益肾化瘀方治疗不明原因复发性流产的临床研究

目的观察中药益肾化瘀方治疗不明原因复发性流产患者的临床疗效,及对血清D-二聚体水平、血小板聚集率(PAR)、子宫动脉阻力指数(RI)及妊娠结局的影响。方法入组82例不明原因复发性流产患者,随机分为对照组41例和治疗组41例。对照组采用皮下注射低分子肝素钠联合口服阿司匹林治疗,治疗组在对照组基础上加服益肾化瘀方,观察2组患者治疗前后中医证候积分的变化,血浆D二聚体水平、PAR、RI的变化,孕4周和孕8周的血清βHCG水平及妊娠结局。结果治疗后治疗组临床有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);中医证候积分较治疗前均下降(P<0.05~0.01),治疗组优于对照组(P<0.05):2组患者治疗后PAR、RI、孕8周血清β-HCG水平差异有统计学意义(P<0.05);D-二聚体水平、孕4周血清β-HCG水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗组继续妊娠率高于对照组(P<0.05)。结论益肾化瘀方联合西药能降低不明原因复发性流产患者的D二聚体水平、PAR、RI,改善胎盘血流灌注,从而提高再次妊娠率。

自拟益肾健脾化瘀方治疗绝经后脾肾阳虚型骨质疏松症的临床研究

目的探讨自拟益肾健脾化瘀方治疗绝经后脾肾阳虚型骨质疏松症的临床疗效。方法选取2016年1月-2017年1月我院收治的120例绝经后骨质疏松症患者,将其按照随机数字法随机分为观察组和对照组,每组60例,2组均给予碳酸钙D3片,在此基础上,对照组给予仙灵骨葆胶囊,观察组给予自拟益肾健脾化瘀方剂,2组均治疗3月。结果治疗后2组腰背疼痛、腰膝酸软、夜尿增加、畏寒肢冷、神疲倦怠及总评分均显著下降(P<0.01),但观察组下降更为明显(P<0.01);治疗后观察组总有效率为93.33%,显著高于对照组(80.00%,P<0.01);2组腰椎L2~L4、股骨颈、股骨大转子、Ward's三角骨密度均较治疗前显著增加(P<0.01),但观察组增加更为明显(P<0.01);2组骨特异性碱性磷酸酶(B-ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)均较治疗前显著下降(P<0.01),观察组下降更为明显(P<0.01);2组雌二醇(E2)、胰岛素生长因子(IGF-1)均较治疗前显著上升(P<0.01),观察组上升更为明显(P<0.01);2组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用自拟益肾健脾化瘀方可以显著改善绝经后脾肾阳虚型骨质疏松症的临床症状,同时可改善患者骨代谢和骨密度,其作用机制可能与提高雌激素和IGF-1水平有关。

益肾化瘀方对单侧输尿管结扎模型大鼠波形蛋白表达的影响

目的:动态观察单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction,UUO)模型大鼠肾组织中波形蛋白(Vimentin)的表达及益肾化瘀方对其影响,探讨Vimentin在肾间质纤维化进程中的表达变化和益肾化瘀方对其影响以及防治肾间质纤维化可能的机制。方法:将清洁级雄性大鼠150只随机分为假手术组、模型组、益肾化瘀方低剂量组、益肾化瘀方高剂量组和洛汀新组,采用单侧输尿管结扎的方法建立肾间质纤维化模型(UUO模型),分别于UUO术后第3天、第7天、第14天、第21天、第28天采用光学显微镜观察肾间质病理形态学改变,采用免疫组化(PV二步法)观察大鼠肾组织Vimentin的表达变化。结果:造模3 d后即可见肾间质水肿,随时间延长逐渐出现炎细胞浸润,部分小管消失,皮质变薄。同时,Vimentin表达增高,与时间呈相关性。用药干预后,Vimentin表达较模型组有所降低,(P<0.01或P<0.05),益肾化瘀方高剂量组与洛汀新组差异不显著。结论:益肾化瘀方组可能通过降低肾组织中Vimentin表达,减轻细胞外基质沉积,从而延缓肾间质纤维化进程。

健脾益肾化瘀通络方治疗移植肾功能延迟的疗效观察

目的:探讨健脾益肾化瘀通络方治疗移植肾功能延迟的效果及对TNF-α、IL-6、hs-CRP等炎性反应因子的影响。方法:选取2013年4月至2018年3月武汉科技大学附属普仁医院收治的移植肾功能延迟恢复的患者60例作为研究对象。按照随机数字表法随机分组法分为对照组和观察组,每组30例。对照组给予血液透析联合免疫抑制方案辅助治疗,观察组在对照组基础上给予健脾益肾化瘀通络方治疗。比较2组肾功能指标(Scr、BUN、Ccr)、炎性反应因子(TNF-α、IL-6、hs-CRP)、肾功能恢复时间及临床疗效。结果:治疗后,2组Scr、BUN、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平均降低,Ccr水平均升高(P<0.05);观察组治疗后Scr、BUN、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平均降低幅度及Ccr升高幅度均高于对照组(P<0.05);观察组治疗后肾功能恢复时间早于对照组(P<0.05);2组患者总有效率比较(观察组96.67%:对照组90.00%)(P>0.05)。结论:健脾益肾化瘀通络方可显著改善移植肾功能水平,缩短移植肾功能延迟恢复的时间,降低血清TNF-α、IL-6、hs-CRP等炎性反应因子水平,临床治疗效果显著,可进一步推广。

Effect of Yishen Huayu Fang on kidney tissue E-cadherin expression in unilateral ureter ligation in rats

OBJECTIVE:To observe E-calcium sticky protein(E-cadherin) expression in kidney tissues in a rat model of unilateral ureter ligation and the effect of Yishen Huayu Fang(formula of tonifying the kidney and dissolving accumulated blood stasis) on the expression.METHODS:A total of 150 clean grade male rats were randomly divided into a control group,model group,low-dose Yishen Huayu Fang group(low-dose group),high-dose Yishen Huayu Fang group(high-dose group),and Lotensin group.A renal fibrosis model was established with unilateral ureteral obstruction(UUO).Pathological changes of rat renal tissue were observed with light microscopy on days 3,7,14,21,and 28 after UUO.Changes in kidney tissue E-cadherin expression were observed with immunohistochemistry.RESULTS:Three days after modeling,kidney edema appeared followed by gradual inflammatory cell infiltration,and part of the small tubules disappeared while the renal cortex thinned.Meanwhile,the E-cadherin expression level dropped,which was negatively correlated with the obstruction time.After intervention,E-cadherin expression was increased in all treatment groups(P<0.01 or P<0.05),while there were no significant differences between the high-dose and Lotensin groups.CONCLUSION:Yishen Huayu Fang delays the renal fibrosis process by promoting E-cadherin expression in renal tissues and reducing extracellular matrix deposition.

益肾化瘀排石方配合体外碎石治疗肾结石疗效观察

目的:观察益肾化瘀排石方配合体外碎石治疗肾结石的疗效。方法:采用我院经验方益肾化瘀排石方配合体外冲击波碎石治疗肾结石60例(治疗组),并与西药常规治疗配合体外冲击波碎石治疗肾结石40例(对照组)作对照。结果:治疗组疗效明显优于对照组(P<0.01)。治疗组ESWL后第20天Scr、BUN恢复正常,而对照组未完全恢复正常。结论:益肾化瘀排石方配合体外冲击波碎石治疗肾结石有较好疗效。

基于网络药理学与实验验证探讨益肾化瘀方延缓肾间质纤维化机制

目的:通过网络药理学探索益肾化瘀方延缓肾间质纤维化(RIF)的分子机制,并进行实验验证。方法:利用网络药理学获取益肾化瘀方延缓RIF可能的作用机制,并进行分子对接验证其结合力。构建RIF小鼠模型,观察益肾化瘀方对肾组织病理损伤以及Bax、Bcl-2表达的影响。结果:网络药理学研究显示益肾化瘀方可通过多靶点干预RIF,其作用机制可能与细胞凋亡等通路相关。分子对接显示益肾化瘀方活性成分与防治RIF共有靶点的结合活性较好。动物实验显示,益肾化瘀方可降低RIF小鼠肾组织细胞凋亡水平,改善肾小管损伤,显著降低肾组织Bax、Bcl-2表达(P<0.01),进而减轻RIF。结论:益肾化瘀方可以干预多种RIF基因,其保护作用机制可能与下调细胞凋亡有关。

益肾化瘀方对肾间质纤维化大鼠肾组织中CTGF蛋白表达的影响

目的:动态观察肾间质纤维化大鼠肾组织中结缔组织生长因子(CTGF)蛋白的表达变化以及益肾化瘀方对其影响,探讨益肾化瘀方治疗肾间质纤维化的部分机制。方法:将150只大鼠随机分为假手术组、模型组、益肾化瘀方高剂量组、益肾化瘀方低剂量组、洛汀新组,采用单侧输尿管结扎(UUO)的方法建立肾间质纤维化大鼠模型;分别于UUO术后3、7、14、21、28d观察模型大鼠肾组织中CTGF蛋白的表达变化,采用Western-blot方法,以β-actin为内参,测定CTGF蛋白的相对表达量。结果:与假手术组相比,模型组大鼠肾组织CTGF蛋白表达于7d后出现不同程度的增高(P<0.01);用药后至第7d,与模型组相比,各给药组大鼠肾组织CTGF蛋白表达均有所降低(P<0.05或P<0.01),益肾化瘀方高剂量组优于益肾化瘀方低剂量组和洛汀新组(P<0.05或P<0.01)。结论益肾化瘀方可以通过降低肾组织中CTGF蛋白表达,从而防治肾间质纤维化。

益肾化瘀解毒方对连续不卧床腹膜透析腹膜炎患者血清HMGB-1和hs-CRP水平的影响

目的观察益肾化瘀解毒方对连续不卧床腹膜透析(CAPD)腹膜炎患者微炎症状态的影响及其可能作用机制。方法选取60例正在行CAPD治疗且中医辨证为肾虚浊瘀内停证的腹膜炎患者,随机分为治疗组与对照组各30例,两组均进行常规治疗,治疗组加用益肾化瘀解毒方口服,每日1剂,4周为1个疗程,连续治疗2个疗程。评价临床疗效并观察两组患者中医证候积分,检测血清高迁移率族蛋白1(HMGB-1)和超敏C-反应蛋白(hs-CRP)水平。结果治疗组临床疗效有效率为83.34%,对照组为46.67%,治疗组疗效优于对照组(P<0.01)。治疗组治疗后中医证候积分、HMGB-1、hs-CRP均较治疗前显著降低,且均低于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论益肾化瘀解毒方能有效改善CAPD腹膜炎患者微炎症状态,其机制可能与降低患者血清HMGB-1和hs-CRP水平有关。

基于HK-2细胞转分化研究益肾化瘀方抗肾间质纤维化机制

目的:观察益肾化瘀方含药血清对人近端肾小管上皮细胞株(HK-2)细胞转分化过程中γ干扰素(IFN-γ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)表达的影响,探究该方抗肾间质纤维化机制。方法:将体外培养的HK-2细胞随机分为:正常对照组,缬沙坦含药血清组,AngⅡ刺激组,5%、10%、20%益肾化瘀方含药血清组,分别干预12、24、48 h。检测各组细胞IFN-γ、TGF-β1、Col-Ⅰ、Col-Ⅳ的表达情况。结果:与正常对照组同期比较,AngⅡ刺激组IFN-γ表达量显著降低(P<0.05),TGF-β1、Col-Ⅰ、Col-Ⅳ表达量显著升高(P<0.05);与AngⅡ刺激组同期比较,10%、20%益肾化瘀方含药血清组及缬沙坦组IFN-γ表达量显著升高(P<0.05),各治疗组IFN-γ表达量显著降低(P<0.05);其中20%益肾化瘀方含药血清组与缬沙坦含药血清组各指标表达量无显著性差异。结论:益肾化瘀方含药血清可通过上调IFN-γ及下调TGF-β1、Col-Ⅰ、Col-Ⅳ的表达保护肾脏。

益肾化瘀方对单侧输尿管结扎大鼠转化生长因子β1、Smad7信号蛋白表达的影响

目的探讨益肾化瘀方抗肾间质纤维化的可能作用机制。方法 108只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、缬沙坦组和益肾化瘀方高、中、低剂量组,每组18只。除假手术组外其余大鼠采用单侧输尿管结扎方法建立肾间质纤维化模型,造模次日益肾化瘀方高、中、低剂量组分别予益肾化瘀方浓缩液32、16、8 g/(kg·d)灌胃,缬沙坦组予缬沙坦溶液13.3 mg/(kg·d)灌胃,假手术组、模型组予生理盐水20 ml/(kg·d)灌胃,各组均连续灌胃28天。分别于造模后第7、14、28天观察大鼠肾组织病理改变,计算肾间质纤维化面积,检测大鼠肾组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad7信号蛋白的表达。结果模型组大鼠出现肾间质炎细胞浸润和梭形核细胞增生,伴局灶性肾间质纤维化,各治疗组肾脏病理表现均有不同程度的减轻,其中益肾化瘀方高剂量组病理改变与缬沙坦组相当。与同时间点假手术组比较,其余各组大鼠肾间质纤维化面积、TGF-β1升高,Smad7信号蛋白减少(P<0.01);与同时间点模型组比较,除益肾化瘀方低剂量组外,其余各治疗组大鼠肾间质纤维化面积、TGF-β1降低,Smad7信号蛋白增加(P<0.05或P<0.01),并且以益肾化瘀方高剂量组和缬沙坦组改善最明显(P<0.05)。结论益肾化瘀方可能通过抑制大鼠肾组织中TGF-β1的高表达,上调Smad7的表达,从而减轻肾间质纤维化。

益肾降浊化瘀方及其拆方对肾间质纤维化大鼠TNF-α及IL-8表达的影响

目的:观察益肾降浊化瘀方及其拆方对腺嘌呤致肾间质纤维化模型大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)表达的影响,探讨益肾降浊化瘀方对肾间质纤维化的作用机制。方法:将SPF级雄性SD大鼠70只分正常组,模型组,尿毒清组,全方组,拆方1组,拆方2组,拆方3组,除正常组比较,用腺嘌呤ig法制作肾间质纤维化模型。正常组,模型组予生理盐水(10 m L·kg^(-1)·d^(-1)),尿毒清组(2.5 g·kg^(-1)·d^(-1)),全方组(20.2 g·kg^(-1)·d^(-1)),拆方1,2,3组(11,8.2,7.9 g·kg^(-1)·d^(-1))。给药4周后,酶联免疫吸附法(Elisa法)检测血清TNF-α,IL-8含量,免疫组织化学法检测肾组织中TNF-α,IL-8蛋白水平。结果:与正常组比较,模型组TNF-α和IL-8在血清和肾组织中含量明显升高(P<0.05);与模型组比较,全方组、拆方1组、拆方2组、拆方3组血清和肾组织TNF-α,IL-8含量明显降低(P<0.05),其中全方组肾组织TNF-α,IL-8蛋白表达和血清TNF-α,IL-8含量明显低于各拆方组(P<0.05)。结论:益肾降浊化瘀方全方组及其拆方1组、拆方2组、拆方3组均能下调TNF-α,IL-8的表达,其中以益肾降浊化瘀方全方组作用最显著。

益肾化瘀方含药血清对NRK52E细胞转分化过程中p-Smad2/3、Smad7表达的影响

目的:观察益肾化瘀方含药血清对TGF-β1诱导的体外培养的肾小管上皮细胞(NRK52E)转分化过程中p-Smad2/3、Smad7表达的影响。方法:将体外培养的NRK52E细胞随机分为6组:正常对照组,TGF-β1刺激组,5%、10%、20%益肾化瘀方含药血清组,缬沙坦含药血清组,培养48h后取出。观察各组细胞形态变化,采用免疫细胞化学法检测NRK52E细胞p-Smad2/3、Smad7的表达。结果:NRK52E细胞经TGF-β1刺激后,失去原有的铺路石样形态,拉长增大呈梭形,而与益肾化瘀方含药血清共同作用后,细胞形态有所修复,细胞梭形改变减轻;免疫组化显示与正常对照组比较,TGF-β1刺激组细胞p-Smad2/3核表达明显增强(P<0.01),Smad7表达却减弱(P<0.01)。而各药物干预组与单纯TGF-β1刺激组相比,p-Smad2/3的表达随药物浓度增加呈下降趋势(P<0.01),而Smad7表达的阳性率明显增强(P<0.01)。其中20%益肾化瘀方含药血清组与缬沙坦含药血清组的表达无显著差异。结论:益肾化瘀方含药血清通过抑制Smad2/3的磷酸化,上调Smad7表达,显示出对TGF-β1刺激的NRK52E细胞转分化过程的阻抑作用,并与剂量呈正相关。