Cloning and Analysis of Full-Length cDNA of PumNPR1 Gene from Pyrus ussuriensis Maxim

The purpose of this study is to find a new gene resource for the researches of molecular breeding of Rosaceae plants disease-resistance. Pyrus ussuriensis Maxim is used as a starting material to clone the full-length cDNA of NPR1（nonexpressor of pathogenesis- related genes 1） which is a key regulator in SA （salicylic acid）-mediated systemic acquired resistance （SAR） by homologous cloning and RACE techniques. The length of the cDNA sequence was 1 767 bp, the ORF was 1 761 bp, it coded 586 amino acids, pi=5.58, the relative molecular weight was 65.009 ku, contained 19 kinds of amino acids, and had full BTB/POZ and ANK domains. Compared the homology of NPR1 gene in GenBank database, the homology with Pyrus pyrifolia, Arabidopsis thaliana, Nicotiana tabacum, Lycopersicon esculentum, Oryza sativa, Helianthus annuus were 98%, 62%, 68%, 65%, 57%, 63%. The homology offunctional area were 99%, 78%, 82%, 79%, 74%, 77%. This NPR1 gene was considered as homologic gene of Pyrus ussuriensis Maxim and named PumNPR1.

油红梨(Pyrus ussuriensis)果实后熟过程中香气成分的变化

通过顶空固相微萃取结合气相色谱质谱联用技术分析油红梨果实后熟不同时期挥发性组分。后熟0 d、5 d及10 d时分别检测出11、26和33种挥发性成分,主要为酯类、醛类、醇类及萜类物质。各种挥发性物质在不同的后熟时期种类及绝对含量均为升高的趋势,尤其是酯类组分的增加;35种挥发性组分中共检测出7种特征香气组分,分别为己醛、E-2-己烯醛、丁酸乙酯、2-甲基丁酸乙酯、己酸乙酯、乙酸己酯和庚酸乙酯,其中具有果香型特征的2-甲基丁酸乙酯、己酸乙酯及乙酸己酯对果实香气的贡献值较大;基于挥发性组分的差异,电子鼻能够很好的将不同时期的油红梨区分开来。

秋子梨果实矿质元素含量差异分析

以黑龙江省36份秋子梨果实为试材,采用ICP-MS法对果皮和果肉中12种矿质元素含量进行测定并比较分析。结果表明:秋子梨果实中各矿质元素的平均含量依次为K>P>Ca>Mg>Na>Al>Fe>Zn>Cu>Cr>Pb>Cd,不同种质中果皮和果肉各元素的含量差异明显,野生资源的果实矿质元素含量高于选育品种、农家品种和优良品系。相关性分析结果表明,果皮和果肉中的P、K、Fe、Cu和Zn这5种元素之间存在极显著正相关。聚类分析结果表明,根据果皮或果肉的矿质元素含量,36份秋子梨种质可分为2个略有不同的类别。主成分分析表明,S23、S20、S16和S10是果实矿质元素总含量较高的品种,可优先作为功能性品种选育种质材料,为秋子梨果实矿质元素的遗传改良提供更为深入和有价值的依据。

两个秋子梨果实品质分析

为探究两个秋子梨品种差异,更好地对其进行开发利用,以红丰和早黄成熟期果实为试材,利用显著性分析、相关性分析、主成分分析和聚类分析等方法对两个不同品种秋子梨果实品质进行分析。结果表明,两种梨的果实在果实外观、果肉风味、果实香气、果汁含量上有所不同,在外观品质上红丰梨单果重为212.96 g、横径为75.49 mm、纵径为70.25 mm、果梗长度为36.48 mm,这4个指标分别达到了早黄梨的171.13%、119.33%、121.29%和113.19%;红丰梨的果实硬度显著低于早黄梨,为早黄梨的79.37%。因此红丰梨相较于早黄梨果形较大、果实较重、果肉较软,适合喜好大果、软果的消费者选择;在营养成分上红丰梨的可溶性固形物、可溶性糖、矿质元素含量均显著高于早黄梨,其中可溶性固形物含量为11.10%、矿质元素含量为3748.49 mg·kg^(-1),而可溶性糖含量为124.61 mg·g^(-1),达到了早黄梨可溶性糖含量的206.89%;果实的单果重、果实横径、果实纵径、果实硬度4项形态指标与可溶性糖、可溶性固形物、维生素C、矿质元素呈现出显著相关性,与可滴定酸呈极显著相关;在矿质元素含量上,红丰梨果肉和果皮中矿质元素Mg、P、K、Ca、Fe的含量以及12种矿质元素的总含量均高于早黄梨。对两个品种果实品质综合比较得出,红丰梨果实品质优于早黄梨,更适合在生产上开发利用。

啤特果机械采收与分选技术装备

林果种植产业发展过程中传统的采收与分选方式往往需要投入大量的人力物力,随着林果栽培面积逐渐扩大以及林果种类的逐渐增加,传统的人力生产方式已经不能满足产业的整体发展需求,急需要推进机械采收和机械化分选。在分析啤特果机械采收与分选应用技术的基础上,对未来的发展趋势进行了探讨。

辽宁省‘南果梨’园土壤和叶片养分状况调查分析

【目的】摸清辽宁省‘南果梨’园土壤养分状况,为合理施肥提供理论依据。【方法】对辽宁省30个有代表性的‘南果梨’园土壤养分状况及叶片矿质营养状况进行了研究,结合相关土壤养分分级标准,分析‘南果梨’园土壤养分存在的问题。【结果】结果表明,辽宁省66.7%～80.0%‘南果梨’园叶片N、P、K含量处于适宜范围内,10.0%～20.0%的‘南果梨’园叶片N、P、K含量较低,有23.33%的‘南果梨’园叶片N的含量较高;50.0%～100%果园叶片Ca、Mg、Fe、B、Zn、Cu在适宜范围内,100%叶片Mn含量在高量范围内;果园土壤pH较低,平均为5.75,83.33%的果园pH小于6.5;50%的果园土壤有机质含量处于中等水平,40.0%的‘南果梨’园土壤有机质含量较低;60.0%～93.33%果园土壤全氮、有效磷、有效钾含量在中等以上水平,6.67%～33.3%的果园土壤全氮、有效磷和有效钾含量较低;63.33%～100.0%的果园土壤有效锌、有效铁、交换钙和交换镁含量整体在中等以上水平,部分果园土壤有效锌、铁含量较低;果园土壤0～20 cm土壤养分含量表层高于0～40 cm土层。【结论】辽宁省‘南果梨’叶片矿质元素含量整体处于适量状态,叶片Mn较高;果园土壤整体呈酸性,土壤有机质及矿质元素含量总体处于中等水平,部分果园土壤缺磷少钾氮不足,果园土壤养分呈表聚化。

5种秋子梨品种的花粉形态观察

应用扫描电子显微镜,对安梨、花盖梨、尖把酸梨、南果梨和磨盘梨5种秋子梨品种的花粉进行了形态观察。结果表明,不同秋子梨品种花粉的外部形态大致相同,均为橄榄形,有3条萌发沟,不同品种的萌发沟宽度存在差异,轴面观主要为三角形与方形2种;不同品种花粉粒的大小差异不大,均为30～50μm;不同品种间花粉壁表面纹饰存在较大的差异,其主要为网脊粗细及其交叉与平行排列的程度不同,其中花盖梨与南果梨网脊主要为平行排列,安梨、尖把酸梨与磨盘梨的网脊走向以交叉为主。此外,不同品种的网孔大小与形态也存在差异。

生物炭减缓干旱胁迫对秋子梨根系呼吸生理功能的影响

【目的】探讨生物炭减缓干旱胁迫对秋子梨幼苗根系呼吸代谢功能的影响机制。【方法】以1年生盆栽秋子梨(Pyrus ussuriensis Maxim.)幼苗为试材,主要利用液相氧电极技术和方法,研究废弃枝条制成的生物炭对干旱胁迫下秋子梨幼苗根系活力、根系呼吸代谢途径、关键酶活性及中间产物的影响。【结果】土壤干旱胁迫期间,干旱处理的土壤相对含水量呈明显下降趋势。而生物碳处理的土壤含水量一直高于干旱处理水平。其中,干旱胁迫3 d,生物炭处理的土壤含水量较干旱处理高23.6%。生物炭处理的根系活力较干旱处理下降缓慢,干旱胁迫7~11 d,生物炭处理的根系活力分别较干旱处理高28.2%、23.0%和20.4%;生物炭处理有效减缓根系呼吸代谢EMP途径贡献率下降幅度,维持稳定的TCA途径贡献率,PPP途径贡献率升幅较小,线粒体电子传递途径仍以细胞色素途径(CP)为主,PPP途径的关键酶G-6-PDH和6-PGDH活性明显高于同期干旱处理,根系TCA途径中间产物丙酮酸和柠檬酸含量高于干旱处理。【结论】生物炭减缓干旱胁迫下土壤水分损耗,减轻土壤干旱胁迫对秋子梨幼苗根系呼吸代谢功能的抑制作用,提高秋子梨植株对干旱胁迫的适应能力。

南果梨周年干物质与氮磷钾积累动态

[目的]明确南果梨干物质积累特征和氮磷钾养分周年动态积累规律,为南果梨优化施肥量和施肥时期提供依据。[方法]以12年生南果梨树为试材采用田间采样和树体分解方法,分别于萌芽后10 d(萌芽期)、30 d(花期)、65 d(幼果膨大期)、100 d(果实膨大或新稍停止生长期)、130 d(果实着色前)、155 d(果实采收期)、185 d(采收后)、210d(落叶前)8个生育期选干周和树高一致的3株树将树体连根从土壤中挖出,分出果实、叶片、枝条、主干、主根、侧根、须根,各器官单独称重,并取200g左右的鲜样按清水、洗涤剂、清水、1%盐酸、3次去离子水冲洗、杀青、烘干后,电磨粉碎过0.15 mm筛,测定样品中氮、磷、钾含量。[结果]1)南果梨周年生育期内树体干物质当年净积累量为18.4 kg/plant,干物质累积速率出现两次累积高峰,分别是幼果膨大期(0.15 kg/d)和采收期(0.11 kg/d)。2)南果梨树体总氮周年积累量为154.0~301.0 g,新生器官为0~116.2 g,果实膨大期达到最高;多年生器官氮积累量为154.0~194.8 g,落叶前达到最高。3)南果梨树体总磷周年积累量为17.1~37.2 g,果实着色前最高。其中新生器官为13.7 g,果实采收期最高;多年生器官为17.1~24.9 g,果实转色期最高。4)南果梨树体总钾周年积累量为27.9~174 g。新生器官钾为97.3 g,采收期最高;多年生器官钾为27.6~76.6 g,落叶前最高。5)产量大约为17 t/hm^2的12年生南果梨从萌芽到落叶前树体当年氮磷钾的单株净累积量分别为146.2、20.1、146.1 g折合1000 kg果实经济产量需吸收氮(N)、磷(P)、钾(K)5.4、0.7、5.4 kg。[结论]南果梨周年干物质单株积累总量为41.4kg,当年净积累量为19.7kg。南果梨干物质积累主要集中在花期到果实膨大期和果实转色到落叶前,分别占47.3%和47.5%。南果梨从萌芽到落叶前氮、磷、钾的单株净累积量分别为146.2、20.1、146.1 g,每1000 kg果实经济产量需吸收氮(N)、磷(P)、钾(K)5.4、0.7、5.4 kg。从开花到果实膨大期和从果实着色到采收后30天对氮吸收分别占总氮累积量的39.0%和49.0%,而磷、钾的累积从萌芽到开花较快到果实膨大期磷的累积达67.4%,钾的累积达65.1%,果实膨大期是干物质和氮磷钾积累的关键时期。

黑龙江省野生秋子梨群体遗传结构的荧光AFLP分析

以来自黑龙江省海林市、东宁县和孙吴县3个居群的90个野生秋子梨株系为试材,利用荧光AFLP标记技术对野生秋子梨群体遗传多样性及遗传结构进行了分析,旨在为野生秋子梨种质资源的保护和利用提供科学依据。结果表明:野生秋子梨3个居群种群水平多态性位点百分比(P)为82.95%,Nei's基因多样度(H)为0.1467,Shannon信息指数(I)为0.2397,野生秋子梨遗传多样性水平较低;3个居群的多态性位点百分比、基因多样度及Shannon信息指数比较,东宁居群>海林居群>孙吴居群,居群水平上东宁居群的遗传多样性较丰富;基因分化系数(GST=0.1008)显示,野生秋子梨的遗传变异主要发生在居群内;野生秋子梨居群间存在较大的基因流动(Nm=4.4603),说明3个野生秋子梨居群间存在着较频繁的基因交流;UPGMA聚类分析结果表明,3个居群是相对独立的孟德尔群体,且海林居群和东宁居群的遗传关系较近。3个居群中东宁居群遗传多样性最丰富,是进行原生境保护优先考虑的居群。

五种秋子梨果实采后品质变化及生理差异研究

以京白梨、南果梨、花盖梨、尖把梨、安梨5种秋子梨果实为试材,研究其在常温(20±1)℃下果实采后品质变化及生理差异,并分析了果实硬度与其他品质指标的关系。结果表明,供试品种货架期长短存在差异;在后熟过程中,五种秋子梨果实硬度和VC含量均呈下降趋势,可溶性固形物(SSC)含量和相对电导率均呈上升趋势,果皮色泽由绿转黄;京白梨的呼吸强度显著高于其他4种秋子梨(P<0.05)且有呼吸跃变峰;京白梨、南果梨、花盖梨及尖把梨的乙烯释放速率均呈先升高后降低的趋势,且均存在乙烯释放跃变,京白梨和南果梨的乙烯释放速率极显著高于其他3种秋子梨(P<0.01),安梨没有乙烯跃变峰且乙烯释放速率最低。硬度与其他品质指标的相关性分析表明,除了果实硬度、VC含量、果皮色泽和相对电导率影响秋子梨果实后熟软化外,京白梨的可滴定酸(TA)含量,南果梨的SSC和呼吸强度,以及安梨的SSC均与果实后熟软化呈显著(P<0.05)或极显著相关(P<0.01)。

‘香水梨’和‘嘉宝梨’后熟期间呼吸强度及品质指标的变化及其比较

以商业成熟的‘香水梨’和‘嘉宝梨’为试材,经室温（20±3）℃、相对湿度85%~90%条件下后熟,测定后熟期间的生理和品质指标的变化。结果表明,‘香水梨’后熟期间的呼吸强度呈典型的跃变型变化,显著高于‘嘉宝梨’,且‘香水梨’在第5天出现呼吸高峰,‘嘉宝梨’虽在第15天时有呼吸高峰出现,但变化不显著;‘嘉宝梨’的可溶性固形物含量和固酸比显著高于‘香水梨’,两者的可溶性固形物含量分别在第15天和第10天时达到最大,‘香水梨’可滴定酸含量显著高于‘嘉宝梨’,后熟期间均逐渐下降;果实色泽变化为a＊值变化最明显,‘香水梨’显著高于‘嘉宝梨’,后熟期间均逐渐上升;2种梨后熟期间石细胞含量基本不变,硬度逐渐减小,质量损失率逐渐增大,均为‘香水梨’高于‘嘉宝梨’。综上所述,‘香水梨’和‘嘉宝梨’均属于跃变型果实,后熟期间果实色泽和质地等品质性状均显著提升。

京白梨花药开裂异常的解剖学研究

比较研究了京白梨(Pyrus ussuriensis Maxim.)、鸭梨、雪花梨花药开裂特性、环境条件对花药开裂的影响以及花药开裂异常的解剖学结构,结果表明:(1)京白梨花药开裂率明显低于鸭梨和雪花梨,使其产生花粉的量较少,从而导致传粉能力较弱.(2)京白梨、鸭梨、雪花梨在环境温度为25℃,相对湿度在60%～80%时最适宜花药开裂,但京白梨花药开裂率始终低于鸭梨和雪花梨.(3)在京白梨花药发育后期不能形成开裂腔是引起花药不开裂的主要原因,而导致开裂腔不能形成的原因可能与单核期的绒毡层细胞不退化和药室内壁细胞不进行U字型加厚有关.

土壤含水量对三种阔叶树苗气体交换及生物量分配的影响

在温室内用盆栽法研究了土壤含水量对茶条槭、山梨和山桃的气体交换及生物量分配的影响 .设置 4种土壤水分处理 (土壤相对含水量 75 .0 %、6 1.1%、4 6 .4 %和 35 .4 % ) .结果表明 :随土壤含水量降低 ,3树种苗木净光合速率、蒸腾速率和气孔导度均下降 ,土壤含水量最低时 ,茶条槭苗木各生理指标降低幅度最大 ,山梨和山桃次之 .茶条槭和山梨水分利用效率 (WUE)随土壤含水量的减少呈降低趋势 ,山桃WUE呈升高趋势 .水分胁迫下 ,3树种苗木根分配生物量显著增加 .茶条槭在水分胁迫下 ,根冠比增加幅度最大 ,山梨次之 ,山桃最小 .此外 ,茶条槭叶形态可塑性强 ,随土壤含水量降低 ,茶条槭单叶叶面积和总叶面积显著减小 ,叶厚度增加 .山梨和山桃在水分胁迫下单叶叶面积及总叶面积无显著变化 .综合 3树种苗木在水分胁迫下的生理和形态指标及生物量分配的变化 ,茶条槭和山桃对水分胁迫的适应能力强于山梨 .表 4参

满园香梨叶片不定芽的诱导

采用正交试验设计研究了不同基本培养基、TDZ、生长素种类及其浓度4个因素组合对满园香梨(Pyrusus鄄suriensisMaxim.cv.Manyuanxiang)离体叶片不定芽再生的影响。结果表明,基本培养基的种类是影响叶片不定芽再生最重要的因素,其次是生长素的种类。通过叶片不定芽再生频率和平均每叶再生不定芽数分析表明,NN69+TDZ3.0mg/L+IAA0.2mg/L为满园香梨叶片不定芽发生的最佳培养基组合,在该培养基组合上,满园香梨叶片再生率和平均再生芽数分别达到了74.8%和4.40。同一叶片的基部和顶端比中部更有利于不定芽的再生。

山梨组织培养及快繁技术研究

通过对由山梨种子长出的茎尖进行组织培养的研究,筛选出了适宜诱导及增殖的培养基是ZS(改良的MS培养基)+BA 2 mg/L+NAA0.1 mg/L,适宜生根的培养基是ZS(改良的MS培养基)+IBA3 mg/L。

山梨SRAP反应体系的建立

以山梨为试材,提取其基因组DNA,探讨了SRAP反应体系中各组分浓度对扩增的影响。结果表明,采用该方法提取的基因组DNA纯度好、片段完整、无明显降解;在20μL的反应体系中,各成分适宜浓度分别为TaqDNA聚合酶1.0 U、模板DNA 70 ng、dNTPs 250μmol/L、每个特异性引物0.3μmol/L、10×PCR Buffer 2μL,余下的体积用已灭菌的去离子水补充至20μL。

南果梨专用肥对其产量和品质的影响

以6-10a生南果梨树为试材，于2006年在鞍山千山区绿色果品有限公司果园基地进行为期1a的有关南果梨专用肥的应用研究，取得了明显的效果。结果表明：不同的南果梨专用肥施用量对南果梨的产量和品质都有显著的影响；在一定施肥量范围内，随南果梨专用肥施用量的增加，产量和品质有明显提高；根据回归方程求得施用南果梨专用肥11．82kg／株时，南果梨产量达到最高，营养品质和外观品质最佳；如继续增加施用量，其产量和品质则会降低。

苹果和山梨导管的解剖学研究

采用离析法和光学显微技术,对苹果和山梨木质部导管细胞的类型、所占比例及导管细胞的长度和口径,纤维细胞的长度和口径进行了比较解剖研究.结果表明:两种材料导管类型相同,但所占比例不同;山梨木质部导管要比苹果木质部导管长且宽;山梨的纤维细胞长度和口径比苹果的纤维细胞长度和口径大,且长度上差异明显.

观赏山梨叶片总RNA的提取及质量分析

为了从富含多糖和多酚等物质的观赏山梨幼叶中提取和分离出高质量的RNA,利用Trizol法、改良的Trizol法、异硫氰酸胍法、硼砂-CTAB法和硼砂-SDS法提取观赏山梨叶片总RNA。通过RNA产率、纯度、电泳图谱和RT-PCR结果等分析来确立适用于观赏山梨RNA分离的方法。结果表明,硼砂-SDS法提取的RNA呈现出28S rRNA,18S rRNA和5S rRNA三条较清晰的条带,RNA的得率和纯度均较高、很少有降解。RT-PCR结果进一步证实了硼砂-SDS法提取的观赏山梨叶片总RNA可用于分子生物学的下游试验。此方法简便易行,成本也较低,适合于富含多糖、多酚植物材料RNA的提取。另外4种方法获得的RNA得率、纯度较低,降解严重,有较多小分子和盐存在,因此不适合用于观赏山梨总RNA的提取。