人类心脏发育候选基因ZNF569的生物信息学分析

目的分析人类心脏发育候选基因ZNF569的生物信息学,对其功能研究提供指导意见。方法利用生物信息学网站及生物软件对人类心脏发育候选基因ZNF569进行生物信息学分析。结果ZNF569是一个新的人类KRAB/C2H2型锌指蛋白基因。此基因在基因组DNA上长约56.28 kb,定位于19q13.12。开放阅读框全长2061个碱基,含6个外显子,5个内含子,编码一个长686个氨基酸残基的蛋白质。该蛋白包含一个KRAB结构域和18个锌指结构域,进化分析表明各种真核生物中都存在ZNF569的同源蛋白,而ZNF569蛋白与鼠ZNF74蛋白的相似度达到94%,它们之间的蛋白质序列保守度更高。ZNF569本身18个锌指结构蛋白质序列也高度保守。结论ZNF569及其同源蛋白构成了一个在进化中高度保守的新的KRAB-ZF基因,而它的功能尚未见报道。

人类心发育候选基因ZNF569融合EGFP真核表达载体的构建及表达

目的：构建真核表达重组体pEGFP-ZNF569，并鉴定其在哺乳动物COS-7细胞系能否正确表达。方法：把ZNF569基因ORF定向克隆入带有EGFP报告基因的真核表达载体，构建真核表达重组体pEGFP-ZNF569，脂质体介导将pEGFP-ZNF569转染入哺乳动物COS-7细胞，以一步法RT-PCR检测其在哺乳动物COS-7细胞中的表达情况。结果：双酶切及测序鉴定表明成功构建真核表达重组体pEGFP—ZNF569，并在COS-7细胞中成功地表达了融合荧光蛋白。RT-PCR检测显示RT—PCR扩增产物与ZNF569目的基因片段大小相符，确实源于重组质粒转录后的mRNA。结论：真核表达重组体pEGFP-ZNF569的成功构建及在体外真核细胞中有效表达，为进一步研究ZNF569在心发育过程中的信号调控奠定了一定的实验基础。