右归饮对皮质酮大鼠细胞免疫及细胞因子的影响

用皮质酮造成大鼠细胞免疫抑制模型，观察右归饮的调节作用，结果表明：模型大鼠免疫功能明显抑制，淋巴细胞增殖反应减弱．ＮＫＣＣ活性降低，ＩＬ－２、ＩＦＮ－Ｙ含量减少。２００％右归饮灌胃（１０ｇ／ｋｇ）后，可以有效拮抗ＣＯＲＴ对细胞免疫的抑制，体内和体外试验均可见模型大鼠淋巴细胞增殖反应加强，ＮＫＣＣ活性提高，ＩＬ－２和ＩＦＮ－γ水平也明显提高，文章对其可能作用机理作了初步分析。

右归饮联合干细胞介入法对冷冻坏死股骨头血管修复的实验研究

目的：观察右归饮联合干细胞介入法对冷冻坏死股骨头的血管修复及疗效,探讨该方法在治疗冷冻坏死股骨头的作用机理。方法：毕格犬24只,随机分为4组：A组（模型组）、B组（右归饮组）、C组（干细胞介入组）、D组（干细胞介入加右归饮组）。液氮冷冻法造模;分离、培养、增殖骨髓基质干细胞（MSCs）;造模完成,C、D组行动脉灌注MSCs 1mL（细胞密度：5×10^6-1×10^7/mL）;术后,B、D组每天予以右归饮100mL;治疗4周及8周后分批处死。采用DSA、病理学,免疫组织化学和RT-PCR观察股骨头坏死修复、血管修复及VEGF、TGF-β表达情况。结果：DSA观察：D组的血管数量及直径较C组明显改善（P〈0.01）;组织病理学及免疫组织化学：各治疗组较A组的结构有明显改善,D组较其他各组的VEGF、TGF-β阳性表达率都明显增高（P〈0.01）;RT-PCR：D组VEGF、TGF-β较其他各组表达量增多（P〈0.01,P〈0.05）,各治疗组的表达都高于A组（P〈0.01）。讨论：右归饮联合干细胞介入法能够促进VEGF、TGF-β的表达增强,能够有效地改善坏死股骨头的血供,促进坏死修复。

加减右归饮对实验性兔膝关节骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的探讨加减右归饮对兔膝关节骨关节炎软骨细胞凋亡的影响。方法24只青紫蓝兔完全随机分为正常组、模型组、中医组和阳性对照组，按兔膝关节制动引起关节软骨退变的方法造模，8周后处死动物制备标本，光镜、透射电镜观察关节软骨形态学变化，流式细胞术检测软骨细胞凋亡率。结果中药组细胞凋亡率明显低于模型组及阳性对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论加减右归饮具有抑制软骨细胞凋亡的作用。

右归饮治疗强直性脊柱炎临床疗效观察

为了观察右归饮治疗强直性脊柱炎的临床疗效,将64例患者随机分为2组,治疗组34例,口服右归饮煎剂;对照组30例,口服SASP(柳氮磺胺吡啶)。服用3个疗程(90天)后统计疗效。结果显示治疗组总有效率为85.3％,对照组为83.3％。两组治疗后ESR、CRP、IgA明显下降,且治疗组优于对照组,表明右归饮对于强直性脊柱炎有确切的疗效。

正交试验法优选右归饮散剂的提取工艺

目的:筛选出右归饮散剂的最佳制备工艺。方法:以收膏率和梓醇的含量为考察指标,考察加水量、提取时间和提取次数对右归饮提取工艺影响程度,用正交设计的试验方法筛选最佳制备工艺。结果:右归饮的最佳提取条件为将药材加10倍量水,提取2次,每次1.5h。结论:试验为右归饮散剂制作的工艺条件提供了参考依据。

神经干细胞增殖分化相关蛋白在皮质酮大鼠中的变化

目的观察神经干细胞(NSC)增殖分化相关蛋白在皮质酮(CORT)大鼠NSC增殖分化中的作用。方法利用Westernblot方法检测NSC增殖分化相关蛋白变化。结果造模后30d和60d、CORT大鼠NSC增殖分化相关蛋白Notch1、hes5、Mash1、NeuroD表达水平显著低于正常对照组,尤以Mash1、NeuroD更显著(P<001);右归饮可明显增加Notch1、hes5、Mash1、NeuroD表达水平(P<001)。结论CORT显著抑制NSC增殖分化相关蛋白表达水平,右归饮能部份拮抗CORT对NSC增殖分化相关蛋白表达的抑制。Notch和bHLH家族可能与右归饮促进NSC增殖分化作用有关。

右归饮对激素性股骨头坏死大鼠血清脂联素影响的实验研究

目的:建立SD大鼠激素性股骨头坏死模型,观察右归饮对SD大鼠激素性股骨头坏死(steroid—induced avascular necrosis of femoral head,SANFH)治疗中血清脂联素的变化影响,探讨右归饮对SD大鼠激素性股骨头坏死的治疗机制。方法:随机将40只SD大鼠随机分组,A组(10只,空白组),B组(15只,模型组),C组(治疗组,15只)。A组肌注生理盐水1次/wk(40μL/kg剂量),连续注射12wk,共12次。B、C组先按20μg/kg剂量经腹腔注射大肠杆菌内毒素2次,每次须间隔24h,第二次注射大肠杆菌内毒素24h后,再按40mg/kg剂量经大鼠双侧臀肌注射醋酸泼尼松龙,连续注射12次,每次间隔7d,总共观察12wk。自wk7开始对治疗组用右归饮中药迸行灌胃治疗(1.32g/100g/d),1次d,连续灌胃6wk,模型组和空白组同等剂量生理盐水,连续灌胃6wk。观察各组标本的病理情况,并应用酶联免疫分析(ELISA)测定法监测血清脂联素的水平。结果:模型组中的血清脂联素含量与空白组比较,有显著下降(P<0.01)。治疗组中的血清脂联素含量与模型组比较,有显著上升(P<0.01)。结论:右归饮可有效提升激素性股骨头坏死SD大鼠模型体内的血清脂联素含量,提高骨修复的速度。

右归饮对激素性股骨头坏死氧化应激途径相关基因表达的影响研究

目的通过基因芯片技术研究右归饮对激素性股骨头坏死(SINFH)氧化应激途径相关基因表达的影响,筛选出右归饮抗氧化应激的可能作用位点,为中药防治SINFH的研究奠定基础。方法取健康成年Wistar大鼠20只,随机分为模型对照组和右归饮治疗组,每组各10只。两组大鼠均以腹腔注射大肠杆菌内毒素后,于左侧臀肌注射大剂量甲泼尼龙的方法建立激素性股骨头坏死模型。模型对照组予以蒸馏水灌胃,右归饮治疗组给予右归饮灌胃,每天1次。6周后取两组大鼠的左侧股骨头标本进行组织病理学观察和基因芯片检测。结果组织病理学观察可见模型组大鼠出现骨细胞坏死,骨小梁紊乱、变细,空骨陷窝率增加;右归饮治疗组骨小梁板层样结构稀疏但较为整齐,骨小梁边缘成骨细胞多见,软骨下血管丰富,偶见少量空骨陷窝。基因芯片检测发现氧化应激途径(oxidative stress)活性下降,代表性基因为Gclc、SOD3和COX6A2。结论右归饮可影响大鼠激素性股骨头坏死组织中氧化应激相关基因的表达,代表性基因为Gclc、SOD3和COX6A2。

右归饮对糖皮质激素诱导的骨髓间充质干细胞凋亡的调节作用

目的:探讨右归饮对糖皮质激素(glucocorticoids,GCs)诱导的大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)凋亡的调控作用及机制。方法:将20只SD大鼠分为生理盐水组和右归饮组,每组10只,分别采用生理盐水及右归饮灌胃,每日一次。灌胃2周后,脱脊处死大鼠并取血,制备空白血清和含药血清,提取、培养大鼠BMSCs并进行分组给药:空白组(10%空白血清)、模型组(10%空白血清+地塞米松5×10^(−5)mol/mL)、中药组(10%含药血清+地塞米松5×10^(−5)mol/mL)、对照组(10%含药血清),分别用CCK-8法检测各组细胞增殖变化,ELISA法测定各组骨碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)水平,茜素红染色比较各组红染钙矿化结节数量,Western blot检测BMSCs凋亡相关蛋白表达,并对量丰成分进行分子对接,根据结合能评价靶点与活性化合物的结合强度与活性。结果:对比各组不同时间点的吸光度(A_(450))比值,模型组较空白组均降低(P<0.05),而中药组、对照组较模型组均提高(P<0.05),对照组与空白组差异无统计学意义(P>0.05);ELISA结果表明模型组ALP水平显著低于空白组和对照组(P<0.05),中药组显著提高ALP水平(P<0.05),对照组与空白组差异无统计学意义(P>0.05);此外,模型组与各组相比钙矿化结节数目显著降低,对照组与空白组差异无统计学意义,两组均高于模型组与中药组;Western blot结果表明与空白组相比,模型组促凋亡蛋白Bax和cleaved caspase 3的表达水平均显著升高(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平显著降低(P<0.01),中药组的结果则与之相反,对照组与空白组的表达无明显差异;分子对接结果表明右归饮主要通过epicatechin 5,7,3'-trimethyl ether、delphinin等调控BMSCs的凋亡,促进成骨分化。结论:右归饮含药血清可通过对Bax、cleaved caspase 3、Bcl-2的调控,保护GCs诱导的BMSCs凋亡,促进BMSCs增殖与成骨分化。

何世东扶正固本、分期论治类风湿性关节炎

何世东教授认为遗传基因、易感基因在特定条件下诱发基因异常表达,导致病理性自身免疫反应,发为类风湿性关节炎;提出"扶正固本、调节肝脾肾,分期论治"的独到见解,重视肝脾肾,急性期寒热错杂,桂枝芍药知母汤辨证加减,缓解期重视扶正,黄芪四君汤合右归饮辨证加减。根据病程,灵活应用岭南道地药材、扶正固本药及虫类搜风药,在组方遣药配伍注意剂量比例;类风湿性关节炎为慢性破坏性关节炎,尚须注重病机之标本,治标为先,缓图治本。

右归饮联合MSCs介入治疗早期股骨头缺血性坏死的研究

目的观察右归饮联合MSCs介入治疗早期股骨头缺血性坏死(avascular necrosis of the femoral head,ANFH)的疗效及促进再血管化、再骨化的作用。方法取健康雄性成年毕格犬24只,体重(10.0±0.5)kg,随机分为4组:A组(模型组)、B组(右归饮组)、C组(MSCs介入组)、D组(MSCs介入加右归饮组),每组6只。通过液氮冷冻法建立早期ANFH模型。分离、培养并以BrdU标记MSCs。造模3周后,C、D组动脉灌注标记后的浓度为(0.5～1.0)×106个/mL的MSCs1mL,B、D组每天予右归饮100mL灌胃,A、C组以100mL蒸馏水灌胃。连续治疗4周及8周后行股骨头大体观察,DSA和MRI观察股骨头供血血管的数量及直径的变化情况,行组织学及免疫组织化学染色观察VEGF、BrdU阳性表达情况,实时荧光定量RT-PCR检测VEGF mRNA表达。结果治疗后4、8周,A组股骨头外形扁平,呈蘑菇状;B、C、D组股骨头外形基本正常。DSA观察示C、D组治疗后供血血管分支增粗、增多,原阻塞血管再通。治疗后4、8周,C、D组间血管数和血管直径比较差异均有统计学意义(P<0.05);两组血管直径与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05),D组血管数与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05)。MRI检查示B、C、D组较A组明显改善,D组尤为明显,T1W略低信号,T2W略低信号,STIR略高信号。组织病理学及免疫组织化学染色示:B、C、D组较A组结构有明显改善,D组较其他各组的VEGF阳性表达率均明显增高(P<0.05),D组较C组的BrdU阳性率、阳性成骨细胞数、阳性血管数表达均明显增高(P<0.05)。实时荧光定量RT-PCR检测示:D组较其他各组VEGFmRNA表达量增多(P<0.05),B、C、D组的VEGF表达均高于A组(P<0.05)。结论右归饮联合MSCs介入治疗早期ANFH疗效显著,可改善坏死股骨头的血供、促进修复、预防塌陷。

基于“阳生阴长,阳杀阴藏”理论探讨阴阳互济之左、右归丸对绝经后骨质疏松症防治

"阳生阴长,阳杀阴藏"是描述自然界生、长、化、收、藏演变规律的理论。绝经后骨质疏松症是妇女绝经后,雌激素水平下降,导致全身骨代谢紊乱的疾病,从中医阴阳观来看,绝经后骨质疏松症患者存在阴阳失衡的病因病机。文章旨在以天地之阴阳,万物之阴阳的特点规律,结合到人身之阴阳,而人一身之阴阳皆源于肾之阴阳,从"阳生阴长,阳杀阴藏"理论分析肾阴、肾阳在绝经后骨质疏松症发生、发展过程阴阳盛衰偏倚变化,从"补肾阴肾阳"角度分析"阴阳互济"立法的左归丸、右归丸防治绝经后骨质疏松症的理论基础,为临床区分应用左、右归丸防治绝经后骨质疏松症提供中医理论依据。

右归饮介导Wnt/β-catenin通路干预大鼠激素性股骨头坏死研究

目的研究右归饮对激素性股骨头坏死(steroid-induced avascular necrosis of femoral head,SANFH)模型大鼠的影响,探讨其作用机制。方法取50只SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组及右归饮低(6.6 g生药/kg)、中(13.2 g生药/kg)、高(26.4 g生药/kg)剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠采用脂多糖(LPS)联合激素法制备SANFH模型。右归饮各剂量组在造模同时灌胃相应剂量的右归饮,模型组和正常组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续8周。末次给药后,采用全自动生化分析仪测定各组大鼠血清钙、磷水平;各组大鼠股骨头标本行MRI检测,采用HE染色观察大鼠股骨头病理学改变,采用RT-PCR检测大鼠股骨头caspase-3、β-catenin、Wnt3α基因表达。结果与模型组比较,右归饮中、高剂量组血清钙、磷水平升高(P<0.05或P<0.01),右归饮低剂量组血清磷水平升高(P<0.05);右归饮中、高剂量组股骨空骨陷窝率降低(P<0.05或P<0.01);右归饮低、中、高剂量组caspase-3 mRNA[(2.146±0.191)、(1.688±0.247)、(1.370±0.252)比(2.535±0.236)]水平降低(P<0.05或P<0.01),β-catenin mRNA[(0.433±0.102)、(0.496±0.091)、(0.698±0.089)比(0.259±0.106)]水平升高(P<0.05或P<0.01);右归饮中、高剂量组Wnt3αmRNA[(0.509±0.061)、(0.833±0.053)比(0.384±0.052)]水平升高(P<0.05或P<0.01)。右归饮中、高剂量组MRI检测可见关节周少许T2高信号,关节内可见T2高信号,与股骨头软骨界限较分明,股骨头内部无明显异常信号;右归饮中、高剂量组HE染色可见骨小梁粗大,排列较规则,骨细胞大部分正常,空骨陷窝较少。结论右归饮对SANFH大鼠的保护作用可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。