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Development and evaluation of immunoassay for zeranol in bovine urine 被引量:2
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作者 LIU Yuan ZHANG Cun-zhen +5 位作者 YU Xiang-yang ZHANG Zhi-yong ZHANG Xiao LIU Rong-rong LIU Xian-jin GONG Zhen-ming 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2007年第12期900-905,共6页
A high affinity polyclonal antibody-based enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was developed for the quantification of zeranol in bovine urine. On the basis of urine matrix studies, the optimized dilution facto... A high affinity polyclonal antibody-based enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was developed for the quantification of zeranol in bovine urine. On the basis of urine matrix studies, the optimized dilution factors producing insignificant matrix interference were selected as 1:5 in pretreatment. In the improved ELISA, the linear response range was between 0.02 and 1 μg/ml, and the detection limit was 0.02 μg/ml for the assay. The overall recoveries and the coefficients of variation (CVs) were in the range of 82%-127% and 3.5%-8.8%, respectively. Thirty-six bovine urine samples spiked with zeranol (ranging from 0.2 to 10 μg/ml) were detected by the ELISA and liquid chromatography (LC) method, and good correlations were obtained between the two methods (R^2=0.9643). We conclude that this improved ELISA is suitable tool for a mass zeranol screening and can be an altemative for the conventional LC method for zeranol in bovine urine. 展开更多
关键词 zeranol Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) Bovine urine
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Electrochemical Detection of Zeranol and Zearalenone Metabolic Analogs in Meats and Grains by Screen-Plated Carbon-Plated Disposable Electrodes
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作者 Ming-Kun Hsieh Huiru Chen +2 位作者 Jen-Lin Chang Wei-Shao She Chi-Chung Chou 《Food and Nutrition Sciences》 2013年第7期31-38,共8页
Zeranol (Z) is an estrogenic growth-promoting agent synthesized from mycotoxin zearalenone (Zen). Inadvertent consumption of Z and its structural analogs from meat or grain products remain a food safety concern. An ec... Zeranol (Z) is an estrogenic growth-promoting agent synthesized from mycotoxin zearalenone (Zen). Inadvertent consumption of Z and its structural analogs from meat or grain products remain a food safety concern. An economic and rapid high performance liquid chromatography method with electrochemical detection using disposable screen-printed carbon electrode is developed for determination of Z, Zen and 3 major metabolic analogs α-zearalenol (α-Ze), β-zearalenol (β-Ze), and β-zearalanol (β-Za). The electrochemical method was validated for application in food matrices including beef, pork, feed and cereal after optimized liquid and/or solid-phase extraction procedures. All 5 Z analogs were separated in 10 minutes with the limits of detection ranging from 15 ng/ml for α-Ze and 25 ng/ml for Z and Zen;the limit of quantitation ranged from 40 50 ng/ml. The recoveries were all above 75% regardless of matrix types and extraction procedures. The intra and inter day variations were both less than 6% at the nominal concentration of 1 μg/ml and less than 13% at 100 ng/ml level. Chromatographically time-matched peaks of Z, α-Ze and β-Za were observed in moldy feed, cereal and rice with high productivity, indicating possible grain-specific Zs exposure for animals and human. Proper exercise of preservative procedures for grain and grain products to prevent it from mold production is imperative. The simplicity and reproducibility of this method affords quick and reliable quantitation of multiple types of Z analogs in food products and can offer semi-confirmative information comparable to UV detection and supplementary to ELISA screening. 展开更多
关键词 zeranol Moldy Grain Electrochemical Carbon Electrode
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免疫亲和注射器微萃取-高效液相色谱串联质谱法测定牛奶中玉米赤霉醇类化合物
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作者 张欣达 李娜 +5 位作者 赵世瑾 郑妍 杨琳燕 张伟 李留安 李存 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期29-34,共6页
将偶联玉米赤霉醇单克隆抗体的二氧化硅作为注射器微萃取的选择性吸附剂,建立了检测牛奶中6种玉米赤霉醇类化合物(ZERs)的免疫亲和注射器微萃取-高效液相色谱串联质谱法(IA-MEPS-LC-MS/MS)。将牛奶离心后,取中间夹层,使用免疫亲和注射... 将偶联玉米赤霉醇单克隆抗体的二氧化硅作为注射器微萃取的选择性吸附剂,建立了检测牛奶中6种玉米赤霉醇类化合物(ZERs)的免疫亲和注射器微萃取-高效液相色谱串联质谱法(IA-MEPS-LC-MS/MS)。将牛奶离心后,取中间夹层,使用免疫亲和注射器微萃取,超纯水洗涤,甲醇洗脱,洗脱液浓缩,流动相复溶后进行LC-MS/MS分析,采用C18色谱柱分离,水-乙腈为流动相梯度洗脱。使用基质匹配外标法定量,在工作液质量浓度0.1~100.0 ng/mL时6种ZERs线性良好,相关系数在0.9943~0.9962;在ZERs添加水平为1 ng/g时,平均回收率在50.40%~68.34%,日内RSD在4.87%~17.64%,日间RSD在7.04%~18.75%,本方法的检测限(LOD)为0.05 ng/g,定量限(LOQ)为0.2 ng/g。 展开更多
关键词 玉米赤霉醇类化合物 免疫亲和注射器微萃取 牛奶 残留检测
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LC-MS法分析鸡肝中的玉米赤霉醇 被引量:1
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作者 曹莹 黄士新 +2 位作者 王蓓 孙亚云 王迪楼 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第z1期249-251,共3页
  玉米赤霉醇(Zeranol)是一种非甾体类激素,具有促进家畜蛋白质合成和增重的作用.由于其在动物组织中残留,目前在欧盟被禁用.2002年4月我国农业部第193号公告和2002年11月农业部、国家药品监督管理局第227号公告中规定禁止使用玉米赤...   玉米赤霉醇(Zeranol)是一种非甾体类激素,具有促进家畜蛋白质合成和增重的作用.由于其在动物组织中残留,目前在欧盟被禁用.2002年4月我国农业部第193号公告和2002年11月农业部、国家药品监督管理局第227号公告中规定禁止使用玉米赤霉醇,但由于玉米赤霉醇作为畜禽增重剂效果好、经济回报高,仍有一些不法饲养业主受利益驱使而违法使用.…… 展开更多
关键词 zeranol Chicken liver LC - MS
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免疫亲和柱净化-高效液相色谱法同时检测鸡蛋中6种玉米赤霉醇类化合物残留量 被引量:27
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作者 游丽娜 李贤良 +5 位作者 郗存显 唐柏彬 王国民 张雷 袁中珍 赵华 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1021-1025,共5页
建立了鸡蛋中6种玉米赤霉醇类化合物(α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮和玉米赤霉烯酮)残留量的免疫亲和柱净化-高效液相色谱检测方法。样品酶解后用叔丁基甲醚提取、氢氧化钠反萃取,经免... 建立了鸡蛋中6种玉米赤霉醇类化合物(α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮和玉米赤霉烯酮)残留量的免疫亲和柱净化-高效液相色谱检测方法。样品酶解后用叔丁基甲醚提取、氢氧化钠反萃取,经免疫亲和柱富集和净化后,采用高效液相色谱-紫外检测器进行测定。色谱柱:Agilent EclipseXDB-C18(150 mm×4.6 mm,3.5μm);流动相:甲醇-乙腈-水(50∶15∶35,v/v/v);流速:1.0 mL/min;检测波长:270nm。结果表明,6种目标物在0.01~0.2 mg/L范围内线性关系良好,相关系数(r)≥0.999 8,检出限(LOD,S/N≥3)为1.0μg/kg,平均回收率为73.2%~95.7%,相对标准偏差小于8%。该方法灵敏度高、重现性好,适用于鸡蛋样品中痕量玉米赤霉醇类药物残留的测定。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 免疫亲和柱 玉米赤霉醇 玉米赤霉烯醇 玉米赤霉酮 玉米赤霉烯酮 鸡蛋
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牛肉组织中玉米赤霉醇及相关物残留的气相色谱-质谱法测定 被引量:18
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作者 张伟 王建平 +1 位作者 沈建忠 李晓薇 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期513-517,共5页
建立了能够同时检测牛肉组织中玉米赤霉醇(又名α-玉米赤霉醇)及3种相关物(β-玉米赤霉醇、玉米赤霉酮和α-玉米赤霉烯醇)残留的气相色谱-质谱联用法。样品均质后,用甲醇提取样品中的待测物,浓缩,用水稀释后,乙酸乙酯萃取,浓缩。用... 建立了能够同时检测牛肉组织中玉米赤霉醇(又名α-玉米赤霉醇)及3种相关物(β-玉米赤霉醇、玉米赤霉酮和α-玉米赤霉烯醇)残留的气相色谱-质谱联用法。样品均质后,用甲醇提取样品中的待测物,浓缩,用水稀释后,乙酸乙酯萃取,浓缩。用氢氧化钾溶液溶解,正己烷去脂,乙醚萃取,氨基固相萃取柱净化,衍生化后,用气相色谱-质谱联用仪检测,外标法定量。玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、玉米赤霉酮和α-玉米赤霉烯醇线性范围均为0.5-10.0 ng/mL,检测限均为1.0 ng/g,在添加5.0 ng/g时,回收率为71.5%-81.4%,变异系数为1.4%-5.0%。 展开更多
关键词 玉米赤霉醇 牛肉 残留 GC/MS
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复合免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱法测定动物源食品中6种黄曲霉毒素和6种玉米赤霉醇类真菌毒素残留量 被引量:35
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作者 孙雪 郗存显 +3 位作者 唐柏彬 王国民 陈冬东 赵华 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第6期970-978,共9页
建立了动物源食品(猪肉、鱼肉、猪肝)中6种黄曲霉毒素(AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1和AFM2)和6种玉米赤霉醇类真菌毒素(α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮和玉米赤霉烯酮)残留量的复... 建立了动物源食品(猪肉、鱼肉、猪肝)中6种黄曲霉毒素(AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1和AFM2)和6种玉米赤霉醇类真菌毒素(α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮和玉米赤霉烯酮)残留量的复合免疫亲和柱净化-高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法。样品经β-葡萄糖苷酸/硫酸酯复合酶酶解后,用甲醇-乙腈(20∶80,V/V)提取,提取液经玻璃纤维滤纸过滤,滤液用PBS溶液稀释,复合免疫亲和柱富集和净化后,采用HPLC-MS/MS法分析。12种目标分析物中AFB2和AFG2的线性范围为0.03~6.0μg/L,其余目标分析物的线性范围为0.05~20μg/L,线性相关系数均大于0.999,检出限在0.01~0.03μg/kg范围内,定量限在0.04~0.09μg/kg范围内。分别以0.5,1.0和5.0μg/kg添加浓度水平进行方法学验证,平均回收率为73.6%~98.4%,相对标准偏差(RSD)为1.9%~11.2%。本方法简便、灵敏,能够满足动物源食品中痕量黄曲霉毒素和玉米赤霉醇类真菌毒素残留的测定要求。 展开更多
关键词 动物源食品 复合免疫亲和柱 黄曲霉毒素 玉米赤霉醇类真菌毒素 高效液相色谱-串联质谱
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玉米赤霉醇人工抗原合成及其多克隆抗体的制备 被引量:17
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作者 刘媛 刘贤进 +4 位作者 余向阳 张存政 陈育如 龚振明 周全 《分析科学学报》 CAS CSCD 2006年第1期1-4,共4页
对玉米赤霉醇(ZER)16-OH进行改造,设计合成了模拟玉米赤霉醇特征结构的半抗原——ZER-16-羧丙基丁醚。用混合酸酐法将其与载体蛋白BSA连接,用于免疫新西兰大白兔,制备的抗血清效价达1:102400。基于活性酯法合成的包被抗原建立了CI... 对玉米赤霉醇(ZER)16-OH进行改造,设计合成了模拟玉米赤霉醇特征结构的半抗原——ZER-16-羧丙基丁醚。用混合酸酐法将其与载体蛋白BSA连接,用于免疫新西兰大白兔,制备的抗血清效价达1:102400。基于活性酯法合成的包被抗原建立了CI-ELISA检测方法,该法对玉米赤霉醇检测的线性范围为18.39~1744.70ng/mL,检出限为8.61ng/mL。 展开更多
关键词 玉米赤霉醇 人工抗原 多克隆抗体 酶联免疫吸附测定(ELISA)
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高效液相色谱-串联质谱法同时测定动物肝脏中玉米赤霉醇及其类似物残留量 被引量:12
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作者 彭涛 李晓娟 +5 位作者 陈冬东 代汉慧 于静 朱明达 马微 唐英章 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第4期469-474,共6页
采用高效液相色谱-串联质谱方法(HPLC-MS/MS)同时测定了动物肝脏中6种玉米赤霉醇及其类似物的残留量。酶解后的样品采用乙醚提取,经液-液分配(LLP)和HLB固相萃取(SPE)柱净化后,采用HPLC-MS/MS电喷雾电离(ESI-),多反应监测(MRM)模式检测... 采用高效液相色谱-串联质谱方法(HPLC-MS/MS)同时测定了动物肝脏中6种玉米赤霉醇及其类似物的残留量。酶解后的样品采用乙醚提取,经液-液分配(LLP)和HLB固相萃取(SPE)柱净化后,采用HPLC-MS/MS电喷雾电离(ESI-),多反应监测(MRM)模式检测,基质匹配外标曲线定量。按照欧盟法规2002/657/EC的要求进行验证。在添加浓度1~4μg/kg范围内,方法回收率在70%~90%之间;相对标准偏差小于20%。6种玉米赤霉醇及其类似物的判断限(CCα)在0.17~0.31μg/kg之间,检测能力(CCβ)在0.26~0.42μg/kg之间。本方法对其它动物源食品中玉米赤霉醇及其类似物残留的检测具有适用性。 展开更多
关键词 高效液相色谱-串联质谱 动物肝脏 玉米赤霉醇 类似物
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酶联免疫法检测动物源性产品中玉米赤霉醇残留 被引量:12
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作者 贺艳 郑文杰 +1 位作者 赵卫东 刘煊 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2009年第6期124-127,共4页
运用酶联免疫法(ELISA),建立检测动物源性产品中玉米赤霉醇残留的初筛检测方法。通过对动物源性产品中玉米赤霉醇残留量的检测表明,该方法的最低检测限为1.0μg/kg,最低检测限附近的添加回收率在72.4%~98.6%之间。
关键词 酶联免疫法 玉米赤霉醇 残留 检测
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高效液相色谱法测定鸡肝中玉米赤霉醇的残留量 被引量:22
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作者 方晓明 陈家华 唐毅锋 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期158-161,共4页
建立了高效液相色谱测定鸡肝中玉米赤霉醇的方法。样品经β 葡糖苷酸酶水解、乙醚提取、氢氧化钠抽提、C18小柱净化后,用ZorbaxSB Phenyl柱(250mm×4 6mmi.d.,5μm)分离,以乙腈 0 3%三氟乙酸水溶液(体积比为40∶60)作流动相,流速为0... 建立了高效液相色谱测定鸡肝中玉米赤霉醇的方法。样品经β 葡糖苷酸酶水解、乙醚提取、氢氧化钠抽提、C18小柱净化后,用ZorbaxSB Phenyl柱(250mm×4 6mmi.d.,5μm)分离,以乙腈 0 3%三氟乙酸水溶液(体积比为40∶60)作流动相,流速为0 80mL/min,于262nm波长处检测。结果表明,样品的加标平均回收率为72 0%~80 4%,相对标准偏差为8 3%~13 9%,定量测定低限(LOQ)为5μg/kg。方法已应用于实际样品的测定。另外,用高效液相色谱 质谱/质谱法对分离出的组分予以定性确证。 展开更多
关键词 残留量 高效液相色谱法 紫外检测 串联质谱 玉米赤霉醇 鸡肝
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免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱法同时测定猪肉中6种玉米赤霉醇类化合物残留量 被引量:9
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作者 李贤良 游丽娜 +4 位作者 郗存显 唐柏彬 王国民 张雷 赵华 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1147-1152,共6页
建立了猪肉中6种玉米赤霉醇类化合物残留量的免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱(IAC-LC-MS/MS)分析方法。酶解后的样品用乙醚提取,提取液浓缩后用三氯甲烷溶解,NaOH溶液反萃取,经免疫亲和柱富集和净化后,采用LC-MS/MS进行测定,外标法定... 建立了猪肉中6种玉米赤霉醇类化合物残留量的免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱(IAC-LC-MS/MS)分析方法。酶解后的样品用乙醚提取,提取液浓缩后用三氯甲烷溶解,NaOH溶液反萃取,经免疫亲和柱富集和净化后,采用LC-MS/MS进行测定,外标法定量。在Shimadzu Shim-pack VP-ODS C18反相柱上分离,梯度洗脱,流动相为乙腈和2 mmol/L乙酸铵溶液;质谱采集为电喷雾负离子多反应监测模式。6种目标物的线性范围为0.5~200μg/L,相关系数(R)大于0.999,定量限(LOQ)在0.05~0.63μg/kg之间;添加浓度在1.0~5.0μg/kg范围内,方法回收率为71.3%~93.7%,相对标准偏差在3.7%~9.7%之间。该方法灵敏度高、重现性好,适用于猪肉样品中痕量玉米赤霉醇类药物残留的测定。 展开更多
关键词 玉米赤霉醇类化合物 液相色谱-串联质谱 免疫亲和柱 猪肉
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玉米赤霉醇单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:7
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作者 王鹤佳 曹振 +1 位作者 沈建忠 史为民 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第10期3-5,共3页
将玉米赤霉醇 (α- zearalanol,ZER)琥珀酰化得到 ZER- 7-半琥珀酸酯 ,再利用混合酸酐法与牛血清白蛋白 (BSA)偶联得到免疫原 ,以此免疫原免疫 BAL B/c小鼠 ,利用杂交瘤技术得到两株稳定分泌 ZER单克隆抗体的杂交瘤细胞株 1C1 2 和 9B4 ... 将玉米赤霉醇 (α- zearalanol,ZER)琥珀酰化得到 ZER- 7-半琥珀酸酯 ,再利用混合酸酐法与牛血清白蛋白 (BSA)偶联得到免疫原 ,以此免疫原免疫 BAL B/c小鼠 ,利用杂交瘤技术得到两株稳定分泌 ZER单克隆抗体的杂交瘤细胞株 1C1 2 和 9B4 ,经鉴定两株单抗亚型均为 Ig G1 ,间接 EL ISA测定腹水效价为 1∶ 3.2× 10 5。该抗体与同系物β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮、玉米赤霉烯酮的交叉反应率分别为 36 .2 5 % ,5 2 .73% ,0 .6 7% ,74 .36 % ,5 3.70 % ;与己烯雌酚、雌二醇、睾酮、克伦特罗的交叉反应率均小于 0 .1%。 展开更多
关键词 玉米赤霉醇 单克隆抗体 制备 鉴定 杂交瘤技术 残留检测方法
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免疫亲和固相萃取-超高效合相色谱-串联质谱法同时测定牛奶中6种玉米赤霉醇类化合物残留 被引量:14
14
作者 章璐幸 孙洁胤 +2 位作者 王延辉 吴惠芳 俞松林 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期566-572,共7页
建立了免疫亲和固相萃取(IAC-SPE)-超高效合相色谱-串联质谱(UPC2-MS/MS)同时测定牛奶中α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉烯酮和玉米赤霉酮残留的分析方法。样品用去离子水稀释,经IAC-SPE富... 建立了免疫亲和固相萃取(IAC-SPE)-超高效合相色谱-串联质谱(UPC2-MS/MS)同时测定牛奶中α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉烯酮和玉米赤霉酮残留的分析方法。样品用去离子水稀释,经IAC-SPE富集净化后,采用Waters ACQUITY UPC2 Torus 2-PIC色谱柱(50 mm×3.0 mm,1.7μm)分离,以超临界CO_2和0.1%(v/v)甲酸甲醇溶液为流动相,经梯度洗脱后在ESI-模式下检测。经过稀释离心的牛奶样品采用免疫亲和柱净化后没有明显的基质效应,6种目标化合物在1~200 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数(r^2)≥0.995 7;6种目标化合物在3个加标水平下的平均回收率为75.9%~106.5%,日内和日间精密度均≤11.4%。该法专属性好,操作简便,有机溶剂使用量小,与已有的样品测定方法比较更绿色环保,可用于牛奶中α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮和玉米赤霉烯酮的残留检测。 展开更多
关键词 超高效合相-串联质谱 固相萃取 免疫亲和柱 玉米赤霉醇类化合物 牛奶
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复合免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱法同时测定动物源性食品中6种玉米赤霉醇类化合物和氯霉素残留量 被引量:11
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作者 王清 王国民 +5 位作者 郗存显 李贤良 陈冬东 唐柏彬 张雷 赵华 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期640-646,共7页
建立了动物源性食品中6种玉米赤霉醇类化合物和氯霉素残留量的复合免疫亲和柱净化、液相色谱-串联质谱(LC-MS / MS)分析方法。样品(鱼肉、肝脏、牛奶、蜂蜜)经β-葡萄糖苷酸/硫酯酸复合酶酶解后用乙醚提取,提取液经氮气吹干,残渣... 建立了动物源性食品中6种玉米赤霉醇类化合物和氯霉素残留量的复合免疫亲和柱净化、液相色谱-串联质谱(LC-MS / MS)分析方法。样品(鱼肉、肝脏、牛奶、蜂蜜)经β-葡萄糖苷酸/硫酯酸复合酶酶解后用乙醚提取,提取液经氮气吹干,残渣用50%乙腈溶液复溶后过滤,滤液用 PBS 溶液稀释,经复合免疫亲和柱富集净化后供 LC-MS /MS 检测,采用多反应监测(MRM)模式进行定量和定性分析,外标法定量。结果表明,7种目标物的检出限( S / N =3)在0.04~0.10μg / kg 之间,线性相关系数(R2)≥0.9990,平均回收率为70.9%~95.6%,相对标准偏差为2.0%~11.8%。该方法灵敏度高、重现性好,适用于动物源性食品中痕量玉米赤霉醇类药物和氯霉素残留的测定。 展开更多
关键词 复合免疫亲和柱 液相色谱-串联质谱 玉米赤霉醇类化合物 氯霉素 动物源性食品
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玉米赤霉醇完全抗原的制备及质量鉴定 被引量:5
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作者 胡骁飞 邓歌 +5 位作者 柴书军 姚静静 孙亚宁 王方雨 邓瑞广 张改平 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期637-645,共9页
旨在合成玉米赤霉醇(ZER)人工抗原,并用其免疫小鼠以获得含高滴度ZER多克隆抗体的小鼠血清,为ZER单克隆抗体的制备奠定基础。改造ZER第16位上的羟基,合成半抗原ZER-16-羧丙基丁醚,然后分别采用混合酸酐法和碳二亚胺(EDC)法将改造后的半... 旨在合成玉米赤霉醇(ZER)人工抗原,并用其免疫小鼠以获得含高滴度ZER多克隆抗体的小鼠血清,为ZER单克隆抗体的制备奠定基础。改造ZER第16位上的羟基,合成半抗原ZER-16-羧丙基丁醚,然后分别采用混合酸酐法和碳二亚胺(EDC)法将改造后的半抗原与载体蛋白BSA或OVA偶联,制备免疫原ZER-BSA和包被原ZER-OVA,并采用凝胶电泳、动物免疫对人工抗原进行质量鉴定,间接ELISA测定抗血清效价,间接竞争(阻断)ELISA测定抗血清的敏感性和特异性。结果表明,用制备的免疫原免疫小鼠血清效价均已达到1∶104以上。6号鼠的血清敏感性最高,对ZER的半数抑制质量浓度(IC50)达15.77ng/mL,获得的血清除与α-玉米赤霉醇特异性反应外,与其结构类似物β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮、玉米赤霉烯酮分别有12.5%、100%、12.5%、25%、100%的交叉反应,与其他霉菌毒素交叉反应性均小于0.5%。表明试验成功获得ZER人工抗原,通过动物免疫制备敏感性好、特异性强的ZER多克隆抗体,为ZER单克隆抗体的制备及其免疫学检测方法的建立奠定基础。 展开更多
关键词 玉米赤霉醇 完全抗原 多克隆抗体 ELISA
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玉米赤霉醇酶标抗原的制备及其直接和间接竞争ELISA检测方法的建立与比较 被引量:6
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作者 刘媛 刘贤进 +4 位作者 余向阳 张存政 张晓 刘蓉蓉 龚振明 《分析科学学报》 CAS CSCD 2008年第2期141-144,共4页
采用活性酯法将半抗原玉米赤霉醇-16-羧丙基醚与辣根过氧化物酶连接,制备了三种结合比的酶标抗原。通过紫外吸收法和直接非竞争ELISA法对酶标抗原的偶联结果和抗原性进行鉴定。最终选择结合比为1.3∶1的酶标抗原建立直接竞争ELISA检测... 采用活性酯法将半抗原玉米赤霉醇-16-羧丙基醚与辣根过氧化物酶连接,制备了三种结合比的酶标抗原。通过紫外吸收法和直接非竞争ELISA法对酶标抗原的偶联结果和抗原性进行鉴定。最终选择结合比为1.3∶1的酶标抗原建立直接竞争ELISA检测方法。并对建立的直接竞争ELISA(DC-ELISA)与间接竞争ELISA(IC-ELISA)方法在检出限、检测线性范围、检测时间和二抗的使用方面进行了比较。 展开更多
关键词 玉米赤霉醇 酶标抗原 酶联免疫吸附试验(ELISA)
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快速高分离液相色谱-串联质谱法测定植物组织中雌激素玉米赤霉醇类化合物 被引量:7
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作者 张岩 李挥 +3 位作者 张敬轩 吕品 王丽霞 刘敬泽 《分析化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1683-1686,共4页
应用快速高分离液相色谱-串联质谱仪(RRLC-MS/MS),建立了植物组织中玉米赤霉醇类化合物(α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮、玉米赤霉烯酮)的检测方法。植物组织样品采用乙腈提取,碱性水溶... 应用快速高分离液相色谱-串联质谱仪(RRLC-MS/MS),建立了植物组织中玉米赤霉醇类化合物(α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮、玉米赤霉烯酮)的检测方法。植物组织样品采用乙腈提取,碱性水溶液反萃取,经混合阴离子(MAX)固相萃取柱进行净化和富集后,用RRLC-MS/MS检测,多反应监测(MRM)模式下进行定性与定量分析。结果表明:玉米赤霉醇类化合物在0~20μg/kg的线性范围内均具有良好的线性关系,方法检出限(LOD)为0.5μg/kg,定量限(LOQ)为1.0μg/kg,6种玉米赤霉醇类化合物的平均回收率为75.8%~105.4%,相对标准偏差为2.4%~12.1%。本方法可用于植物组织中玉米赤霉醇类化合物含量的测定。 展开更多
关键词 快速高分离液相色谱-串联质谱 植物组织 玉米赤霉醇类
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牛尿中玉米赤霉醇残留酶联免疫检测方法的研究 被引量:4
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作者 王鹤佳 史为民 +2 位作者 沈建忠 唐宁 王平 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第11期9-11,共3页
在制备了玉米赤霉醇单克隆抗体的基础上 ,建立了牛尿中玉米赤霉醇残留的 EL ISA检测方法 ,确定了各种溶液的最适工作浓度 ,并对最低检测限、5 0 %抑制浓度和空白牛尿添加回收试验进行了研究。本方法的最低检测限为 0 .6 ng/ml,5 0 %抑... 在制备了玉米赤霉醇单克隆抗体的基础上 ,建立了牛尿中玉米赤霉醇残留的 EL ISA检测方法 ,确定了各种溶液的最适工作浓度 ,并对最低检测限、5 0 %抑制浓度和空白牛尿添加回收试验进行了研究。本方法的最低检测限为 0 .6 ng/ml,5 0 %抑制浓度为 3.0 ng/ml,以 10、2 1和 35 ng/ml浓度添加空白牛尿 ,回收率在 70 .0 %~ 116 .0 %之间 ,变异系数在 6 .0 %~ 15 .9%之间。此方法快速、灵敏、方便 。 展开更多
关键词 牛尿 玉米赤霉醇 酶联免疫吸附试验 单克隆抗体 药物残留
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运动员特供食品中兴奋剂检测研究进展 被引量:6
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作者 李永吉 陈燕 +1 位作者 王柯 刘畅 《食品安全质量检测学报》 CAS 2016年第7期2604-2610,共7页
β_2-受体激动剂类(β_2-Agonists)、合成类固醇类(anabolic steroids)、糖皮质激素类(glucocorticoid)和玉米赤霉醇类(zeran01)都有促进蛋白合成、提高肌肉含量等作用。尽管这些物质在很多国家的畜牧业养殖中都被禁止或限制使用,但不... β_2-受体激动剂类(β_2-Agonists)、合成类固醇类(anabolic steroids)、糖皮质激素类(glucocorticoid)和玉米赤霉醇类(zeran01)都有促进蛋白合成、提高肌肉含量等作用。尽管这些物质在很多国家的畜牧业养殖中都被禁止或限制使用,但不少养殖户依旧非法滥用以提高经济效益。运动员在摄入有药物残留的食品后,会导致兴奋剂检测呈阳性,这无论对运动员个人还是国家,都会造成重大损失。为杜绝食源性兴奋剂,运动员特供食品常常需要进行上述4类项目的检测。本文主要对这4类物质的定义、作用、危害以及国内外检测方法等进行简要阐述。 展开更多
关键词 β2-受体激动剂类 合成类固醇类 糖皮质激素类 玉米赤霉醇类
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