD、MyoG和MRF4在蛋白质水平的表达情况。结果显示:4种融合蛋白的分子质量分别为15.60、16.90、16.91和19.35 ku,抗体的效价均达到2.4×106;经检测,黄河鲤白肌中Pax7、MyoD、MyoG和MRF4蛋白分子的免疫荧光信号强度无显著差异(P>0.05)。本研究制备的黄河鲤肌肉发育关键因子的多克隆抗体可为进一步定量分析黄河鲤肌肉发育关键标志性蛋白分子的表达提供有力的工具。