左归降糖益肾方对2型糖尿病肾病小鼠足细胞nephrin与podocin表达的影响

目的观察左归降糖益肾方对MKR转基因2型糖尿病肾病(DN)小鼠足细胞nephrin、podocin表达的影响,探讨其作用机制。方法 8周龄MKR小鼠40只随机分为4组,空白组(A组)、DN组(B组)、DN+中药组(C组)、DN+糖适平+贝那普利组(D组)。B、C、D组给予高脂饮食联合右侧肾切除造模。手术4周后,各给药组给予相应药物,4周后处死小鼠。电化学法观察小鼠空腹血糖,全自动生化仪检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN),ELISA法测定尿微量白蛋白(UmAlb),RT-PCR法检测nephrin、podocin mRNA表达,Western Blotting法测定nephrin、podocin蛋白表达,电镜观测足细胞形态结构。结果与A组比较,B组小鼠空腹血糖、SCr、BUN及UmAlb均明显升高(P<0.01),肾小球足细胞nephrin、podocin mRNA及蛋白表达明显下调(P<0.01)。给药后,与B组比较,用药组小鼠血糖、SCr、BUN及UmAlb明显下降(P<0.01),肾小球足细胞nephrin、podocin mRNA及蛋白表达明显上调(P<0.01,P<0.05)。电镜结果显示,给药组小鼠肾小球足细胞较B组明显改善。结论左归降糖益肾方通过恢复2型糖尿病肾病小鼠足细胞nephrin和podocin的表达而保护肾脏。

益肾通络方对膜性肾病大鼠肾组织Nephrin、Podocin mRNA表达的影响

目的:观察益肾通络方对膜性肾病大鼠肾组织Nephrin、Podocin mRNA表达的影响,为临床治疗膜性肾病(MN)提供依据。方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组、贝那普利组、中药组,各组按相应剂量灌胃,于第4周末观察24 h尿蛋白定量(UTP)、血清总蛋白(TP)、血白蛋白(Alb)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr),留取肾脏组织,用免疫荧光、光镜、电镜来观察大鼠肾组织病理变化,Real-time PCR法测Nephrin、Podocin mRNA在肾脏中的表达情况。结果:与正常组相比,其余三组TP、Alb均明显降低而TC、TG、UTP均明显升高,肾脏病理出现损害,肾组织中Nephrin、Podocin mRNA表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,治疗组UTP、TC、TG均明显降低,TP、Alb均明显升高,肾脏病理损害较轻,肾组织Nephrin、Podocin mRNA表达有所升高(P<0.05)。贝那普利组与中药组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:益肾通络方可明显降低膜性肾病大鼠的尿蛋白、升高血白蛋白水平、改善血脂代谢,对膜性肾病大鼠肾小球基底膜免疫复合物的沉积及基底膜的增厚有抑制作用,可减少肾脏病理损伤,能够上调膜性肾病大鼠肾组织Nephrin、Podocin mRNA的表达,延缓膜性肾病进一步发展。

益气活血化瘀汤对膜性肾病大鼠肾脏组织NephrinmRNA和PodocinmRNA表达的影响

目的观察益气活血化瘀汤对膜性肾病大鼠肾脏组织Nephrin mRNA、Podocin mRNA表达的影响。方法 SD大鼠随机分为正常对照组和造模组,其中造模组采用抗近端小管刷状缘抗原(抗Fx1A)血清一次性尾静脉注射诱导被动型海曼(Heymann)肾炎模型,造模成功后将造模组随机分为模型组、洛丁新组及益气活血化瘀汤低、中、高剂量组,每组6只。每组按相应剂量灌胃4周,每周收取大鼠24 h尿量,检测24 h尿蛋白定量(UTP)。4周末处死大鼠,心脏取血,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-c)、三酰甘油(TG)水平,取肾脏行Masson、PASM染色观测肾脏组织病理改变,免疫荧光法观察Ig G、C3改变,实时荧光PCR检测Nephrin mRNA、Podocin mRNA的表达。结果与正常对照组比较,其余5组UTP均升高(P<0.05),Nephrin mRNA、Podocin mRNA表达量均减少(P<0.01);与模型组比较,给药组UTP均减少(P<0.05),Nephrin和Podocin mRNA表达量均增加(P<0.01),TP、ALB有所升高但差异无统计学意义(P>0.05),Scr、BUN、TC、HDL-c、TG差异无统计学意义(P>0.05);与洛丁新组比较,益气活血化瘀汤低、中、高剂量组UTP有所减少,但差异无统计学意义(P>0.05),各生化指标差异无统计学意义(P>0.05),益气活血化瘀汤低、中、高剂量组肾脏组织Nephrin mRNA、Podocin mRNA表达均有所增加,但差异无统计学意义(P>0.05);益气活血化瘀汤各组之间各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论益气活血化瘀汤可明显减少膜性肾病大鼠的尿蛋白程度,减少肾脏病理损伤,上调肾脏组织Nephrin mRNA、Podocin mRNA的表达,延缓膜性肾病的进展。

健脾益肾活血方对膜性肾病大鼠肾组织Nephrin和Podocin表达的影响

目的观察健脾益肾活血方对膜性肾病大鼠24 h尿蛋白定量及肾脏组织Nephrin、Podocin蛋白表达的影响。方法将40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、贝那普利组、健脾益肾活血组,每组10只。除正常组外,其余组均采用抗FxlA血清一次性尾静脉注射诱导被动型Heymann肾炎模型。造模后第1天开始,贝那普利组给予0.15 mg/mL盐酸贝那普利片悬混液灌胃,健脾益肾活血组给予2.5 g/mL的健脾益肾活血汤灌胃,正常组、模型组给予等量生理盐水灌胃,均1次/d,连续4周。每周末检测各组大鼠24 h尿蛋白定量;于灌胃4周末处死大鼠,心脏取血,检测血清总蛋白、血清白蛋白、血肌酐、总胆固醇、三酰甘油;取肾脏组织,观察病理改变;免疫组化观察肾脏组织中Nephrin、Podocin蛋白阳性表达情况。结果造模后各造模组大鼠24 h蛋白尿定量均明显高于正常组(P均<0.05);灌胃3周和4周后,贝那普利组及健脾益肾活血组大鼠24 h蛋白尿定量均明显低于同期模型组(P均<0.05),健脾益肾活血组与贝那普利组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。末次灌胃结束后,模型组、贝那普利组、健脾益肾活血组血清白蛋白水平和肾脏组织中Nephrin、Podocin表达平均荧光强度均明显低于正常组(P均<0.05),模型组、贝那普利组、健脾益肾活血组血清胆固醇水平和模型组、健脾益肾活血组血清三酰甘油水平均明显高于正常组(P均<0.05),各组血肌酐水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05);模型组、贝那普利组及健脾益肾活血组各血清指标水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05);贝那普利组、健脾益肾活血组Nephrin与Podocin表达平均荧光强度均明显高于模型组(P均<0.05),且健脾益肾活血组均明显高于贝那普利组(P均<0.05)。结论健脾益肾活血方可以降低膜性肾病大鼠的尿蛋白水平,能够上调肾脏组织中Nephrin、Podocin蛋白的表达。

宣通三焦、活血通络方对膜性肾病大鼠肾保护作用及肾脏组织中Nephrin、NEPH1表达的影响

目的观察宣通三焦、活血通络方对膜性肾病大鼠血尿生化指标、肾脏病理及肾组织中Nephrin、NEPH1表达的影响。方法取40只清洁级健康SD雄性大鼠,随机选取10只作为正常组,其余大鼠采用阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)进行膜性肾病造模。将造模成功的大鼠随机分为膜性肾病组、雷公藤+激素组、中药组各10只。正常组、膜性肾病组给予生理盐水灌胃,雷公藤+激素组给予雷公藤多苷片和醋酸泼尼松片混悬液灌胃,中药组给予宣通三焦、活血通络方混悬液灌胃,均1次/d,连续4周。测定各组大鼠24h尿蛋白定量(24h UTP)及血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、白蛋白(ALB)、肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平,光镜、电镜、免疫荧光下观察各组大鼠肾脏病理改变,实时荧光定量PCR法测定肾组织中Nephrin和NEPH1 mRNA表达情况。结果与正常组比较,膜性肾病组、雷公藤+激素组、中药组大鼠24h UTP及血清TG、TC水平均明显升高(P均<0.05),血清ALB水平及肾组织中Nephrin和NEPH1 mRNA相对表达量均明显降低(P均<0.05),SCr、BUN无明显变化(P均>0.05);与膜性肾病组比较,雷公藤+激素组、中药组大鼠24h UTP及血清TG、TC水平均明显降低(P均<0.05),血清ALB水平及肾组织中Nephrin和NEPH1 mRNA相对表达量均明显升高(P均<0.05);中药组血清TC、TG水平均明显低于雷公藤+激素组(P均<0.05),雷公藤+激素组和中药组其余指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论宣通三焦、活血通络方可以降低膜性肾病大鼠蛋白尿,升高血ALB,调节脂代谢,改善肾脏病理改变,其机制可能与上调肾组织中Nephrin、NEPH1的表达有关。

益肾通络方对膜性肾病大鼠肾组织中转化生长因子-β1、Ⅳ型胶原mRNA表达的影响

【目的】观察益肾通络方对膜性肾病(MN)大鼠肾组织中转化生长因子-β(transforming growth factor,TGF-β1)、Ⅳ型胶原(collagenⅣ,ColⅣ)mRNA表达的影响。【方法】将SD大鼠随机分为正常组、模型组、盐酸贝那普利组(剂量为10mg·kg-1·d-1)、益肾通络方组(剂量为20 g·kg-1·d-1),各组按相应剂量灌胃,于第4周末观察24 h尿蛋白定量、白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平;采用免疫荧光、电镜及Real-time PCR法检测各组大鼠TGF-β1、ColⅣmRNA在肾组织的表达。【结果】与正常组比较,模型组大鼠出现大量蛋白尿,血清TP、ALB水平均显著降低,血清TC、TG水平均显著升高,肾组织出现病理损害,肾组织中TGF-β1、ColⅣmRNA均显著上调(P<0.05);与模型组比较,各治疗组24 h尿蛋白定量,TC、TG水平均显著降低,血清TP、ALB水平均显著升高,肾组织病理损害较轻,肾组织中TGF-β1、ColⅣmRNA均显著下调(P<0.05)。盐酸贝那普利组与益肾通络方组比较差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】益肾通络方对MN的治疗作用与其能够抑制TGF-β1、ColⅣmRNA在肾组织中的表达有关。

益肾健脾通络汤对特发性膜性肾病患者尿蛋白及凝血功能的影响

目的观察益肾健脾通络汤对特发性膜性肾病患者尿蛋白及凝血功能的影响。方法将84例特发性膜性肾病患者随机分为2组,对照组42例给予常规西药治疗,观察组42例在对照组治疗基础上给予益肾健脾通络汤治疗,2组均连续治疗3个月。观察2组治疗后24 h尿蛋白定量(24 h UTP)、血清白蛋白(ALB)、凝血功能[凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、血小板计数(Plt)]及肾功能指标[血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)]改善情况,评估2组临床疗效。结果治疗后2组24 h UTP、SCr、BUN水平和Plt均显著降低(P均<0. 05),ALB水平均显著升高(P均<0. 05),PT、TT均显著延长(P均<0. 05),且治疗后观察组上述各指标改善情况均显著优于对照组(P均<0. 05);观察组治疗后总有效率为90. 5%,显著高于对照组的73. 8%(P <0. 05); 2组治疗期间均未出现严重不良反应。结论益肾健脾通络汤能够明显改善特发性膜性肾病患者凝血功能和肾功能,减少蛋白尿,提高血清白蛋白水平,疗效确切,安全可靠。

参芪蛭龙汤通过ERK/cPLA2信号通路对膜性肾病小鼠的治疗作用及机制研究

目的:观察参芪蛭龙汤方对膜性肾病(MN)小鼠的治疗作用及可能的机制。方法:通过多次尾静脉注射阳离子牛血清白蛋白制备MN模型小鼠。造模结束后,依据尿蛋白数值将MN小鼠随机分为模型对照组(等量蒸馏水)、参芪蛭龙汤低剂量组(12 g生药/kg)、参芪蛭龙汤高剂量组(24 g生药/kg)和雷公藤多苷片组(14 mg/kg)。另取10只正常小鼠作为空白对照组(等量蒸馏水)。连续给药4周,每天灌胃给药1次。给药结束后,收集24 h尿液,测定尿蛋白数值;眼球取血,测定肾功、肝功、血脂及血清IL-6、IL-4、TNF-α含量;HE染色观察肾脏病理变化;免疫组化染色观察肾脏IgG沉积情况;Western-blot法测定肾脏组织ERK1/2和cPLA2蛋白表达;RT-PCR法检测肾脏组织Neph-1、Nephrin及Podocin基因表达。结果:与模型组比较,参芪蛭龙汤组病理变化明显改善;参芪蛭龙汤低、高剂量组可显著降低MN小鼠尿蛋白数值;降低血脂TC及TG水平(P<0.05或P<0.01);升高ALB及TP水平(P<0.05或P<0.01);对CRE、UREA及UA水平无显著影响(P>0.05);降低血清IL-6、IL-4及TNF-α含量(P<0.05或P<0.01);显著下调MN小鼠肾脏组织中p-ERK1/2和p-cPLA2蛋白表达水平(P<0.05或P<0.01);显著升高肾脏组织Neph1、Nephrin及Podocin mRNA基因表达水平(P<0.01)。结论:参芪蛭龙汤对MN小鼠具有较好的治疗作用,作用机制与调节Nephrin-podocin-Neph1受体复合物相关基因表达,保护肾小球滤过屏障;抑制ERK/cPLA2途径的激活,减轻肾小球上皮细胞损伤,从而减少促炎细胞因子分泌有关。

芪苓益肾通络方对脾肾气虚型特发性膜性肾病肾功能及血脂水平的影响

目的观察芪苓益肾通络方在脾肾气虚型特发性膜性肾病(IMN)中的应用效果及对肾功能及血脂水平的影响。方法收集衡水市中医医院内分泌肾病科门诊及病房就诊的脾肾气虚型IMN患者100例,根据随机数字表法将入组患者分为治疗组与对照组,各50例。其中对照组给予糖皮质激素联合环磷酰胺治疗,治疗组在使用糖皮质激素联合环磷酰胺基础上加用芪苓益肾通络方,治疗周期均为3个月。观察治疗前后肾功能及血脂水平的变化及药物不良反应情况,并对治疗前后中医证候严重程度进行积分,评价其总体疗效。结果治疗后24h尿总蛋白定量(24 UTP)、尿白蛋白/尿肌酐比值(ACR)、肾小球滤过率(GFR)、血清胱抑素C(CysC)、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、血浆白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)均有所改善(P<0.05),且治疗组改善程度优于对照组(P<0.05);治疗组不良反应发生率略低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论将芪苓益肾通络方用于IMN中,疗效良好,相比于常规治疗来说,其在降低尿蛋白,改善肾功能、血脂,延缓疾病进展等方面的优势更显著。

益肾健脾通络汤对特发性膜性肾病患者肾功能及凝血功能的影响

目的:探讨益肾健脾通络汤对特发性膜性肾病患者肾功能及凝血功能的影响。方法:2017年1月-2020年10月收治特发性膜性肾病患者50例,随机分为两组,各25例。对照组给予常规西医治疗;观察组在常规西医治疗基础上给予益肾健脾通络汤。比较两组患者肾功能及凝血功能。结果:观察组治疗后24小时尿蛋白定量(24 h UTP)、血清血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平均低于对照组,白蛋白(ALB)水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后血浆凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)水平均高于对照组,血小板计数(Plt)水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:益肾健脾通络汤可显著提高特发性膜性肾病患者的肾功能,改善凝血功能。