益气解毒复方对重症肌无力患者中医证候影响及Th17/Treg细胞免疫调节作用

目的观察益气解毒复方对重症肌无力患者中医证候影响及外周血Th17/Treg细胞免疫调节作用。方法随机将63例重症肌无力患者分为对照组(n=31)和治疗组(n=32),对照组给予溴吡斯的明和糖皮质激素等基础治疗,治疗组在对照组给药基础上加用益气解毒复方干预,连续治疗12周。观察临床疗效,统计分析治疗前后两组患者中医证候积分,检测治疗前后两组患者外周血中Th17/Treg细胞、Foxp3/RORγt基因和IL-6、IL-17细胞因子表达水平。结果治疗12周后,与对照组相比,治疗组可显著降低患者的中医证候积分(P<0.05),能促进外周血中Foxp3、Treg基因的表达(P<0.05),降低外周血中Th17、Treg细胞和IL-6、IL-17细胞因子的表达(P<0.05)。结论益气解毒复方可能通过影响外周血Th17、Treg细胞分化及转录因子RORγt、Foxp3基因的表达水平和相关细胞因子的表达,进而调节Th17/Treg细胞免疫平衡,达到治疗重症肌无力的作用。

益气解毒复方对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠胸腺中Aire及ROR-γt/Foxp3相关炎症因子表达的影响

目的研究益气解毒复方对实验性自身免疫性重症肌无力(Experimental autoimmune myasthenia gravis,EAMG)大鼠胸腺中自身免疫调节因子(Aire)及转录因子维甲酸相关核孤儿受体(ROR-γt)/叉头翼状螺旋转录因子3(Foxp3)相关炎症因子表达的影响。方法通过免疫诱导注射鼠源性AchR-α亚基97-116肽段复制EAMG模型,分为正常组、模型组、阳性对照组(强的松)及益气解毒复方高、中、低剂量组,每组10只。观察大鼠行为学及Lennon评分,检测血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-6(IL-6)水平,Western blot检测EAMG大鼠胸腺组织中Aire和Foxp3的表达,RT-PCR检测各组大鼠胸腺组织中RORγt的表达情况。结果与治疗前相比,各药物组Lennon分级评分显著降低;与强的松组相比,益气解毒复方各剂量组Lennon评分无明显差异(P>0.05)。RT-PCR结果,模型组胸腺内RORγt mRNA相对表达量明显高于正常组(P<0.05),各药物组胸腺中RORγt mRNA相对表达量明显低于模型组(P<0.05)。Western blot结果,与正常组比较,模型组Aire和Foxp3蛋白的表达量均显著降低(P<0.05);与模型组比较,各药物组大鼠胸腺中Aire和Foxp3蛋白的表达量均显著升高(P<0.01)。ELISA结果,模型组大鼠血清IL-6含量明显高于正常组(P<0.01),而TGF-β1含量明显低于正常组(P<0.01);给药后,各药物组IL-6含量明显降低,TGF-β1含量明显升高(P<0.01)。结论益气解毒复方能改善EAMG大鼠肌无力症状,其作用机制可能通过上调Aire蛋白表达,调节免疫炎症反应,影响Th17/Treg分化,从而调控ROR-γt/Foxp3免疫平衡发挥调节自身免疫反应的作用,可能是其治疗MG的作用机制之一。

益气解毒活络中药复方对糖尿病大鼠肾脏病理组织结构的影响

目的:探讨益气解毒通络中药复方(YQJDHL)对糖尿病(DM)大鼠肾脏结构的影响。方法:SPF级健康雄性SD大鼠72只,注射链脲佐菌素造成糖尿病及痰浊瘀毒中医证候模型。应用YQJDHL分别在造模成功及成模后2周灌胃给药,观察大鼠肾脏病理组织学变化。结果:YQJDHL能够减轻糖尿病肾病(DN)大鼠肾小球肥大、系膜细胞增生等病理改变,中药预防组疗效优于中药治疗组。结论:YQJDHL能够预防和治疗大鼠早期DN,其机制可能与延缓肾脏病理组织损害有关。

益气解毒方中苯丙素类化合物对鼻咽癌细胞增殖效应的影响

目的探讨益气解毒方中苯丙素类化合物异欧前胡素、阿魏酸、绿原酸对人鼻咽癌CNE2细胞增殖效应的抑制作用及机制研究。方法使用实时无标记细胞功能分析技术(RTCA)动态监测不同浓度的3种苯丙素类化合物对离体人鼻咽癌CNE2细胞生长曲线的影响;Cytation^(TM)5高通量活细胞成像分析检测系统分别监测3种不同浓度苯丙素类化合物对人鼻咽癌CNE2细胞形态改变;Western blot法检测3种苯丙素类化合物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、X连锁的凋亡蛋白抑制剂(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)、Survivin表达的影响。结果RTCA实时监测结果显示异欧前胡素、阿魏酸、绿原酸均能不同程度地抑制CNE2细胞增殖,存在药物浓度越高抑制效应越明显的趋势。CytationTM 5检测结果显示,与对照组相比,3种苯丙素类化合物作用36 h后,大量CNE2细胞出现细胞漂浮死亡,细胞膜破溃、细胞结构模糊等形态变化。Western blot检测结果显示,与对照组相比,异欧前胡素、阿魏酸、绿原酸能明显抑制CNE2细胞中增殖相关蛋白PCNA、XIAP、Survivin的表达(P<0.05)。结论益气解毒方中主要苯丙素类化合物异欧前胡素、阿魏酸、绿原酸均可以不同程度抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖,其机制可能与下调增殖相关蛋白PCNA、XIAP、Survivin的表达有关。

益气解毒复方对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠CXCL13、IL-21的影响

目的：研究益气解毒复方对实验性自身免疫性重症肌无力（EAMG）大鼠B细胞趋化因子（CXCL13）、白细胞介素-21（IL-21）在血清及胸腺表达水平的影响。方法：100只Lewis大鼠中随机选取10只为正常组,其余采用对Lewis大鼠皮下注射鼠源性AchR-a亚基97-116肽段方法建立重症肌无力的实验模型,经评估造模成功的49只大鼠随机分为益气解毒复方高、中、低剂量组、醋酸泼尼松组、模型组。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法及免疫组化检测CXCL13、IL-21在EAMG大鼠血清及胸腺中的水平。结果：益气解毒复方高、中、低剂量组、醋酸泼尼松组血清及胸腺中CXCL13、IL-21水平明显降低,相比模型组有明显差异性（P〈0.01）,但益气解毒复方高、中、低剂量组、醋酸泼尼松组之间比较无明显差异性（P〉0.05）。结论：益气解毒复方能明显改善EAMG大鼠肌无力症状,可降低EAMG大鼠血清及胸腺中CXCL13、IL-21水平,这可能是该方治疗MG的作用机制之一。

益气解毒化瘀方联合抗病毒治疗对难治性慢性丙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群和炎性细胞因子的影响

目的探讨益气解毒化瘀方联合抗病毒治疗对难治性慢性丙型肝炎(DT-CHC)患者外周血淋巴细胞亚群及炎性因子的影响。方法选择2013年3月~2015年2月收治的84例难治性慢性丙型肝炎患者为研究对象,采用随机数字表法随机分为观察组和对照组(各42例)。给予对照组聚乙二醇干扰素(Peg-INF-α)联合利巴韦林治疗,观察组采用益气解毒化瘀方联合Peg-INF-α和RBV治疗。随访6个月,比较两组临床疗效、淋巴细胞亚群、炎性因子变化。结果治疗6个月时,观察组总有效率和HCV RNA转阴率分别为81.0%和14.3%,均显著高于对照组(57.1%和2.4%,P<0.05);观察组外周血CD3^+、CD4^+、CD4/CD8和CD8^+细胞分别为(69.3±6.1)%、(36.4±4.2)%、(1.4±0.4)和(25.4±2.5)%,显著高于对照组【分别为(62.5±5.5)%、(30.2±3.6)%、(1.1±0.4)和(26.9±3.5)%,P<0.05】;观察组L-选择素、可溶性细胞间粘附分子、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α含量分别为(886.2±154.5)ng/ml、(258.7±65.4)ng/ml、(88.7±11.6)pg/ml和(1.3±0.5)ng/m,均显著低于对照组【分别为(1268.9±235.8)ng/ml、(379.6±80.3)ng/ml、(121.6±14.2)pg/ml和(1.6±0.5)ng/ml,P<0.05】;观察组治疗后白细胞和血小板计数均明显高于对照组(P<0.05)。结论益气解毒化瘀方联合Peg-INF-α和利巴韦林治疗能有助于缓解难治性丙型肝炎患者病毒学应答率,改善免疫功能,减少对骨髓抑制的影响,提高治疗效果。

益气解毒复方对Ⅰ、Ⅱ型重症肌无力患者的临床疗效及免疫调节作用

目的观察益气解毒复方对Ⅰ、Ⅱ型重症肌无力患者的临床疗效及血清Tfr、Tfh、IL-21、AChRAb的影响。方法收集Ⅰ、Ⅱ型重症肌无力患者共60例,按随机数字表分为益气解毒复方组(常规西药+益气解毒复方)和对照组(常规西药),每组各30例,治疗12周,观察治疗前后QMG评分变化,评估临床疗效,采用流式细胞术、ELISA法检测并观察治疗前后血清Tfr、Tfh细胞比例及IL-21、AchR-Ab水平变化,观察治疗期间不良反应情况。结果治疗12周后,两组患者QMG评分均有下降(P<0.01),但益气解毒复方组在降低QMG评分上较对照组更明显(P<0.01),在愈显率及有效率方面也较对照组更明显(P<0.05);两组MG患者血清Tfh细胞比例及IL-21和AchR-Ab水平均明显降低(P<0.01),Tfr细胞比例及Tfr/Tfh比值均明显升高(P<0.01),但与对照组相比,益气解毒复方组在降低Tfh细胞比例、AchR-Ab水平及升高Tfr细胞比例上更明显(P<0.05),在升高Tfr/Tfh比值,降低IL-21水平上也更明显(P<0.01)。结论在常规西医治疗的基础上联合益气解毒复方治疗MG近期疗效显著,可协同增效,安全性好,其机制可能与升高血清Tfr细胞比例、降低血清Tfh细胞比例,上调Tfr/Tfh比值及减少IL-21,降低AchR-Ab水平有关。

益气养阴活血解毒中药对大鼠急性心肌梗死后梗死心肌与心室重构的影响

目的观察急性心肌梗死(AMI)后大鼠心室重构时左心室质量、心肌梗死面积、血清胶原蛋白Ⅰ和Ⅲ含量及益气养阴活血解毒中药的干预作用。方法结扎Wistar大鼠左冠状动脉前降支复制AMI模型,6周后并发心肌重构,将24只AMI大鼠随机分为模型组(灌服等容量蒸馏水)、培哚普利组(0.36 mg/kg体质量)、硝酸异山梨醇酯组(5 mg/kg体质量)、益气养阴活血解毒中药组(生药10 g/kg体质量),每组6只,于造模成功后第2天开始灌胃相应药物,1次/d连续4周,空白组(只穿刺,不结扎)5只灌服等容量蒸馏水。4周后称体质量后处死大鼠,取血检测血清Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白含量,取心脏,称取心脏、左心室质量,计算心脏指数、左心室质量指数,取左心室缺血区N-BT染色法观察心肌梗死面积。结果与空白组比较,模型组心脏质量、心脏质量指数、左心室质量、左心室质量指数、血清胶原蛋白Ⅰ和Ⅲ含量均显著增加(均为P<0.01);与模型组比较,中药组大鼠心脏质量、心脏质量指数、左心室质量、左心室质量指数、心肌梗死面积、血清胶原蛋白Ⅰ和Ⅲ含量均显著减小(均为P<0.05),其中心脏质量指数、左心室质量指数、血清胶原蛋白Ⅰ和Ⅲ含量介于硝酸异山梨醇酯组和培哚普利组之间(均为P<0.05),而心肌梗死面积则与硝酸异山梨醇酯组和培哚普利组差异无统计学意义(均为P>0.05)。结论益气养阴活血解毒中药可缩小AMI后心肌重构大鼠心肌梗死面积,抑制胶原蛋白合成、分泌和心肌肥厚、心肌纤维化,其效应优于硝酸异山梨醇酯,而稍差于培哚普利。

益气解毒消银汤治疗寻常型银屑病疗效及对免疫机制的影响

目的探讨益气解毒消银汤对寻常型银屑病的治疗效果及对免疫机制的影响。方法依据随机对照法将2016年11月—2019年11月来医院治疗的寻常型银屑病患者120例分为研究组和参照组,每组60例。参照组采用复方氟米松软膏治疗,研究组在参照组治疗的基础上,口服益气解毒消银汤治疗。两组均治疗8周。比较两组治疗前后血清中IL-17、IL-22、IL-23细胞因子含量,比较两组治疗前后外周血嗜酸性粒细胞P物质和NK1R水平,比较两组治疗前后临床评分变化情况和,制定疗效判定标准。结果研究组治疗疗效高于参照组(P<0.05);研究组治疗后中医证候瘙痒剧烈、点状出血、皮疹增多的证候积分低于参照组(P<0.05);研究组治疗后PASI评分指数较参照组低(P<0.05);研究组治疗后血清IL-17、IL-22和IL-23水平低于参照组(P<0.05);研究组治疗后外周血嗜酸性粒细胞P物质和NK1R水平低于参照组(P<0.05)。结论益气解毒消银汤可有效的改善患者的临床症状,降低PASI评分指数,调节患者体内的免疫炎症反应,降低血清嗜酸性粒细胞P物质及NK1R水平,和复方氟米松软膏联合应用,具有协同增效的作用,值得进一步研究探讨。