Effects of Yulangsan polysaccharide on monoamine neurotransmitters, adenylate cyclase activity and brain-derived neurotrophic factor expression in a mouse model of depression induced by unpredictable chronic mild stress

The present study established a mouse model of depression induced by unpredictable chronic mild stress. The model mice were treated with Yulangsan polysaccharide （YLSPS; 150, 300 and 600 mg/kg） for 21 days, and compared with fluoxetine-treated and normal control groups. Enzyme-linked immunosorbent assay, radioimmunity and immunohistochemical staining showed that following treatment with YLSPS （300 and 600 mg/kg）, monoamine neurotransmitter levels, prefrontal cortex adenylate cyclase activity and hippocampal brain-derived neurotrophic factor expression were significantly elevated, and depression-like behaviors were improved. Open-field and novelty-suppressed feeding tests showed that mouse activity levels were increased and feeding latency was shortened following treatment. Our results indicate that YLSPS inhibits depression by upregulating monoamine neurotransmitters, prefrontal cortex adenylate cyclase activity and hippocampal brain-derived neurotrophic factor expression.

玉郎伞多糖对过氧化氢诱导大鼠原代肝细胞损伤的保护作用

目的研究玉郎伞多糖（YLS）对H2O2诱导大鼠原代肝细胞损伤的保护作用及其机理。方法采用IV型胶原酶灌流法分离大鼠肝细胞进行原代培养,用H2O2体外诱导肝细胞损伤,检测培养上清液中AST和ALT水平,测定肝细胞中MDA和GSH含量,MTT法检测细胞存活和增殖活性。结果YLS（0.125～1 mg/ml）可明显降低或恢复由H2O2升高的培养上清液中AST和ALT水平及肝细胞中MDA含量,还可提高H2O2降低的肝细胞存活率和GSH含量。结论提示YLS对大鼠原代培养肝细胞损伤有直接保护作用,该作用可能与其抗氧化作用有关。

玉郎伞多糖对肝星状细胞增殖和I型胶原合成的影响

目的研究玉郎伞多糖(YLS)对肝星状细胞(HSC)增殖和I型胶原合成的影响。方法选择肝星状细胞系作为体外研究对象,MTT法测定肝星状细胞的增殖,LDH法检测YLS对肝星状细胞的毒性作用,ELISA法测定I型胶原含量。结果YLS(12.5～100μg/mL)可明显降低培养上清液中I型胶原水平,抑制肝星状细胞的增殖,并呈剂量依赖性。结论YLS可能通过抑制HSC的增殖及I型胶原的合成等机制从而抑制肝纤维化的形成。

玉郎伞多糖诱导人肝肿瘤细胞株BEL7404细胞凋亡

目的研究玉郎伞多糖(YLSPS)对细胞凋亡的影响。方法用MTF法、Hochest荧光染色法及Annexin V-FITC/PI双染法等方法研究YLSPS含药血清对人肝癌细胞株BEL7404的增殖、细胞凋亡及细胞周期的影响。结果YLSPS各剂量组(0.75 g·kg^(-1)、1.50 g·kg^(-1)、3.00 g·kg^(-1))含药血清能明显抑制BEL7404细胞株的增殖,吸光值(D值)分别为0.26±s 0.04、0.22±0.06、0.182±0.026,与NS组(0.43±0.04)比较有显著差异(P<0.01)。YLSPS各剂量组凋亡指数分别为(8.1±1.5)%、(10.8±2.3)%、(11.6±2.9)%,明显高于NS组(P<0.01)。对细胞周期的影响表现为G_2/M期阻滞。结论玉郎伞多糖可诱导BEL7404细胞凋亡,其抗肿瘤活性可能与G_2/M期阻滞有关。

玉郎伞多糖对四氯化碳诱导大鼠原代肝细胞损伤的保护作用

目的：研究玉郎伞多糖（YLS）对大鼠原代肝细胞损伤的保护作用及其机制。方法：采用Ⅳ型胶原酶灌流法分离大鼠肝细胞进行原代培养，用四氯化碳（CCl4）体外诱导肝细胞损伤，检测培养上清液中天门冬氨酸转换酶（AST）和丙氨酸氨基转换酶（ALT）水平，测定肝细胞中丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）含量．MTT法检测细胞存活和增殖活性。结果：YLS（0.125～1.000g·L^-1）可明显降低由CCl4升高的肝细胞培养上清液中AST和ALT水平及肝细胞MDA含量，还可提高CCl4降低的肝细胞存活率和GSH含量。结论：提示YLS对大鼠原代培养肝细胞损伤有直接保护作用．该作用可能与其抗氧化作用有关。

玉郎伞多糖对环磷酰胺致小鼠肝损伤的保护作用

目的:观察玉郎伞多糖(YLSP)对环磷酰胺(CTX)致小鼠肝损伤的治疗作用并探讨其作用机制。方法:将小鼠随机分为正常对照组(NC),肝损伤模型组(CTX),阳性对照组(联苯双酯,BPDC),YLSP(玉郎伞多糖)高、中、低剂量组。除正常对照组外,其余各组小鼠每天腹腔注射CTX 40 mg·kg-1,共7 d,建立小鼠肝损伤模型。造模后连续灌胃7 d,观察YLSP对小鼠血清谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)活性,苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠肝脏组织病理学改变。结果:与模型组比较,YLSP各剂量组均能降低小鼠血清中ALT、AST活性及肝组织中MDA的含量;同时能增加肝组织中GSH含量及SOD和GSH-Px活性(P<0.05或P<0.01);HE染色结果显示YLSP能减轻CTX所致的肝组织变性、坏死程度,可减轻小鼠肝组织病理损伤程度。结论:YLSP对CTX所致小鼠肝损伤具有良好的保护作用。

玉郎伞多糖对小鼠免疫功能的调节作用

目的研究玉郎伞多糖(YLSPS)对小鼠免疫功能的影响。方法考察YLSPS对小鼠肉瘤S180的抑瘤率、荷瘤小鼠免疫器官指数、外周血白细胞数量的影响;MTT法检测YLSPS对荷瘤鼠、正常BALB/c及裸鼠脾淋巴细胞增殖的影响;ELISA法检测YLSPS对TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-2的影响。结果 YLSPS各剂量组(0.15,0.3,0.6 g.kg-1)治疗小鼠S180实体瘤的平均抑瘤率分别为39.7%,41.3%,52.6%;可提高荷S180小鼠的脾脏和胸腺指数,可明显升高CTX降低的免疫器官指数和外周血白细胞数量,增强ConA诱导的脾淋巴细胞转化,而对LPS诱导的脾淋巴细胞转化无明显影响;能促进免疫细胞分泌TNF-α、IL-6、IFN-γ和IL-2。结论 YLSPS具有明显的免疫调节活性,其作用的靶细胞可能是T淋巴细胞与巨噬细胞,而对B淋巴细胞没有影响。

玉郎伞多糖提取工艺的正交法优化

目的对玉郎伞提取工艺进行改进,利用正交法进一步优化提取玉郎伞多糖提取工艺。方法采用正交法优化玉郎伞的提取工艺;以苯酚-硫酸显色法于490 nm波长处测定葡萄糖含量吸光度,计算换算因子和玉郎伞多糖含量。结果葡萄糖的浓度在15～65μg/ml范围内其吸光度呈良好的线性关系(r=0.999 1);平均加样回收率为98.25%,RSD=1.72%(n=6);平均换算因子f=1.82,RSD=2.16%(n=6),玉郎伞多糖的平均提取率为3.78%,RSD=0.173 8%(n=9)。多糖的最佳提取条件为浸泡3 h、加10倍量水、提取3次每次3 h。结论优化提取方法后,玉郎伞多糖的提取率提高98%。苯酚-硫酸法可作为玉郎伞多糖定量分析。

玉郎伞多糖对体外BALB/C小鼠淋巴细胞和巨噬细胞分泌细胞因子的影响

目的:探讨玉郎伞多糖(YLSPS)体外对BALB/C小鼠淋巴细胞、巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、γ-干扰素(IFN-γ)及白细胞介素-2(IL-2)的影响及作用机制。方法:分离BALB/C小鼠腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞,分为空白对照组、LPS或ConA对照组和各浓度YLSPS组(50,100,200 mg·L^(-1)),MTT法检测脾淋巴细胞增殖,ELISA法检测细胞培养液中TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-2的浓度,RT-PCR法检测TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-2 mRNA的表达。结果:各浓度YLSPS组能剂量依赖性地促进BALB/C小鼠脾淋巴细胞增殖和TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-2的分泌,显著增强这些细胞因子的mRNA的表达(P<0.01或P<0.05)。结论:YLSPS体外能促进BALB/C小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞分泌IFN-γ、IL-2、TNF-α和IL-6,其作用机制可能与上调上述细胞因子mRNA表达有关。

玉郎伞多糖解酒作用及机制研究

目的研究玉郎伞多糖(YULANGSAN polysaccharides,YLSP)的解酒作用及其机制。方法采用小鼠白酒灌胃造模,在饮酒前后,分别给予一定剂量的YLSP、海王金樽片或生理盐水,观察醉酒率、醉酒潜伏期和醉酒时间,并测定小鼠肝脏中乙醇脱氢酶(ADH)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、超氧化物歧化酶(SOD)的活力以及丙二醛(MDA)的含量。结果在饮酒前给予YLSP,动物醉酒率降低,醉酒潜伏期延长,小鼠肝脏中ALT、AST的活性和MDA的含量降低,ADH和SOD的活性升高(P<0.05)。结论 YLSP可能通过提高ADH和SOD的活性,降低MDA的含量,减轻乙醇对肝脏的损害,有一定的防醉作用。

玉郎伞提取物对支气管平滑肌舒张作用的研究

研究玉郎伞水提物及从玉郎伞中提取纯化的三种活性成份—黄酮、皂苷、多糖对豚鼠离体气管条的舒张作用。实验制备新鲜豚鼠离体气管条,在克氏缓冲液中分别加入组胺或乙酰胆碱,使豚鼠气管螺旋条收缩达高峰后观察不同剂量的玉郎伞水提物及三种活性成份对乙酰胆碱或组胺致气管条收缩的影响。结果表明,玉郎伞水提物及皂苷、多糖能对抗乙酰胆碱或组胺对豚鼠离体气管条的收缩作用,使组胺及乙酰胆碱量效曲线右移。因此,玉郎伞水提物及皂苷、多糖有较强的支气管舒张作用。

玉郎伞多糖对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制初探

目的:研究玉郎伞(YLS)多糖对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法:W istar雄性大鼠灌胃YLS多糖高、中、低剂量(0.6,0.3,0.15 g.kg-1.d-1),连续7 d,末次给药60 m in后采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,缺血2 h再灌注24 h后对大鼠神经功能进行评分,并测定脑梗死体积、脑含水量、脑组织中白细胞介素-β(IL-β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。实验同时设尼莫地平(0.02 g.kg-1.d-1)阳性对照组和假手术组,每组10只。结果:与脑缺血再灌注模型组相比,YLS多糖能够改善大鼠的神经功能障碍,降低脑梗死体积和脑含水量,降低脑组织中的IL-1β和TNF-α含量。结论:玉郎伞多糖对大鼠急性脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与降低脑组织中的IL-1β和TNF-α含量有关。

玉郎伞提取物抗炎作用研究

研究玉郎伞水提物及从玉郎伞中提取纯化的三种活性成份—黄酮、皂苷、多糖的抗炎作用。以巴豆油致炎小鼠耳廓肿胀、角叉菜胶诱发小鼠足跖肿胀及小鼠棉球肉芽肿模型分别观察玉郎伞水提物及三种成份对小鼠耳廓肿胀、足跖肿胀及棉球肉芽肿形成的抑制作用。结果表明,玉郎伞水提物及三种成份可抑制小鼠耳廓炎症、足跖肿胀及棉球肉芽肿的形成。因此,玉郎伞水提物及三种活性成份具有较强的抗炎作用。

玉郎伞提取物平喘镇咳作用的研究

目的研究玉郎伞水提物及从玉郎伞中提取的3种活性成份-黄酮、皂苷、多糖的平喘镇咳作用。方法采用豚鼠喷雾致喘法、小鼠氨水引咳法,观察玉郎伞水提物及3种成份对豚鼠引喘潜伏期、小鼠咳嗽潜伏期的影响。结果玉郎伞水提物及3种成份能显著延长乙酰胆碱组胺混合刺激所致豚鼠哮喘的引喘潜伏期,减少氨水致小鼠的咳嗽次数并延长咳嗽潜伏期。结论玉郎伞水提物及3种活性成份具有较强的平喘镇咳作用。

玉郎伞多糖药理作用研究进展

目的：为玉郎伞多糖药理作用的深入研究提供参考.方法：通过参阅、检索2000 ～ 2013年国内外相关文献及资料,并进行整理、分析、归纳.结果：玉郎伞多糖具有保护肝脏、保护脑组织、抗老年痴呆、抗抑郁、抗肿瘤等多种药理作用.结论：玉郎伞多糖药理作用广泛,需要研究人员倍加关注并深入研究,进一步明确其药理作用及其作用机制.

玉郎伞多糖对Aβ_(25-35)所致PC12细胞损伤细胞内钙离子浓度的影响

目的观察Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡损伤模型胞内钙浓度的变化及YLSP的影响。方法采用Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡损伤模型,石杉碱甲作为对照药,给予YLSP预处理后,加入Flu-3/AM,用流式细胞仪(FCM)测定各组细胞的平均荧光强度。结果各组PC12细胞内钙离子含量存在显著性差异(F=14.051,P<0.01),其中,Aβ25-35作用PC12细胞后,PC12细胞内钙离子含量显著升高(P<0.01),经YLSP处理后,PC12细胞内钙离子含量较模型组细胞显著降低(P<0.01),其中,YLSP高剂量组的PC12细胞内钙离子含量显著低于石杉碱甲组(P<0.01)。结论 YLSP能对抗Aβ引起的细胞内钙离子浓度升高,防止钙超载的发生。

玉郎伞多糖对药物性肝损伤小鼠的保护作用

目的探讨玉郎伞多糖对布洛芬(IBU)致小鼠肝损伤的保护作用及可能机制。方法将昆明种小鼠随机分成6组,每组10只,即空白对照组(NC),模型对照组,玉郎伞多糖大(600 mg·kg-1)、中(300 mg·kg-1)、小(150 mg·kg-1)剂量组及联苯双酯组(联苯双酯,150 mg·kg-1)。玉郎伞多糖大、中、小剂量组和联苯双酯组灌胃给予相应药物,每日1次,连续14 d。末次给药后2 h,除NC组外,其他各组一次性灌胃IBU,200 mg·kg-1,制备小鼠肝损伤模型。造模后禁食不禁水20 h,测定天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(T-Bi L)、碱性磷酸酶(ALP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平;取肝组织行病理学检查,观察肝组织损伤程度。结果与模型对照组比较,玉郎伞多糖各剂量组血清ALP、AST、ALT活性降低,T-Bi L及IL-6、TNF-α水平降低;肝组织MDA水平降低,肝匀浆SOD及GSH-Px水平升高(P<0.05)。玉郎伞多糖可减轻肝细胞损伤程度。结论玉郎伞多糖对IBU所致肝损伤小鼠具有保护作用,其机制可能与抗氧自由基损伤、抗脂质过氧化损伤及减少炎症因子释放等有关。

玉郎伞多糖对环磷酰胺所致的免疫抑制小鼠免疫功能的影响

本文旨在研究玉郎伞多糖(YLSPS)对环磷酰胺所致的免疫抑制小鼠免疫功能的影响。选取60只体重相近的小鼠随机分为6组:空白对照组、环磷酰胺(CTX)模型组、阳性药左旋咪唑组(LMS)和YLSPS低、中、高剂量组。除空白对照组外,其它各组小鼠于给药的第1、3、5、7、9 d皮下注射CTX(30 mg/kg)造模。空白对照组用生理盐水(NS,0.1 mL/10 g)灌胃,LMS组用LMS[50 mg/(kg·d)]灌胃,YLSPS低、中、高剂量组用YLSP[150、300、600 mg/(kg·d)]灌胃,给药10 d后对小鼠胸腺和脾脏重量进行测定,检测乳酸脱氢酶(LDH)和酸性磷酸酶(ACP)的活性,并检测肝、脾巨噬细胞吞噬功能,观察二硝基氟苯(DNFB)诱导的迟发型超敏反应,并对小鼠负重游泳时间、常压缺氧、低温和高温环境下的存活时间以及对亚硝酸盐中毒性缺氧耐受性的影响进行检测。结果显示,与CTX模型组比较,YLSPS各剂量组能提高胸腺指数和脾脏指数;并能提高免疫抑制小鼠乳酸脱氢酶和酸性磷酸酶活性;肝、脾巨噬细胞廓清指数和吞噬指数明显提高;中、高剂量组的耳肿胀度明显提高,并能延长小鼠负重游泳时间、常压缺氧存活时间、耐低温存活时间、耐高温存活时间和小鼠对亚硝酸盐中毒性缺氧耐受性。研究结果表明,玉郎伞多糖对环磷酰胺致免疫低下小鼠的非特异性免疫和特异性免疫具有增强作用,并有明显的抗应激作用。

玉郎伞多糖对双氯芬酸致小鼠肝损伤的保护作用及相关机制研究

目的:探讨玉郎伞多糖(Yulangsan polysaccharide,YLSPS)对双氯芬酸(Diclofenac,DICF)致小鼠肝损伤的保护作用及相关机制研究。方法:把昆明种小鼠随机分为正常对照组(normal control,NC),DICF损伤模型组,YLSPS高(YLSPSH,600 mg/kg)、YLSPS中(YLSPSM,300 mg/kg)、YLSPS低(YLSPSL,150 mg/kg)剂量组和联苯双酯阳性对照组(dimethyl diphenyl bicarboxylate,200 mg/kg DDB),每组10只。YLSPS高、中、低剂量组和联苯双酯组灌胃给予相应药物,正常对照组和模型组同法给予相等容积的生理盐水,每日1次,连续14 d。末次给药后1 h,除正常组给予相等容量生理盐水腹腔注射外,其余各组小鼠同法给予DICF 50 mg/kg。造模后动物禁食20 h,取血及脏器检测肝功能指标碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及总胆红素(total bilirubin,TBIL),检测肝匀浆超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和过氧化氢酶(catalase,CAT)的水平及血清中白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平,HE(Hematoxylin eosin)染色法观察各组小鼠肝细胞损伤程度。结果:与模型对照组比较,YLSPS能降低血清ALT、AST、ALP活性和TBIL含量以及肝组织MDA含量(P<0.05),能降低血清TNF-α、IL-1β水平(P<0.05),提高肝组织SOD、GSH-Px以及CAT活性(P<0.05)。结论:YLSPS能够有效减轻肝细胞损伤程度,对DICF所致的小鼠肝损伤具有保护作用,机制可能与抗氧自由基及抑制脂质过氧化等作用有关。

玉郎伞多糖对肝星状细胞氧应激脂质过氧化作用的影响

目的研究玉郎伞多糖（YLS）对肝星状细胞（HSC）氧应激脂质过氧化作用的影响及机制。方法用H2O2诱导肝星状细胞脂质过氧化,测定细胞培养上清液中MDA,SOD水平,MTT法测定肝星状细胞的增殖,LDH法检测YLS对肝星状细胞的毒性作用,ELISA法测定I型胶原含量。结果YLS（25-200μg/ml）可明显降低培养上清液中MDA含量和I型胶原水平,抑制肝星状细胞的增殖,提高SOD活力,并呈剂量依赖性。结论YLS对肝星状细胞的增殖及I型胶原的合成具有抑制作用,该作用可能与其抗氧化作用有关。