多靶点抗肿瘤新药:ZD6474

ZD6474(ZactimaTM、Vandetanib、范得它尼)是一种口服、小分子VEGFR-2(KDR)、EGFR和RET酪氨酸激酶多靶点抑制剂。2006年2月FDA批准ZD6474为治疗甲状腺癌的快通道药物。临床前和临床研究表明ZD6474对甲状腺癌和非小细胞肺癌有较好疗效,且不良反应较少。本文对ZD6474的临床前和临床研究进展做一综述。

ZD6474联合阿霉素对乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用

目的探讨ZD6474联合阿霉素对乳腺癌细胞MCF-7的抑制及杀伤作用。方法用MTT法检测ZD6474、阿霉素单药及其联合对MCF-7细胞的增殖抑制程度,同时采用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况。结果ZD6474单药及阿霉素单药对MCF-7细胞均有明显抑制作用,两药联合具有协同作用(P<0.05)。ZD6474主要使细胞阻滞于G0/G1期,阿霉素则使细胞阻滞于S期。两药联用后同时阻滞于G0/G1及S期。联合组凋亡率明显高于单药组(P<0.05),差异有统计学意义。结论ZD6474和阿霉素对乳腺癌MCF-7细胞有增殖抑制及促凋亡作用,两药联合表现为协同或相加作用。

ZD6474对肝癌HepG2细胞的抑制作用

目的探讨ZD6474对肝癌细胞HepG2的杀伤作用及作用机制。方法甲基噻唑基四唑实验(MTT法)测定ZD6474对HepG2细胞的增殖抑制;通过流式细胞仪检测细胞周期变化。结果 ZD6474对HepG2细胞有明显的增殖抑制作用(P<0.001)。ZD6474导致肝癌细胞发生G_0/G_1期阻滞。结论 ZD6474能显著抑制肝癌HepG2细胞的体外增殖,可能与导致肝癌细胞G_0/G_1期阻滞相关。

双靶向性小分子酪氨酸激酶抑制剂ZD6474对鼻咽癌细胞株CNE2的放射增敏作用

目的研究ZD6474对鼻咽癌细胞株CNE2放射增敏作用。方法采用MTT法测定ZD6474的半数抑制浓度（50％inhibition concentration，IC50），克隆形成实验计算细胞存活率，拟合生存曲线计算放射生物学参数，流式细胞仪检测ZD6474联合放疗的凋亡率及细胞周期分布。结果单纯用药组，CNE2细胞的存活率随ZD6474浓度的增加而降低，其IC50约为2．15μmol·L^-1。ZD6474作用CNE2细胞24h后均见到放射增敏作用，增敏比为1．535±0．134。ZD6474或照射均可增加凋亡率，减少S期细胞比例及增加G2／M期细胞比例（P〈0．01）。结论ZD6474联合照射应用可提高cNE2细胞的放射敏感性并阻碍细胞增殖、促进凋亡和干扰细胞周期分布。ZD6474有望成为EGFR高表达CNE2细胞的放射增敏剂。

Prolonged exposure of colon cancer cells to the epidermal growth factor receptor inhibitor gefitinib(Iressa^(TM))and to the antiangiogenic agent ZD6474:Cytotoxic and biomolecular effects

瞄准：为了分析 HT-29 和 LoVo 结肠癌房间的延长在试管内暴露的生物效果，排队到 gefitinib (Iressa ) ，表皮的生长的一个禁止者因素受体(EGFR ) 活动，和 ZD6474， KDR 和 EGFR 活动的一个禁止者。方法：房间用也为多达 2 wk 与每药被对待一连续或一断断续续(药暴露的 4 d 每个星期由冲刷的 3 d 列在后面) 时间表。结果：在两种细胞类型，延长了暴露(多达 14 d ) 到 gefitinib 或 ZD6474 生产了治疗时间表坚持、独立的细胞生长的类似的抑制。房间生长上的效果与 p-EGFR 或 p-KDR 表示的显著抑制被联系。有 gefitinib 或 ZD6474 的治疗也禁止了 EGFR 下游的信号分子， p-Erk1/2 和 p-Akt 的表达式，尽管这些效果的大小在治疗和房间线之间变化了。而且，抵抗相关的蛋白质 ABCG2 被显示出显著地在连续暴露的 14 d 以后增加到二药的药的表示。结论：我们断定到 gefitinib 和 ZD6474 的结肠癌房间的长期的暴露不修改他们的细胞毒素的效果，但是它可能在敏感上有效果到古典细胞毒素的药。

ZD6474对膀胱癌裸小鼠皮下移植瘤的影响

目的:探讨ZD6474对膀胱癌裸鼠皮下移植瘤细胞凋亡的影响。方法:30只BALB/c裸鼠建立膀胱癌原位移植瘤动物模型,随机分为5组(每组6只):实验组A[0.5(mg/(kg.d)];实验组B(3(mg/kg.d)];实验组C[7(mg/(kg.d)];实验组D[10 mg/(kg.d)],分别给予ZD6474,于接种后第7、14、21、28、35天测量动物体重及MRI检查,测量肿瘤细胞直径。结果:7 mg/(kg.d)组在给予ZD6474第21天时,肿瘤直径为(1.20±0.08)mm,与3 mg/(kg.d)组[肿瘤直径(2.80±0.15)mm]比较,差异有统计学意义;10 mg/(kg.d)组与7 mg/(kg.d)相比,肿瘤直径为(1.20±0.09)mm,差异无统计学意义,但是有2例死亡,尸体解剖示肝坏死。结论:荷人膀胱癌原位移植瘤动物模型的实验,提示其对膀胱癌具有抗肿瘤作用。

ZD6474对肝癌细胞和乙肝相关肝癌细胞增殖的影响

目的:探讨ZD6474对肝癌细胞株HepG2和乙肝相关肝癌细胞株HepG2.2.15细胞增殖的影响。方法:用WST方法检测ZD6474对细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞仪检测ZD6474对细胞周期及凋亡的影响。结果:ZD6474可以显著抑制HepG2和HepG2.2.15细胞增殖,6.4μmol/L的ZD6474可以抑制(46.86±10.32)%的HepG2和(41.24±7.35)%的HepG2.2.15细胞增殖,其抑制增殖作用随剂量增加而增强(P<0.05)。ZD6474诱导细胞产生G0/G1期阻滞,6μmol/L的ZD6474可诱导71.90%的HepG2和69.90%的HepG2.2.15细胞阻滞于G0/G1期。结论:ZD6474可以抑制HepG2和HepG2.2.15细胞增殖,其机制可能与诱导细胞周期阻滞有关。

抑制Src激酶对慢性粒细胞白血病细胞的抑制作用

目的探讨抑制Src激酶对K562及其衍生的imatinib耐药K562/G细胞体外和体内抗肿瘤作用及分子机制。方法先在体外检测ZD6474直接抑制Src激酶对细胞凋亡的影响;然后建立裸鼠皮下移植瘤模型,利用灌胃给药的方式给予ZD6474,剂量为25～100 mg/(kg.d),连续给药18 d,观察移植瘤生长情况,并用免疫组化方法分析肿瘤组织的增殖和Src激酶表达情况。结果 ZD6474在体外呈剂量依赖性直接抑制Src激酶活性;特异性抑制Src可以诱导K562和K562/G细胞凋亡,并上调Bax/Bcl-2的比例,但不影响STAT3的活性。口服给予ZD6474可以显著抑制K562、K562/G裸鼠移植瘤的生长(P<0.05);并抑制肿瘤组织中增殖细胞核抗原和Src激酶的表达。结论 ZD6474直接抑制Src激酶,从而抑制imatinib耐药的K562/G和亲本K562细胞增殖,诱导凋亡,并以剂量依赖方式显著抑制K562、K562/G裸鼠移植瘤生长,其机制与ZD6474显著抑制Src激酶活性有关。