姜黄素调控Yes相关蛋白1对子宫内膜癌Warburg效应及生物学行为的影响

目的:观察姜黄素调控Yes相关蛋白1 (YAP1)对子宫内膜癌糖酵解Warburg效应及生物学行为的影响。方法:将HEC-1B细胞分为对照组、NC-YAP1组、si-YAP1组及低、中、高剂量组。对照组不做任何处理,NC-YAP1组转染NC-YAP1质粒,si-YAP1组转染si-YAP1质粒,低、中、高剂量组细胞分别用20、40、80μmol/L的姜黄素处理。试剂盒检测各组细胞葡萄糖消耗量及乳酸含量;CCK-8法检测各组细胞增殖能力;流式细胞术检测各组细胞周期与凋亡;划痕法检测各组细胞迁移能力;Transwell法检测各组细胞侵袭能力。蛋白质印迹(Western blot)法检测YAP1、乳酸脱氢酶-A (LDH-A)、己糖激酶2 (HK2)、丙酮酸激酶2 (PKM2)蛋白表达。结果:与对照组比较,NC-YAP1组YAP1蛋白相对表达水平、乳酸含量及葡萄糖消耗量、LDH-A、HK2、PKM2蛋白水平、细胞增殖抑制率、G0/G1期比例及S期比例、细胞凋亡率、划痕愈合率、细胞侵袭抑制率差异均无统计学意义(P>0.05),si-YAP1组及低、中、高剂量组YAP1蛋白相对表达水平、葡萄糖消耗量及乳酸含量、LDH-A、HK2、PKM2蛋白水平、S期比例、划痕愈合率均降低(P<0.05),细胞增殖抑制率、G0/G1期比例、细胞凋亡率、细胞侵袭抑制率均升高(P<0.05)。与NC-YAP1组比较,siYAP1组及低、中、高剂量组细胞YAP1蛋白相对表达水平、葡萄糖消耗量及乳酸含量、LDH-A、HK2、PKM2蛋白水平、S期比例、划痕愈合率均降低(P<0.05),细胞增殖抑制率、G0/G1期比例、细胞凋亡率细胞侵袭抑制率均升高(P<0.05),且低、中、高剂量组上述指标均呈剂量依赖性(P<0.05)。与si-YAP1组比较,低、中剂量组细胞中YAP1蛋白相对表达水平均增加(P<0.05),而高剂量组差异无统计学意义(P>0.05);低剂量组葡萄糖消耗量及乳酸分泌量、LDH-A、HK2、PKM2蛋白水平、S期比例、划痕愈合率均增加(P<0.05),细胞增殖抑制率、G0/G1期比例、细胞凋亡率、细胞侵袭抑制率均降低(P<0.05),高剂量组葡萄糖消耗量及乳酸分泌量、LDH-A、HK2、PKM2蛋白水平、S期比例、划痕愈合率均降低(P<0.05),细胞增殖抑制率、G0/G1期比例、细胞凋亡率、细胞侵袭抑制率增加(P<0.05),而中剂量组乳酸含量及葡萄糖消耗量、LDH-A、HK2、PKM2蛋白水平、细胞增殖抑制率、G0/G1期比例及S期比例、细胞凋亡率、划痕愈合率、细胞侵袭抑制率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:姜黄素可能通过抑制YAP1表达抑制子宫内膜癌细胞的Warburg效应、增殖、迁移及侵袭等恶性行为。

基于非靶向代谢组学技术探讨Yes相关蛋白1改善马兜铃酸I诱导小鼠肝损伤的机制

目的基于非靶向代谢组学技术探讨Yes相关蛋白1(YAP1)改善马兜铃酸I(Aristolochic acid I,AAI)诱导小鼠肝损伤的机制。方法随机选取8只3周龄雄性肝细胞特异性Yap1基因敲除(基因型为Yap1^(Flox/Flox),Albumin-Cre,简称Yap1^(LKO))小鼠作为Yap1^(LKO)+AAI组,8只Yap1Flox对照小鼠作为Yap1^(Flox)+AAI组。2组小鼠均按照2.5 mg·kg^(-1)·d^(-1)剂量腹腔注射AAI,连续14 d。采用鼠尾PCR法鉴定基因型;微板法测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;HE染色法观察肝脏组织病理变化;免疫组织化学法测定肝组织中YAP1蛋白表达情况。采用非靶向代谢组学方法分析肝脏组织差异代谢物,利用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用技术分析样品,通过主成分分析(PCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)筛选差异代谢物,利用HMDB数据库、METLIN数据库对代谢物进行鉴定,通过KEGG数据库对差异代谢物进行通路富集分析。结果(1)AAI诱导14 d,Yap1^(LKO)小鼠的体质量增长低于Yap1^(Flox)小鼠,但差异无统计学意义(P>0.05)。在第14天,与Yap1^(Flox)+AAI组比较,Yap1^(LKO)+AAI组小鼠血清中的ALT、AST酶活性明显升高(P<0.05),肝脏组织病理损伤明显加重。Yap1^(Flox)小鼠肝脏有YAP1蛋白阳性表达,而Yap1^(LKO)小鼠无YAP1蛋白阳性表达。(2)通过代谢组学分析共筛选出139种显著变化(VIP>1且P<0.05)的差异代谢物,与Yap1^(LKO)+AAI组小鼠相比,Yap1Flox+AAI组小鼠的62种肝脏代谢物上调,包括胆碱、牛磺酸、亚牛磺酸、α-亚麻酸、桐油酸、鹅去氧胆酸等;77种代谢物下调,包括甘油磷酸胆碱、L-磷脂酰胆碱、L-谷氨酰胺、L-丝氨酸、L-谷胱甘肽、5-甲硫腺、苯丙氨酸、6-磷酸葡萄糖、乳酸、尿酸苷等。KEGG富集通路主要有胆碱代谢、甘油磷脂代谢、胰岛素抵抗、谷胱甘肽代谢等。结论肝细胞特异性Yap1基因敲除加重了AAI诱导的小鼠肝脏损伤,YAP1通过上调胆碱、牛磺酸等不饱和脂肪酸,参与调控胆碱代谢、甘油磷脂代谢等,从而改善AAI诱导的小鼠肝损伤。

情志应激激素受体调控Yes相关蛋白1影响乳腺癌细胞上皮间充质转化进程研究

目的:探究情志应激激素受体(GR)与Yes相关蛋白1(YAP1)对乳腺癌MCF-7细胞转移的调控机制,以期为乳腺癌的治疗提供新思路。方法:通过免疫组化实验分析乳腺癌组织和癌旁组织GR和YAP1的表达;将MCF-7细胞分为:si NC组、si GR组和si YAP1组,分别通过MTT实验、Transwell实验、细胞划痕实验和流式细胞术分析MCF-7细胞的增殖、侵袭、迁移能力及凋亡率,通过蛋白免疫印迹实验分析细胞GR和YAP1的表达水平。结果:与癌旁正常组织比较,乳腺癌组织YAP1与GR的表达水平升高。与si NC组比较,si GR组和si YAP1组的MCF-7细胞增殖能力、侵袭能力、迁移能力显著降低,凋亡率增加(P<0.05)。与si NC组比较,si GR组的MCF-7细胞的YAP1和GR表达水平降低(P<0.05),si YAP1组的MCF-7细胞的YAP1表达水平降低(P<0.05)。结论:乳腺癌患者的癌组织中YAP1与GR的表达水平升高。GR被激活后,通过调控细胞内的YAP1通路影响MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭能力以及凋亡率,进而导致乳腺癌MCF-7细胞转移,靶向调节YAP1抑制乳腺癌上皮间充质转化(EMT)发生可为乳腺癌患者提供新的治疗策略。

Yes相关蛋白1和散乱蛋白2对Luminal型乳腺癌预后的影响

目的研究Yes相关蛋白1(YAP1)和散乱蛋白2(DVL2)在Luminal型乳腺癌组织及癌旁组织中的表达情况,分析其与临床病理特征及预后的关系。方法采用Real-Time PCR和免疫组化方法检测202例Luminal型乳腺癌组织中YAP1、DVL2 mRNA和蛋白表达水平,分析YAP1和DVL2与乳腺癌患者临床病理特征及预后的关系;采用Cox回归分析乳腺癌患者无瘤生存时间的影响因素;Kaplan-Meier生存曲线分析乳腺癌患者YAP1、DVL2表达水平与无瘤生存时间的关系。结果DVL2蛋白的表达水平与乳腺癌患者的TNM分期、有无神经侵犯及癌栓有关。YAP1与腋窝淋巴结、TNM分期、有无神经侵犯及癌栓有关。YAP1 mRNA与DVL2 mRNA表达呈正相关,Cox回归分析结果显示DVL2和YAP1是乳腺癌患者无瘤生存时间的独立影响因素。Kaplan-Meier生存曲线显示DVL2高表达的乳腺癌患者无瘤生存时间较短,而YAP1高表达的乳腺癌患者的无瘤生存时间较长,联合DVL2和YAP1蛋白表达水平分析显示DVL2(-)YAP1(+)组中Luminal型乳腺癌患者的无瘤生存时间明显长于其他3组。结论DVL2和YAP1在Luminal型乳腺癌组织及癌旁正常组织中有不同程度的表达,与乳腺癌患者的某些临床病理特征及无瘤生存时间有关,二者在乳腺癌组织中的表达水平有相关性。

子宫颈癌病理分级与微血管密度、Yes相关蛋白1的相关性研究

目的:探讨子宫颈癌病理分级与微血管密度(MVD)、Yes相关蛋白1(YAP1)的相关性。方法:选择2019年3月-2022年6月临沂市第三人民医院收治的子宫颈癌患者53例为对象,常规采集病灶组织及癌旁组织(距离病灶≥3 cm)。根据子宫颈癌病理分级分为高分化组、中分化组和低分化组;采用免疫组织化学法测定不同组织中、不同病理分级下MVD、YAP1阳性率;采用Spearman相关系数法对子宫颈癌病理分级与MVD、YAP1阳性率进行分析。结果:子宫颈癌病灶组织中MVD、YAP1阳性率均高于癌旁组织(P<0.05);免疫组化染色结果显示,子宫颈癌病灶组织YAP1表达于细胞质与细胞核;而MVD表达于细胞质,呈棕褐色、棕黄色,着色度较高;而癌旁组织中阳性染色细胞较少,MVD、YAP1着色程度较低;低分化组MVD、YAP1阳性率均高于高分化组与中分化组(P<0.05);中分化组MVD、YAP1阳性率均高于高分化组(P<0.05);Spearman相关系数法结果显示,子宫颈癌患者病理分级与MVD、YAP1表达均呈负相关(rs=-0.692、-0.452)。结论:MVD、YAP1在子宫颈癌病灶组织中呈阳性高表达,其高表达水平与病理分级存在一定相关性,能为临床诊疗提供新方法。

沉默Yes相关蛋白1对人非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭的影响

目的研究Yes相关蛋白1(YAP1)在非小细胞肺癌细胞增殖、细胞周期、迁移、侵袭中的作用。方法通过慢病毒介导的小干扰RNA靶向抑制人非小细胞肺癌细胞株A549中YAP1基因的表达,采用CCK-8法、流式细胞术分别检测沉默YAP1对A549细胞增殖及凋亡周期的影响,Transwell实验观察沉默YAP1对A549细胞迁移、侵袭能力的影响。结果沉默YAP1后,A549细胞YAP1mRNA和蛋白表达均下调(P<0.01),CCK-8实验结果显示沉默YAP1抑制A549的增殖、增加G0/G1期的细胞比例(P<0.01),Transwell实验结果示沉默YAP1抑制A549细胞的迁移、侵袭(P<0.01)。结论沉默YAP1基因对非小细胞肺癌细胞的恶性生物学特征具有抑制作用,YAP1可能成为肺癌治疗的潜在靶标。

Yes相关蛋白1在乳腺癌中的表达及临床意义

目的探讨yes相关蛋白1(YAP1)在正常乳腺组织及乳腺癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学Envision法检测133例乳腺浸润性导管癌,37例乳腺导管原位癌及47例癌旁组织中YAP1的表达。结果 (1)YAP1在乳腺癌旁组织中的阳性率(81%)明显高于乳腺癌组织中的阳性率(46%)(P<0.05);(2)YAP1在乳腺导管原位癌中的阳性率为43%,与乳腺浸润性导管癌之间的差异无统计学意义(P=0.925);(3)YAP1阳性表达与患者年龄、肿瘤大小及淋巴结转移转移无关,而与乳腺癌的分子分型有关(P<0.05)。结论在乳腺癌中YAP1可能作为抑癌基因发挥作用,YAP1的表达对乳腺癌的治疗有一定意义。

Yes相关蛋白1与肿瘤相关性的研究进展

转录辅激活因子Yes相关蛋白1(YAP1)作为Hippo信号通路下游的主要效应因子,在调控器官大小、促进组织再生和维持干细胞自我更新等方面发挥着重要作用。随着对YAP1研究的深入,发现YAP1在多种肿瘤组织中呈高表达状态,并可促进肿瘤的增殖、侵袭和转移。因此,YAP1有望成为肿瘤早期诊断的分子标志物及肿瘤治疗的潜在靶点。本文就YAP1的结构、生物学功能及其与肿瘤的相关性予以综述。

微小RNA-141和Yes相关蛋白1在胃癌组织中的表达及其对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响

目的:探究微小RNA-141(miR-141)和Yes相关蛋白1(YAP1)在胃癌组织中的表达情况,同时分析它们对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。方法:选择行胃癌手术的40例患者为研究对象,取手术切除的胃癌组织及癌旁组织,采用荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-141表达,采用免疫组化检测YAP1表达。分析miR-14、YAP1表达与胃癌患者临床病理特征的相关性。分别使用miR-141和YAP1对胃癌SGC-7901细胞系进行干预,分析它们对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。结果:胃癌组织中miR-141表达水平低于癌旁组织,YAP1蛋白表达水平高于癌旁组织(均P<0.05)。miR-141表达水平与胃癌患者组织分化程度及TNM分期存在明显相关性(均P<0.05)。YAP1表达水平与胃癌患者TNM分期、肿瘤直径以及组织分化程度相关(均P<0.05)。在24、48、72 h三个时间点,与阴性对照组比较,转染miR-141模拟物后,胃癌SGC-7901细胞活力出现明显降低,而转染miR-141抑制剂后胃癌SGC-7901细胞活力出现明显升高(均P<0.05)。在24、48、72 h三个时间点,与阴性对照组比较,转染YAP1沉默物siRNA YAP1的胃癌SGC-7901细胞活力出现明显降低,细胞迁移和侵袭能力明显下降(均P<0.05)。结论:胃癌组织中miR-141低表达,YAP1高表达,且两者表达水平同胃癌SGC-7901细胞活性密切相关,可以考虑将miR-141和YAP1作为胃癌治疗的新靶点。

Yes相关蛋白1在食管癌发生发展及治疗中的作用研究进展

食管癌是我国高发肿瘤,患者5年生存率低,亟需寻找新的治疗靶点。Yes相关蛋白1(YAP1)作为Hippo信号通路下游重要的效应因子,在肿瘤的发生发展及治疗抵抗中发挥了非常重要的作用。YAP1在食管癌细胞中高表达,可以促进食管癌细胞增殖、抑制食管癌细胞凋亡、增强食管癌细胞的侵袭和转移,并且导致食管癌患者的化疗耐药和放疗抵抗。靶向YAP1治疗可能给食管癌患者带来临床获益,将YAP1抑制剂与抗癌药物或放疗联合应用或是治疗食管癌的新策略。

蛋白激酶Cι/Yes相关蛋白1与人乳头瘤病毒在肿瘤微环境中的作用研究进展

宫颈癌是女性最常见恶性肿瘤之一,有研究已证实人乳头瘤病毒(HPV)感染特别是高危型HPV,是引起宫颈癌的主要原因,但仅1%HPV感染者转变为宫颈癌,研究认为免疫抑制是其协同因子之一。蛋白激酶Cι(PKCι)是一种非经典型蛋白激酶C,PKCι通过下游效应因子Yes相关蛋白1(YAP1)促进免疫抑制,而YAP1则通过募集骨髓来源的抑制性细胞和CD8^+T细胞来促进肿瘤的免疫抑制;调节PKCι/YAP1为宫颈癌免疫治疗提供可能的靶点。本文对PKCι/YAP1与HPV在肿瘤微环境中的作用研究进展进行综述。

miR-27a-3p靶向调控Yes相关蛋白1促进人牙髓干细胞成骨分化

目的探讨miR-27a-3p靶向调控Yes相关蛋白1(YAP1)基因对人牙髓干细胞(hDPSCs)成骨分化的影响。方法体外分离培养hDPSCs细胞,将miR-27a-3p模拟物(miR-27a-3p mimics,过表达组)、miR-27a-3p抑制剂(miR-27a-3p inhibitor,敲低组)、miR-NC(对照组)分别转染至hDPSCs细胞中,检测miR-27a-3p表达水平的改变对YAP1表达的影响。采用TargetScan数据库检索miR-27a-3p的靶基因。应用双荧光素酶报告基因实验验证miR-27a-3p和YAP1的靶向关系。将miR-27a-3p mimics、miR-NC转染到hDPSCs特定时间后收集细胞,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot等检测经典的成骨标志物骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、成骨转录因子-2(RUNX2)、骨桥蛋白(OPN)、YAP1 mRNA和蛋白表达水平。应用MTT比色法验证miR-27a-3p和YAP1对细胞增殖活性的影响。结果过表达组hDPSCs细胞中miR-27a-3p的表达水平较对照组显著上调(P<0.05),YAP1 mRNA和蛋白的表达水平下调(P<0.05)。而敲低组miR-27a-3p的表达水平较对照组明显下降(P<0.05),YAP1 mRNA和蛋白的表达水平增高(P<0.05)。生物信息学分析表明,miR-27a-3p作用于YAP1的3′UTR区,双荧光素酶报告基因实验验证了YAP1是miR-27a-3p的靶基因。qRT-PCR、Western blot检测显示,与对照组相比,miR-27a-3p过表达时hDPSCs中BMP-2、RUNX2、OPN mRNA和蛋白的表达水平上调(P<0.05)。MTT检测显示,miR-27a-3p过表达可明显上调hDPSCs增殖率(P<0.05),而YAP1过表达则会降低hDPSCs的增殖率(P<0.05)。结论miR-27a-3p可能通过靶向调控YAP1促进hDPSCs成骨分化。

卵巢上皮癌CD24和Yes相关蛋白1的表达及其临床意义

目的检测卵巢癌上皮组织中关于CD24和Yes相关蛋白1(YAP1)的发生发展机制,分析二者与卵巢癌中临床参数的表达及预后的相关性。方法收集44例正常卵巢组织标本和44例卵巢上皮癌标本,应用免疫组织化学方法检测CD24和YAP1的表达情况,分析二者的表达与不同临床参数的关系、二者表达的相关性,以及二者的表达与生存时间的关系。结果在卵巢癌上皮组织中CD24和YAP1均有明显的高表达(P<0.05);CD24在卵巢癌上皮组织中的高表达与卵巢癌的临床分期、分化程度呈明显相关性(P<0.05);这种类型癌组织中二者的表达水平呈正相关(r=0.501,P<0.05)。经Kaplan-Meier法生存分析,CD24和YAP1阳性情况下,患者的生存期减少(P<0.05)。结论CD24、YAP1蛋白在上皮性卵巢癌组织中呈现高表达,CD24、YAP1蛋白和上皮性卵巢癌的发生发展密切相关。

Yes相关蛋白1在胆囊癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨Yes相关蛋白1(YAP1)在胆囊癌组织中的表达及其临床意义。方法选取62例胆囊癌及16例癌旁石蜡组织标本,常规福尔马林固定、脱水、包埋、切片处理,采用Envision二步法免疫组织化学染色法检测YAP1的表达情况,并分析癌组织YAP1阳性率与临床病理特征及预后的相关性。结果 YAP1在胆囊癌及癌旁组织阳性着色主要定位于细胞质和(或)细胞核,胆囊癌组织YAP1表达阳性率高于癌旁组织(P <0. 05)。胆囊癌癌组织YAP1表达阳性率在伴淋巴结或远处转移者中升高,且随原发肿瘤-区域淋巴结-远处转移(TNM)分期、分化程度的增加而增加,且胆囊癌YAP1表达阳性者预后较YAP1表达阴性者差(均P <0. 05)。结论胆囊癌癌组织中YAP1多呈阳性表达,且YAP1表达可能与胆囊癌TNM分期、分化程度、淋巴结转移及预后相关。

Yes相关蛋白1对胃癌顺铂化疗敏感性的影响及作用机制初探

目的探索性研究Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)对胃癌细胞SGC-7901生物学行为能力及顺铂化疗敏感性的影响,分析相关作用机制。方法于2019年1月至2020年12月采用反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫印迹试验(Western blot,WB)检测正常胃上皮黏膜细胞GES1和胃癌细胞SGC-7901中YAP1相对表达量表达差异。实验分为沉默(Lv-shRNA-YAP1)组、阴性对照(Lv-shRNA-NC)组、空白对照组,构建YAP1沉默重组慢病毒颗粒Lv-shRNA-YAP1和阴性对照Lv-shRNA-NC分别转染胃癌细胞SGC-7901,空白对照组不做任何处理,分别采用细胞计数8(Cell Counting Kit-8,CCK8)实验、划痕实验、Transwell实验观察YAP1对胃癌细胞增殖、运动、迁移、侵袭等生物学行为能力的影响;向3组细胞加入不同浓度顺铂溶液,采用CCK8实验检测各组细胞存活率及顺铂对细胞的半数有效抑制浓度(IC50),取空白对照组、Lv-shRNA-YAP1组细胞加入IC50顺铂溶液,进一步分为空白对照组、Lv-shRNA-YAP1组、顺铂组、Lv-shRNA-YAP1+顺铂组,采用RT-PCR实验和WB实验比较4组细胞中YAP1及其下游靶基因胰岛素样生长因子(insulin like growth factor,IGF)、苏氨酸蛋白激酶(prote in k inase B,Akt)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)表达情况。结果与正常胃上皮黏膜细胞GES1[mRNA(1.00±0.03),蛋白(1.00±0.02)]比较,YAP1在胃癌细胞SGC-7901中呈高表达[mRNA(6.43±0.43),蛋白(2.54±0.13)],差异均有统计学意义(t=11.821、8.371,均P<0.05)。空白对照组胃癌细胞在24 h、48 h、72 h的增殖能力分别为(0.44±0.05)、(0.72±0.05)、(0.97±0.04),细胞运动距离(82.32±4.53)%,细胞迁移及侵袭能力分别为(543±43)个、(586±54)个,Lv-shRNA-NC组分别为(0.40±0.05)、(0.68±0.04)、(0.92±0.05)、(84.42±5.42)%、(523±51)个、(573±54)个,Lv-shRNA-YAP1组胃癌细胞在24 h、48 h、72 h的增殖能力均明显降低[分别为(0.34±0.04),(0.52±0.04),(0.73±0.05),均P<0.05],细胞运动距离明显较小[(51.42±5.31)%,P<0.05],细胞迁移及侵袭能力均明显降低[分别为(432±44)个、(485±53)个,均P<0.05]。当顺铂浓度为0.5、1.0、2.0、4.0、8.0μg/ml时,Lv-shRNA-YAP1组胃癌细胞SGC-7901存活率均明显低于空白对照组和Lv-shRNA-NC组细胞(均P<0.05);Lv-shRNA-YAP1组顺铂对细胞的IC50为(1.48±0.33)μg/ml,明显低于空白对照组和Lv-shRNA-NC组[分别为(4.43±0.32)μg/ml,(4.18±0.42)μg/ml,均P<0.05]。空白对照组细胞中IGF、Akt、TGF-β的mRNA和蛋白相对表达量分别为(1.00±0.03)、(1.00±0.02)、(1.00±0.04),(1.00±0.02)、(1.00±0.04)、(1.00±0.03),Lv-shRNA-YAP1组分别为(0.58±0.03)、(0.62±0.03)、(0.39±0.03),(0.78±0.03)、(0.73±0.03)、(0.74±0.05),顺铂组分别为(0.67±0.02)、(0.73±0.03)、(0.40±0.02),(0.72±0.04)、(0.74±0.04)、(0.77±0.05),Lv-shRNA-YAP1组和顺铂组细胞中IGF、Akt、TGF-β的mRNA和蛋白相对表达量明显优于空白对照组细胞(均P<0.05),Lv-shRNA-YAP1+顺铂组细胞中IGF、Akt、TGF-β的mRNA和蛋白相对表达量[(0.70±0.02)、(0.68±0.03)、(0.34±0.04),(0.51±0.03)、(0.46±0.03)、(0.55±0.05)]则明显低于Lv-shRNA-YAP1组和顺铂组(均P<0.05)。结论YAP1蛋白在胃癌细胞SGC-7901中高表达,靶向沉默YAP1蛋白可有效改善胃癌细胞SGC-7901对顺铂的敏感性,抑制肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭,其机制可能与IGF、Akt、TGF-β表达下调有关。

Yes相关蛋白1在胃癌组织中的表达及与患者临床特征和预后的关系

目的探讨Yes相关蛋白1(YAP1)在胃癌组织中的表达及与患者临床特征和预后的关系。方法选取104例胃癌患者,均接受手术治疗,取胃癌组织和相应的癌旁组织,采用免疫组化法检测YAP1的表达情况,分析YAP1的表达与患者临床特征及预后的关系。YAP1与胃癌患者临床特征的相关性采用Spearman相关分析。结果胃癌组织中YAP1蛋白的阳性表达率为68.27%,明显高于癌旁组织的13.46%(P﹤0.01)。不同浸润深度、分化程度、TNM分期和淋巴结转移情况胃癌患者胃癌组织中YAP1蛋白阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,浸润深度为T_(3~4)、分化程度为低分化和未分化、有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期均是胃癌患者胃癌组织中YAP1蛋白表达的独立危险因素(P﹤0.05)。Spearman相关分析结果显示,YAP1阳性表达与胃癌患者浸润深度、分化程度、淋巴结转移、TNM分期均呈正相关(P﹤0.05)。随访6个月,104例胃癌患者病死9例,病死率为8.65%,其中YAP1阳性表达患者的病死率为9.86%,与YAP1阴性表达患者的6.06%比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论胃癌组织中YAP1的阳性表达率高于癌旁组织,且其表达与胃癌患者TNM分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关,可能成为临床治疗胃癌的新靶点。

姜黄素对A549肺癌细胞生物学特性及YES相关蛋白1表达的影响

目的:探讨姜黄素(curcumin)对A549肺癌细胞增殖、凋亡和迁移能力以及YES相关蛋白1(YAP1)表达的影响。方法:采用CCK8法检测姜黄素对A549细胞的IC50浓度;分别用10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L姜黄素处理A549肺癌细胞(Cur10组、Cur20组和Cur40组),CCK-8法、流式细胞术及Transwell小室实验检测姜黄素对A549细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响;采用WesternBlot检测姜黄素对YAP1蛋白表达影响。结果:姜黄素处理后,Cur10组、Cur20组和Cur40组细胞的增殖能力均显著低于BC组,增殖抑制率和凋亡率逐渐升高,迁移能力逐渐降低,且呈剂量依赖性;与对照组相比,Cur10组、Cur20组和Cur40组YAP1蛋白表达水平均显著降低,且Cur20组和Cur40组显著低于Cur10组,Cur40显著低于Cur20组。结论:姜黄素可以呈剂量依赖性抑制A549肺癌细胞增殖和迁移能力,促进其凋亡,其机制可能与对YAP1蛋白的抑制有关。

YES相关蛋白1和表皮生长因子受体在食管鳞癌中的表达及意义

目的探讨Hippo信号转导通路下YES相关蛋白1(YAP1)以及表皮生长因子受体(EGFR)的表达在食管鳞癌及正常组织中的临床意义。方法收集56例需手术的食管鳞癌患者的癌组织及癌旁正常组织。通过qRT-PCR、免疫组化法和Western blot检测YAP1与EGFR蛋白在癌和癌旁组织中的表达,分析其与临床特征的相关性。结果在食管鳞癌组织中无论是在RNA层面还是在蛋白水平,都存在YAP1与EGFR显著高表达,并且两者呈正相关,与食管鳞癌的临床分期及淋巴结转移密切相关。YAP1的阳性率与食管鳞癌的局部侵犯、分化程度密切相关。在食管中、低分化癌组织中,YAP1的阳性率显著高于高分化癌组织。Ⅲ期患者的食管癌组织中YAP1及EGFR的阳性率均显著高于Ⅰ、Ⅱ期的患者。YAP1及EGFR的阳性率在发生淋巴结转移者亦显著高于无淋巴结转移者。结论 Hippo信号通路下YAP1与EGFR在食管癌组织中高表达,与食管癌的临床分期及淋巴结转移密切相关。YAP1与EGFR在细胞增殖调控中共同起到重要的作用。

Krüppel样因子4和Yes相关蛋白1在食管鳞状细胞癌组织的表达

目的探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中Krüppel样因子4(KLF4)和Yes相关蛋白1(YAP1)的表达及临床意义。方法收集2017年5月至2022年12月大庆龙南医院(齐齐哈尔医学院第五附属医院)和大庆油田总医院病理学检查确诊的69例ESCC患者的癌组织和对应癌旁组织标本,采用免疫组织化学法检测上述组织中KLF4和YAP1表达水平,进行χ^(2)检验,结合临床资料分析两者的表达与ESCC临床病理特征的关系。组间比较采用χ^(2)=检验。结果ESCC癌组织中KLF4阳性表达率46.38%(32/69),明显低于对应癌旁组织中KLF4阳性表达率81.16%(56/69),差异有统计学意义(χ^(2)=18.066,P<0.01)。KLF4表达水平与ESCC患者淋巴结转移、TNM分期(TNM stage)明显相关(χ^(2)=4.512、5.301,P<0.05),KLF4表达水平与ESCC患者性别、年龄、组织学分化程度无明显相关(χ^(2)=0.002、0.006、0.165,P>0.05)。ESCC癌组织中YAP1阳性表达率63.77%(44/69),明显高于对应癌旁组织中YAP1阳性表达率15.94%(11/69),两者差异有统计学意义(χ^(2)=32.921,P<0.01)。YAP1表达水平与ESCC患者淋巴结转移、组织学分化程度、TNM分期明显相关(χ^(2)=6.287、4.540、4.681,P<0.05),YAP1表达水平与ESCC患者性别、年龄无明显相关(χ^(2)=0.0040.042,P>0.05)。结论ESCC癌组织中,KLF4表达下调和YAP1表达上调可能与ESCC进展和不良临床病理特征有关,检测KLF4和YAP1有助于判断ESCC生物学行为。

手术标本YAP1、POU2F2、Cath-D表达与局限性肾癌术后复发的相关性及预测意义

目的研究手术标本Yes相关蛋白1(YAP1)、POU2家族同源框2(POU2F2)和组织蛋白酶D(Cath-D)表达与局限性肾癌术后复发的相关性及预测意义。方法回顾性分析2019年1月至2022年3月新乡医学院第一附属医院收治的282例局限性肾癌手术患者的临床资料,根据术后2年随访期内(2例失访)复发情况分为复发组42例和未复发组238例。比较两组患者的基线资料以及手术标本YAP1、POU2F2、Cath-D表达水平,采用多因素Logistic回归分析局限性肾癌术后复发的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析手术标本YAP1、POU2F2和Cath-D表达单一及联合预测局限性肾癌术后复发价值,采用Pearson相关分析法分析手术标本YAP1、POU2F2和Cath-D表达与复发时间的相关性。结果复发组患者的2017AJCCTNM分期T2期、Fuhrman分级Ⅳ级患者占比分别为80.95%、40.48%,明显高于未复发组患者的62.31%、21.85%,差异均有统计学意义(P<0.05);复发组患者的YAP1阳性率、POU2F2 mRNA和Cath-D阳性率分别为78.57%、1.70±0.36和83.33%,明显高于未复发组患者的47.90%、1.48±0.41、50.00%,差异均有统计学意义(P<0.05);校正前多因素Logistic回归分析结果显示,2017AJCCTNM分期T2期、Fuhrman分级>Ⅱ级、YAP1阳性、POU2F2mRNA、Cath-D阳性均与局限性肾癌术后复发相关(P<0.05),校正后YAP1阳性、POU2F2 mRNA和Cath-D阳性仍是局限性肾癌术后复发的独立相关危险因素(P<0.05);ROC分析结果显示,三者联合预测局限性肾癌术后复发的AUC为0.915,敏感度为80.95%,特异度为89.00%,明显高于各指标单独预测(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,手术标本YAP1、POU2F2、Cath-D表达与复发时间呈负相关(r=-0.802、-0.769、-0.834,P<0.05)。结论局限性肾癌患者手术标本YAP1、POU2F2和Cath-D表达水平与术后复发密切相关,其联合预测局限性肾癌术后复发具有良好参考价值。