ZNF436在胃癌中的表达及调控WNT/β-catenin对胃癌细胞迁移及侵袭的影响

目的探讨锌指蛋白ZNF436在人胃癌细胞系和组织中的相对表达,及ZNF436对胃癌细胞MKN-28迁移和侵袭的影响和机制。方法以人胃癌细胞系,胃癌、配对癌旁组织和正常人胃组织为研究对象;实时定量PCR和免疫组织化学法分析ZNF436在胃癌细胞系,胃癌、配对癌旁组织和正常人胃组织中的相对表达;在线数据分析ZNF436的表达与预后关系;ZNF436-siRNA(实验组)、NC-siRNA(对照组)质粒转染人胃癌MKN028细胞,转染后48 h实时定量PCR验证ZNF436的敲降效率,Transwell实验分析敲降ZNF436后对实验组细胞迁移和侵袭影响;裸鼠转移瘤实验验证ZNF436体内对细胞转移的影响;免疫蛋白印迹实验验证ZNF436对WNT/β-catenin信号通路的影响。结果与正常胃上皮细胞系相比,ZNF436在人胃癌细胞系中高表达( P <0.001);同时与癌旁组织和正常人胃组织相比,ZNF436在胃癌组织中高表达( P <0.001);在线数据发现ZNF436的表达与胃癌的预后有关( P =0.0028);ZNF436基因表达越高,患者预后越差( P <0.001);与对照组相比,实验组细胞的迁移和侵袭能力明显受到抑制( P <0.001);实验组中裸鼠转移瘤的瘤大小和体积明显低于实验组( P < 0.001);低表达ZNF436后,WNT/β-catenin信号通路及其下游细胞因子明显受到抑制。结论ZNF436作为潜在癌基因在人胃癌组织中表达上调,通过促进WNT/β-catenin信号通路参与胃癌的进程。

ZNF436在压力超负荷诱导的心肌肥厚及纤维化中的作用

目的利用基因工程小鼠研究ZNF436在压力超负荷诱导的心肌肥厚及心肌纤维化中的作用。方法将24只ZNF436基因敲除(ZNF436^(—/—),KO)小鼠和24只ZNF436野生型(wild type,WT)小鼠分别随机分为模型组和假手术组(n=12),通过主动脉缩窄术建立小鼠心肌肥厚模型,运用超声检测的方法评价手术4周后小鼠心功能,组织病理学方法评价心肌肥厚及纤维化程度,实时定量聚合酶链式反应在m RNA水平检测心肌肥厚标志物心钠肽、脑钠肽、肌球蛋白重链β及心肌纤维化标志物Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维。结果主动脉缩窄术后4周,KO模型组与WT模型组及KO假手术组相比,KO模型组小鼠心室腔增大,短轴缩短率下降(P均<0.05,n=12),心肌肥厚和纤维化的病理学检测及有关标志物表达水平模型组高于假手术组(P均<0.05,n=12),其中KO模型组表达增加程度比WT模型组更为显著(P均<0.05,n=12)。结论 ZNF436基因可抑制心肌肥厚及纤维化,对心功能起保护作用。