Steroidal and pregnane glycosides from Ypsilandra thibetica

The whole plants of Ypsilandra thibetica have been analyzed as part of a systematic study on saponin constituents of medicinal plants.This has resulted in the isolation of two new bisdesmosidic furostanol saponins,named ypsilandroside P(1)and ypsilandroside Q(2),and one new pregnane glycoside,named ypsilandroside R(3),together with nine known steroidal glycosides.Their structures were elucidated on the basis of extensive spectroscopic analysis,including that of 2D NMR data,and the results of acidic hydrolysis.Ypsilandroside P(1)was cytotoxicity against two human tumor cell lines.

Two New Steroidal Saponins from Ypsilandra thibetica

Two new monosaccharide steroidal saponins,named ypsilandroside S(1)and ypsilandroside T(2),have been isolated from the whole plants of Ypsilandra thibetica.Their structures were elucidated as heloniogenin 3-O-b-D-apiofuranoside(1)and pregna 5,16-dien-3b,12a-diol-20-one-3-O-b-D-apiofuranoside(2)by spectroscopic techniques(1D and 2D NMR,MS).Compounds 1 and 2 were tested for their inhibitory effects on lipopolysaccharide-induced nitric oxide production in RAW 264.7 cells.

Ypsilandrosides U-Y,five new steroidal saponins from Ypsilandra thibetica

Phytochemical reinvestigation on the whole plants of Ypsilandra thibetica obtained four new spirostanol glycosides,named ypsilandrosides U-X(1-4),and one new cholestanol glycoside,named ypsilandroside Y(5).Their structures have been established by extensive spectroscopic data and chemical methods.Among them,compound 4 is a rare spirostanol glycoside which possesses a novel 5(6→7)abeo-steroidal aglycone,while compound 1 is a first spiro-stanol bisdesmoside attached to C-3 and C-12,respectively,isolated from the genus Ypsilandra.The induced platelet aggregation activity of the isolates was tested.

黑籽重楼高效繁育及栽培技术

黑籽重楼(Paris thibetica Franch.)为百合科重楼属植物,属于名贵中药材。因其根茎生长缓慢,长期大量采挖使其野生资源面临枯竭,人工种植是缓解供需矛盾和保护野生资源的重要途径。通过对黑籽重楼的形态特征和生长习性进行总结,对人工栽培过程中的种苗繁育、选地整地、种植管理、病虫害防治以及采收、加工储存等进行详细地介绍,以期为黑籽重楼的人工高效繁育及生产栽培提供参考。

丫蕊花属——陕西省百合科一新记录属

报道了陕西省百合科一新记录属--丫蕊花属(Ypsilandra Franch.),其新记录种为丫蕊花(Ypsilandra thibetica Franch.)。提供了形态描述和野外照片,凭证标本藏于陕西理工大学植物标本馆。

重楼属植物AFLP实验体系的建立

通过对影响重楼AFLP-银染技术体系的关键因素作对比研究,建立了一套优化的重楼AFLP分子标记体系.优化的关键因素为:1)DNA采用CTAB法提取更适于重楼的AFLP分析,且从幼叶中提取的DNA纯度和质量最高;2)酶切时间为9h时效果最佳;3)选择性扩增时退火温度为56℃;4)从15对引物中筛选出4对进行选择性扩增,得到扩增条带276条,其中多态性带201条(占72.83%).

模拟增温效应对西藏苔草繁殖生态的影响

通过采用国际冻原计划模拟增温对植物影响的方法,从繁殖生态学角度研究了西藏苔草(Carex thibetica Franch)种群的物候期、分蘖数、生物量和种群繁殖对增温的响应。结果表明:暖棚内气温、土壤表层温度分别了1.17℃和1.50℃;物候期提前或延迟,生长期延长;增温可以提高西藏苔草的生殖产量,但不提高其种子发芽率;增温可提高西藏苔草分蘖数和生物量;西藏苔草繁殖对策趋于营养繁殖。

峨眉山2种重楼属植物同域分化的分子遗传学及其形态学证据初探

对峨眉山2种重楼—小重楼(Paris polyphyllaSmith var.minoraS.F.Wang)、黑籽重楼(P.thibeticaFranch)DNA进行了AFLP(扩增的限制性片段长度多态性)分析和形态上的差异分析。AFLP分析可知小重楼和黑籽重楼在DNA分子水平上表现出极为丰富的遗传多样性,每个种内个体间的相似性很大,但有明显种间的遗传差异。形态对比分析可知小重楼和黑籽重楼在花部性状上有明显的差异。AFLP和形态分析结果表明小重楼和黑籽重楼无论是在形态还是遗传上均有明显差异。它们之间已经有了明显的分化。

不同产地丫蕊花不同部位中3种皂苷成分含量测定及差异分析

目的:建立测定丫蕊花中重楼皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ含量的方法,比较不同产地丫蕊花不同部位中这3种皂苷成分的含量差异。方法:采用高效液相色谱法测定10个产地丫蕊花的全草部位和地下部位中重楼皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量,色谱柱为Kromasil C18,流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,柱温为35℃,检测波长为203 nm,进样量为10μL。以3种皂苷成分的含量为指标,对20批次丫蕊花进行聚类分析和偏最小二乘判别分析,对样品进行聚类区分,并确定其主要差异性成分。结果:重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ的检测质量线性范围分别为0.051~2.04、0.007~0.28、0.168~6.72μg(r≥0.9995);检测限分别为1.92、1.75、1.87 ng,定量限分别为6.40、5.87、6.23 ng;精密度、重复性、稳定性(24 h)的RSD均小于2%(n=6);平均回收率分别为99.29%、101.38%、99.64%,RSD分别为1.17%、2.64%、0.75%(n=6)。20批次样品的重楼皂苷Ⅱ含量为0.615~1.875 mg/g,重楼皂苷Ⅵ含量为0~0.095 mg/g,重楼皂苷Ⅶ含量为3.158~12.354 mg/g。聚类分析结果显示,20批次样品被聚为两类,批次S9~S12为一类,其余16批次样品被聚为一类;偏最小二乘判别分析结果显示,20批次样品分为3个区,批次S1、S2、S8、S14、S16、S20被分为Ⅰ区,批次S9~S12被分为Ⅱ区,其余样品被分为Ⅲ区。不同产地的丫蕊花存在品质差异,且全草和地下部位中3种皂苷成分无差异性。权重排序结果显示,重楼皂苷Ⅶ为丫蕊花药材中主要差异性成分,其中彭州和大邑县产丫蕊花药材中重楼皂苷Ⅶ最高。结论:本方法简单方便、灵敏度高,可用于丫蕊花中3种皂苷成分的含量测定。以彭州和大邑县产丫蕊花活性成分含量较高、质量较好。

丫蕊花的化学成分

从百合科丫蕊花属植物丫蕊花(Ypsilandra thibetica Franch)全草中分离鉴定了8个化合物,分别为:偏诺皂苷元(1),偏诺皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(2),偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(3),偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃葡萄糖(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(4),薯蓣皂苷元(5),薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(6),木犀草素(7),木犀草苷(8)。其中化合物1,2,5,7,8均首次在丫蕊花植物中分到。

华重楼及其常见混伪品的多重聚合酶链式反应快速鉴定体系的建立和应用

收集华重楼常见混种栽培种的根茎,叶片及种子样品,对华重楼极其常见混伪品的r DNA-ITS片段进行对比分析。基于重楼属植物r DNA-ITS的SNP位点,针对华重楼、球药隔重楼、黑籽重楼设计3组共6条特异性引物,建立并优化多重PCR反应体系。应用已建立的多重PCR方法对华重楼、球药隔重楼、黑籽重楼及常见的其他重楼属混伪品进行鉴别,验证方法的准确性。通过观察电泳检测扩增产物条带的位置及数量实现快速检测的目的。建立的多重PCR鉴定方法能准确地对华重楼极其常见重楼属混杂栽培种进行快速鉴别。多重PCR方法特异性强,灵敏度高,高效快速,可用于多基源中药材及同属近缘种的快速鉴别,同时为中药材的种质资源鉴定提供可行的方法。

黑籽重楼的生药学研究

目的:对重楼药材原植物黑籽重楼进行系统的生药学研究。方法:对黑籽重楼的植物形态、药材特征、药材横切面及粉末进行观察;以重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ为对照品对药材进行薄层鉴别,采用高效液相色谱法测定黑籽重楼中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量。结果:黑籽重楼的原植物特征包括具有侧膜胎座,果开裂,无外种皮,于一侧包以深红色多汁的鸡冠状假种皮;查阅文献,黑籽重楼与云南重楼、七叶一枝花在药材性状上的区别主要表现在表面颜色、形状、环纹、断面上,气味上没有明显的差异;黑籽重楼的横切面结构、粉末特征与云南重楼、七叶一枝花没有明显差异;经薄层色谱鉴别,在黑籽重楼根茎中都含有重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ,含量分别为0.117%、0.081%、0.114%、0.204%;重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的总量为0.516%,与药典标准(含重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的总量不得少于0.60%)存在差异。结论:本研究可为黑籽重楼的鉴定及进一步研究提供科学依据。

丫蕊花的双受精及胚和胚乳发育的初步观察

丫蕊花(Ypsilaudra thibetica Franch.)为珠孔受精。进入胚囊的两个精子分别与卵细胞和中央细胞进行正常的双受精,其受精作用属有丝分裂前型。受精后的初生胚乳核立即分裂,其发育方式为沼生目型。到发育后期、由游离状态的胚乳核形成胚乳细胞时,珠孔室和合点室都形成胚乳细胞。合子的休眠期很长,而且胚的发育过程较为缓慢。种子成熟时胚尚无器官的分化。本文还观察了以上发育过程中淀粉粒、蛋白质的动态。

峨眉石凤丹的生药鉴定

目的:为峨眉石凤丹的真伪鉴别提供依据。方法:对峨眉石凤丹的药材性状、显微特征进行鉴别研究。结果:峨眉石凤丹叶肉组织为薄壁细胞构成,没有栅栏组织与海绵组织的区分。皮层中有维管束,并常可见根迹维管束。螺纹导管,草酸钙针晶束常见。结论:上述特征可作为峨眉石凤丹的主要鉴别依据。

百合科药用植物丫蕊花的研究进展

丫蕊花Ypsilandra thibetica是百合科丫蕊花属植物,以全草入药,具有清热解毒、散结等功效,主治瘰疬,小便不利等症,在民间应用较广泛。化学研究显示,甾体皂苷是丫蕊花的主要成分和有效成分。据作者统计,到目前为止从丫蕊花中共报道了51个甾体皂苷类化合物,包括螺甾烷和呋甾烷2种主要类型;药理实验及临床研究表明,丫蕊花具有抗肿瘤、缩宫止血及抗菌作用,尤其对多种妇科出血症的治疗有显著疗效。该文对国内外有关丫蕊花的植物学研究、品种鉴定、化学成分和药理活性等方面进展进行了详细的总结,并分析了丫蕊花作为中药重楼资源替代品的优势,同时探讨了今后研究的方向,以期为该药材的进一步研究提供有益参考,为今后的深入开发利用提供科学依据。

丫蕊花甾体皂苷YB16诱导人结肠癌细胞凋亡作用

目的探讨丫蕊花甾体皂苷(YB16)对人结肠癌细胞HCT15凋亡的作用及其机制。方法体外培养HCT15细胞,以不同浓度的YB16(0.125~16.000μmol/L)干预24 h,噻唑蓝(MTT)法检测HCT15细胞存活率,光镜下观察细胞形态变化,吖啶橙(AO)染色观察细胞凋亡情况,JC-1染色观察细胞膜电位改变,蛋白免疫印迹检测细胞内B淋巴细胞瘤–2(Bcl-2)、多聚ADP–核糖聚合酶(PARP)、激活型PARP(cleaved-PARP)、半胱氨酸蛋白酶–3(caspase-3)、激活型caspase-3(cleaved-caspase-3)蛋白表达。结果与对照组比较,各剂量YB16组细胞存活率明显下降,呈剂量效应关系(P <0.05);与对照组比较,YB16组细胞出现凋亡特征性改变,凋亡细胞明显增多;与对照组比较,0.500、1.000μmol/L YB16组HCT15细胞内Bcl-2蛋白表达[分别为(0.542±0.04)、(0.351±0.03)]明显下降,cleaved-PARP、cleaved-caspase-3蛋白表达[分别为(0.647±0.05)、(0.686±0.03)和(0.677±0.03)、(0.762±0.04)]均显著上升,差异有统计学意义(均P <0.05)。结论 YB16可抑制HCT15细胞增殖、促进细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2蛋白表达、上调cleaved-PARP、cleaved-caspase-3蛋白表达有关。

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中丫蕊花皂苷G的浓度及其体内药动学研究

目的采用高效液相-串联质谱（LC-MS/MS）法测定大鼠血浆中丫蕊花皂苷G的含量,并研究其在大鼠体内的药动学特征。方法采用Phenomenex Luna C18色谱柱（150 mm×2 mm,3μm）,流动相为乙腈-水（含0.1%甲酸）,流速0.2 mL·min-1,以人参皂苷Rg3为内标;分别于大鼠尾静脉注射丫蕊花皂苷G 0.25、0.5、1 mg·kg-1,给药后于不同时间点采血,经固相萃取法处理后,采用上述LC-MS/MS法测定血药浓度;采用DAS 3.0软件、非房室模型拟合药代参数。结果 0.011.0μg·m L-1丫蕊花皂苷G与峰面积的线性关系良好,方法学考察均符合要求;大鼠静脉给药后的血浆药动学参数为：t1/2=3.447±0.898 h、MRT0-∞=4.568±1.075 h、CL=0.858±0.171 L·h-1·kg,AUC、Cmax随给药剂量的增加而等比增大,符合线性药动学特征。结论所用方法简便、灵敏,结果准确,适用于大鼠血浆中丫蕊花皂苷G的含量测定及其药动学研究。

重楼替代药材丫蕊花研究进展

百合科(Liliaceae)丫蕊花属植物具有和重楼属十分相似的化学成分及药理活性。丫蕊花和重楼活性成分主要为甾体皂苷,具有抗菌、止血、抗肿瘤等药理作用,因此丫蕊花具有替代重楼的药效物质基础,可在一定程度上缓解重楼资源危机。综述丫蕊花的研究进展,以期为加快丫蕊花的研究开发和利用提供参考。

黑籽重楼化学成分及其抗肿瘤活性研究

目的研究黑籽重楼Paris thibetica根状茎的化学成分及其抗肿瘤活性。方法综合运用正相硅胶、Sephadex LH-20、ODS-C18等柱色谱以及半制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,并通过MS、1H-NMR、13C-NMR等波谱学方法进行结构鉴定。采用MTT法研究化合物的体外抗肿瘤活性。结果从黑籽重楼根状茎的乙醇提取物中分离得到14个化合物,分别鉴定为重楼皂苷V(1)、重楼皂苷I(2)、重楼皂苷II(3)、重楼皂苷VI(4)、偏诺皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、重楼皂苷H(6)、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、重楼皂苷VII(8)、parisyunnanoside G(9)、trikamsteroside E(10)、豆甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖(11)、β-谷甾醇棕榈酸酯(12)、β-香树脂醇(13)、4-羟基-5-甲基呋喃-3-羧酸(14)。结论所有化合物均为首次从黑籽重楼中分离得到,化合物10、12~14为首次从重楼属植物中分离得到。化合物1~8对人肝癌细胞BEL-7402有细胞毒活性,其中化合物3活性最好,IC50为0.48μmol/L。