捻转血矛线虫(H.contortus)ZJ株H11蛋白基因的克隆及序列分析

参照已发表的捻转血矛线虫H11蛋白基因序列设计引物,以H.contortusZJ株的总RNA为模板,进行RT2PCR扩增,成功扩增出H11基因。将PCR产物与pUCm2T载体连接后,转化DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆并测序。序列分析表明,其核苷酸序列与国外报道的H11基因的同源性为99.5%。编码氨基酸序列具有氨基肽酶的保守序列,推测可使虫体不能获得所必需的氨基酸而导致死亡。

猪链球菌ZJ株溶血素基因的克隆和序列分析

猪链球菌ZJ株溶血素 (suilysin)基因 (sly)用特异引物进行PCR扩增后 ,采用T_A克隆策略将其克隆至E .ColiDH5浕。PCR产物和重组质粒酶切分析表明该基因与已报道的sly基因一致 ,核苷酸序列分析表明sly基因与P1/ 7株和 1933株的同源性分别为 99.6 %和 99.7%。

捻转血矛线虫ZJ株24000分泌排泄(ES)蛋白基因的克隆和序列分析

通过 RT- PCR方法 ,从捻转血矛线虫成虫总 RNA中扩增得到特异性片段 ,并把这一基因片段克隆到 p U C18克隆载体上 ,进行测序及同源性比较。序列分析可知 ,其核苷酸序列与国外已发表的 2 4 0 0 0分泌排泄抗原基因的同源性为 99.2 %。表明本试验成功提取了捻转血矛线虫成虫总 RNA,并用 RT- PCR方法克隆了 2 4 0 0 0分泌排泄抗原基因 。

柔嫩艾美耳球虫ZJ株5401基因的克隆和序列分析

利用RT PCR方法扩增出了柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)ZJ(浙江)株的子孢子表面抗原5401基因。把这一基因片段克隆到PGEM T克隆载体上,得到的阳性克隆经PCR鉴定及酶切分析,结果表明重组子(pGEM T 5401)中含有5401基因,该序列全长为864bp,序列本身是一个开放阅读框,将克隆得到的基因与国外报道的5401基因比较,有两个碱基发生有义突变,引起两个氨基酸发生突变,核苷酸同源性为99 8%,氨基酸同源性为99 3%。克隆出的5401基因可以用于将来重组疫苗的研究。

普莱柯生物的副猪嗜血杆菌病二价灭活疫苗（4型JS株＋5型ZJ株）获批为新兽药

根据《兽药管理条例》和《兽药注册办法》规定，经审查，批准普菜柯生物工程股份有限公司、洛阳惠中生物技术有限公司、国家兽用药品工程技术研究中心申报的副猪嗜血杆菌病二价灭活疫苗（4型JS株＋5型ZJ株）为新兽药，核发《新兽药注册证书》，并发布产品试行规程、质量标准、说明书和标签，自3月25日起执行。

捻转血矛线虫ZJ株滞育虫体的获得及其形态特征

为进一步研究寄生性线虫的滞育机制,参照Adams(1986)的方法,通过瘤胃灌注,将捻转血矛线虫感染性三期幼虫攻入绵羊体内,对绵羊进行处理后,获得捻转血矛线虫滞育虫体。滞育虫体发育程度一致,虫体长(1 067±97)μm(n=18),肠道细胞中含有大量棒状结晶块;性腺开始发育,出现雌驱器原基;颈部出现颈乳突。通过温度检测分析,温度可能不是滞育现象的主要刺激因素。棒状结晶块可以被DAPI特异性着色,其成分可能含有核酸。本试验将为进一步研究捻转血矛线虫的滞育机制及其防治奠定基础。

国内首个水佐剂副猪二价灭活疫苗上市

8月8日普莱柯举办的“创未来，赢天下”副猪灭活疫苗上市发布会在洛阳召开。会上大家共同见证了普莱柯历经7年时间研发的新产品——副猪嗜血杆菌病二价灭活疫苗（4型JS株＋5型ZJ株）上市。该疫苗的上市填补了水溶性佐剂副猪嗜血杆菌病灭活疫苗的国内空白，对副猪嗜血杆菌病防控并同时减少抗生素的滥用意义重大，

猪圆环病毒2型单管巢式PCR检测方法建立

猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征的主要病原体。为建立一种灵敏度更高且特异性更强的分子检测技术,研究建立一种猪圆环病毒2型单管巢式PCR检测技术。首先利用梯度PCR方法验证内外引物的最佳退火温度;再利用正交试验设计的方法对单管巢式PCR反应体系的内外引物浓度、Ex Taq酶用量等相关因素进行优化。结果表明,当外引物PCV2-P1/P3退火温度为64.4℃,内引物PCV2-1/2退火温度为54.4℃,通过正交试验最终筛选出的最佳反应体系(25μL)为:2×Taq PCR Mastermix 10μL,100μmol/L的内引物PCV2-1/2各1μL,10μmol/L的外引物PCV2-P1/P3各0.2μL,模板DNA 2.5μL,ddH_(2)O 10.1μL。上述反应体系仅对猪圆环病毒2型扩增出特异性目的条带,具有高度特异性,最低检测下限针对猪圆环病毒2型DBN-SX07株目的基因的最低DNA模板量为0.6×10^(-6) ng、ZJ/c株目的基因的最低DNA模板量为0.6×10^(-3) ng。研究建立的猪圆环病毒2型单管巢式PCR检测方法可以有效针对猪圆环病毒2型特异性检测。

鸭传染性浆膜炎三价灭活疫苗对提高白羽肉鸭生产性能指标的观察

为探究鸭传染性浆膜炎三价灭活疫苗对白羽肉鸭各项生产指标的影响,选取安徽萧县某肉鸭养殖公司2018年9月份放养的1845504只白羽肉鸭,试验分为两组:免疫组19家,共165040只肉鸭,7日龄免疫齐鲁动物保健品有限公司的鸭传染性浆膜炎三价灭活疫苗(1型ZJ01株+2型HN01株+7型YC03株,0.2 mL/只)和青岛易邦生物工程有限公司的重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8+H7N9 H7-Re1株,0.4 mL/只),共同混合注射,0.6 mL/只;空白对照组178家,共1680464只肉鸭,不免疫;同等条件下进行饲养。结果显示,实验组较对照组成活率提高2.1%,只均重差异性不大(均3 kg左右),料肉比降低0.02,试验表明对肉鸭免疫鸭传染性浆膜炎三价灭活疫苗,使肉鸭成活率有明显提升,料肉比有小幅度改善。