益气解毒方对DNP诱导TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔/鼻咽上皮癌前病变及p16和c-jun基因表达的影响

背景与目的:有研究表明,益气解毒方中药可通过抑制细胞端粒酶的激活而阻断二亚硝基哌嗪(DNP)诱导大鼠鼻咽癌变和人胚鼻咽上皮细胞转化。本研究探讨益气解毒方对经DNP诱导TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠的鼻腔和鼻咽黏膜上皮增殖及c-jun和p16基因表达的影响,为益气解毒方的疗效和可能作用机制提供新的证据。方法:G4代5月龄TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠20只,随机分为2组:①TgN(p53mt-LMP1)/HT诱癌中药组[中药组,10只,以12.91g/(kg?d)剂量灌胃益气解毒方药液];②TgN(p53mt-LMP1)/HT诱癌0.9%氯化钠溶液对照组(氯化钠溶液对照组,10只,以15ml/kg氯化钠溶液灌胃)。另设阴性对照组(用野生型C57BL/6J小鼠10只,以15ml/kg氯化钠溶液灌胃)。用HE染色法观察各组小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织生物学表型特征,比较癌前病变率;免疫组织化学染色法检测各组小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织c-jun和p16基因的表达水平,并采用Western印迹法验证。结果:阴性对照组、氯化钠溶液对照组和中药组鼻腔和(或)鼻咽黏膜上皮癌前病变率分别为0、90%和10%,差异有显著性(P<0.01)。与氯化钠溶液对照组比较,中药组小鼠鼻腔和鼻咽的p16基因表达水平显著上调(鼻腔:157±10vs132±10,鼻咽:155±12vs133±10,P值均<0.01),c-jun基因的表达水平显著下调(鼻腔:111±9vs161±10;鼻咽:110±10vs159±10,P值均<0.01),趋于正常水平,与阴性对照组(鼻腔和鼻咽的p16表达灰度值分别为130±12和129±12,c-Jun分别为164±13和164±9)的差异无显著性(P值均>0.05)。结论:中药益气解毒方可阻逆DNP对TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织癌前病变发生和发展的诱导作用,其干预作用与下调c-jun表达和上调p16基因表达密切相关。

益气解毒方水提物对RAW264.7细胞免疫功能的影响

目的研究益气解毒方水提物对小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞免疫功能的影响,并探讨其可能的作用机制。方法用不同浓度益气解毒方水提物处理RAW264.7细胞,MTT法检测细胞增殖活性,ELISA法检测细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-12(IL-12)、一氧化氮(NO)的分泌水平,Western blot法检测细胞核转录因子NF-κBp65蛋白的表达水平。结果与空白对照组比较,益气解毒方水提物在10~320mg·L^(-1)范围内明显促进RAW264.7细胞增殖,且10 mg·L^(-1)浓度效果最佳(P<0.05);与空白对照组比较,益气解毒方水提物能促进TNF-α、IL-12及NO的分泌(P<0.05),显著诱导细胞内NF-κBp65蛋白的表达(P<0.05)。结论益气解毒方水提物对RAW264.7细胞的免疫功能具有调节作用,其作用可能与激活NF-κBp65蛋白通路相关。

益气解毒方对中晚期鼻咽癌患者Th17细胞活性的干预效应

目的探讨益气解毒方对中晚期鼻咽癌患者Th17细胞活性的干预效应。方法 40例中晚期鼻咽癌患者,于治疗开始前应用流式细胞术检测外周血Th17细胞数值比例,ELISA法检测血清细胞因子IFN-γ、IL-17含量水平,并以10例健康人作为对照,分析各指标的组间差异及其意义。然后,将40例中晚期鼻咽癌患者随机分为常规治疗组和联合治疗组各20例;常规治疗组予以标准化常规放化疗,联合治疗组在常规治疗基础上加用益气解毒方;两组患者均于放疗疗后3个月时分别应再次检测外周血Th17细胞数值比例,ELISA法检测血清细胞因子IFN-γ、IL-17水平,比较分析其组间差异及意义。结果中晚期鼻咽癌患者治疗前外周血中Th17细胞数量(IL-17+/CD3+2.89±1.06,IL-17+/CD4+0.47±0.19)、血清IFN-γ(124.95±4.22)、IL-17(4.61±0.09),均分别显著低于健康对照组的(细胞比值11.03±2.53和1.69±0.28)、(细胞因子水平220.36±18.76和7.71±0.34)(P<0.05);经过系统治疗后,联合治疗组患者外周血Th17细胞数值比例(分别为IL-17+/CD3+11.10±2.84,IL-17+/CD4+2.09±0.34)、IFN-γ及IL-17水平(分别为321.60±41.19和5.54±0.14)均较常规治疗组显著升高(分别为3.55±1.11,0.63±0.20,155.26±4.99,2.97±0.14),组间差异具有显著性统计学意义(P<0.05)。结论益气解毒方能促进Th17细胞分化,增强效应细胞因子IFN-γ和IL-17分泌。

益气解毒方联合表皮生长因子受体络氨酸激酶抑制剂靶向治疗气阴两虚型非小细胞性肺癌患者的疗效观察

目的探究益气解毒方联合表皮生长因子受体络氨酸激酶抑制剂(Epidermal Growth Factor Receptor Tyrosine Kinase Inhibitor,EGFR-TKI)靶向治疗对气阴两虚型非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的疗效。方法选取2018年2月—2021年2月期间在自贡市第一人民医院住院治疗的100例NSCLC患者,按随机数字表法分为对照组和治疗组,每组各50例。对照组患者仅接受EGFR-TKI靶向治疗,治疗组患者接受益气养阴解毒方和EGFR-TKI联合治疗。治疗4周后,观察比较两组患者近期疗效、中医证候疗效、生活质量改善率、不良反应及无进展生存期。结果治疗后治疗组近期疗效总有效率84.0%(42/50)较对照组62.0%(31/50)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后治疗组中医证候有效率82.0%(41/50)较对照组60.0%(30/50)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后治疗组患者生活质量改善有效率92.0%(46/50)较对对照组74.0%(37/50)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗期间,两组患者皮疹、腹泻不良反应比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后治疗组无进展生存期明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论益气解毒方联合EGFR-TKI靶向治疗临床疗效较好,可减少EGFR-TKI的副作用发生,改善临床症状,延长无进展生存期。

肾癌根治术后益气解毒方联合细胞因子辅助治疗临床疗效评估

目的评估肾癌根治术后益气解毒方联合细胞因子辅助治疗的效果。方法选取确诊为T1-3N0M0分期肾细胞癌且接受肾癌根治术、目前呈无瘤状态的40例患者入组,运用随机数字表法分为加用益气解毒方组(益气解毒方+IL-2+干扰素-α_2b)和免疫调节治疗组(IL-2+干扰素-α_2b),每组各20例。按照各组上述给药方案给予治疗,8周为1个疗程。治疗2个疗程后,运用尼莫地平法计算各组疗效积分比后得出治疗有效率,评价其临床常见症状改善情况;运用Karnofsky评分系统评价各组患者术后各阶段体力恢复状况;运用欧洲癌症治疗与研究组织生活品质核心问卷EORTC QLQ-C30(V3.0中文版)定量评估各组患者术后生活质量变化情况;同时根据美国国立肿瘤研究院(NCI)抗癌药物扩大通用毒性标准(CTC3.0版)评价各组患者接受治疗期间的不良反应情况。结果治疗后加用益气解毒方组在治疗有效率(95.0%vs 50.0%)、Karnofsky评分(87.64±6.51 vs 80.30±11.03)、EORTC QLQ-C30评分(68.79±10.57 vs 54.83±16.24)方面均显著高于免疫调节治疗组(P<0.05);不良反应方面,加用益气解毒方组患者发热(60.0%vs 80.0%)、恶心呕吐(50.0%vs 80.0%)、乏力(55.0%vs85.0%)、厌食(40.0%vs 65.0%)、腹泻(35.0%vs 60.0%)及关节疼痛(30.0%vs 50.0%)发生率均显著低于免疫调节治疗组(P<0.05)。结论肾癌根治术后益气解毒方联合细胞因子辅助治疗,能够有效降低细胞因子治疗不良反应、显著改善患者体力状况,有效提高患者生活质量及治疗满意度。

益气解毒方对转基因小鼠上皮细胞及基因影响

目的研究益气解毒方对TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠的鼻腔和鼻咽粘膜上皮细胞增殖及肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)和p16基因表达的影响。方法苏木素-伊红(H-E)染色法观察小鼠鼻腔和鼻咽粘膜上皮细胞增殖特征;免疫组织化学染色法检测小鼠鼻腔和鼻咽粘膜上皮细胞TRAF2、p16基因的表达水平,并采用蛋白印迹(Westernblot)对基因表达进行验证。结果与TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠诱癌生理盐水对照组(TIC组)比较,TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠诱癌益气解毒方干预组(TIM组鼻腔和鼻咽粘膜上皮增生不明显,癌前病变率显著下降(P<0.01);其TRAF2基因表达水平(TIC组、TIM组鼻腔的分别为129.45±9.53和160.96±11.04,鼻咽的分别为126.38±12.69和160.88±6.84)显著降低(P<0.01);p16基因表达水平(TIC组、TIM组鼻腔的分别为157.21±10.44和131.72±10.06,鼻咽的分别为155.41±11.77和132.63±10.22)显著增高(P<0.01)。TIM组的TRAF2和p16基因表达水平接近野生型C57BL/6J小鼠对照组(鼻腔和鼻咽的TRAF2基因表达水平分别为165.07±10.58和164.39±7.88,p16基因表达水平分别为129.62±12.16和129.12±11.67),差异无统计学意义。结论中药益气解毒方可阻逆二亚硝基哌嗪(DNP)对TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔和鼻咽粘膜上皮细胞异常增殖的诱导效应,其阻逆作用的发挥与下调TRAF2基因表达和上调p16基因表达密切相关。