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猪急性腹泻综合征冠状病毒S蛋白多克隆抗体的制备及在检测该病毒感染中的应用 被引量:4
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作者 刘大凯 韩郁茹 +8 位作者 张记宇 张燎原 冯廷帅 杨小曼 曾苗苗 时洪艳 秦毅斌 石达 冯力 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期499-504,共6页
为制备猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)纤突蛋白(S)的多克隆抗体(PAb),本研究经PCR扩增SADS-Co V S蛋白S1亚基C端结构域(S1-CTD)基因片段(384 bp),并将其克隆至原核表达载体p GEX-6p-1中,构建重组质粒p GEX-6p-1-S1-CTD,经双酶切和... 为制备猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)纤突蛋白(S)的多克隆抗体(PAb),本研究经PCR扩增SADS-Co V S蛋白S1亚基C端结构域(S1-CTD)基因片段(384 bp),并将其克隆至原核表达载体p GEX-6p-1中,构建重组质粒p GEX-6p-1-S1-CTD,经双酶切和测序鉴定正确后,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,利用IPTG诱导表达,通过western blot鉴定重组S1-CTD蛋白(rS1-CTD)的表达及反应原性。结果显示,r S1-CTD以包涵体的形式表达,在40 ku处出现特异性条带。诱导表达后的r S1-CTD经不同浓度尿素重悬并超声离心,SDS-PAGE检测后切胶纯化,得到纯化的重组蛋白。利用BCA试剂盒测得蛋白的浓度为33μg/m L。将该重组蛋白乳化后经3次免疫新西兰大白兔,并在3免一周后采血,分离血清获得S1-CTD蛋白PAb。将SADS-Co V感染Vero E6细胞24 h后,以获得的兔PAb为一抗,分别采用western blot和间接免疫荧光试验(IFA)检测该PAb的反应原性。Western blot结果显示,在约250 ku处出现特异性条带,而阴性对照组无该条带;IFA结果显示,SADS-Co V感染的细胞中出现绿色荧光,而阴性对照细胞无绿色荧光。将SADS-Co V感染仔猪的回肠组织制备病理切片,以制备的PAb为一抗,通过免疫组织化学(IHC)检测SADS-Co V的抗原。结果显示,该组织切片中出现棕色阳性信号,而阴性对照仔猪回肠组织切片则无该棕色信号。表明该PAb可与感染SADS-Co V的仔猪回肠组织中的相应抗原发生特异性免疫反应。综上所述,本实验制备的S1-CTD蛋白PAb具有良好的反应原性和免疫原性,可以用于western blot、IFA、IHC检测体内外SADS-Co V的感染,为后续SADS-Co V检测方法的建立及S蛋白生物学功能的研究奠定基础。 展开更多
关键词 猪急性腹泻综合征冠状病毒 s蛋白 原核表达 多克隆抗体 初步应用
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猪急性腹泻综合征冠状病毒S1蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立
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作者 杨小曼 时洪艳 +8 位作者 张燎原 张鑫 张记宇 刘大凯 冯廷帅 曾苗苗 陈建飞 石达 冯力 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期608-613,共6页
为建立猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)S1蛋白抗体的间接ELISA检测方法,本研究通过构建重组真核分泌型表达质粒p CAGGS-S1-His并转染HEK293F悬浮细胞进行可溶性表达S1蛋白。转染重组质粒5 d后的细胞上清利用HisTrapTMExcel亲和层析... 为建立猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)S1蛋白抗体的间接ELISA检测方法,本研究通过构建重组真核分泌型表达质粒p CAGGS-S1-His并转染HEK293F悬浮细胞进行可溶性表达S1蛋白。转染重组质粒5 d后的细胞上清利用HisTrapTMExcel亲和层析柱纯化,浓缩后的蛋白经SDS-PAGE、western blot鉴定显示获得了分子量约为130 ku且大于理论大小的重组S1蛋白,表明该蛋白为分泌表达且具有良好的翻译后修饰。利用获得的重组S1蛋白作为包被抗原,通过优化反应条件,初步建立了SADS-CoV S1蛋白抗体的间接ELISA检测方法。该方法与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪圆环病毒2型(PCV2)阳性血清均无交叉反应,仅与SADS-CoV阳性血清反应,表明该方法特异性较强;该方法检测SADS-CoV阳性血清,当稀释至1:3 200时仍为阳性,表明该方法具有较高的敏感性;对4份阳性血清的批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,表明该方法具有良好的重复性和稳定性;利用该方法和间接免疫荧光试验(IFA)对50份临床样品检测,结果显示该间接ELISA检测到9份阳性样品,41份阴性样品;IFA检出5份阳性样品,45份阴性样品,二者的总符合率为92%。综上表明,本研究建立的间接ELISA检测方法能够特异、灵敏地检测SADS-CoV S1蛋白抗体,可以用于SADS-CoV灭活疫苗的免疫效果评价以及该病原的血清学流行病学调查和免疫水平监测,为SADS-CoV所致疫病的鉴别诊断和防控奠定基础。 展开更多
关键词 猪急性腹泻综合征冠状病毒 s1蛋白 间接ELIsA方法 抗体检测
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超声联合染色体筛查在Down’s综合征诊断中的应用
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作者 王清华 郭静 王铁锋 《湖北民族大学学报(医学版)》 2024年第2期53-56,61,共5页
目的探究超声联合染色体非整倍体无创DNA产前检测(Non-invasive prenatal genetic testing,NIPT)在Down’s综合征(DS)诊断中的应用。方法回顾性收集2020年6月-2023年6月太康县人民医院收治的疑似DS高危患者210例为研究对象,通过超声、N... 目的探究超声联合染色体非整倍体无创DNA产前检测(Non-invasive prenatal genetic testing,NIPT)在Down’s综合征(DS)诊断中的应用。方法回顾性收集2020年6月-2023年6月太康县人民医院收治的疑似DS高危患者210例为研究对象,通过超声、NIPT及两项联合对DS进行诊断,与羊水细胞染色体核型分析结果进行对比,采用ROC曲线分析三者诊断敏感度、特异性、准确性与诊断价值。结果在210例疑似DS患者中,经羊水细胞染色体核型分析证实,DS患者26例(12.38%,26/210),非DS患者184例(87.62%,184/210)。以羊水细胞染色体核型分析结果作为金标准,超声诊断DS的敏感度为69.23%(18/26),特异度为92.93%(171/184),超声诊断DS与羊水细胞染色体核型分析结果相比两者一致性一般(Kappa=0.574);NIPT诊断DS的敏感度为84.62%(22/26),特异度为97.83%(180/184),NIPT诊断DS与羊水细胞染色体核型分析结果相比两者一致性较好(Kappa=0.806);两项联合诊断DS的敏感度为92.31%(24/26),特异度为98.37%(181/184);两项联合诊断DS与羊水细胞染色体核型分析结果相比两者一致性较好(Kappa=0.892)。两项联合检出率明显高于超声检查,且两项联合、NIPT检查诊断误诊率均明显低于超声检查(P<0.05)。ROC曲线分析显示,超声、染色体筛查、两项联合检查诊断DS的AUC为0.811、0.871、0.953,提示两项联合检查对DS的诊断价值更高。结论超声联合染色体筛查进行DS诊断具有高准确性,利于提高孕妇接受度,具有较高临床价值,值得临床推广应用。 展开更多
关键词 Down’s综合征 超声 染色体筛查 诊断 价值
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1例Lemierre’s综合征患者的药物治疗分析与监护
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作者 刘宇思 黄凌峰 +2 位作者 黄勤淼 曹伟灵 张鹏 《中国药房》 CAS 北大核心 2024年第8期997-1000,共4页
目的为Lemierre’s综合征的早期诊断、药物治疗及用药监护提供参考。方法医师根据患者病情及血宏基因组二代测序检测结果确诊患者为Lemierre’s综合征,临床药师参与了该患者的治疗全过程。治疗过程中,临床药师针对坏死梭杆菌感染,建议... 目的为Lemierre’s综合征的早期诊断、药物治疗及用药监护提供参考。方法医师根据患者病情及血宏基因组二代测序检测结果确诊患者为Lemierre’s综合征,临床药师参与了该患者的治疗全过程。治疗过程中,临床药师针对坏死梭杆菌感染,建议予哌拉西林钠他唑巴坦钠联合甲硝唑抗感染治疗;针对左侧颈内静脉炎并血栓形成,建议予依诺肝素钠注射液抗凝治疗。结果医师采纳临床药师建议,患者病情好转,准予带药出院。结论临床药师通过解读血宏基因组二代测序检测结果,同时结合患者病情,协助医师为该患者制定了个体化抗感染治疗及抗凝治疗方案,并进行用药监护,确保了患者用药的安全有效。 展开更多
关键词 Lemierre’s综合征 mNGs 坏死梭杆菌 临床药师 药学监护
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16s rRNA测序分析针灸治疗对腹泻型肠易激综合征(肝郁脾虚证)患者肠道菌群的影响
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作者 黄发樟 姚志芳 《中国医药导刊》 2024年第4期407-411,共5页
目的:从肠道菌群角度入手,探究针灸调节腹泻型肠易激综合征(IBS)的临床疗效及作用机理。方法:选取我院针灸科收治的肠易激综合征患者40例,按照3∶1比例随机分为针灸治疗组(30例),对照组(10例)。根据《中医消化病诊疗指南》评价临床疗效... 目的:从肠道菌群角度入手,探究针灸调节腹泻型肠易激综合征(IBS)的临床疗效及作用机理。方法:选取我院针灸科收治的肠易激综合征患者40例,按照3∶1比例随机分为针灸治疗组(30例),对照组(10例)。根据《中医消化病诊疗指南》评价临床疗效,应用16s rRNA测序检测治疗前后肠道菌群α多样性以及肠道菌群组成。结果:针灸治疗组患者治疗有效率高于对照组(93.33%vs 60%,P<0.05),对针灸治疗组中有效的28例患者的肠道菌群α多样性和组成差异进行分析:治疗后,反应物种丰富度的Chao指数、反应多样小的Shannon指数均优于治疗前(P<0.05)。在属水平上,与治疗前相比,治疗后双歧杆菌属、乳杆菌属、直肠真杆菌属、肠球菌属、粪杆菌属、拟杆菌属、毛螺菌属、罗氏菌属成为优势菌属(P<0.05)。结论:针灸治疗对腹泻型肠易激综合征(肝郁脾虚证)患者疗效显著。患者治疗前后肠道菌群的变化,提示针灸治疗可能可以通过调节肠道菌群,对腹泻型IBS发挥临床疗效。 展开更多
关键词 16s RRNA 针灸 肠易激综合征 肠道菌群
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原发性肾病综合征患儿血清LXA4、S100A4水平与病情、疾病转归的关系
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作者 夏伟 陶迪 +2 位作者 周佳乐 张沛 樊忠民 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第12期1453-1457,共5页
目的探讨原发性肾病综合征(PNS)患儿血清脂氧素A4(LXA4)、S100钙结合蛋白A4(S100A4)水平与病情、疾病转归的关系。方法选取2020年3月至2022年3月南京明基医院收治的168例PNS患儿为研究对象,另选取来南京明基医院体检的150例健康儿童为... 目的探讨原发性肾病综合征(PNS)患儿血清脂氧素A4(LXA4)、S100钙结合蛋白A4(S100A4)水平与病情、疾病转归的关系。方法选取2020年3月至2022年3月南京明基医院收治的168例PNS患儿为研究对象,另选取来南京明基医院体检的150例健康儿童为对照组,将PNS患儿根据疾病活动度分为缓解期组(n=73)与发作期组(n=95)。采用酶联免疫吸附试验检测血清LXA4、S100A4水平。患儿出院后连续随访1年,根据预后情况分为预后良好组(n=138)与预后不良组(n=30)。采用Spearman相关分析血清LXA4、S100A4水平与疾病活动度的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清LXA4、S100A4对PNS患儿预后的预测价值;采用多因素Logistic回归分析PNS患儿预后的影响因素。结果缓解期组、发作期组血清LXA4、S100A4水平高于对照组,且发作期组血清LXA4、S100A4水平高于缓解期组(P<0.05)。PNS患儿血清LXA4、S100A4水平与疾病活动度均呈正相关(r=0.593、0.546,P<0.05)。预后良好组PNS患儿血清LXA4、S100A4水平低于预后不良组(P<0.05)。血清LXA4、S100A4预测PNS患儿疾病转归的曲线下面积(95%CI)分别为0.767(0.756~0.888)、0.846(0.824~0.863),二者联合预测的曲线下面积(95%CI)为0.905(0.879~0.924)。预后不良组病理类型为肾炎型占比、24 h尿蛋白定量、血尿发生占比高于预后良好组,尿蛋白转阴时间长于预后良好组,病理类型为单纯型及总蛋白、IgM水平低于预后良好组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,有血尿发生(OR=2.300,95%CI 1.598~3.312)、24 h尿蛋白定量≥121.25 mg/24 h(OR=2.098,95%CI 1.489~2.956)、LXA4≥95.64 ng/L(OR=2.627,95%CI 1.737~3.973)、S100A4≥248.15 ng/L(OR=2.729,95%CI 1.777~4.192)是PNS患儿预后不良的危险因素(P<0.05)。结论血清S100A4、LXA4水平在PNS患儿中升高,且与疾病活动度及预后相关,有望作为评估PNS病情及预后的潜在标志物。 展开更多
关键词 原发性肾病综合征 s100钙结合蛋白A4 脂氧素A4 预后
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曹伟云教授治疗Good’s综合征合并支气管扩张验案1例
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作者 何新平 曹伟云 伍世葵 《生命科学仪器》 2024年第3期134-136,共3页
Good’s综合征是一种免疫缺陷性疾病,属于少见病,关于本病的报道并不多,尤其是采用中药治疗的报道少之又少。Good’s综合征患者因免疫力欠佳,易合并感染,尤以合并支气管扩张伴感染偏多。目前,西医治疗多为对症治疗,急性期予抗生素控制感... Good’s综合征是一种免疫缺陷性疾病,属于少见病,关于本病的报道并不多,尤其是采用中药治疗的报道少之又少。Good’s综合征患者因免疫力欠佳,易合并感染,尤以合并支气管扩张伴感染偏多。目前,西医治疗多为对症治疗,急性期予抗生素控制感染,但患者病情易反复。本文主要从曹伟云教授对Good’s综合征合并支气管扩张病的中医病因病机和辨证论治等方面展开论述,认为Good’s综合征合并支气管扩张或因初感外邪、侵犯肺系,或因痰热日久、消耗阴液,或因久病体虚、伤及阴阳引起,在治疗上或予以清热散邪,或予以养阴清热、化痰排脓,或予以补阳养阴,同时根据伴随症进行药物加减,通过整体观念辨证论治,扶正与祛邪动态调整,尤以扶正为要,增强患者的免疫力,改善患者体质,迅速缓解患者临床症状,减少病情发作次数和患者住院次数。 展开更多
关键词 Good’s综合征 支气管扩张 感染 验案
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改良腮腺筋膜瓣术式对预防Frey’s综合征的作用 被引量:14
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作者 杨建军 徐宏 +3 位作者 邓婧 赵文科 张艳 项锋钢 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2008年第2期110-112,共3页
目的:为了提高腮腺浅叶良性肿瘤区域性切除术的手术效果,减少术后味觉性出汗综合征(Frey’s综合征)的发生。方法:治疗组选择32例腮腺浅叶良性肿瘤行保留腮腺筋膜的区域性切除术,常规筋膜上翻瓣,然后切开筋膜制作腮腺筋膜瓣,切除肿瘤及... 目的:为了提高腮腺浅叶良性肿瘤区域性切除术的手术效果,减少术后味觉性出汗综合征(Frey’s综合征)的发生。方法:治疗组选择32例腮腺浅叶良性肿瘤行保留腮腺筋膜的区域性切除术,常规筋膜上翻瓣,然后切开筋膜制作腮腺筋膜瓣,切除肿瘤及瘤周部分腺体组织,对位缝合筋膜瓣,复位分层缝合皮瓣。对照组选择30例腮腺浅叶良性肿瘤行常规筋膜上翻瓣的区域性切除术,比较两种术式的手术效果。结果:治疗组的32例病人,无1例发生Frey’s综合征,对照组的30例病人,有6例发生Frey’s综合征(占20%),两组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:腮腺筋膜瓣在腮腺浅叶良性肿瘤区域性切除术中的应用,对预防术后Frey’s综合征的发生有重要的临床作用。 展开更多
关键词 腮腺筋膜瓣 腮腺良性肿瘤 手术 Frey’s综合征
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产蛋下降综合征病毒纤突蛋白Knob-S区原核表达及其活性分析 被引量:6
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作者 陈滔 唐应华 +5 位作者 陆吉虎 高峰 于漾 何家惠 黎满香 侯继波 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第6期41-44,共4页
通过PCR扩增得到产蛋下降综合征病毒(EDSV)纤突蛋白Knob-S区基因,将其克隆至原核表达载体pET-32(a)的多克隆位点构建了原核表达载体pET-32(a)-Knob-S,将其转化至感受态细胞BL21中,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析,结果获得了42ku的融合蛋白,用... 通过PCR扩增得到产蛋下降综合征病毒(EDSV)纤突蛋白Knob-S区基因,将其克隆至原核表达载体pET-32(a)的多克隆位点构建了原核表达载体pET-32(a)-Knob-S,将其转化至感受态细胞BL21中,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析,结果获得了42ku的融合蛋白,用纯化的融合蛋白免疫鸡制备抗血清,通过血凝试验、Western blot和血凝抑制试验分析,表明该融合蛋白不能凝集鸡红细胞,无血凝活性;但可与EDSV阳性血清发生特异反应,并诱导机体产生特异性抗体,具有很好的抗原性。 展开更多
关键词 产蛋下降综合征病毒 原核表达 Knob—s
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核基因参与人类线粒体12S rRNA突变相关非综合征耳聋的临床表型 被引量:3
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作者 赵苏瑛 张海军 +2 位作者 徐春宏 单云峰 单祥年 《分子细胞生物学报》 CSCD 北大核心 2006年第1期39-45,共7页
人类线粒体DNA 12S rRNA A1555G突变可引起母系遗传性非综合征耳聋,并提高氨基糖甙类药物对该类耳聋的诱导作用。我们在江苏淮阴发现了一个非综合征耳聋大家系,家系个体发病呈典型的母系遗传特征,临床可表现为先天性耳聋、中年进行性耳... 人类线粒体DNA 12S rRNA A1555G突变可引起母系遗传性非综合征耳聋,并提高氨基糖甙类药物对该类耳聋的诱导作用。我们在江苏淮阴发现了一个非综合征耳聋大家系,家系个体发病呈典型的母系遗传特征,临床可表现为先天性耳聋、中年进行性耳聋乃至完全正常的表型。对家系个体进行研究后发现A1555G突变是引起该家系耳聋的主要原因。我们用EB病毒转化的方法对该家系部分个体行建系工作后,对家系中17个个体的类淋巴母细胞进行分析,其中包括具有耳聋症状的个体7人(患者组),具有同质性A1555G突变但表型正常的个体6人(携带组),正常婚配对照 5人,与正常婚配对照相比,患者组与携带组在线粒体蛋白合成速率及在葡萄糖或半乳糖培养基中的生长速度出现了不同程度的下降,且突变细胞系中线粒体功能缺陷的严重程度与个体的临床表型相关.这些发现强有力地支持了核基因参与了该疾病临床表型的形成。 展开更多
关键词 综合征耳聋 表型 12s RRNA 核基因
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猪繁殖呼吸综合征病毒S3毒株的分离及其免疫特性研究 被引量:5
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作者 祁贤 张婉华 +2 位作者 叶向阳 朱永军 陆鑫芳 《动物医学进展》 CSCD 2002年第4期87-90,共4页
从某猪场仔猪体内分离到一株 PPRSV毒株 ,该毒株能在 Marc-1 4 5细胞上增殖产生致细胞病变 ,该病变能被 PPRSV美洲型阳性血清所抑制 ,不被乙脑病毒、猪细小病毒、伪狂犬病毒阳性血清所抑制 ,经美洲型 PPRSV荧光抗体染色呈阳性反应 ,电... 从某猪场仔猪体内分离到一株 PPRSV毒株 ,该毒株能在 Marc-1 4 5细胞上增殖产生致细胞病变 ,该病变能被 PPRSV美洲型阳性血清所抑制 ,不被乙脑病毒、猪细小病毒、伪狂犬病毒阳性血清所抑制 ,经美洲型 PPRSV荧光抗体染色呈阳性反应 ,电镜观察到直径 55~ 60 nm的病毒粒子 ,接种阴性仔猪未见临床症状异常 ,但抗体检测阳性。命名该分离毒为 PPRSV-S3毒株。在 S3弱毒株分离鉴定的基础上 ,进一步在猪体上对其致病性和免疫力进行研究。S3毒株接种仔猪后 ,仔猪不表现任何症状 ,也不向外排毒。4~ 5周龄的仔猪接种 S3株后可产生坚强的免疫力 ,免疫后 4~ 6个月能抵抗强毒攻击。后备母猪配种前 2~ 3周免疫接种 S3株 ,怀孕 90~95d攻强毒 ,未发生流产、死胎、木乃伊胎、产弱仔等繁殖障碍现象。结果表明 ,S3是一株自然分离的弱毒株 ,且具有良好的安全性和免疫力。 展开更多
关键词 繁殖呼吸综合征病毒 s3毒株 分离 免疫特性
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11个携带线粒体tRNA^(Ser(UCN)) G7444A突变的中国汉族非综合征型耳聋家系分析评估 被引量:9
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作者 唐霄雯 阳娅玲 +7 位作者 高应龙 肖红利 何哲耘 郑静 郑斌娇 吕建新 金龙金 管敏鑫 《温州医学院学报》 CAS 2014年第6期401-406,410,共7页
目的:通过对11个携带线粒体tRNASer(UCN)G7444A突变的中国汉族非综合征型耳聋家系进行临床和分子遗传学特征等分析评估,探讨线粒体tRNASer(UCN)G7444A突变在母系遗传非综合征型耳聋发生发展中的作用。方法:PCR扩增2 650例中国汉族非综... 目的:通过对11个携带线粒体tRNASer(UCN)G7444A突变的中国汉族非综合征型耳聋家系进行临床和分子遗传学特征等分析评估,探讨线粒体tRNASer(UCN)G7444A突变在母系遗传非综合征型耳聋发生发展中的作用。方法:PCR扩增2 650例中国汉族非综合征型耳聋样本的线粒体12S rRNA、线粒体tRNASer(UCN)基因以及GJB2基因。对11个携带线粒体tRNASer(UCN)G7444A突变的中国汉族非综合征型耳聋家系进行听力学检测、耳聋相关热点基因突变检测以及家系资料等综合分析。结果:在2 650例中国汉族非综合征型耳聋患者中,14例携带线粒体tRNASer(UCN)G7444A突变,突变率为0.53%。在这11个携带线粒体tRNASer(UCN)G7444A突变的家系中,同时携带线粒体tRNASer(UCN)G7444A突变和线粒体12S rRNA A1555G、12S rRNA C1494T或GJB2c.235delC的家系分别为3、1和2个。临床资料分析表明,这11个中国汉族非综合征型耳聋家系母系成员在听力损失严重程度、发病年龄以及耳聋外显率方面存在较大差异。同时携带线粒体tRNASer(UCN)G7444A突变和线粒体12S rRNA A1555G、C1494T或GJB2 c.235delC突变家系的耳聋平均外显率分别为29.4%、42.9%和19.0%。前两者的外显率明显高于只携带线粒体tRNASer(UCN)G7444A突变家系的耳聋平均外显率(为14.0%)。结论:线粒体tRNASer(UCN)G7444A突变可能与线粒体12S rRNA A1555G和C1494T原发突变存在协同作用,共同影响非综合征型耳聋的表型。 展开更多
关键词 综合征型耳聋 线粒体tRNAser(UCN) 线粒体12s RRNA 基因突变
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猪繁殖与呼吸综合征病毒S1株单克隆抗体的制备及生物学特性研究 被引量:4
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作者 祁贤 张婉华 +1 位作者 叶向阳 朱永军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期189-191,共3页
通过差速离心和蔗糖密度梯度离心法对猪繁殖与呼吸综合征病毒沪 1(PRRSV_S1)株进行抗原纯化。免疫BALB/c小鼠 ,取脾细胞与SP2 / 0融合 ,用间接ELISA和有限稀释法 ,获得 2株稳定分泌抗PRRSV单抗的杂交瘤细胞株 ,分别命名为AG1、BD3。ELIS... 通过差速离心和蔗糖密度梯度离心法对猪繁殖与呼吸综合征病毒沪 1(PRRSV_S1)株进行抗原纯化。免疫BALB/c小鼠 ,取脾细胞与SP2 / 0融合 ,用间接ELISA和有限稀释法 ,获得 2株稳定分泌抗PRRSV单抗的杂交瘤细胞株 ,分别命名为AG1、BD3。ELISA交叉试验和阻断试验表明 ,2株单抗具有高度特异性。AG1可与PRRSV_S1,欧洲株LV ,美洲株VR_2 332反应 ,而BD3与美洲株VR_2 332反应较弱 ,2株单抗对猪细小病毒 (PPV)、猪伪狂犬病病毒 (PRV)、猪乙型脑炎病毒 (JEV)均不反应。阳性杂交瘤细胞的上清液效价是 1∶2 5 6~ 1∶5 12 ,腹水效价分别在 1∶10 3 ~ 1∶10 5之间。AG1和BD3各有 10 0条染色体 ,琼脂双扩散试验结果表明AG1属于IgG2b ,BD2属于IgM。 展开更多
关键词 猪繁殖 呼吸综合征病毒s1株 单克隆抗体 生物学特性
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大剂量阿托伐他汀钙对内囊预警综合征进展为脑梗死患者血清S100B蛋白及预后的影响 被引量:3
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作者 付胜奇 张淑玲 +2 位作者 张洪涛 张道培 嵇朋 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期917-919,共3页
目的观察大剂量阿托伐他汀对内囊预警综合征进展为脑梗死患者血清S100B蛋白水平及预后的影响。方法随机将发病24h内入院的内囊预警综合征进展为脑梗死患者30例分为对照组和阿托伐他汀组(阿托伐他汀80mg/d,连续用药14d)。治疗前后检测血... 目的观察大剂量阿托伐他汀对内囊预警综合征进展为脑梗死患者血清S100B蛋白水平及预后的影响。方法随机将发病24h内入院的内囊预警综合征进展为脑梗死患者30例分为对照组和阿托伐他汀组(阿托伐他汀80mg/d,连续用药14d)。治疗前后检测血清S100B蛋白水平,应用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)及Barthel指数(BI)记分法对入院后当天及3个月时行神经功能缺损程度进行评分。结果治疗前血清S100B蛋白与当时及3个月时病情严重性显著相关(r=0.721,r=-0.635,P均<0.001;r=0.561,r=-0.623,P均<0.001)。治疗后阿托伐他汀组血清S100B蛋白水平下降,且与对照组相比,差异有显著性(P=0.009)。各组入院时神经功能缺失程度评分与3个月后相比,差异有显著性(P<0.001,P<0.001),但不同组之间相比无明显差异。结论短期应用大剂量阿托伐他汀可以降低内囊预警综合征进展为脑梗死患者血清S100B蛋白水平,但对其3个月的预后无明显改善作用。 展开更多
关键词 内囊预警综合征 阿托伐他汀钙 血清s100B蛋白 预后
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Cobb’s综合征的临床诊断与治疗 被引量:4
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作者 王建生 王志潮 +1 位作者 柳江 张鸿祺 《北京医学》 CAS 2012年第10期884-886,共3页
目的总结Cobb’s综合征临床诊断和治疗的经验体会。方法采用磁共振成像与脊髓血管造影确定诊断后,采用血管内栓塞与手术切除相结合的方法消除病变对脊髓的损害,恢复脊髓功能。手术后连续随访确定患者的治疗效果和预后。结果 4例临床治... 目的总结Cobb’s综合征临床诊断和治疗的经验体会。方法采用磁共振成像与脊髓血管造影确定诊断后,采用血管内栓塞与手术切除相结合的方法消除病变对脊髓的损害,恢复脊髓功能。手术后连续随访确定患者的治疗效果和预后。结果 4例临床治愈,1例在手术实施血管畸形近全切除5年后再出血,经过再次栓塞后恢复。结论成功的治疗要依靠先栓塞治疗后手术切除的完整结合,任何一项治疗的不彻底都不能完全消除病变,易复发。 展开更多
关键词 Cobb’s综合征 脊柱血管疾病 诊断 治疗
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急性冠脉综合征患者血清高敏C反应蛋白和组织蛋白酶S水平变化与临床意义 被引量:3
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作者 周碧蓉 陈越峰 +1 位作者 周娜 杨景 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2013年第9期1036-1039,共4页
目的:探讨血清高敏C反应蛋白(hsCRP)、组织蛋白酶S(CatS)与急性冠脉综合征的相关关系。方法:选择53例急性冠脉综合征患者(ACS组),对照组36例,检测两组血清CatS、hs-CRP水平并进行比较。同时检测ACS组治疗后血清hs-CRP、CatS水平的变化... 目的:探讨血清高敏C反应蛋白(hsCRP)、组织蛋白酶S(CatS)与急性冠脉综合征的相关关系。方法:选择53例急性冠脉综合征患者(ACS组),对照组36例,检测两组血清CatS、hs-CRP水平并进行比较。同时检测ACS组治疗后血清hs-CRP、CatS水平的变化。结果:ACS组在性别、年龄、吸烟、糖尿病、脑梗死、高血压患病率方面与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);ACS组治疗前血清CatS水平为(0.51±0.03)nmol/L,hs-CRP为(10.21±5.03)mg/L,分别高于对照组的(0.43±0.04)nmol/L和(3.64±1.87)mg/L,差异具有统计学意义(P<0.05);ACS组治疗后血清CatS、hs-CRP水平分别为(0.45±0.06)nmol/L和(6.05±3.25)mg/L,较治疗前的(0.51±0.03)nmol/L和(10.21±5.03)mg/L明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ACS患者血清CatS及hs-CRP的水平的变化提示CatS及hs-CRP可能在ACS发生发展过程中具有重要作用,推测CatS可能作为ACS的一种新的生物标志物。 展开更多
关键词 组织蛋白酶s 急性冠脉综合征 高敏C反应蛋白
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基于16S rRNA测序技术初步探讨多囊卵巢综合征大鼠肠道菌群多样性 被引量:12
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作者 肖慧 刘艳霞 +2 位作者 征征 邢雅雯 邢玉 《疑难病杂志》 CAS 2020年第4期399-405,共7页
目的应用16S rRNA测序技术分析来曲唑联合高脂饮食诱导的多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠肠道菌群多样性的特点。方法2018年10月—2019年3月于北京中医药大学进行实验。选取SPF级雌性SD大鼠12只,随机数字表法分为对照组和模型组,每组6只;对照... 目的应用16S rRNA测序技术分析来曲唑联合高脂饮食诱导的多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠肠道菌群多样性的特点。方法2018年10月—2019年3月于北京中医药大学进行实验。选取SPF级雌性SD大鼠12只,随机数字表法分为对照组和模型组,每组6只;对照组予普通饮食,模型组予来曲唑联合高脂饮食诱导大鼠PCOS模型,采用16S rRNA高通量基因测序技术检测肠道菌群多样性。结果与对照组比较,模型组大鼠肠道菌群中拟杆菌门丰度减少(t=-2.951,P=0.033),厚壁杆菌门丰度增加(t=2.800,P=0.038),拟杆菌门/厚壁杆菌门比值显著降低(t=-3.378,P=0.02)。模型组大鼠肠道菌群中各分类水平的拟杆菌丰度均减少,包括属水平的Allpprevotella、拟杆菌属、副拟杆菌属、普氏菌属等;厚壁杆菌门中多个分类水平的菌群丰度增加,包括属水平的丹毒丝菌属、红蝽菌属等,而瘤胃菌科丰度减少;变形菌门中属水平的Parasutterella增多,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论来曲唑联合高脂饮食诱导的PCOS大鼠肠道菌群存在菌群失调的现象,主要表现为拟杆菌门丰度减少,厚壁杆菌门丰度增加;Allpprevotella、拟杆菌属、副拟杆菌属、普氏菌属、瘤胃菌科等益生菌丰度减少,而梭菌属、Parasutterella、红蝽菌科等有害菌群丰度增加。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 肠道菌群 16s RRNA 拟杆菌门 厚壁杆菌门 大鼠
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25个携带线粒体12S rRNA A1555G突变的中国汉族非综合征型耳聋家系 被引量:6
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作者 彭光华 郑斌娇 +10 位作者 方芳 伍越 梁玲芝 郑静 南奔宇 余啸 唐霄雯 朱翌 吕建新 陈波蓓 管敏鑫 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期62-72,共11页
线粒体12S rRNA A1555G突变是引起氨基糖甙类药物诱导的非综合征型耳聋的重要原因之一。文章对收集的25个携带A1555G突变的中国汉族非综合征型耳聋家系进行了临床和分子遗传学评估。结果表明,这25个家系的母系成员在耳聋外显率、听力损... 线粒体12S rRNA A1555G突变是引起氨基糖甙类药物诱导的非综合征型耳聋的重要原因之一。文章对收集的25个携带A1555G突变的中国汉族非综合征型耳聋家系进行了临床和分子遗传学评估。结果表明,这25个家系的母系成员在耳聋外显率、听力损失严重程度和发病年龄上存在较大差异。当包括和不包括氨基糖甙类药物使用史时,耳聋的平均外显率分别为28.1%和21.5%,排除氨基糖甙类药物时,耳聋的平均发病年龄从1~15岁不等。线粒体全序列分析发现了16个新变异,不同的线粒体DNA多态性位点显示这25个家系分别属于东亚人群A、B、D、F、G、M、N和R单倍型,其中线粒体单倍型B的家系耳聋外显率和表现度较其他单倍型高。此外,7个继发突变位点和21个高保守性位点突变可能增加了这些家系的耳聋外显率。GJB2基因上未检测到与耳聋相关的突变,表明在本研究的耳聋家系中,GJB2基因可能没有参与A1555G突变的表型表达。以上各方面提示,线粒体单倍型和其他因素可能参与了这25个家系耳聋患者的表型修饰。 展开更多
关键词 线粒体12s rRNA A1555G突变 综合征型耳聋 氨基糖甙类抗生素 单倍型
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可溶性CD44s、SF、LDH在鉴别巨幼细胞贫血和骨髓增生异常综合征中的意义 被引量:6
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作者 杨洁 杨永宾 +6 位作者 李杰 张晓霞 王瑞仓 郝洪岭 李燕 袁军 赵培 《河北医药》 CAS 2016年第24期3773-3775,共3页
目的测定巨幼细胞贫血(MA)和骨髓增生异常综合征(MDS)患者的血清可溶性CD44s(sol CD44s)、乳酸脱氢酶(LDH)、血清铁蛋白(SF)水平,来探讨此三项指标在MDS与MA的鉴别诊断中的意义。方法 112例初诊患者为研究对象,其中MDS患者58例(MDS组),M... 目的测定巨幼细胞贫血(MA)和骨髓增生异常综合征(MDS)患者的血清可溶性CD44s(sol CD44s)、乳酸脱氢酶(LDH)、血清铁蛋白(SF)水平,来探讨此三项指标在MDS与MA的鉴别诊断中的意义。方法 112例初诊患者为研究对象,其中MDS患者58例(MDS组),MA患者39例(MA组),健康成年人15例作为对照(对照组)。留取血清标本,采用ELISA法检测血清sol CD44s,速率法测定LDH水平及电化学发光免疫分析法(ECLIA)测定SF水平。结果 MDS组血清sol CD44s水平明显高于对照组与MA组(P<0.05),MA组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。MDS组与MA组血清LDH水平均明显高于对照组,两两比较MDS组LDH水平低于MA组(P<0.05)。MDS组与MA组血清SF水平均明显高于对照组,两两比较MDS组SF水平高于MA组(P<0.05)。结论MDS患者血清可溶性CD44s、SF水平较MA患者明显升高,MDS患者LDH水平低于MA患者。血清可溶性CD44s、LDH、SF可作为MA与MDS鉴别诊断的参考指标。 展开更多
关键词 可溶性CD44s 巨幼细胞贫血 乳酸脱氢酶 骨髓增生异常综合征
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急性呼吸窘迫综合征患者血清钙结合蛋白S100A12的表达及临床意义 被引量:15
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作者 周凌 蒋丕萍 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第18期3077-3080,共4页
目的探讨急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者血清钙结合蛋白S100A12的表达及临床意义,分析其与病情严重程度和预后相关性,同时比较S100A12与降钙素原(PCT)在ARDS患者预后中的价值。方法选取2016年1月至2017年11月呼吸科诊治的ARDS患者68例作... 目的探讨急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者血清钙结合蛋白S100A12的表达及临床意义,分析其与病情严重程度和预后相关性,同时比较S100A12与降钙素原(PCT)在ARDS患者预后中的价值。方法选取2016年1月至2017年11月呼吸科诊治的ARDS患者68例作为研究对象,选取同期68例健康体检者作为对照组。根据患者病情严重程度分为轻度组、中度组和重度组;根据患者28 d预后情况,分为生存组和死亡组。入组时采集研究对象静脉血,检测S100A12、PCT水平,并收集患者APACHE Ⅱ评分和肺损伤评分等资料。通过受试者工作特征曲线(ROC)评价血清S100A12和PCT对ARDS患者预后的价值。结果 ADRS患者的病死率为48.53%(33/68),ARDS患者血清S100A12和PCT水平高于对照组(P <0.05)。血清S100A12和PCT水平随着ARDS患者病情严重程度呈增加趋势(P <0.05),生存组患者血清S100A12和PCT水平低于死亡组(P <0.05)。ARDS患者血清S100A12和PCT水平与APACHE Ⅱ评分、肺损伤评分呈正相关性(P <0.05),与PaO_2/FiO_2呈负相关(P <0.01)。S100A12和PCT的ROC曲线下面积分别为0.825、0.783,灵敏度分别为0.750、0.643,特异度分别为0.775、0.850。结论血清S100A12与ARDS患者病情严重程度和预后密切相关,对ADRS的诊治具有一定的临床价值。 展开更多
关键词 急性呼吸窘迫综合征 s100A12 降钙素原 病情严重程度 预后
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