ZBP-89在肝癌组织中的表达及同缺氧诱导因子-2α的相关性分析

目的:探讨ZBP-89在肝癌组织中的表达、临床意义和缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)组织水平上的相关性。方法:采用免疫组化染色法检测120例肝癌及癌旁组织中ZBP-89、HIF-2α的表达,分析ZBP-89的表达同肝癌临床参数的关系及同HIF-2α的相关性。结果:ZBP-89蛋白在33.3%(40/120)的肝癌组织中和60.8%(73/120)的癌旁组织中呈高表达状态,其在肝癌组织中的表达明显低于其在癌旁组织中的表达(P<0.05)。ZBP-89的表达与肝癌的大小呈负相关。在肝癌组织中ZBP-89的表达和HIF-2α的表达呈正相关。结论:ZBP-89可能参与了肝癌的发生、发展过程,其表达可能受HIF-2α调控。

ZBP-89通过抑制八聚体结合转录因子4通路对肝癌细胞干性的影响

目的 观察ZBP-89对八聚体结合转录因子4(Oct4)信号通路和肝癌细胞干性的影响。方法 采用免疫组织化学染色法检测120例肝癌组织中ZBP-89、CD133和上皮细胞黏附因子(EpCAM)的表达,分析ZBP-89的表达水平与CD133、EpCAM的相关性。通过ZBP-89过表达的慢病毒载体和小干扰RNA(siRNA)调节Hep3B细胞中ZBP-89的表达,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测Oct4、CD133和EpCAM的表达。结果 在肝癌组织中ZBP-89的表达水平和CD133、EpCAM的表达呈负相关(χ2=45.000,P<0.05;χ2=26.020,P<0.05)。当Hep3B细胞中的ZBP-89表达升高时,Oct4、CD133和EpCAM的表达下降,其中mRNA水平分别为对照组的(0.47±0.03)、(0.63±0.01)、(0.53±0.02)倍(P均<0.05),当ZBP-89的表达下降时Oct4、CD133和EpCAM的表达升高,其中mRNA水平分别为对照组的(2.04±0.03)、(1.62±0.03)、(1.79±0.05)倍(P均<0.05)。Western blot与Real-time PCR结果相一致。结论 ZBP-89可通过抑制Oct4信号通路抑制肝癌细胞的干性。

ZBP-89与缺氧信号因子HIF-1α在肝癌细胞中的相关性研究

目的探讨ZBP-89在肝癌组织中的表达与缺氧诱导因子HIF-1α的相关性,为证实ZBP-89通过抑制HIF-1α/Notch1信号通路降低肝癌干细胞“干性”提供依据。方法选择2016年8月~2018年8月深圳市龙华区人民医院与深圳市人民医院肝胆胰外科120例原发性肝癌患者作为研究对象,收集病理标本,采用免疫组化染色方法来检测肝癌细胞及癌旁组织中ZBP-89、HIF-1α的相关表达,分析二者之间的相关性。结果ZBP-89在肝癌组织中呈现出低表达状态,而在癌旁组织中却呈现出高表达状态,分别为34.17%、62.50%;ZBP-89在癌旁组织中表达高于肝癌组织(P<0.05)。而在肝癌组织细胞中发现ZBP-89的表达与缺氧信号因子HIF-1α的表达呈负相关(P<0.05)。结论ZBP-89很可能为肝癌发生、发展过程中一个潜在的抑癌基因,通过抑制HIF-1α/Notch1通路进而抑制肝癌干细胞增殖、增强肝癌干细胞对化疗药物的敏感性,可能是其发挥抑癌效应的重要机制。

ZBP-89通过HIF-1α/Notch1通路对肝癌干细胞干性的调控作用

目的探究ZBP-89(Zinc-binding protein-89)通过HIF-1α/Notch1通路对肝癌干细胞干性的调控作用。方法构建ZBP-89过表达慢病毒载体(Len-ZBP-89)并进行慢病毒包装,微球体培养法富集肝癌干细胞,流式细胞术检测细胞中EpCAM、CD133的表达,CoCl 2(HIF-1α激活剂)处理肝癌干细胞,RT-PCR检测细胞中ZBP-89、 HIF-1α和Notch1mRNA表达,Westernblot检测细胞中ZBP-89、 HIF-1α、 Notch1、 CD44、CD133和EpCAM蛋白表达,Transwell检测细胞迁移和侵袭能力,光学显微镜观察特征性肿瘤球体的形成。结果 Len-ZBP-89慢病毒包装成功,病毒滴度为1.32×10^(9) TU/mL;肝癌细胞PLC/PRF/5中ZBP-89 mRNA和蛋白表达水平下调,HIF-1α和Notch1 mRNA和蛋白表达水平上调;PLC/PRF/5细胞成功富集肝癌干细胞PLC/PRF/5.C,PLC/PRF/5.C中EpCAM、CD133的表达水平均上调;Len-ZBP-89可下调PLC/PRF/5.C细胞中HIF-1α、Notch1、CD133、CD44和EpCAM的蛋白表达,下调细胞迁移、侵袭能力和特征性肿瘤球体克隆数量;CoCl 2(HIF-1α激活剂)可上调PLC/PRF/5.C细胞中HIF-1α、Notch1、CD133、CD44和EpCAM的蛋白表达,上调细胞迁移、侵袭能力和特征性肿瘤球体克隆数量(P<0.05);CoCl 2处理可逆转Len-ZBP-89对PLC/PRF/5.C干性的抑制作用。结论过表达ZBP-89通过抑制HIF-1α/Notch1通路抑制肝癌干细胞干性。

新型GATA-1相互作用蛋白质及其在造血调控中的作用

GATA-1在造血干细胞的谱系分化中起关键的调控作用，为红系和巨核系发育成熟必不可少，对肥大细胞系及嗜酸性粒细胞系发育也有一定的调控作用。GATA-1的转录活性受到多层次的精确调节，其调控不同谱系分化的功能大多通过与不同的蛋白质相互作用来实施。近年来，多种新的GTAT-1相互作用蛋白质被确定，特别是GATA-1复合体的研究，揭示了GATA-1转录活性及其调控造血分化的新机制。