益气养阴活血方调控Nrf2/NLRP3信号通路对糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用研究

目的探讨益气养阴活血方通过调控核因子E2相关因子2(Nrf2)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路对糖尿病肾病(DN)大鼠的肾脏保护作用机制。方法清洁级雄性SD大鼠40只,适应性喂养1周后,随机分为:空白组、模型组、缬沙坦组、益气养阴活血方等剂量(等剂量)组及高剂量(高剂量)组。除空白组外各组均应用高脂高糖喂养,联合单次注射链脲佐菌素(STZ)建立DN大鼠模型。造模成功后中药两组均灌服益气养阴活血方颗粒剂,缬沙坦组灌服缬沙坦,空白组和模型组灌服生理盐水,6周后留取大鼠24 h尿液、血液和肾脏组织。生化检测各组大鼠24 h尿总蛋白定量(24 h-UTP)、血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、葡萄糖(GLU)、总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG);酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清白介素1β(IL-1β)、白介素18(IL-18)水平;HE染色光镜观察肾组织病理改变;蛋白免疫印迹(Western Blot)检测肾组织中Nrf2、血红素加氧酶-1(HO-1)、NLRP3蛋白水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测大鼠肾脏Nrf2、HO-1、NLRP3mRNA表达水平。结果生化:与空白组相比,模型组24 hUTP、Scr、BUN、GLU、CHO、TG均显著升高(P<0.01);与模型组对比,各干预组24 h-UTP、Scr、BUN、GLU、CHO、TG均显著降低(P<0.05或P<0.01)。ELISA:与空白组相比,模型组血清IL-1β、IL-18水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,各干预组血清IL-1β、IL-18水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。肾脏病理:与空白组对比,模型组大鼠肾脏组织病变严重;与模型组对比,各干预组肾脏病理均有改善。WB及PCR:与空白组对比,模型组肾脏Nrf2 mRNA、HO-1 mRNA及Nrf2、HO-1蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01),NLRP3mRNA、NLRP3蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01);与模型组对比,各干预组Nrf2 mRNA、HO-1 mRNA及Nrf2、HO-1蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01),NLRP3mRNA、NLRP3蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论益气养阴活血方可能通过调控Nrf2/NLRP3信号通路,减轻氧化应激,抑制DN大鼠炎症反应,从而改善上述生化指标,减轻肾脏病理损害。

益气养阴活血利水方对视网膜脱离术后患者视网膜电图及MCP-1、ATP、IL-2水平的影响

目的探究益气养阴活血利水方联合妥布霉素地塞米松滴眼液对视网膜脱离术后患者视网膜电图及房水MCP-1、ATP、IL-2水平的影响。方法选取2017年12月—2018年12月于该院眼科就诊的50例视网膜脱离术后患者,以随机数字表法分为联合组(n=25)、常规组(n=25)。两组均行视网膜脱离术,术后常规组予妥布霉素地塞米松滴眼液治疗,联合组在常规组基础上予以益气养阴活血利水方治疗,两组均于手术2周后连续治疗6个周,随访1年。评估两组术后8周的视力疗效,比较两组术前、术后2周、术后8周的视网膜电图及术后2周、术后8周房水MCP-1、ATP、IL-2水平,统计两组术后1年视力及复发情况。结果治疗后,联合组患者总有效率为92.00%(23/25),高于常规组的52.00%(13/25)(P<0.05);术前、术后2周、术后8周两组暗适应视网膜电图a波振幅、b波振幅依次升高,且联合组高于常规组,术后8周明适应视网膜电图a波振幅、b波振幅高于术前,且联合组均高于常规组(P<0.05);术后8周,两组房水MCP-1、IL-2水平均低于术后2周,且联合组低于常规组,两组房水ATP水平高于术后2周,且联合组高于常规组(P<0.05)。随访1年,联合组患者术后1年视力高于常规组(P<0.05),联合组复发率(4.00%,1/25)与常规组(12.00%,3/25)比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论益气养阴活血利水方联合妥布霉素地塞米松滴眼液能提高视网膜脱离术后患者房水ATP水平,降低房水MCP-1、IL-2水平,同时调节视网膜组织微环境,从而改善视网膜电图,提高患者视功能,且不会增加术后复发率。

养阴益气活血方改善原发性干燥综合征患者焦虑抑郁状态及病情活动的研究

目的:研究原发性干燥综合征患者焦虑抑郁状态及其与病情活动度的相关性,探讨养阴益气活血方对焦虑抑郁状态及病情程度的改善作用。方法:将68例女性原发性干燥综合征患者随机分为治疗组33例和对照组35例,同时选取健康成年女性33例为正常组。对照组给予硫酸羟氯喹片口服治疗,治疗组在对照组的基础上加中药养阴益气活血方治疗。2组均以12周为1个疗程。观察2组患者治疗前后及正常组入组时疾病活动指数(ESSDAI)评分、抑郁自评量表(SDS)评分、焦虑自评量表(SAS)评分,以及红细胞沉降率(ESR)、免疫球蛋白G(IgG)水平。结果:治疗前,2组患者SAS评分、SDS评分、ESSDAI评分及ESR、IgG水平均高于正常组(P<0.05)。治疗后,2组患者SAS评分、SDS评分、ESSDAI评分及ESR、IgG水平较治疗前均有改善(P<0.05);治疗组SAS评分、SDS评分、ESSDAI评分及IgG水平明显低于对照组(P<0.05)。治疗前,患者SAS评分与ESSDAI评分、ESR水平呈显著正相关(P<0.05);治疗后,患者SAS评分、SDS评分与ESSDAI评分及ESR、IgG水平均呈显著正相关(P<0.05)。结论:原发性干燥综合征患者存在不同程度的焦虑抑郁情绪,且焦虑抑郁状态积分与病情程度呈正相关。养阴益气活血方联合西药在有效治疗原发病的同时,能明显改善患者焦虑抑郁状态。

益气活血方治疗慢性肾脏病尿蛋白的临床研究

目的观察益气活血方治疗慢性肾脏病患者尿蛋白的临床疗效。方法筛选2017年12月—2020年10月就诊于医院门诊及住院部符合慢性肾脏病诊断的患者70例,随机分为治疗组和对照组,对照组予以基础治疗,治疗组予基础治疗的基础上加服益气活血方,治疗周期为3个月。分别观察并比较治疗前后各组患者血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、血尿酸(SUA)、24 h尿蛋白(Upro/24 h)等生化指标及临床疗效。结果治疗组患者的总有效率显著高于对照组(P<0.01);与对照组比较,4周、8周和12周时治疗组患者Upro/24h、SCr、BUN、UA以及尿红细胞计数水平显著下调,而GFR水平显著上调(P<0.05,P<0.01);与0周时比较,4周、8周和12周时治疗组患者上述各生化指标水平显著下调,GFR水平显著上调(P<0.05,P<0.01)。结论益气活血方可有效降低慢性肾脏病患者尿蛋白的含量,对肾脏功能具有保护作用,提高临床疗效。

益气温阳活血利水方治疗心肾综合征(心肾阳虚证)对AngⅡ、GDF-11的变化研究

目的研究益气温阳活血利水方治疗心肾综合征(心肾阳虚证)对患者血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、生长分化因子-11(GDF-11)的变化影响。方法选取医院2017年5月-2019年5月收治的心肾综合征(心肾阳虚证)患者73例,采用随机数字法分为两组。对照组给予西医基础治疗,观察组加用益气温阳活血利水方治疗,分析两组患者治疗后的临床效果。结果观察组总有效率(85.71%,30/35)高于对照组(62.86%,22/35),不良反应率(45.71%,16/35)与对照组(51.43%,18/35)比较,差异不具有统计学意义(P>0.05)。两组治疗前肾功能指标、心功能指标、AngⅡ、GDF-11、C反应蛋白(CRP)、细胞间黏附因子-1(sICAM-1)水平组间比较,差异不具有统计学意义(P>0.05)。观察组治疗后左心室射血分数(LVEF)、心输出量(CO)水平高于对照组,血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、AngⅡ、GDF-11、CRP、sICAM-1水平低于对照组(P<0.05)。结论益气温阳活血利水方治疗心肾综合征(心肾阳虚证)可减轻炎症反应,降低AngⅡ、GDF-11的表达水平,改善心功能和肾功能,且安全性高。

益气活血方干预急性心肌梗死MAPKs信号通路的实验研究

目的探讨益气活血方对急性心肌梗死模型大鼠丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路的影响。方法选取SPF级健康雄性SD大鼠72只,随机分为对照组12只和造模组60只。造模组采用冠状动脉左前降支结扎法建立急性心肌梗死模型,对照组大鼠接受假手术。将造模成功的大鼠随机分为模型组、麝香保心丸组及益气活血方低、中、高浓度组,各12只.模型组和对照组分别灌胃给予生理盐水10 mL/kg, qd;麝香保心丸组灌胃给予5 mg/mL麝香保心丸混悬液10 mL/kg, qd;益气活血方低、中、高浓度组分别灌胃给予生药浓度为0.104 g/mL、0.208 g/mL、0.416 g/mL益气活血方10 mL/kg, qd。各组大鼠均给药4周。检测比较各组血清心肌酶、氧化应激指标水平,以及心肌组织磷酸化P38丝裂原活化蛋白酶(p-P38 MAPK)、磷酸化细胞外信号相关蛋白激酶1(p-ERK1)、磷酸化c-Jun氨基端蛋白激酶(p-JNK)表达水平。结果与模型组比较,各组大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、丙二醛(MDA)水平较低,心肌组织p-P38 MAPK、p-JNK表达水平较低,且益气活血方低浓度组>益气活血方中浓度组>益气活血方高浓度组和麝香保心丸组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与模型组比较,各组大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)水平较高,心肌组织p-ERK1表达水平较高,且益气活血方低浓度组<益气活血方中浓度组<益气活血方高浓度组和麝香保心丸组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论益气活血方能剂量依赖性的减轻急性心肌梗死大鼠心肌损伤,清除氧自由基,其作用可能与调控心肌组织MAPKs信号通路活性有关。

益气养阴活血通络方对特发性肺纤维化模型大鼠血小板活化及肺组织CD40-CD40L系统的影响

目的 基于CD40-CD40L系统探讨益气养阴活血通络方治疗特发性肺纤维化(IPF)的可能作用机制。方法 96只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、吡非尼酮组、益气养阴活血通络组,每组24只。除空白组外,其余各组大鼠采用气管内注射盐酸博来霉素制备IPF大鼠模型。造模次日吡非尼酮组采用吡非尼酮胶囊序贯方式灌胃,第1~7天给药剂量62.5 mg/(kg·d),第8~14天给药剂量125 mg/(kg·d),第15~28天给药剂量187.5 mg/(kg·d);益气养阴活血通络组给予益气养阴活血通络方颗粒剂18 g/(kg·d)灌胃;空白组和模型组每日给予10 ml/kg生理盐水灌胃。各组大鼠均每日灌胃1次,连续28天。分别于模型制备次日起第7、14、28天(各组每个时间点8只大鼠)时采用HE染色观察各组大鼠肺脏组织病理形态学变化;碱水解法检测肺组织羟脯氨酸(HYP)含量;酶联免疫吸附试验检测血清纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)、凝血因子Ⅸ(FⅨ)、凝血因子Ⅶ(FⅦ)、血小板因子4 (PF-4)表达水平;流式细胞术检测血小板CD41、CD62P表达水平;蛋白免疫印迹法检测肺脏组织CD40、CD40L蛋白水平。结果 空白组大鼠肺组织病理HE染色显示正常。模型组大鼠病理显示第7天时肺泡间隔增宽、腔内炎症细胞聚集,肺间质可见明显水肿;第14天时肺间质内可见胶原纤维增生;第28天时肺泡逐渐萎缩,胶原纤维大量沉积。与空白组同时间点比较,模型组大鼠第7、14、28天肺组织HYP含量,血小板CD41、CD62P表达水平,血清PAI、FⅨ、FⅦ、PF-4表达水平,肺组织CD40、CD40L蛋白水平均显著升高(P<0.01)。与模型组同时间点比较,吡非尼酮组和益气养阴活血通络组大鼠肺组织病理形态学显示炎症细胞浸润明显改善、纤维化程度显著减轻。各给药组大鼠第7、14、28天肺组织HYP含量,血小板CD41表达水平,血清PAI、FⅨ、FⅦ、PF-4表达水平,肺组织CD40、CD40L蛋白水平均有不同程度下降(P<0.05或P<0.01)。与吡非尼酮组比较,益气养阴活血通络组大鼠第7 d、14 d、28 d肺组织HYP含量及血清PAI、FⅨ、FⅦ、PF-4表达水平均下降,第7、28天血小板CD41、CD62P表达水平下降,第28天肺组织CD40蛋白水平下降(P<0.05或P<0.01)。结论 益气养阴活血通络方治疗IPF机制可能与抑制血小板活化和CD40-CD40L系统从而改善肺纤维化病理损伤有关。

益气活血利水方辅助治疗慢性心力衰竭气虚血瘀水停证的随机对照试验

目的评价益气活血利水方辅助治疗慢性心力衰竭气虚血瘀水停证的临床疗效。方法采用随机对照设计,将50例慢性心力衰竭气虚血瘀水停证患者随机分为治疗组和对照组各25例。在西医基础治疗的同时,治疗组予益气活血利水方,每日1剂;对照组予盐酸曲美他嗪片,每次10 mg,每日3次,疗程均为4周。比较治疗前后两组患者NYHA心功能分级、6分钟步行距离、中医证候积分,并评价心功能疗效。结果治疗后两组患者NYHA心功能分级比较,治疗组优于对照组(P <0. 05)。与治疗前比较,治疗后两组患者6分钟步行距离均明显延长(P <0. 05),其中治疗组(339. 40±52. 68) m、对照组(294. 04±56. 81) m,差异有统计学意义(P <0. 05)。治疗后两组患者中医证候积分均较治疗前改善,治疗后治疗组比对照组气虚症状积分(气短、乏力、气喘)改善明显(P <0. 05);在血瘀症状(心悸、胸闷、脉络瘀血)和水停症状(面肢浮肿、腹胀)积分方面差异无统计学意义(P> 0. 05)。两组治疗后中医证候总积分均较治疗前下降,治疗组为(9. 44±4. 81)分、对照组为(12. 96±5. 71)分,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论益气活血利水方辅助治疗能有效改善慢性心力衰竭气虚血瘀水停证患者的心功能,降低中医证候积分,显著延长6分钟步行距离。

基于治未病思想辨治早期糖尿病肾病的临床疗效观察

目的观察益气养阴化湿活血方辨治早期糖尿病肾病(DKD)的疗效。方法采用回顾性研究的方法,依据纳入标准和排除标准检索出于马晓燕教授门诊就诊的气阴两虚兼湿瘀证DKD患者92例,依据治疗方案分为对照组40例(基础治疗+厄贝沙坦片)、观察组52例(基础治疗+益气养阴化湿活血方),观察疗程12周。结果治疗前两组一般资料、实验室指标和中医证候积分组间差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前后对比,两组FPG、HbA1c、HDL-C、LDL-C、BUN、CysC、UACR、24h尿蛋白定量水平均控制较好(P<0.05);观察组TC水平、Ca^(2+)水平控制较好(P<0.05),中医证候积分明显降低(P<0.01)。治疗后,与对照组比较观察组的FPG、HbA1c、TC、LDL-C、HDL-C、BUN、UA水平均控制更好(P<0.05),证候积分更低、证候疗效更好(P<0.01);两组临床疗效相当(P>0.05)。结论益气养阴化湿活血方治疗早期糖尿病肾病具有较好的疗效,能通过干预影响DKD进展的独立危险因素,如湿证、湿热证、FPG、HbA1c、TC、HDL-C、LDL-C、Ca^(2+)、BUN、CysC,延缓DKD进展。