橄榄苦苷调节Hippo-YAP/TAZ信号通路对膝骨关节炎大鼠滑膜炎症的影响

目的探讨橄榄苦苷(OL)通过调节Yes相关蛋白(YAP)/转录共激活因子PDZ结合基序(TAZ)信号通路对膝骨关节炎(KOA)大鼠滑膜炎症的影响。方法采用改良的Hulth法构建KOA大鼠模型,并随机分为Model组、低剂量OL组(20 mg/kg)、高剂量OL组(40 mg/kg)、高剂量OL+VT103组(40 mg/kg+10 mg/kg YAP/TAZ抑制剂),每组12只,另取12只大鼠作为正常对照组(NC组)。观察各组大鼠的情况,Lequesne MG评分对各组大鼠行为学进行评估;ELISA试剂盒检测大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的表达;苏木精-伊红(HE)染色检测大鼠滑膜组织的病理损伤;qRT-PCR法检测滑膜组织中YAP和TAZ mRNA的表达;Western blot检测大鼠滑膜组织中YAP、磷酸化YAP(p-YAP)、磷酸化TAZ(p-TAZ)、TAZ、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果与NC组比较,Model组大鼠Lequesne MG评分升高、血清中TNF-α和IL-6的表达增加、YAP和TAZ mRNA表达增加、p-YAP/YAP、p-TAZ/TAZ、Bax蛋白表达升高(P<0.05);与Model组比较,低剂量、高剂量OL组大鼠Lequesne MG评分降低、血清中TNF-α和IL-6的表达减少、YAP和TAZ mRNA表达减少、p-YAP/YAP、p-TAZ/TAZ、Bax蛋白表达降低(P<0.05);VT103可明显减弱OL对KOA大鼠滑膜组织的保护作用(P<0.05)。结论OL可能通过激活YAP/TAZ信号通路减轻膝骨关节炎大鼠滑膜炎症。

扁蒴藤素调节YAP/TAZ信号通路对创伤性关节炎大鼠的治疗作用研究

目的探究扁蒴藤素(PM)调节Yes相关蛋白(YAP)/转录共激活因子PDZ结合基序(TAZ)信号通路对创伤性关节炎(PTOA)大鼠的治疗作用。方法将SD雄性大鼠随机分为对照组、PTOA组、低剂量PM组(PM-L组,100 mg/kg PM)、高剂量PM组(PM-H组,200 mg/kg PM)和高剂量PM+YAP抑制剂VTPF组(PM-H+VTPF组,200 mg/kg PM+10 mg/kg VTPF),每组12只。记录大鼠热痛阈值、压痛阈值的变化。HE染色观察大鼠软骨组织病理学变化,并进行Mankin s评分,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠软骨组织中炎症因子一氧化氮(NO)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-3水平。TUNEL染色观察大鼠软骨组织细胞凋亡的情况。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实验检测大鼠软骨组织TAZ、IL-1β、TNF-αmRNA水平。Western Blot检测大鼠软骨组织YAP/TAZ信号通路相关蛋白的表达情况。结果与对照组相比,PTOA组大鼠热痛阈值、压痛阈值、软骨组织YAP磷酸化水平、TAZ蛋白水平与mRNA水平显著降低(P<0.05),软骨组织IL-1β、TNF-α及其mRNA水平、NO、MMP-1、MMP3水平、细胞凋亡率、Mankin s评分显著升高(P<0.05),HE显示软骨层变薄,结构不清晰,软骨细胞大量丢失、排列紊乱。与PTOA组相比,PM-L组、PM-H组大鼠相关指标变化与上述相反(P<0.05),软骨组织病变减轻。YAP抑制剂VTPF减轻了PM对PTOA的治疗作用。结论PM可能通过激活YAP/TAZ信号通路,对PTOA大鼠具有一定的治疗作用。

YAP和TAZ在宫颈癌中表达及临床意义

目的探讨Yes相关蛋白(YAP)和转录共激活因子PDZ结合基(TAZ)在宫颈癌组织和正常宫颈组织中表达及意义,分析二者与宫颈癌患者临床特征的相关性。方法采用免疫组化法检测65例宫颈癌组织(宫颈癌组)和33例正常宫颈组织(正常组)中YAP、TAZ蛋白表达。结果YAP、TAZ阳性表达率在宫颈癌组分别为83.07%、75.38%,在正常组分别为21.21%、12.12%,差异均有统计学意义(P<0.05)。在宫颈癌组织标本中YAP表达与组织浸润深度相比较差异有统计学意义(P<0.05),TAZ表达则与组织浸润深度相比较差异无统计学意义(P>0.05),而二者与宫颈癌组织分化程度、淋巴结转移和国际妇产科联盟(FIGO)分期均有统计学意义(P<0.05),与年龄无相关性(P>0.05)。结论YAP与TAZ蛋白在宫颈癌组织中高表达,Hippo信号通路的转录共激活因子YAP/TAZ蛋白在宫颈癌发生发展过程中起明显促进作用。

YAP/TAZ在肿瘤细胞上皮-间充质转化中作用的研究进展

Yes相关蛋白(YAP)/转录共激活因子PDZ结合基序(TAZ)/作为Hippo信号通路级联的下游效应因子,在器官生长、组织再生、细胞增殖等中具有关键调控作用。在哺乳动物细胞中,Hippo通路的激酶级联反应通过磷酸化YAP/TAZ来抑制YAP/TAZ的活性,从而调控器官的大小和肿瘤的形成。上皮-间充质转化作为肿瘤转移的首发事件,是肿瘤发展的关键因素,而YAP/TAZ在调控肿瘤细胞上皮-间充质转化中具有重要作用。而作为核心的YAP/TAZ必将成为癌症和再生药物中最有吸引力的治疗靶点。

Hippo信号通路与相关疾病的研究进展

Hippo信号通路是在果蝇中发现的一条在进化上高度保守,参与调控器官大小及细胞增殖、凋亡的重要信号转导通路,通过一系列激酶级联反应发挥作用。目前已证实Hippo信号通路在肿瘤的发生发展中起关键作用,并且随着对Hippo信号通路的深入研究,发现其与心血管系统、神经系统、免疫系统及其他系统也有重要关系。本研究综述Hippo信号通路及其在肿瘤和各器官系统疾病中的研究进展,并展望Hippo信号通路的研究前景。

25-OH维生素D通过调控TGF-β介导的YAP/TAZ核转位机制对新生儿感染性肺炎的抗炎作用研究

目的探讨25-OH维生素D(25-OH vitamin D,25-OH-VD)对新生儿感染性肺炎(neonatal infectious pneumonia,NIP)的抗炎作用及其作用机制。方法选取2022年1月~2023年1月成都市妇女儿童中心医院收治的65例NIP患儿,根据病情严重程度,分为轻症组(n=34)和重症组(n=31),另选取同期60例健康新生儿为对照组。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清25-OH-VD,白细胞介素-2(inteleukin-2,IL-2)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和IL-1β水平;蛋白免疫印迹法检测外周血单个核细胞中维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)、细胞核转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)/Yes相关蛋白(nucleus-Yes-associated protein,n-YAP)和细胞核转录共激活因子PDZ结合基序(nucleus-transcriptional coactivator with PDZ-binding motif,n-TAZ)通路相关蛋白表达。脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激人肺上皮细胞构建NIP体外模型,分为Control组、LPS组和LPS+VD组;CCK-8检测细胞活力;qRT-PCR检测各组细胞中细胞色素P450家族成员28B1(recombinant cytochrome P45027B1,CYP27B1)和VDR的mRNA表达;免疫细胞化学法检测各组细胞YAP阳性细胞核数;免疫荧光检测各组细胞YAP/TAZ复合物核转位;蛋白免疫印迹法检测各组细胞炎性因子相关蛋白表达。结果与对照组相比,轻症组和重症组患儿血清中IL-2(1.91±0.18μg/L,2.63±0.27μg/L vs 1.05±0.12μg/L),IFN-γ(1.73±0.13μg/L,2.18±0.19μg/L vs 1.03±0.07μg/L),TNF-α(1.79±0.08μg/L,2.38±0.13μg/L vs 0.97±0.04μg/L)和IL-1β(2.18±0.07μg/L,2.59±0.11μg/L vs 0.96±0.02μg/L)含量以及TGF-β(1.67±0.21,2.43±0.42 vs 1.02±0.04),n-YAP(2.08±0.11,4.23±0.37 vs 0.99±0.02)和n-TAZ(2.47±0.42,4.21±0.58 vs 1.03±0.05)蛋白表达逐渐升高,25-OH-VD(12.57±2.21μg/L,7.85±2.03μg/L vs 16.76±1.02μg/L)含量和VDR(0.73±0.09,0.51±0.06 vs 1.03±0.08)蛋白表达逐渐降低,差异具有统计学意义(F=18.983~56.782,均P<0.001)。细胞实验结果显示,与Control组相比,LPS组细胞存活率在12h(76.23%±0.73%vs 116.72%±2.14%),24 h(57.23%±0.94%vs 125.76%±1.67%)和48 h(41.23%±0.56%vs 138.56%±1.35%)时显著降低(t=10.342,26.562,37.821);YAP阳性细胞数(47.35±3.47个vs 12.46±1.34个)和YAP/TAZ复合物核转位率(2.56%±0.32%vs 1.01%±0.06%)升高(t=46.362,26.921);IL-2(2.03±0.09 vs 1.03±0.08),IFN-γ(2.07±0.21 vs 1.02±0.04),TNF-α(2.18±0.11 vs 0.99±0.02)和IL-1β(3.17±0.42 vs 1.03±0.05)的蛋白表达水平升高(t=28.341,26.713,31.235,47.823),差异具有统计学意义(均P<0.001),而两组间CYP27B1和VDR mRNA表达差异无统计学意义(t=0.872,0.786,均P>0.05)。与LPS组比较,LPS+VD组在12 h(85.23%±0.36%),24 h(79.82%±0.63%),48 h(76.28%±0.72%)的细胞存活率和CYP27B1(4.42±0.14),VDR mRNA(5.13±0.56)表达升高,YAP阳性细胞核数(24.41±3.23个)和YAP/TAZ复合物核转位率(1.47%±0.26%)降低,IL-2(1.21±0.06),IFN-γ(1.13±0.42),TNF-α(1.03±0.37)和IL-1β(1.61±0.58)蛋白表达降低,差异具有统计学意义(t=7.263,19.892,23.145,27.872,26.982,14.762,13.623,18.273,25.314,27.873,22.134,均P<0.01)。结论血清25-OH-VD水平与NIP严重程度相关,外源性给予VD补充可通过调控TGF-β介导的YAP/TAZ核转位机制发挥抗炎作用,减轻NIP损伤。

Hippo信号通路在肝纤维化过程中的调控机制研究进展

肝纤维化是肝脏慢性损伤的一种修复反应,其特征为肝脏中细胞外基质的过量沉积,肝星状细胞(HSC)的激活是肝纤维化发生的中心环节。Hippo信号通路是一条高度保守的信号通路,其参与了哺乳动物多种细胞和器官的稳态调控,且能够通过调控多种细胞、趋化因子、分子信号等相互作用参与肝纤维化的发生发展。Hippo信号通路能够参与HSC的激活,其下游转录激活因子Yes相关蛋白(YAP)和含PDZ结合基序的转录共激活因子(TAZ)是HSC激活的关键调节因子。YAP/TAZ在肝纤维化过程中表达上调,并表现出广泛的核累积,抑制YAP/TAZ能有效改善肝纤维化的发生发展。因此,深入研究Hippo信号通路与肝纤维化的关系可以为肝纤维化患者的治疗提供新靶点。

毛兰素通过调节YAP/TAZ信号通路减轻糖尿病肾病大鼠肾纤维化

目的探讨毛兰素对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾纤维化的影响及调节机制。方法雄性SD大鼠分为对照组、模型组、地塞米松组、维替泊芬组、毛兰素低剂量组、毛兰素高剂量组以及毛兰素联合地塞米松用药组,每组10只。检测大鼠微量白蛋白尿(microalbuminuria,MAU)和肾功能相关指标水平;观察肾组织病理变化及胶原纤维沉积;检测肾组织中丙二醛和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平;实时定量荧光定量聚合酶链反应检测肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白介素(interleukin,IL)-1β、转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1信使(messenger,m)RNA水平;免疫印迹法检测Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)/PDZ结合基序的转录共激活因子(transcriptional co-activator with PDZ-binding motif,TZA)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、纤连蛋白(fibronectin,FN)以及纤溶酶原激活物抑制剂(plasminogen activator inhibitor-1,PAI)-1蛋白表达。结果与对照组相比,模型组和地塞米松组的MAU、血清肌酐(serum creatinine,Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、丙二醇、TNF-α、IL-1β、TGF-β1 mRNA水平及YAP、TAZ、CTGF、FN、PAI-1蛋白表达均升高,SOD活性降低(P<0.05);与模型组相比,维替泊芬组和毛兰素组的MAU、Scr、BUN、丙二醇、TNF-α、IL-1β、TGF-β1 mRNA水平及YAP、TAZ、CTGF、FN、PAI-1蛋白表达均降低,SOD活性升高(P<0.05);回补实验加入地塞米松后显示,高剂量毛兰素对DN大鼠的保护作用被逆转(P<0.05)。结论毛兰素可通过抑制YAP/TAZ信号通路减轻DN大鼠的肾纤维化。

Hippo信号通路在肝细胞癌诊治中作用的研究进展

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是全球最常见的恶性肿瘤之一,发病率和病死率均较高,然而其发生和发展机制仍不清楚。Hippo信号通路主要通过由核心分子构成的激酶链转导信号,抑制转录共激活因子入核,减少下游促增殖基因转录。近年来发现Hippo信号通路不仅调控肝发育和肝切除后的再生,而且与HCC的发生也密切相关。Hippo信号通路可调控HCC细胞增殖、转移、自噬、代谢重编程及免疫微环境,参与HCC对多种药物产生耐药的过程。研究Hippo信号通路在HCC中的作用对发现新的治疗靶点有重要意义。

Hippo信号通路在肺纤维化过程中调控机制的研究进展

Hippo信号通路是一条存在于从低等动物到高等动物,高度保守且由蛋白激酶和转录辅助激活因子组成的级联激酶反应链,整合来自细胞微环境的物理和化学信号,调节多种细胞的形态和功能。生理条件下,Hippo通过磷酸化核心信号轴负性调控YAP/TAZ的转录活性,进而调控下游靶基因转录,参与多细胞生物的增殖、凋亡、分化等生理过程。近年来研究表明,Hippo通路的激活与失活,参与肺纤维化病理过程。本文对Hippo信号通路与肺纤维化的最新研究进展进行综述,为研究肺纤维化的治疗提供参考。