玉泉丸调控microRNA-320对糖尿病小鼠糖代谢机制研究

目的:探讨玉泉丸调控microRNA-320对糖尿病小鼠糖代谢的影响并阐明其作用机制。方法:生化分析仪检测各组小鼠血糖、甘油三酯、总胆固醇、血肌酐和尿素;RT-PCR检测microRNA-320、PI3K、Akt以及GLUT-1基因表达水平;Western Blot检测PI3K、Akt以及GLUT-1蛋白表达水平。结果:玉泉丸给药4周后,高剂量给药组可显著性降低糖尿病模型小鼠血糖、甘油三酯、总胆固醇、血肌酐和尿素水平;玉泉丸高剂量给药组可显著降低糖尿病模型小鼠肾脏指数;RT-PCR结果显示,玉泉丸可显著性下调microRNA-320基因表达,上调PI3K、Akt以及GLUT-1基因表达;Western Blot结果显示,玉泉丸可显著性上调PI3K、Akt以及GLUT-1蛋白表达。结论:玉泉丸可有效改善糖尿病模型小鼠糖代谢水平,其作用机制可能至少与下调肾脏组织中microRNA-320过表达、上调PI3K/Akt信号通路介导的GLUT-1过表达有关。

玉泉丸对盐酸二甲双胍在糖尿病大鼠体内药动学的影响

目的:研究玉泉丸对盐酸二甲双胍在糖尿病大鼠体内药动学过程的影响。方法:糖尿病模型大鼠灌胃给予玉泉丸7 d后,给予盐酸二甲双胍,给药后于不同时间采集血样,用高效液相色谱方法测定血药浓度,计算药动学参数。结果:二甲双胍组、联合用药组的药动学参数Cmax分别是18.95,21.76 mg.L-1;t1/2分别是1 069.8,1 767.4 min;CL/F分别是0.013,0.008 L.min-1.kg-1;AUC分别是10 042.1,10 712.2 mg.L-1.min-1。结论:盐酸二甲双胍在糖尿病大鼠体内药动学过程符合一室模型,玉泉丸对盐酸二甲双胍在糖尿病大鼠体内的药动学有显著影响。

玉泉丸对2型糖尿病促炎细胞因子干预的影响

目的观察玉泉丸对2型糖尿病患者促炎细胞因子干预的影响。方法90例2型糖尿病患者按2∶1随机分成治疗组和对照组,两组均在饮食控制、运动等基础治疗基础上加用拜糖苹治疗,治疗组另加服玉泉丸,每次6g,1日4次,疗程3个月,同时观察其C反应蛋白(Creactiveprotein,CRP)、肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactorα,TNFα)、白细胞介素6(interleukin6,IL6)等促炎细胞因子的变化。结果治疗组CRP、TNFα、IL6水平均较治疗前显著降低(P<0.01),两组间CRP、TNFα、IL6治疗前后差值比较差异亦有显著性,治疗组均明显高于对照组(P<0.01)。结论玉泉丸能降低已升高的促炎细胞因子水平。

玉泉丸对盐酸二甲双胍在大鼠体内药动学的影响

目的:研究玉泉丸(葛根、天花粉、地黄等)对盐酸二甲双胍在大鼠体内药动学过程的影响。方法:大鼠灌胃给予玉泉丸7d后,给予盐酸二甲双胍,给药后不同时间采集血样。用高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍血药浓度,绘制药-时曲线,用DAS1.0统计软件进行处理,获得药动学参数。结果:二甲双胍组、联合用药组的主要药动学参数分别为:Cmax=8.57μg/mL、t1/2=232.8min、Cl/F=0.092(L/min)/kg、AUC=3291.5mg/L*min;Cmax=11.60μg/mL、t1/2=523.9min、Cl/F=0.045(L/min)/kg、AUC=5019.7mg/L*min。结论:盐酸二甲双胍在大鼠体内药动学过程符合一室模型,玉泉丸对盐酸二甲双胍在大鼠体内的药动学有显著影响。

玉泉丸对大鼠肝细胞色素P450酶活性的影响

目的考察玉泉丸对大鼠肝细胞色素P450酶活性的影响。方法大鼠分别给予生理盐水、西咪替丁、苯巴比妥钠和玉泉丸灌胃7d后,腹腔注射非那西丁,不同时间点采集血样,用HPLC法测定血浆中探针药物非那西丁的浓度,用DAS软件估算其药代动力学参数。结果生理盐水组、西咪替丁组、苯巴比妥钠组和玉泉丸组探针药物t_(1/2)分别为(93.51±9.21)、(161.67±10.95)、(85.36±8.98)和(31.12±7.09)min。结论玉泉丸对大鼠肝细胞色素P450酶活性有一定的诱导作用。

HPLC法同时测定玉泉丸中5个成分的含量

目的 建立同时测定玉泉丸中5个成分（葛根素、甘草苷、异甘草苷、大豆苷元和甘草酸）的方法。方法 采用反相高效液相色谱-二极管阵列紫外检测器（RP-HPLC-DAD）,在UltimateTM XB-C18色谱柱（250×4.6mm,5μm）上,优化获得以乙腈（B）-水（0.2%甲酸）（A）为流动相的梯度洗脱条件;流速1.0mL/min;检测波长为254,280和340nm,柱温30℃。结果 5个活性成分的分离度良好,在各自测定的浓度范围内具有良好的线性关系（r≥0.997）,平均加样回收率为87.5%-104.3%。相对标准偏差≤3.3%（n=6）。结论 本方法操作简便、快速,具有较好的稳定性和重复性,可为玉泉丸质量控制提供定量分析方法。

玉泉丸对糖尿病肾病大鼠AMPK/FOXO3a通路及肾损伤的影响

目的:探究玉泉丸对糖尿病肾病(DN)大鼠肾损伤及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/叉头框转录因子3a(FoxO3a)通路的影响。方法:90只大鼠随机选取12只为空白组,其余大鼠采用高脂高糖膳食辅以链脲佐菌素腹腔注射构建DN模型。筛选模型成功大鼠60只分为DN组、二甲双胍组(0.045 g/kg),玉泉丸高、中、低剂量组(8.64、4.32、2.16 g/kg),每组12只。各给药组分别灌胃给予相应的药物,1次/d,连续给药8周。检测大鼠24 h尿微量白蛋白(U-mAlb)水平;血糖仪检测空腹血糖(FBG)水平;计算肾脏指数;并检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平和肾组织匀浆中活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)含量;HE染色观察肾脏组织形态变化;荧光显微镜观察肾脏组织凋亡情况;Western blot检测肾脏AMPK、FOXO3a及其磷酸化蛋白表达。结果:与空白组相比,DN组大鼠肾小管上皮细胞损伤严重,大鼠FBG、U-mAlb、血清Scr、BUN、肾脏指数、肾脏组织ROS、MDA、肾小管上皮细胞凋亡数量显著升高(P<0.05),体重、肾脏组织SOD、CAT、p-AMPK/AMPK、p-FOXO3a/FOXO3a蛋白表达显著降低(P<0.05);与DN组相比,二甲双胍组和玉泉丸高、中剂量组大鼠肾脏组织病理损伤明显减轻,FBG、U-mAlb、血清Scr、BUN水平、肾脏指数、肾脏组织ROS、MDA、肾小管上皮细胞凋亡数量明显下降(P<0.05),体重、肾脏组织SOD、CAT含量、p-AMPK/AMPK、p-FOXO3a/FOXO3a蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:玉泉丸可能通过激活AMPK/FOXO3a通路抑制DN大鼠氧化应激反应和肾脏细胞凋亡,减轻肾损伤。

玉泉丸对盐酸二甲双胍药效学的影响

目的研究玉泉丸对盐酸二甲双胍(MH)药效学的影响。方法采用腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,测定给药期间玉泉丸组、MH组、玉泉丸+MH组大鼠血糖值,给药结束后制备肾脏组织病理切片,观察肾脏组织变化情况。结果MH组、联合用药组给药后大鼠血糖值下降明显;玉泉丸组大鼠的血糖值下降缓慢;玉泉丸组、联合用药组肾脏损害减轻并趋于正常组水平,MH组肾脏损害程度与模型组无明显变化。结论玉泉丸与MH联合用药用于糖尿病的治疗时,玉泉丸在降低血糖方面无明显协同作用,而有一定的抑制作用,但能起到改善糖尿病并发症的作用,对肾脏组织的损害有一定的修复功能。

玉泉丸联合二甲双胍治疗2型糖尿病临床观察

目的:观察玉泉丸联合二甲双胍治疗2型糖尿病患者的临床疗效。方法:将100例符合标准的2型糖尿病患者随机分为两组,每组50例,两组患者无显著差异,具有可比性。两组都给予饮食和运动干预,在此基础上,对照组给予二甲双胍,治疗组给予玉泉丸联合二甲双胍进行治疗。治疗6周,观察治疗前后两组患者的2h OGTT、FPG、HbA1c,以及临床疗效。结果:治疗组和对照组患者的2h OGTT、FPG、HbA1c都显著降低,而治疗组的2hOGTT降低更显著;治疗组患者显效率显著高于对照组。结论:玉泉丸联合二甲双胍治疗2型糖尿病患者的疗效优于单纯使用二甲双胍治疗。

玉泉丸对糖代谢异常相关炎性细胞因子的影响

目的观察玉泉丸对糖代谢异常患者相关炎症细胞因子的影响。方法将144例糖代谢异常患者随机分成3组,A组加服玉泉丸,B组加服金芪降糖片,疗程均为3个月,观察患者C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)等炎症细胞因子治疗前后的变化。结果A、B 2组CRP、TNF-α、IL-6水平均较治疗前明显降低(P<0.01),3组间CRP、TNF-α、IL-6治疗前后差值比较有显著性差异(P<0.01)。结论玉泉丸能降低已升高的炎症细胞因子水平。

玉泉丸防治糖尿病慢性并发症的作用机理研究

目的:探讨玉泉丸对2型糖尿病的防治作用及可能的作用机理。方法:新生大鼠自出生第二天起颈部皮下注射L谷氨酸钠(MSG)5g.kg-1隔天一次,共三次,诱导肥胖大鼠胰岛素抵抗模型,8w后将其分为空白对照组,模型组,玉泉丸3.0、6.0、12.0g.kg-1组及阳性对照(罗格列酮)组,运用正糖钳技术测定胰岛素敏感性,ELISA法测定大鼠的胰岛素水平,考察玉泉丸对胰岛素抵抗的影响;运用高脂膳食加腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)20mg.kg-1复制Ⅱ型糖尿病大鼠模型,分为空白对照组,模型组,玉泉丸3.0、6.0、12.0g.kg-1组及阳性对照(罗格列酮)组,考察玉泉丸对血液脂质等指标的影响。结果:(1)与对照组相比,MSG模型大鼠血糖水平明显升高,Lee′s指数及胰岛素水平明显升高,葡萄糖输注速率(Glucose infusion rate,GIR)显著降低;与MSG模型大鼠相比,玉泉丸3.0g.kg-1可显著降低MSG模型大鼠血糖水平,玉泉丸各剂量组均可显著增加MSG模型大鼠GIR。(2)与对照组相比,STZ诱导的2型糖尿病大鼠血清TG、TC、HDL显著升高,经玉泉丸3.0g.kg-1治疗可显著降低血清TC以及LDL水平,而玉泉丸6.0g.kg-1可显著降低Ⅱ型糖尿病大鼠血清TC、HDL以及LDL水平。结论:玉泉丸一方面可通过改善胰岛素敏感性发挥其防治糖尿病慢性并发症的作用,另一方面也可通过调节血脂代谢改善糖尿病患者大血管病变以及微血管病变,为临床应用该药以改善糖尿病慢性并发症提供了一定的实验依据,其详细作用机理有待进一步研究。

玉泉丸用于控糖效果不佳2型糖尿病的疗效及对丙二醛和超敏C反应蛋白水平的影响

目的探讨玉泉丸联合常规治疗方案治疗控糖效果不佳的2型糖尿病(T2DM)的疗效及对丙二醛(MDA)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平的影响。方法选取控糖效果不佳的T2DM患者120例,随机分为试验组(服用玉泉丸联合甘精胰岛素、二甲双胍)与对照组(服用甘精胰岛素、二甲双胍),各60例,比较两组治疗效果、血糖指标、MDA及hs-CRP水平变化情况。结果试验组总有效率为88.33%,显著高于对照组的70.00%(P<0.05);两组患者空腹血糖(FBG)与糖化血红蛋白(HbA1C)水平较用药前均显著降低(P<0.05),且试验组降低幅度显著高于对照组(P<0.05);两组患者MDA及hs-CRP水平均较用药前明显降低(P<0.05),且试验组hs-CRP水平下降幅度显著高于对照组(P<0.05);试验组与对照组不良反应发生率分别为8.33%和16.67%,组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论对控糖效果不佳T2DM患者采用玉泉丸联合甘精胰岛素和二甲双胍治疗,可降低患者体内丙MDA及hs-CRP水平,有效控制并稳定患者病情,疗效较好,值得临床推广。

二冬胶囊对II型糖尿病患者的临床疗效观察

目的:评价二冬胶囊对糖尿病患者的疗效。方法:将80例确诊为糖尿病的患者随机分为治疗组和对照组,治疗组给二冬胶囊,对照组给玉泉丸治疗,共观察16周。比较两组患者的血糖、降糖疗效及不良反应情况。结果治疗组总有效率为85.0%,对照组为87.5%,两组比较,P>0.05;两组治疗后血糖水平均得到显著改善,与治疗前相比有显著性差异(P<0.05);但两组之间相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:二冬胶囊具有与玉泉丸相当的降糖效果,无明显不良反应。

玉泉丸对2型糖尿病大鼠糖脂代谢的影响

目的:建立2型糖尿病大鼠模型,研究玉泉丸对2型糖尿病大鼠糖脂代谢的影响。方法:雄性Wistar大鼠饲以高糖高脂饲料联合链脲佐菌素,建立2型糖尿病模型,连续给药8周,检测口服葡萄糖耐量(OGTT)、血清胰岛素(Ins)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-c)、低密度脂蛋白(LDL-c)。结果:玉泉丸4g·kg^(-1)、8g·kg^(-1)、12kg^(-1)均能不同程度地降低糖尿病大鼠TC、TG、LDL-c,升高Ins,HDL-c,改善OGTT。结论:玉泉丸可降低2型糖尿病大鼠血糖,改善血脂紊乱。

基于UPLC-Q-TOF-MSE的玉泉丸化学成分表征

目的:采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MSE)技术对玉泉丸的化学成分进行表征。方法:采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以甲醇-水(含体积比0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.3 mL/min;采用电喷雾离子源(ESI),正、负离子模式分别进行一级、二级质谱数据采集;采用数据库比对和文献报道对玉泉丸的化学成分进行表征。结果:通过一级MS、二级MS/MS高分辨质谱数据,结合数据库和文献报道对玉泉丸中的142个成分进行了初步表征。其中18个成分来源于葛根,17个成分来源于地黄,7个成分来源于天花粉,24个成分来源于麦冬,28个成分来源于五味子,48个成分来源于甘草。结论:该研究采用UPLC-Q-TOF-MSE技术结合数据处理软件MassLynx和UNIFI,对玉泉丸的化学成分进行了表征,为其进一步的药效物质基础研究奠定了基础。

玉泉丸对2型糖尿病肾病患者血清炎症因子、β2微球蛋白和VEGF、IGF-1的影响

目的:探究玉泉丸对2型糖尿病肾病患者血清炎症因子、β2微球蛋白和VEGF、IGF-1的影响。方法:将72例2型糖尿病肾病患者随机分为对照组(36例)和治疗组(36例)。治疗组和对照组均采用盐酸贝那普利治疗,对患者的饮食控制,督促锻炼以及进行糖尿病知识教育,治疗组在对照组的基础上,加用玉泉丸水煎剂,观察患者临床疗效,血清中炎症因子[C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素-1(IL-1),白细胞介素-6(IL-6)]以及血清β2微球蛋白和内皮生长因子VEGF、促生长因子IGF-1的变化。结果:治疗组总有效率为81.3%,明显高于对照组的68.8%(P<0.05);两组均可降低炎症因子CRP、IL-1、IL-6、血清β2微球蛋白和内皮生长因子VEGF、促生长因子IGF-1的含量,且治疗组显著低于对照组(P<0.05)。结论:采用玉泉丸治疗糖尿病肾病患者临床效果显著,可能机制为减轻炎症反应,降低血清β2微球蛋白和内皮生长因子VEGF、促生长因子IGF-1的水平。

玉泉丸汤剂联合坎地沙坦酯对糖尿病肾病患者肾功能、炎性因子和HOMA-IR的影响

目的讨论玉泉丸汤剂联合坎地沙坦酯对糖尿病肾病患者肾功能、炎性因子和HOMA-IR的影响。方法现将2017年6月—2018年7月收治的糖尿病肾病患者80例作为研究对象,按照患者的入院时间将其分为对照组和观察组各40例,对照组仅使用坎地沙坦酯治疗,观察组则联合使用玉泉丸汤剂和坎地沙坦酯,对2组患者的肾功能、炎性因子和HOMA-IR水平进行对比和分析。结果观察组患者的肾功能、炎性因子和HOMA-IR水平均明显优于对照组,经计算发现其具有统计学意义(P <0. 05)。结论玉泉丸汤剂联合坎地沙坦酯可有效改善糖尿病肾病患者的肾功能,减轻炎症反应和胰岛素抵抗,有利于患者的恢复,可在临床上应用。

玉泉丸对糖尿病肾病大鼠GSK⁃3β/Nrf2通路及YKL⁃40表达的影响

目的探讨玉泉丸对糖尿病肾病大鼠GSK⁃3β/Nrf2通路及肾小球内皮损伤标志物YKL⁃40表达的影响。方法采用高脂高糖饲料喂养结合一次性腹腔注射链脲佐菌素制备大鼠糖尿病肾病模型,大鼠随机分为正常组,模型组,玉泉丸低、中、高(4、8、12 g/kg)剂量组和二甲双胍(50 mg/kg)组(阳性对照),每组10只。全自动生化分析仪检测血糖、甘油三酯、总胆固醇、肌酐、尿素和24 h尿微量白蛋白水平,HE染色观察肾组织病理学变化并评分,ELISA检测血清YKL⁃40、TNF⁃α、IL⁃6、内皮素(ET)水平及肾组织SOD、CAT活性和MDA水平,免疫组织化学法检测肾组织YKL⁃40表达,Western blot检测肾组织GSK⁃3β、p⁃GSK⁃3β、Nrf2蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠肾组织病理学评分,血糖,甘油三酯、总胆固醇、肌酐、尿素、24 h尿微量白蛋白水平,YKL⁃40、TNF⁃α、IL⁃6、ET、MDA水平和YKL⁃40阳性表达指数升高(P<0.01),SOD、CAT活性,p⁃GSK⁃3β/GSK⁃3β、Nrf2蛋白表达降低(P<0.01);与模型组比较,玉泉丸低、中、高剂量组和二甲双胍组大鼠肾组织病理学评分、血糖、甘油三酯、总胆固醇、肌酐、尿素、24 h尿微量白蛋白、YKL⁃40、TNF⁃α、IL⁃6、ET、MDA水平和YKL⁃40阳性表达指数降低(P<0.01),SOD、CAT活性、p⁃GSK⁃3β/GSK⁃3β和Nrf2蛋白表达升高(P<0.01)。结论玉泉丸可降低糖尿病肾病大鼠肾小球内皮损伤标志物YKL⁃40表达,减轻氧化应激和炎症反应,可能与激活GSK⁃3β/Nrf2通路有关。

HPLC测定玉泉丸中葛根素的含量

目的：建立玉泉丸中葛根素含量的HPLC测定方法。方法：采用反相高效液相色谱法，使用Agilent HC—C18（250mm×4．6mm，5μm）色谱柱，以甲醇：水（30-70）作为流动相。流速1．0mL／min，检测波长250nm。结果：葛根素在40-160μg／mL范围内线性较好（r=0．9999），平均回收率为99．71％（RSD为0．35％）。结论：该方法快速、简便、可靠、准确度高、重复性好，处方中其他成分对测定亦无干扰，分离效果好，可用于玉泉丸中葛根素含量测定。

玉泉丸对早期糖尿病肾病肾损害指标的影响

目的观察玉泉丸对早期糖尿病肾病(DN)患者肾损害实验指标的影响。方法62例早期DN患者被随机分为试验组和对照组,在同等治疗的基础上,试验组加服玉泉丸,治疗前后观察尿微白蛋白排泄率(UAE)、尿α1-微球蛋白(α1-MG)、尿N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG酶)、血β2-微球蛋白(β2-MG)、内生肌酐清除率(Ccr)等肾损害指标,并观察空腹血糖(FBG)和糖化血红蛋白(GHb)水平,进行比较。结果治疗后试验组多项肾损害指标比治疗前明显改善(P<0.05或P<0.01),且优于同期对照组(P<0.01或P<0.05),但治疗后肾小球滤过率(Ccr)水平接近正常,变化不显著(P>0.05)。结论玉泉丸能改善早期DN患者的肾损害指标,从而提示玉泉丸能改善和延缓糖尿病肾脏病变的发展。