基于网络药理学探讨郁金散治疗猪肠道炎症的作用机制

为了利用网络药理学探讨郁金散治疗猪肠道炎症的作用靶点,并对靶点涉及的生物学过程和作用通路进行阐述,本试验借助中药系统药理学数据库(TCMSP)分别筛选郁金散的活性成分和靶点,利用美国国家生物技术信息中心(NCBI)、在线人类孟德尔遗传(OMIM)和GeneCards数据库检索肠道炎症靶点,通过Uniprot数据库对靶点进行校正。利用Cytoscape 3.9.1软件和String网站分别构建共有靶点网络和核心靶点相互作用网络,利用用于注释、可视化和集成发现的数据库(DAVID)对靶点涉及的生物学过程和信号通路进行分析。结果显示:经选择物种“Sus scrofa”校正后,郁金散的活性成分有66个,靶点81个,猪肠道炎症靶点198个,郁金散治疗猪肠道炎症的预测靶点有38个,其中核心靶点25个,包括肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)等。基因本体论(GO)功能富集分析得到生物学过程(BP)条目91个,细胞组成(CC)条目3个,分子功能(MF)条目10个,其中生物学过程主要涉及免疫反应、RNA聚合酶II启动子的转录正调控和细胞对脂多糖的反应等;细胞组成主要涉及胞外区、细胞外间隙和白细胞介素-6受体复合体;分子功能主要涉及细胞因子活性、生长因子活性和白细胞介素-2受体结合等。京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析得到83条通路,相关性较强的通路依次是癌症通路、南美锥虫病和细胞因子-细胞因子受体相互作用等。结果表明,郁金散通过调控TNF、IL-6和IL-10等靶点,参与癌症通路、南美锥虫病和细胞因子-细胞因子受体相互作用等通路,对猪肠道炎症发挥治疗作用。

史正刚教授运用菖蒲郁金汤合牵正散治疗多发性抽动症经验

史正刚教授根据小儿生理病理特点,认为小儿多发性抽动症主要是心肝有余,其次为脾肾亏虚,兼有风湿痰瘀所致。临床应用菖蒲郁金汤合牵正散清心疏肝、化痰活血、健脾益肾、息风止痉,同时注重心理调护,每获良效。

郁金散对大肠湿热证大鼠回肠、结肠黏膜SIgA和炎性因子的影响

旨在探讨郁金散对大肠湿热证大鼠回肠、结肠肠黏膜SIgA和炎性因子的影响。体重180~220g Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、大肠湿热证模型组、自愈组和郁金散治疗组,每组10只。通过饮食设置(高糖高脂饮食)、饥饱失常和灌服白酒并结合高温高湿环境,最后腹腔注射生物因子大肠杆菌,以模拟大肠湿热证发病条件,建立大肠湿热证大鼠模型。郁金散治疗组用郁金散治疗5d,然后采集回肠和结肠组织制作病理切片,进行组织病理学观察;用ELISA法检测回肠和结肠黏液中免疫球蛋白SIgA含量及组织炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、IL-17和IL-23含量。结果显示,模型大鼠回肠和结肠黏膜上皮细胞变性、坏死、脱落,上皮完整性被破坏,有炎性细胞浸润现象;郁金散治疗组黏膜上皮再生,完整性得到恢复,连续性良好,排列有序,炎性细胞浸润明显减少。模型组大鼠回肠和结肠黏液中的SIgA含量均显著高于正常对照组(P<0.05);郁金散治疗组显著低于自愈组(P<0.05)。模型组回肠和结肠组织中促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17和IL-23含量显著或极显著高于正常对照组(P<0.05或P<0.01),抑炎因子IL-10含量显著或极显著低于正常对照组(P<0.05或P<0.01);郁金散治疗组回肠组织的上述炎性因子含量与自愈组相比均差异显著(P<0.05);结肠中的TNF-α、IL-10、IL-23与自愈组差异显著(P<0.05);IL-1β、IL-6、IL-17与自愈组差异极显著(P<0.01)。结果表明,大肠湿热证模型大鼠回肠和结肠黏膜免疫稳态被打破,表现为SIgA分泌亢进,炎性细胞因子分泌紊乱;郁金散治疗可以促使其显著回调。

郁金散对大肠湿热证模型大鼠血清及肠道组织胃肠激素的影响

探讨郁金散对大肠湿热证模型大鼠血清和肠道组织胃肠激素的影响。Wistar大鼠60只,体重180~220g,随机分为正常对照组、大肠湿热证模型组、自愈组、郁金散高、中、低剂量治疗组,每组10只。通过自由饮用蜂蜜水;前10d禁食与饲喂充足饲料并灌胃猪油隔日交替进行;之后5d每天灌白酒,并置于高温高湿环境(8h·d-1);然后腹腔注射大肠杆菌,24h后再注射一次建立大肠湿热证大鼠模型。造模成功后,分别给予高(10.4g·kg^(-1))、中(5.2g·kg^(-1))、低(2.6g·kg^(-1))剂量郁金散进行治疗。整个试验过程中观察大鼠的临床症状和体征,记录体重变化,检测血清和回肠、结肠组织中的胃肠激素含量。结果显示:模型大鼠出现便溏、粪便色黄恶臭、肛门红肿、发热等症状和体征。正常组体重逐渐上升,模型大鼠造模期间体重呈现先波状上升、再逐渐下降的趋势,郁金散治疗后体重呈逐渐上升的趋势,其中以高剂量组回升最明显,但各组均无显著性差异(P>0.05)。与正常对照组相比,模型组和自愈组大鼠血清、回肠及结肠组织中胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)、P物质(SP)含量极显著或显著升高(P<0.01或P<0.05),血管活性肠肽(VIP)无显著变化,生长抑素(SS)含量极显著降低(P<0.01);与自愈组相比,各剂量郁金散治疗后,MTL、GAS、SP、VIP和SS都有不同程度的回调,以高剂量组回调最为明显,其中高剂量组大鼠血清、回肠、结肠中MTL、GAS和SP极显著或显著降低(P<0.01或P<0.05),SS极显著或显著升高(P<0.01或P<0.05)。大肠湿热证模型大鼠机体出现了胃肠激素紊乱,表现为MTL、GAS、SP和VIP含量升高,而SS含量降低,郁金散能改善大肠湿热证模型大鼠机体胃肠激素异常水平,且高剂量的治疗效果最好。

郁金散对大肠湿热证大鼠血清免疫球蛋白与抗氧化相关因子的调节作用

本试验旨在阐明郁金散对大肠湿热证大鼠血清免疫球蛋白与抗氧化相关因子的调节作用。选取60只Wistar大鼠,随机分为正常对照组、大肠湿热证模型组、自愈组以及郁金散高、中、低剂量治疗组,共6组,每组10只。通过模拟大肠湿热证发病条件,饮食中采用高糖高脂饮食、饥饱失常、灌服白酒,设置高温高湿环境,再腹腔注射生物因子大肠杆菌,以建立大肠湿热证大鼠模型。此后分别用高、中、低剂量郁金散治疗5d。然后检测血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM水平,并采集脾、胸腺进行组织病理学观察;同时检测血清及肝组织脂质过氧化物(LPO)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)水平。结果显示:与正常对照组相比,模型组血清IgA、IgG、IgM含量极显著升高(P<0.01);与自愈组相比,各剂量郁金散治疗组有不同程度的回调,其中以高剂量组回调最明显,高剂量组中IgA和IgM含量显著降低(P<0.05),IgG含量极显著降低(P<0.01)。病理切片显示大肠湿热证模型大鼠脾和胸腺组织形态结构紊乱,脾淤血,胸腺严重萎缩;郁金散高剂量组脾结构趋于正常,胸腺萎缩程度降低。与正常对照组相比,模型组大鼠血清和肝组织中MDA和LPO含量极显著升高(P<0.01),GSH和NO含量极显著降低(P<0.01);与自愈组相比,各剂量郁金散治疗组有不同程度的回调,其中以高剂量组回调最明显,MDA和LPO含量显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),GSH和NO含量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01)。大肠湿热证模型大鼠机体免疫功能异常、氧化与抗氧化平衡紊乱,郁金散可通过回调大肠湿热证机体的血清免疫球蛋白水平,改善免疫器官脾和胸腺的结构,调节机体的氧化和抗氧化平衡关系而治疗大肠湿热证,其中以高剂量组治疗效果最好。

3种提取方法对郁金散有效成分提取效果的比较

为比较3种提取方法对郁金散中姜黄素、诃子酸、栀子苷、芍药苷、黄连碱、盐酸小檗碱、黄芩苷、大黄素等13种有效成分的提取效果,分别以超声辅助乙醇回流、水回流及水煎煮法提取郁金散,制得干浸膏,建立HPLC检测方法,检测各提取物中13种有效成分的含量,流动相为乙腈-1 mL/L磷酸、乙腈-100 mL/L冰醋酸梯度洗脱,流速1 mL/min,检测波长250 nm、425 nm,柱温30℃,进样量20μL。结果表明,此方法稳定可靠。超声辅助-水、乙醇回流及水煎煮3种提取物得率分别为20.10%、31.39%、21.13%,13种成分含量之和占各自干浸膏的比例分别为30.947%、83.141%、46.690%,且每种成分的含量均为超声辅助乙醇回流法>水煎煮法>超声辅助水回流法。证明超声辅助乙醇回流法最佳,为郁金散新剂型的开发奠定基础。

郁金散加减方对长白猪传染性胃肠炎治疗效果的研究

为了研究郁金散加减方对长白猪传染性胃肠炎的治疗效果,从张家口顺德猪场选取患有传染性胃肠炎的成年长白猪20头,随机分为郁金散加减方低剂量组、郁金散加减方高剂量组、西药组和对照组,每组各5头。郁金散加减方组每天灌服郁金散方剂,早晚各1次,低、高剂量组分别按6、7mL/kg体重给药;西药组每天灌服金刚乙胺,颈部皮下注射氟苯尼考,早晚各1次;对照组正常饲喂,不给药。7d后观察临床症状和生长性能,测定血常规、血清生化指标、血清免疫指标及抗氧化指标。结果表明:郁金散加减方组和西药组病猪反应灵敏,体温正常,进食量增加,粪便恢复正常。低、高剂量组和西药组治愈率分别为80%、90%和60%,郁金散加减方的治疗效果优于西药治疗。与对照组相比,高剂量组能极显著提高猪平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)(P<0.01),极显著降低料重比(P<0.01);3个给药组均能极显著降低血尿素氮(BUN)、丙二醛(MDA)和白细胞数量(WBC)(P<0.01),极显著提高血清钾(K)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)含量和总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.01),但3组间差异不显著(P>0.05);高剂量组过氧化氢酶(CAT)活性极显著高于低剂量组、西药组和对照组(P<0.01)。表明郁金散加减方对长白猪传染性胃肠炎有较好的治疗效果,其中郁金散加减方高剂量组效果更好。