运脾开胃方对小鼠下丘脑神经元细胞NPY水平的干预作用及机制研究

目的:观察运脾开胃方对小鼠下丘脑神经元细胞神经肽Y(NPY)的干预作用及其与Ghrelin受体(GHSR)的关系,研究运脾开胃方对中枢能量代谢途径的影响及机制。方法:培养永生化下丘脑神经元细胞,制备不同浓度的运脾开胃方水煎剂,运用CCK-8法筛选药物浓度;采用激光共聚焦检测细胞内Ca^(2+)水平,免疫荧光检测细胞内GHSR水平,Western Blot法检测NPY、Sirt 1、mTOR、AMPK蛋白表达水平;采用GHSR抑制剂[D-Lys3]-GHRP-6(DLS)阻断GHSR。结果:运脾开胃方能在一定时间范围内上调下丘脑神经元细胞内的Ca^(2+)相对荧光强度;能够上调下丘脑神经元细胞上的GHSR、Sirt 1、NPY、p-mTOR水平,下调p-AMPK水平(P<0.05),且这种效应会被GHSR受体抑制剂(D-Lys3)-GHRP-6阻断(P<0.01)。结论:运脾开胃方可通过激活GHSR提高下丘脑神经元细胞NPY表达水平,其机制可能与Sirt 1、mTOR、AMPK有关。