猪急性腹泻综合征冠状病毒S1蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)S1蛋白抗体的间接ELISA检测方法,本研究通过构建重组真核分泌型表达质粒pCAGGS-S1-His并转染HEK293F悬浮细胞进行可溶性表达S1蛋白。转染重组质粒5 d后的细胞上清利用HisTrapTM Excel亲和层析柱纯化,浓缩后的蛋白经SDS-PAGE、western blot鉴定显示获得了分子量约为130 ku且大于理论大小的重组S1蛋白,表明该蛋白为分泌表达且具有良好的翻译后修饰。利用获得的重组S1蛋白作为包被抗原,通过优化反应条件,初步建立了SADS-CoV S1蛋白抗体的间接ELISA检测方法。该方法与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪圆环病毒2型(PCV2)阳性血清均无交叉反应,仅与SADS-CoV阳性血清反应,表明该方法特异性较强;该方法检测SADS-CoV阳性血清,当稀释至13200时仍为阳性,表明该方法具有较高的敏感性;对4份阳性血清的批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,表明该方法具有良好的重复性和稳定性;利用该方法和间接免疫荧光试验(IFA)对50份临床样品检测,结果显示该间接ELISA检测到9份阳性样品,41份阴性样品;IFA检出5份阳性样品,45份阴性样品,二者的总符合率为92%。综上表明,本研究建立的间接ELISA检测方法能够特异、灵敏地检测SADS-CoV S1蛋白抗体,可以用于SADS-CoV灭活疫苗的免疫效果评价以及该病原的血清学流行病学调查和免疫水平监测,为SADS-CoV所致疫病的鉴别诊断和防控奠定基础。

猪急性腹泻综合征冠状病毒S蛋白多克隆抗体的制备及在检测该病毒感染中的应用

为制备猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)纤突蛋白(S)的多克隆抗体(PAb),本研究经PCR扩增SADS-Co V S蛋白S1亚基C端结构域(S1-CTD)基因片段(384 bp),并将其克隆至原核表达载体p GEX-6p-1中,构建重组质粒p GEX-6p-1-S1-CTD,经双酶切和测序鉴定正确后,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,利用IPTG诱导表达,通过western blot鉴定重组S1-CTD蛋白(rS1-CTD)的表达及反应原性。结果显示,r S1-CTD以包涵体的形式表达,在40 ku处出现特异性条带。诱导表达后的r S1-CTD经不同浓度尿素重悬并超声离心,SDS-PAGE检测后切胶纯化,得到纯化的重组蛋白。利用BCA试剂盒测得蛋白的浓度为33μg/m L。将该重组蛋白乳化后经3次免疫新西兰大白兔,并在3免一周后采血,分离血清获得S1-CTD蛋白PAb。将SADS-Co V感染Vero E6细胞24 h后,以获得的兔PAb为一抗,分别采用western blot和间接免疫荧光试验(IFA)检测该PAb的反应原性。Western blot结果显示,在约250 ku处出现特异性条带,而阴性对照组无该条带;IFA结果显示,SADS-Co V感染的细胞中出现绿色荧光,而阴性对照细胞无绿色荧光。将SADS-Co V感染仔猪的回肠组织制备病理切片,以制备的PAb为一抗,通过免疫组织化学(IHC)检测SADS-Co V的抗原。结果显示,该组织切片中出现棕色阳性信号,而阴性对照仔猪回肠组织切片则无该棕色信号。表明该PAb可与感染SADS-Co V的仔猪回肠组织中的相应抗原发生特异性免疫反应。综上所述,本实验制备的S1-CTD蛋白PAb具有良好的反应原性和免疫原性,可以用于western blot、IFA、IHC检测体内外SADS-Co V的感染,为后续SADS-Co V检测方法的建立及S蛋白生物学功能的研究奠定基础。

超声联合染色体筛查在Down’s综合征诊断中的应用

目的探究超声联合染色体非整倍体无创DNA产前检测(Non-invasive prenatal genetic testing,NIPT)在Down’s综合征(DS)诊断中的应用。方法回顾性收集2020年6月-2023年6月太康县人民医院收治的疑似DS高危患者210例为研究对象,通过超声、NIPT及两项联合对DS进行诊断,与羊水细胞染色体核型分析结果进行对比,采用ROC曲线分析三者诊断敏感度、特异性、准确性与诊断价值。结果在210例疑似DS患者中,经羊水细胞染色体核型分析证实,DS患者26例(12.38%,26/210),非DS患者184例(87.62%,184/210)。以羊水细胞染色体核型分析结果作为金标准,超声诊断DS的敏感度为69.23%(18/26),特异度为92.93%(171/184),超声诊断DS与羊水细胞染色体核型分析结果相比两者一致性一般(Kappa=0.574);NIPT诊断DS的敏感度为84.62%(22/26),特异度为97.83%(180/184),NIPT诊断DS与羊水细胞染色体核型分析结果相比两者一致性较好(Kappa=0.806);两项联合诊断DS的敏感度为92.31%(24/26),特异度为98.37%(181/184);两项联合诊断DS与羊水细胞染色体核型分析结果相比两者一致性较好(Kappa=0.892)。两项联合检出率明显高于超声检查,且两项联合、NIPT检查诊断误诊率均明显低于超声检查(P<0.05)。ROC曲线分析显示,超声、染色体筛查、两项联合检查诊断DS的AUC为0.811、0.871、0.953,提示两项联合检查对DS的诊断价值更高。结论超声联合染色体筛查进行DS诊断具有高准确性,利于提高孕妇接受度,具有较高临床价值,值得临床推广应用。

1例Lemierre’s综合征患者的药物治疗分析与监护

目的为Lemierre’s综合征的早期诊断、药物治疗及用药监护提供参考。方法医师根据患者病情及血宏基因组二代测序检测结果确诊患者为Lemierre’s综合征,临床药师参与了该患者的治疗全过程。治疗过程中,临床药师针对坏死梭杆菌感染,建议予哌拉西林钠他唑巴坦钠联合甲硝唑抗感染治疗;针对左侧颈内静脉炎并血栓形成,建议予依诺肝素钠注射液抗凝治疗。结果医师采纳临床药师建议,患者病情好转,准予带药出院。结论临床药师通过解读血宏基因组二代测序检测结果,同时结合患者病情,协助医师为该患者制定了个体化抗感染治疗及抗凝治疗方案,并进行用药监护,确保了患者用药的安全有效。

16s rRNA测序分析针灸治疗对腹泻型肠易激综合征(肝郁脾虚证)患者肠道菌群的影响

目的:从肠道菌群角度入手,探究针灸调节腹泻型肠易激综合征(IBS)的临床疗效及作用机理。方法:选取我院针灸科收治的肠易激综合征患者40例,按照3∶1比例随机分为针灸治疗组(30例),对照组(10例)。根据《中医消化病诊疗指南》评价临床疗效,应用16s rRNA测序检测治疗前后肠道菌群α多样性以及肠道菌群组成。结果:针灸治疗组患者治疗有效率高于对照组(93.33%vs 60%,P<0.05),对针灸治疗组中有效的28例患者的肠道菌群α多样性和组成差异进行分析:治疗后,反应物种丰富度的Chao指数、反应多样小的Shannon指数均优于治疗前(P<0.05)。在属水平上,与治疗前相比,治疗后双歧杆菌属、乳杆菌属、直肠真杆菌属、肠球菌属、粪杆菌属、拟杆菌属、毛螺菌属、罗氏菌属成为优势菌属(P<0.05)。结论:针灸治疗对腹泻型肠易激综合征(肝郁脾虚证)患者疗效显著。患者治疗前后肠道菌群的变化,提示针灸治疗可能可以通过调节肠道菌群,对腹泻型IBS发挥临床疗效。

原发性肾病综合征患儿血清LXA4、S100A4水平与病情、疾病转归的关系

目的探讨原发性肾病综合征(PNS)患儿血清脂氧素A4(LXA4)、S100钙结合蛋白A4(S100A4)水平与病情、疾病转归的关系。方法选取2020年3月至2022年3月南京明基医院收治的168例PNS患儿为研究对象,另选取来南京明基医院体检的150例健康儿童为对照组,将PNS患儿根据疾病活动度分为缓解期组(n=73)与发作期组(n=95)。采用酶联免疫吸附试验检测血清LXA4、S100A4水平。患儿出院后连续随访1年,根据预后情况分为预后良好组(n=138)与预后不良组(n=30)。采用Spearman相关分析血清LXA4、S100A4水平与疾病活动度的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清LXA4、S100A4对PNS患儿预后的预测价值;采用多因素Logistic回归分析PNS患儿预后的影响因素。结果缓解期组、发作期组血清LXA4、S100A4水平高于对照组,且发作期组血清LXA4、S100A4水平高于缓解期组(P<0.05)。PNS患儿血清LXA4、S100A4水平与疾病活动度均呈正相关(r=0.593、0.546,P<0.05)。预后良好组PNS患儿血清LXA4、S100A4水平低于预后不良组(P<0.05)。血清LXA4、S100A4预测PNS患儿疾病转归的曲线下面积(95%CI)分别为0.767(0.756~0.888)、0.846(0.824~0.863),二者联合预测的曲线下面积(95%CI)为0.905(0.879~0.924)。预后不良组病理类型为肾炎型占比、24 h尿蛋白定量、血尿发生占比高于预后良好组,尿蛋白转阴时间长于预后良好组,病理类型为单纯型及总蛋白、IgM水平低于预后良好组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,有血尿发生(OR=2.300,95%CI 1.598~3.312)、24 h尿蛋白定量≥121.25 mg/24 h(OR=2.098,95%CI 1.489~2.956)、LXA4≥95.64 ng/L(OR=2.627,95%CI 1.737~3.973)、S100A4≥248.15 ng/L(OR=2.729,95%CI 1.777~4.192)是PNS患儿预后不良的危险因素(P<0.05)。结论血清S100A4、LXA4水平在PNS患儿中升高,且与疾病活动度及预后相关,有望作为评估PNS病情及预后的潜在标志物。

感染后肠易激综合征肠道菌群及血清代谢物对内脏敏感性影响

目的:探讨感染后肠易激综合征(PI-IBS)小鼠肠道菌群与血清代谢物的变化,分析其对内脏敏感性的影响。方法:采用旋毛虫感染法制备PI-IBS模型,利用16S rDNA测序分析PI-IBS小鼠和正常小鼠肠道微生物变化;血清代谢组学分析血清代谢物变化;Spearman法对2组的差异代谢物和差异菌群进行关联分析。结果:16S rDNA测序结果显示mouse gut metagenome和g_Alistipes可能是PI-IBS小鼠的关键肠道微生物。代谢组学分析共筛选出22种组间差异代谢物,涉及16条代谢通路,主要包括氨基酸的生物合成、半胱氨酸和蛋氨酸代谢、精氨酸生物合成、突触囊泡循环等通路。结论:肠道菌群和血清代谢物改变参与PI-IBS内脏高敏感性的产生。

Osborne’s韧带悬吊尺神经前置术结合经皮神经肌肉电刺激在肘管综合征治疗中的应用

目的探究Osborne’s韧带悬吊尺神经前置术结合经皮神经肌肉电刺激在肘管综合征治疗中的应用。方法前瞻性选取2020年1月至2022年10月拟在秦皇岛市第一医院进行Osborne’s韧带悬吊尺神经前置术治疗的肘管综合征患者120例,按照随机数字表法分为两组,每组各60例。对照组行常规手术治疗,研究组在对照组患者治疗的基础上结合经皮神经肌肉电刺激治疗。比较两组术后分并指Lovett肌力分级、肘管综合征功能评分以及治疗前后肘上—肘下神经运动神经传导速度(MCV)及感觉神经传导速度(SCV)水平。结果术后6个月,两组患者的Lovett肌力分级、肘管综合征功能评分均有改善,Lovett肌力分级4、5级患者所占比例增大,且研究组术后6个月Lovett肌力4~5级占比、肘管综合征功能评分优良占比及肘管综合征功能评分为85.00%、90.00%、(12.56±2.15)分,均高于对照组[61.57%、70.00%、(11.02±4.15)分],差异均有统计学意义(P<0.05)。术后1、3个月,两组SCV、MCV均较术前升高,且研究组SCV分别为(47.55±6.65)、(53.66±5.46)m/s,MCV分别为(46.38±7.55)、(53.33±6.45)m/s,均高于对照组[(43.88±5.56)、(48.26±5.97)m/s以及(42.77±7.11)、(47.46±7.31)m/s],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在对肘管综合征患者进行治疗时,采用Osborne’s韧带悬吊尺神经前置术结合经皮神经肌肉电刺激可以有效提高患者的治疗效果,提高患者术后尺神经肌电图SCV、MCV水平,且安全性较好。

特鲁索综合征的研究进展

特鲁索综合征是一种与癌症相关的高凝状态引起的血栓形成综合征,已成为恶性肿瘤患者的第二大死因,仅次于恶性肿瘤本身导致的死亡。其发病机制可能与恶性肿瘤侵袭血管壁导致血管内皮损伤、肿瘤释放促凝物质和凝血因子异常活化有关,临床主要表现为深静脉血栓形成、肺栓塞、慢性弥散性血管内凝血、合并非细菌性血栓性心内膜炎和动脉血栓形成。特鲁索综合征首选抗凝治疗,目前低分子肝素已成为一线治疗药物。

抗GQ1b抗体综合征复发伴癫痫罕见病例1例报道并文献回顾

目的:探讨抗GQ1b抗体综合征患者出现癫痫罕见临床表现的发病机制及临床特点。方法:报道1例癫痫发作的抗GQ1b抗体综合征患者的临床资料,并进行文献复习。结果:患者为青少年女性,因“行走不稳5月余,突发肢体抽搐1天”就诊。查体示对称性眼外肌麻痹、腱反射活跃及共济失调;血清抗GQ1b抗体IgG(+),脑电图示双侧大脑半球散发3~4 Hz棘慢波、多棘慢波,磁共振示双侧额叶、左侧顶叶、双侧丘脑及脑干异常信号。诊断为抗GQ1b抗体综合征Bickerstaff’s脑干脑炎型,给予抗癫痫、类固醇激素及免疫抑制剂等治疗后好转。检索文献收集相关病例报道4篇,基础实验提示GQ1b抗原与癫痫的发病机制密切相关。结论:癫痫为抗GQ1b抗体综合征罕见临床表现,推测与GQ1b抗原分布特点、抗体浓度及血脑屏障渗透性有关,其潜在机制仍需进一步研究。

基于16S rRNA基因测序探讨加味交泰丸对腹泻型肠易激综合征患者肠道菌群的影响

目的 探究加味交泰丸对腹泻型肠易激综合征(diarrhea-predominant irritable bowel syndrome, IBS-D)患者肠道菌群的影响。方法 将60例IBS-D患者随机分为中药组和西药组,每组30例。另选健康者10例作为健康对照组。中药组采用加味交泰丸治疗,西药组采用地衣芽孢杆菌治疗。采用IBS严重程度评分系统(irritable bowel syndrome-severity scoring system, IBS-SSS)评估两组患者临床疗效,采用16S rRNA基因测序法检测肠道菌群。结果 两组患者治疗前IBS-SSS评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗4周后,两组患者的IBS-SSS评分均较治疗前显著下降(P<0.05),且中药组评分降低程度更显著(P<0.05)。与健康对照组比较,IBS-D患者的肠道菌群α多样性显著降低(P<0.05),β多样性也有显著差异(P<0.05),但中药及西药治疗对肠道菌群的多样性无显著影响;在属水平上,加味交泰丸治疗显著增加了优势菌Eubacterium_eligens_group、Flavonifractor及Lachnospira,降低了优势菌Eysipelotrichaceae_UCG-007、Scardovia及Senegalimassilia的相对丰度;地衣芽孢杆菌治疗显著增加了优势菌Peptoclostridium,降低了优势菌Collinsella、Lactococcus及Streptococcus的相对丰度。LDA Effect Size分析显示:加味交泰丸及地衣芽孢杆菌治疗都显著改变了肠道菌群的结构,但两者改变的菌群不同,且治疗后的菌群也与健康对照组有所差异。结论 加味交泰丸可改善IBS-D患者临床症状,其对IBS-D患者肠道菌群多样性无显著影响,但可以改变肠道菌群的结构和组成,并且与地衣芽孢杆菌有所差异;加味交泰丸治疗无法逆转IBS-D引起的肠道菌群的失调。

猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白与核糖体蛋白S20相互作用对病毒复制的影响

旨在筛选并鉴定与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳蛋白(N蛋白)相互作用的宿主蛋白。本试验通过构建猪肺酵母cDNA文库、酵母双杂交、免疫共沉淀、激光共聚焦、过表达和干扰试验等手段,筛选与N蛋白互作的宿主蛋白并研究其对PRRSV复制的影响。结果显示:N蛋白和核糖体蛋白S20(RPS20)在酵母细胞内发生互作,免疫共沉淀和激光共聚焦试验进一步确定N蛋白和RPS20蛋白互作并共定位于细胞质中。过表达和干扰试验证实RPS20能够影响HP-PRRSV在细胞内的增殖。本研究丰富了PRRSV与宿主因子互作的网络,为进一步研究RPS20蛋白在PRRSV感染过程中的生物学功能奠定了基础。

多囊卵巢综合征患者血清S100A4水平变化及其对多囊卵巢综合征的影响

目的 检测多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者血清S100A4水平,探讨S100A4对多囊卵巢综合征发生发展的影响。方法 选取129例于2021年12月—2023年6月之间就诊于安徽医科大学第一附属医院内分泌科门诊,诊断为PCOS的育龄期患者为多囊卵巢综合征组(PCOS组),选取47名同期于安徽医科大学第一附属医院体检中心接受常规体检、月经规律正常并且无高雄激素血症(临床和生化)的健康育龄期女性为正常对照组(NC组)。根据BMI水平将PCOS组分为PCOS-超重组和PCOS-正常体重组;根据血糖水平将PCOS组分为PCOS-正常糖代谢组和PCOS-异常糖代谢组。收集两组临床资料,包括一般资料、S100A4水平及其他生化指标,比较两组临床资料的差异。结果 PCOS组血清S100A4水平高于NC组,差异有统计学意义(P<0.01)。NC组、PCOS-正常组和PCOS-超重组间血清S100A4水平比较,差异有统计学意义(P<0.01);其中PCOS-正常体重组和PCOS-超重组血清S100A4水平高于NC组,差异均有统计学意义(P<0.05)。NC组、PCOS-正常糖代谢组和PCOS-异常糖代谢组血清S100A4水平比较,差异有统计学意义(P<0.01);其中PCOS-正常糖代谢组和PCOS-异常糖代谢组血清S100A4水平高于NC组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,血清S100A4水平与HOMA-β呈负相关,与LDL-C呈正相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,S100A4是育龄期女性发生PCOS的影响因素[OR=1.046,95%CI(1.015,1.078),P<0.05]。ROC曲线:血清S100A4水平预测PCOS的曲线下面积为0.681(P<0.01),其最佳截断值为0.176 ng/ml。结论 PCOS患者血清S100A4升高,并与肥胖、胰岛素抵抗及脂代谢异常有关,参与PCOS的发生发展。

氯硝柳胺通过抑制S100A4表达减轻肝肺综合征病理性血管新生

目的探讨药物氯硝柳胺对S100A4的表达及大鼠肝肺综合征(hepatopulmonary syndrome,HPS)病理性血管新生的影响。方法30只雄性SD大鼠随机分为对照组(Sham组,n=6)、胆管结扎(common bile duct ligation,CBDL)组(CBDL组,n=18)和氯硝柳胺治疗组(NIC组,n=6)。造模后在第1、3、5周分别取材CBDL组大鼠,在第5周取材Sham组,NIC组大鼠在造模后第3周第1天开始灌胃氯硝柳胺混悬液,持续1周,在第5周结束后取材,通过HE、Masson染色评估大鼠肝、肺组织的病理学改变和疾病进展。免疫荧光检测S100A4和CD31在肺中表达位置和强度。使用Western blot和qPCR等方法检测大鼠S100A4的mRNA和蛋白表达变化。用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)、HPS大鼠血清和氯硝柳胺处理肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs),观察其对细胞迁移和成管能力影响。结果CBDL组大鼠肺组织S100A4的mRNA和蛋白表达均随着疾病发展而增加,均高于Sham组(P<0.0001);NIC组肺S100A4 mRNA和蛋白表达水平较CBDL组5周时降低,但仍高于Sham组;在体外使用siRNA降低PMVECs中S100A4表达之后,PMVECs的迁移和成管能力较NC组降低(P<0.0001);HE染色NIC组肺组织中病理改变较CBDL组5周轻,肝组织中则没有发现减缓作用,Masson染色结果发现NIC组大鼠肝脏的纤维化程度减轻不明显;与Sham大鼠血清处理相比,CBDL组5周血清刺激后细胞的迁移、成管能力显著提升,而氯硝柳胺处理则逆转了这一现象(P<0.0001)。结论S100A4可以通过促进HPS大鼠肺微血管新生促进HPS的疾病发展,氯硝柳胺可抑制大鼠肺中S100A4的表达而延缓HPS的进展。

基于16S rDNA高通量测序研究电针对腹泻型肠易激综合征大鼠肠道菌群的调节作用

目的采用16S rDNA高通量测序技术,分析电针足三里对腹泻型肠易激综合征(irritable bowel syndrome-diarrhea,IBS-D)大鼠肠道菌群物种相对丰度和多样性的影响,探讨电针对IBS-D的作用机制。方法将SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组。采用束缚联合番泻叶煎剂灌胃法造模,电针组采用电针双侧足三里干预,空白组与模型组不做干预处理。干预结束后,检测大鼠内脏敏感性,并取大鼠粪便进行16S rDNA高通量测序技术检测大鼠肠道菌群。结果(1)与空白组比较,模型组大鼠腹壁回撤反射评分明显升高(P<0.05);经过电针治疗后,在20 mmHg压力下的腹壁回撤反射评分明显降低(P<0.05)。(2)与空白组相比,模型组OTU数目明显降低,电针组接近于空白组。(3)与空白组相比,模型组芽孢杆菌纲、乳杆菌属、真杆菌属等丰度明显降低,拟杆菌纲、梭菌纲、δ-变形杆菌纲、毛螺菌属等丰度明显升高,而电针组上述菌纲/属丰度均有所改善。(4)三组的Beta多样性分析结果显示,模型组与空白组的样本明显被区分开,而电针组则在两组之间。结论IBS-D与内脏高敏感性以及肠道菌群结构紊乱有关,电针能调节IBS-D大鼠内脏敏感性以及肠道菌群物种相对丰度,改善菌群多样性。

来曲唑诱导大鼠多囊卵巢综合征模型的肠道菌群分析

目的探讨来曲唑(雌激素合成抑制剂)是否会对多囊卵巢综合征患者的肠道微生物群的组成、多样性和丰度有影响。方法利用来曲唑诱导并构建了PCOS大鼠模型,通过16S rRNA的测序方法分析了正常和PCOS大鼠模型的肠道菌群结构。结果在门水平,PCOS组的厚壁菌门(73.29%±5.34%vs.77.17%±4.01%)的丰度较正常组降低,拟杆菌门(23.85%±6.22%vs.17.21%±6.90%)的丰度增加。在属水平,PCOS的罗氏菌属(5.61%±3.20%vs.16.13%±6.20%)和苏黎世杆菌属(1.75%±2.23%vs.9.98%±7.34%)的丰度较正常组降低,而乳杆菌属(18.83%±11.50%vs.15.88%±7.06%)、普雷沃氏菌属(4.58%±1.09%vs.0.46%±0.15%)和瘤胃球菌属(2.97%±1.56%vs.1.16%±0.60%)的丰度增加,进一步分析了两组差异菌群的KEGG信号通路,结果显示PCOS大鼠模型的肠道内胆汁酸生物合成相关的信号通路发生了变化。结论来曲唑灌胃构建的PCOS大鼠模型的肠道菌群结构明显发生紊乱,并且可能与胆汁酸生物合成相关的信号通路有关。

急性脑梗塞并发脑心综合征患者血清内源性孤啡肽与血清S-100钙结合蛋白β水平变化的研究

目的观察急性脑梗塞并发脑心综合征患者血清内源性孤啡肽(N/OFQ)与血清S-100钙结合蛋白β(S100β)水平变化并探讨其意义。方法选取2022年3月至12月于山西医科大学第二医院确诊的急性脑梗塞患者120例为研究对象,根据其是否并发脑心综合征分为脑梗塞组60例和脑心综合征组60例。收集2组临床资料,检测各组的血清N/OFQ、S100β水平,左心室射血分数(LVEF)、N端脑钠肽前体(NT-proBNP)、肌酸磷酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平。比较两组血清N/OFQ、S100β水平的差异并分析与各临床指标之间的相关性,分析脑心综合征的危险因素,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析N/OFQ、S100β联合预测因子对脑心综合征的预测价值。结果脑心综合征组血清N/OFQ、S100β水平明显高于脑梗塞组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。脑心综合征患者大面积组血清N/OFQ、S100β水平高于小面积组、中面积组,中面积组血清N/OFQ、S100β水平高于小面积组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,血清N/OFQ水平与S100β水平呈正相关(P<0.05);血清N/OFQ、S100β与CK-MB、NT-proBNP、cTnI均呈正相关(P<0.05),与LVEF呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析显示,N/OFQ、S100β、CK-MB、NT-proBNP、cTnI水平高是脑心综合征的危险因素;高LVEF是脑心综合征的保护因素。ROC曲线分析显示,N/OFQ、S100β、二者联合预测脑心综合征的曲线下面积分别为0.816、0.818、0.877(P<0.001)。结论血清N/OFQ、S100β与急性脑梗塞并发脑心综合征密切相关,联合检测对脑心综合征的预防和治疗具有很好的临床价值。

严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)刺突蛋白的B细胞及T细胞抗原表位的生物信息学分析

目的使用生物信息学方法预测严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)刺突蛋白(S蛋白)的结构特点,并预测可能的B细胞和T细胞表位。方法从NCBI数据库中获取SARS-CoV-2的S蛋白氨基酸序列,通过蛋白质基本性质分析工具ProtParam分析S蛋白的理化性质;利用综合性序列工具软件Lasergene和蛋白质二级结构分析软件SOMPA分析S蛋白二级结构;蛋白质同源物/类似物Y识别引擎Phyre2和分子图像观察软件Rasmol构建并分析S蛋白三级结构;B细胞表位预测工具ABCpred、BepiPred和BcePred预测S蛋白的B细胞抗原表位;利用免疫表位数据库IEDB预测S蛋白的T细胞抗原表位。结果S蛋白由1273个氨基酸组成,理论等电点为6.24,原子组成为C_(6336)H_(9770)N_(1656)O_(1894)S_(54),属于稳定亲水性蛋白。Lasergene软件的Gramier-Robson方法预测显示:α螺旋占23.5%、β折叠占53.7%、转角区域占14.9%、无规则卷曲占8.33%;Lasergene软件的Chou-Fasman方法预测显示:α螺旋占20.9%,β折叠占35.5%,β转角占35.2%。同时,使用SOPMA在线服务工具分析S蛋白二级结构,其中α螺旋占28.59%,延长链占23.25%,β转角占3.38%,无规则卷曲占44.78%。ABCpred、BepiPred和BcePred分别预测S蛋白的潜在B细胞抗原表位数量为5个、11个、6个。IEDB预测的CD8^(+)T细胞表位和CD4^(+)T细胞表位结果中分别选择各人类白细胞抗原(HLA)基因型亲和力最好的5个表位。结论采用生物信息学方法预测SARS-CoV-2的S蛋白具有多个B细胞及T细胞抗原表位。

CRUSADE评分联合血清S100A12、VEGF水平预测急性冠脉综合征病人PCI术后上消化道出血的临床价值

目的:分析CRUSADE评分联合血清钙结合蛋白S100A12、血管内皮生长因子(VEGF)水平预测急性冠脉综合征(ACS)病人经皮冠状动脉介入(PCI)术后上消化道出血(UGIB)的临床价值。方法:选取45例PCI术后发生UGIB的ACS病人为UGIB组(UGIB均在ACS病人行PCI术后1年内发生,且经消化内镜检查确诊),另选取45例PCI术后1年内未发生UGIB的ACS病人为对照组。收集所有病人临床资料,PCI术后6 h进行CRUSADE评分和血清S100A12、VEGF水平检测,ACS病人PCI术后1年内发生UGIB的影响因素采用Logistic回归分析,受试者工作特征(ROC)曲线评估CRUSADE评分、血清S100A12、VEGF水平预测ACS病人PCI术后1年内发生UGIB的临床价值。结果:UGIB组消化性溃疡史、吸烟史和幽门螺杆菌(Hp)感染比例、CRUSADE评分、血清S100A12、VEGF水平高于对照组(P<0.05)。消化性溃疡史、Hp感染、CRUSADE评分高、S100A12水平高、VEGF水平高是ACS病人PCI术后1年内发生UGIB的独立危险因素(P<0.05);CRUSADE评分、S100A12、VEGF、3项指标联合预测ACS病人PCI术后1年内发生UGIB的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.823、0.768、0.752、0.924,3项指标联合预测的AUC高于CRUSADE评分、S100A12、VEGF单独预测的AUC(P<0.05)。结论:PCI术后发生UGIB的ACS病人CRUSADE评分增加,血清S100A12、VEGF水平升高,均为PCI术后1年内发生UGIB独立危险因素,3项指标联合可提高ACS病人PCI术后发生UGIB的预测价值。

严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)疫苗研究进展

2019冠状病毒病(COVID-19)是严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)感染引起的,SARS-CoV-2病毒毒株不断突变、进化。疫苗研究是控制COVID-19最直接、最有效的方式,根据制备机制不同,SARS-CoV-2疫苗分为灭活病毒疫苗、减毒活疫苗、mRNA疫苗、DNA疫苗、病毒载体疫苗、病毒样颗粒疫苗和蛋白亚单位疫苗等。其中,病毒蛋白亚单位疫苗因其安全性、有效性高具有广泛应用前景,病毒核衣壳蛋白免疫原性高,可变性较低,可作为疫苗制备新方向。我们通过梳理SARS-CoV-2疫苗研究进展、疫苗安全性、疫苗免疫效率等方面,总结疫苗研究的发展现状,并提出可能的研制策略,以期为今后防疫工作提供参考。