益肾化浊方对快速老化小鼠认知功能与海马神经元形态学的影响及机制

目的探讨益肾化浊方对阿尔兹海默病模型快速老化鼠(SAMP)8空间记忆能力、海马神经元形态学的影响及其作用机制。方法将48只9月龄健康雄性SMAP8采用双盲法随机分为SAMP8组、安理申组、益肾化浊方组,每组16只,另取16只SAMR1作为对照组。各组小鼠分别灌胃给予安理申(30 mg/kg)、益肾化浊方(20 g/kg)或等体积0.9%生理盐水,2次/d,连续14 w。分别采用Morris水迷宫检测空间学习记忆能力,尼氏染色观察细胞凋亡情况,电镜观察神经元超微结构,RT-PCR、Western印迹检测β-淀粉样蛋白前体(APP)、早老蛋白(PS1)基因和GSK-3β蛋白表达。结果与对照组比较,SAMP8组游泳总路程、逃避潜伏时间、海马CA1区神经元凋亡数目和APP、PS1基因及GSK-3β蛋白表达量均显著增加(P<0.01),穿越平台次数显著减少(P<0.01),游泳速度显著降低(P<0.01),超微结构损伤明显;与SAMP8组比较,安理申组与益肾化浊方组游泳总路程明显缩短(P<0.01),穿越平台次数明显增加(P<0.01),游泳速度亦显著加快(P<0.01),同时显著减轻神经元超微结构损伤;此外,安理申可显著下调GSK-3β蛋白表达(P<0.01),益肾化浊方可显著减少神经元凋亡数目(P<0.01),同时下调APP、PS1基因表达(P<0.01);组别和训练天数对逃避潜伏时间、总路程、穿越平台次数有明显影响(P<0.01)。结论益肾化浊方可有效提高SAMP8的空间记忆能力,抗神经元凋亡并保护神经元超微结构,其作用机制可能与下调APP、PS1基因和GSK-3β蛋白的表达相关。

益肾化浊颗粒对腺嘌呤饲喂法所致慢性肾衰大鼠血清中Bun,Crea含量的影响

目的:探讨益肾化浊颗粒对腺嘌呤饲喂法致慢性肾衰大鼠的治疗作用及作用机制。方法:采用0.75%腺嘌呤饲喂法复制大鼠慢性肾衰模型,动物随机分成6组,即空白对照组、模型对照组、尿毒清颗粒对照组和益肾化浊颗粒大、中、小剂量组,连续给药30 d后,计算肾脏指数,ELISA法测定血清中尿素氮(Blood Urea Nitrogen,Bun)和肌酐(Creatinine,Crea)含量,HE染色观察肾脏组织病理学变化。结果:与模型对照组大鼠比较,各给药组大鼠肾脏脏器指数差异均无统计学意义,各给药组大鼠血清中Bun和Crea含量均显著降低,益肾化浊颗粒大剂量组大鼠肾小管扩张程度较轻(P<0.05)。结论:益肾化浊颗粒可使腺嘌呤饲喂法所致慢性肾衰大鼠血清中Bun、Crea含量下降,改善肾脏病理变化。

HPLC测定益肾化浊颗粒中丹酚酸B的含量

目的建立益肾化浊颗粒中丹酚酸B含量的高效液相色谱测定方法。方法采用Waters AtlantisTM d C18色谱柱(3.9 mm×150 mm,5μm),以乙腈-甲醇-2%醋酸水溶液(18∶1∶81)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为286 nm,柱温30℃。结果丹酚酸B线性范围为0.12～1.57μg(r=0.9999),平均加样回收率为98.41%,RSD=0.69%(n=6)。结论本方法快速、简便、准确、重复性较好,结果可靠,可用于控制益肾化浊颗粒的质量。

益肾化浊方及拆方对SAMP8小鼠海马神经元凋亡的影响

目的观察益肾化浊方及拆方对7月龄SAMP8小鼠海马神经元凋亡的影响。方法将40只7月龄SAMP8小鼠随机分成SAMP8(P8)组、益肾化浊方(YSHZ)组,益肾(YS)组和化浊(HZ)组,每组10只,选择10只抗快速老化小鼠(SAMR1)作为对照(R1)组;益肾化浊方、益肾方与化浊方分别按照6.24、4.68、1.56 g/(kg·d)灌胃干预,R1和P8组予等量蒸馏水灌胃,疗程均为4 w,4 w后停止干预。采用TUNEL染色观察各组小鼠海马神经元凋亡指数变化,采用Western印迹检测凋亡途径中关键蛋白B淋巴细胞瘤相关X蛋白(Bax)/B淋巴细胞瘤(Bcl)2、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)9、Caspase10、裂解(Cleaved)Caspase3表达情况。结果海马CA1区神经元凋亡指数:与R1组比较,P8组凋亡指数明显增高(P<0.05)。与P8组比较,YSHZ组凋亡指数明显降低(P<0.05)。Western印迹检测结果:与R1组相比,P8组小鼠海马促凋亡蛋白Bax/Bcl2比值、Caspase9、Caspase10和Cleaved Caspase3表达明显升高(P<0.05)。与P8组相比,YSHZ组Bax/Bcl2比值、Caspase10和Cleaved Caspase3表达明显降低(P<0.05);YS组Caspase10表达明显降低(P<0.05)。结论益肾化浊方能明显减轻SAMP8小鼠海马神经元凋亡,该作用可能与调节Bcl-2家族蛋白表达,减少Caspase家族蛋白的活化有关;拆方中益肾方中药具有抗凋亡的作用趋势。

美施康定结合益肾化浊汤治疗骨转移癌痛的临床观察

目的观察美施康定结合益肾化浊汤治疗骨转移癌痛的临床疗效。方法 77例骨转移癌痛患者随机分为两组,对照组常规给予美施康定治疗,治疗组在对照组治疗的基础上加用中药益肾化浊汤,30d为1个疗程,2个疗程后观察两组疗效、用药前后疼痛强度、体力状况以及美施康定的用药剂量变化。结果治疗组疗效优于对照组,且疼痛强度(NRS)评分明显低于对照组(均P<0.05);治疗组体力状况(KPS)评分明显高于对照组(P<0.05);治疗组美施康定用量减少人数明显比对照组多(P<0.05)。结论在常规治疗上加用益肾化浊汤治疗骨转移癌痛疗效明显。