目的 研究日本血吸虫卵黄铁蛋白基因 DNA免疫小鼠诱导的保护性免疫力。方法 将构建的日本血吸虫卵黄铁蛋白基因真核表达重组质粒 p L XSN- Fer l经左后腿肌肉注射 BAL B/ c小鼠 ,共免疫 2次 ,间隔 2周。末次免疫后 5周以血吸虫尾蚴攻...目的 研究日本血吸虫卵黄铁蛋白基因 DNA免疫小鼠诱导的保护性免疫力。方法 将构建的日本血吸虫卵黄铁蛋白基因真核表达重组质粒 p L XSN- Fer l经左后腿肌肉注射 BAL B/ c小鼠 ,共免疫 2次 ,间隔 2周。末次免疫后 5周以血吸虫尾蚴攻击感染 ,攻击感染后 6周计数成虫负荷及肝组织虫卵数和死亡卵百分比。设空质粒免疫组为对照组。结果 p L XSN- Fer l免疫小鼠 ,诱生的Ig G亚类主要是 Ig G2 a和 Ig G2 b;免疫组可产生较高水平的 Ig A和 IFN- γ应答。 p L XSN- Fer l免疫小鼠诱生一定程度的减虫率 34 .0 8% ,减卵率 36 .83% ,死亡卵百分比为 30 .13%。结论 p L XSN-Fer l免疫小鼠能产生较明显的保护性免疫力 ,值得进一步深入研究。展开更多
目的 构建日本血吸虫卵黄铁蛋白基因 (Sj Yol Fer)的真核表达重组质粒 p L Yol Fer,转染 Hela细胞进行表达 ,并对表达产物进行鉴定。 方法 用 PCR法从日本血吸虫大陆株成虫 c DNA文库中扩增目的基因片段 ,经 RNA斑点杂交显示转录差...目的 构建日本血吸虫卵黄铁蛋白基因 (Sj Yol Fer)的真核表达重组质粒 p L Yol Fer,转染 Hela细胞进行表达 ,并对表达产物进行鉴定。 方法 用 PCR法从日本血吸虫大陆株成虫 c DNA文库中扩增目的基因片段 ,经 RNA斑点杂交显示转录差异 ,然后定向克隆入表达载体 p L XSN。转染重组体到 Hela细胞中进行表达 ,并用 SDS- PAGE和 Westernblot分析表达产物。 结果 PCR扩增产物大小约 6 0 0 bp左右 ,与雌虫 RNA的杂交信号明显强于雄虫。获得重组质粒p L Yol Fer,特异性表达产物约为 2 1ku,能被日本血吸虫感染兔血清及小鼠血清识别。 结论 为进一步免疫原性实验奠定了基础。展开更多
文摘目的 研究日本血吸虫卵黄铁蛋白基因 DNA免疫小鼠诱导的保护性免疫力。方法 将构建的日本血吸虫卵黄铁蛋白基因真核表达重组质粒 p L XSN- Fer l经左后腿肌肉注射 BAL B/ c小鼠 ,共免疫 2次 ,间隔 2周。末次免疫后 5周以血吸虫尾蚴攻击感染 ,攻击感染后 6周计数成虫负荷及肝组织虫卵数和死亡卵百分比。设空质粒免疫组为对照组。结果 p L XSN- Fer l免疫小鼠 ,诱生的Ig G亚类主要是 Ig G2 a和 Ig G2 b;免疫组可产生较高水平的 Ig A和 IFN- γ应答。 p L XSN- Fer l免疫小鼠诱生一定程度的减虫率 34 .0 8% ,减卵率 36 .83% ,死亡卵百分比为 30 .13%。结论 p L XSN-Fer l免疫小鼠能产生较明显的保护性免疫力 ,值得进一步深入研究。
文摘目的 构建日本血吸虫卵黄铁蛋白基因 (Sj Yol Fer)的真核表达重组质粒 p L Yol Fer,转染 Hela细胞进行表达 ,并对表达产物进行鉴定。 方法 用 PCR法从日本血吸虫大陆株成虫 c DNA文库中扩增目的基因片段 ,经 RNA斑点杂交显示转录差异 ,然后定向克隆入表达载体 p L XSN。转染重组体到 Hela细胞中进行表达 ,并用 SDS- PAGE和 Westernblot分析表达产物。 结果 PCR扩增产物大小约 6 0 0 bp左右 ,与雌虫 RNA的杂交信号明显强于雄虫。获得重组质粒p L Yol Fer,特异性表达产物约为 2 1ku,能被日本血吸虫感染兔血清及小鼠血清识别。 结论 为进一步免疫原性实验奠定了基础。
