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ZNF580基因原核表达载体的构建与鉴定
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作者 何立英 孙慧燕 张文成 《武警医学院学报》 CAS 2007年第3期219-221,共3页
【目的】构建ZNF580基因原核表达载体,为获得大量重组ZNF580蛋白并制备其多克隆抗体奠定基础。【方法】根据ZNF580cDNA序列的开读框架设计上、下游引物,利用PCR技术扩增ZNF580开放阅读框cD-NA序列,将PCR扩增的目的片段与载体pET30a分别... 【目的】构建ZNF580基因原核表达载体,为获得大量重组ZNF580蛋白并制备其多克隆抗体奠定基础。【方法】根据ZNF580cDNA序列的开读框架设计上、下游引物,利用PCR技术扩增ZNF580开放阅读框cD-NA序列,将PCR扩增的目的片段与载体pET30a分别双酶切、回收纯化后做定向连接,EcoRI、XhoI双酶切电泳筛选、鉴定并测序。【结果】双酶切pET30a-ZNF580,电泳分析插入片段长度为524 bp,与预期的结果一致,经连接点两端进行测序,测序结果显示接头两端序列连接正确。【结论】成功构建原核表达载体pET30a-ZNF580。 展开更多
关键词 znf580基因 原核表达载体 pET30a-znf580
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ZNF580-EGFP融合蛋白的亚细胞定位研究 被引量:6
2
作者 张文成 孙慧燕 孟祥艳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1590-1594,共5页
目的:构建增强型绿色荧光报告蛋白(EGFP)与人ZNF580融合蛋白的真核表达载体,转染MGC803细胞进行表达,研究ZNF580-EGFP融合蛋白在MGC803细胞的亚细胞定位。方法:利用PCR技术扩增ZNF580基因cDNA开放阅读框架全编码区、N端编码区、C端编码... 目的:构建增强型绿色荧光报告蛋白(EGFP)与人ZNF580融合蛋白的真核表达载体,转染MGC803细胞进行表达,研究ZNF580-EGFP融合蛋白在MGC803细胞的亚细胞定位。方法:利用PCR技术扩增ZNF580基因cDNA开放阅读框架全编码区、N端编码区、C端编码区,分别克隆到真核表达载体pEGFP-C1,BglⅡ及HindⅢ双酶切电泳筛选、鉴定并测序。荧光显微镜下观察ZNF580-EGFP在MGC803细胞中的表达及亚细胞定位。结果:酶切pEGFP-ZNF580(1-172)、pEGFP-ZNF580(1-93)、pEGFP-ZNF580(94-172),电泳分析插入片段长度分别为:526bp、289bp、247bp,经连接点两端进行测序证实连接正确。pEGFP-ZNF580(1-172)、pEGFP-ZNF580(94-172)表达的ZNF580-EGFP融合蛋白定位在MGC803细胞核。结论:成功构建真核表达载体并在MGC803细胞中得到表达,分析其核定位信号可能位于ZNF580蛋白的C端C2H2型锌指主构域94-172位氨基酸区间。 展开更多
关键词 znf580-EGFP融合蛋白 真核表达载体 绿色荧光蛋白 亚细胞定位
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ZNF580在1-磷酸鞘氨醇诱导内皮细胞迁移和增殖中的作用 被引量:4
3
作者 韦淑萍 孙慧燕 +1 位作者 刘未 张文成 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期2119-2124,共6页
目的:研究人锌指蛋白ZNF580在1-磷酸鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)诱导内皮细胞迁移和增殖中的作用,为探讨ZNF580功能提供科学依据。方法:RT-PCR检测S1P受体在EA.hy926细胞的表达情况;不同浓度(0~10μmol/L)S1P刺激EA.hy926细... 目的:研究人锌指蛋白ZNF580在1-磷酸鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)诱导内皮细胞迁移和增殖中的作用,为探讨ZNF580功能提供科学依据。方法:RT-PCR检测S1P受体在EA.hy926细胞的表达情况;不同浓度(0~10μmol/L)S1P刺激EA.hy926细胞不同时间(0~12 h)后,RT-PCR和Western blotting检测S1P对ZNF580表达的影响;利用p38 MAPK信号通路特异性抑制剂SB203580研究S1P是否通过此信号通路影响ZNF580的表达;脂质体转染法获得瞬时过表达和瞬时低表达ZNF580的EA.hy926细胞;Transwell实验及MTT比色法分析ZNF580对内皮细胞迁移和增殖活性的影响。结果:EA.hy926细胞表达S1P1、S1P3和S1P5三种受体,其cDNA的特异性扩增产物分别为352 bp、701 bp和236 bp;S1P刺激EA.hy926细胞后,ZNF580的表达呈现剂量和时间依赖性增高;SB203580能够抑制S1P诱导的ZNF580的上调作用;ZNF580过表达(低表达)后内皮细胞迁移和增殖活性明显增强(减弱)。结论:S1P通过p38 MAPK信号通路影响ZNF580的表达;ZNF580在内皮细胞迁移和增殖过程中起着重要的调控作用。 展开更多
关键词 1-磷酸鞘氨醇 内皮细胞 znf580
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ZNF580与EGFP融合蛋白表达载体的构建及其在HEK293细胞的表达和定位 被引量:6
4
作者 张文成 孙慧燕 +1 位作者 罗玉玉 崔明亮 《武警医学院学报》 CAS 2008年第3期161-165,F0003,共6页
[目的]构建人ZNF580与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合蛋白真核表达载体,转染细胞进行瞬时表达,分析ZNF580-EGFP融合蛋白在人胚肾HEK293细胞中的表达和亚细胞定位。[方法]利用PCR技术扩增ZNF580基因cDNA开放阅读框架全编码区(编码1-17... [目的]构建人ZNF580与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合蛋白真核表达载体,转染细胞进行瞬时表达,分析ZNF580-EGFP融合蛋白在人胚肾HEK293细胞中的表达和亚细胞定位。[方法]利用PCR技术扩增ZNF580基因cDNA开放阅读框架全编码区(编码1-172位氨基酸)、N端编码区(编码1-93位氨基酸)、C端编码区(编码94-172位氨基酸),分别克隆到真核表达载体pEGFP-C1,BglΠ及HindШ双酶切筛选鉴定并测序。荧光显微镜下观察ZNF580-EGFP在HEK293细胞中的表达及亚细胞定位。[结果]pEGFP-ZNF580(1-172)、pEGFP-ZNF580(94-172)表达的ZNF580-EGFP融合蛋白聚集于HEK293细胞核。[结论]ZNF580蛋白的核定位信号位于其C端C2H2型锌指主构域(94-172位氨基酸区间)。 展开更多
关键词 增强型绿色荧光蛋白 znf580基因 亚细胞定位 HEK293细胞
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酵母双杂交筛选与转录因子ZNF580相互作用的蛋白 被引量:1
5
作者 罗玉玉 杨蓉 +2 位作者 孔麟麟 任党丽 张文成 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1120-1123,共4页
目的:寻找可能与锌指转录因子ZNF580存在相互作用的蛋白。方法:以ZNF580基因开放阅读框作为模版,PCR扩增后连接入酵母表达质粒pGB。诱饵质粒pGB-ZNF580经测序验证后转化酵母菌株Y190,人胎脑cDNA文库亦转化到能稳定表达诱饵蛋白的Y190酵... 目的:寻找可能与锌指转录因子ZNF580存在相互作用的蛋白。方法:以ZNF580基因开放阅读框作为模版,PCR扩增后连接入酵母表达质粒pGB。诱饵质粒pGB-ZNF580经测序验证后转化酵母菌株Y190,人胎脑cDNA文库亦转化到能稳定表达诱饵蛋白的Y190酵母菌株中,并铺到含有营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-His/-Leu)的培养皿上进行初步筛选。所得阳性克隆再进行β-半乳糖苷酶克隆转移滤纸实验进一步去除假阳性。随机挑取部分阳性克隆,逐一转化入含有诱饵质粒的Y190酵母菌进行一对一验证。分离阳性克隆质粒测序,并应用生物信息学方法分析阳性克隆cDNA编码的蛋白。结果:确定了14种与ZNF580可能存在相互作用的蛋白。结论:初步探讨了ZNF580的功能及其可能参与的信号转导通路,为进一步研究转录因子ZNF580参与动脉粥样硬化的机制奠定了实验基础。 展开更多
关键词 znf580 转录因子 酵母双杂交 蛋白相互作用
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锌指蛋白新基因ZNF580过表达对内皮细胞VEGF及MMP-2表达的影响 被引量:1
6
作者 韦淑萍 孙慧艳 张文成 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期1978-1978,共1页
关键词 znf580 内皮细胞 锌指蛋白 转染 重组质粒 细胞构建 下游靶 空载体 明胶酶谱法 脐静脉
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ZNF580基因对人脐静脉内皮细胞增殖和迁移的影响 被引量:2
7
作者 张文成 韦淑萍 +2 位作者 孙慧燕 侯兵 呼文亮 《武警医学院学报》 CAS 2011年第8期605-608,F0002,共5页
【目的】研究人C2H2型锌指蛋白基因ZNF580在人脐静脉内皮细胞增殖和迁移中的作用。【方法】利用细胞转染技术获得瞬时过表达ZNF580的EA.hy926内皮细胞,并用半定量RT-PCR、Western blotting法检测ZNF580的表达情况;采用MTT比色法和细胞... 【目的】研究人C2H2型锌指蛋白基因ZNF580在人脐静脉内皮细胞增殖和迁移中的作用。【方法】利用细胞转染技术获得瞬时过表达ZNF580的EA.hy926内皮细胞,并用半定量RT-PCR、Western blotting法检测ZNF580的表达情况;采用MTT比色法和细胞迁移实验检测ZNF580对内皮细胞功能的影响。【结果】获得瞬时过表达ZNF580的内皮细胞(转染效率为60%),且ZNF580基因过表达内皮细胞增殖和迁移能力分别增强3倍和2.5倍。【结论】ZNF580能够促进内皮细胞增殖和迁移。 展开更多
关键词 znf580 锌指基因 内皮细胞 增殖 迁移
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绿色荧光蛋白报告基因与ZNF580基因重组真核表达载体的构建与鉴定 被引量:2
8
作者 张文成 扎拉嘎胡 +1 位作者 陈莉 买霞 《武警医学院学报》 CAS 2005年第1期8-10,共3页
【目的】构建具有绿色荧光蛋白报告 (GFP)基因的ZNF5 80真核表达载体 ,为转染细胞提供基础。【方法】根据ZNF5 80cDNA序列的开读框架设计上、下游引物 ,利用PCR技术扩增ZNF5 80cDNA开放阅读框序列 ,将PCR目的片段与PGEM T载体连接并克... 【目的】构建具有绿色荧光蛋白报告 (GFP)基因的ZNF5 80真核表达载体 ,为转染细胞提供基础。【方法】根据ZNF5 80cDNA序列的开读框架设计上、下游引物 ,利用PCR技术扩增ZNF5 80cDNA开放阅读框序列 ,将PCR目的片段与PGEM T载体连接并克隆 ,酶切含目的片段PGEM T质粒及 pEGFP C1载体 ,回收纯化后做定向克隆连接 ,BglⅡ及HindⅢ双酶切电泳筛选、鉴定并测序。【结果】酶切 pEGFP C1 ZNF5 80 ,电泳分析插入片段长度为 :5 2 4bp ,与预期的结果一致 ,经连接点两端进行测序 ,测序结果显示接头两端序列连接正确。【结论】成功构建真核表达载体pEGFP C1 ZNF5 80。 展开更多
关键词 znf580 真核表达载体 绿色荧光蛋白
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siRNA沉默ZNF580基因对内皮细胞MMP-2的表达及侵袭能力的影响 被引量:1
9
作者 韦淑萍 孙慧燕 +1 位作者 牟心红 张文成 《武警医学院学报》 CAS 2011年第7期521-524,F0003,共5页
【目的】观察ZNF580基因沉默后内皮细胞MMP-2的表达及迁移和侵袭能力的变化,为探讨ZNF580基因功能提供科学依据。【方法】针对ZNF580基因不同部位设计并化学合成3对不同靶向小干扰RNA(siRNA),脂质体介导瞬时转染EA.hy926内皮细胞;应用... 【目的】观察ZNF580基因沉默后内皮细胞MMP-2的表达及迁移和侵袭能力的变化,为探讨ZNF580基因功能提供科学依据。【方法】针对ZNF580基因不同部位设计并化学合成3对不同靶向小干扰RNA(siRNA),脂质体介导瞬时转染EA.hy926内皮细胞;应用半定量RT-PCR、Western blotting及明胶酶谱检测转染前后内皮细胞ZNF580和MMP-2 mRNA、蛋白的表达及活性变化;运用划痕愈合实验和Transwell小室模型检测转染前后内皮细胞迁移和侵袭能力的改变。【结果】筛选出最佳干扰序列siRNA序列3;下调ZNF580基因表达后,MMP-2 mRNA的表达及明胶酶的活性均下调(P<0.05),且内皮细胞体外迁移和侵袭能力显著降低(P<0.01)。【结论】ZNF580在内皮细胞运动转移过程中具有重要作用,可能成为肿瘤基因治疗的一个新靶点。 展开更多
关键词 znf580 RNA干扰 内皮细胞 MMP-2 迁移
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带有Flag标签的ZNF580真核表达载体的构建及扩增
10
作者 罗玉玉 赵瑛 +1 位作者 孔麟麟 张文成 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期2062-2064,共3页
目的构建并扩增带有Flag标签的ZNF580真核表达载体,用于免疫共沉淀实验。方法 pGB-ZNF580质粒进行SfiI酶切,琼脂糖电泳,切胶并纯化回收ZNF580片段,与同样酶切的真核表达载体pCDEF-Flag连接构建重组质粒pCDEF-Flag-ZNF580。重组质粒转化... 目的构建并扩增带有Flag标签的ZNF580真核表达载体,用于免疫共沉淀实验。方法 pGB-ZNF580质粒进行SfiI酶切,琼脂糖电泳,切胶并纯化回收ZNF580片段,与同样酶切的真核表达载体pCDEF-Flag连接构建重组质粒pCDEF-Flag-ZNF580。重组质粒转化细菌感受态,铺于氨苄抗性LB平板,37℃培养箱过夜,挑取转化了重组质粒的单克隆接种于液体LB培养基中摇床培养4~8 h。从大肠杆菌中提取质粒酶切鉴定及送Takara公司测序鉴定。结果成功构建重组质粒pCDEF-Flag-ZNF580并转化细菌感受态,于大肠杆菌中扩增得到足够用于细胞转染和免疫共沉淀实验的重组质粒,Takara测序结果显示重组质粒序列完全正确。结论成功构建和扩增了重组质粒pCDEF-Flag-ZNF580,为后续进行真核细胞的转染及免疫共沉淀实验奠定了基础。 展开更多
关键词 znf580 转录因子 真核表达载体
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氧化苦参碱下调ZNF580以抑制LTC-14细胞分泌细胞外基质的分子机制研究 被引量:2
11
作者 陈凯 张青 +5 位作者 刘百庆 陈伟 周芳 张兰 夏时海 许威 《天津医药》 CAS 北大核心 2019年第4期376-381,共6页
目的探讨氧化苦参碱(OM)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠胰腺星状细胞LTC-14中细胞外基质(ECM)分泌的影响及其分子机制。方法取生长良好的LTC-14细胞株,分为对照组(正常培养的LTC-14细胞),TGF-β1组(10μg/L TGF-β1刺激12 h),T... 目的探讨氧化苦参碱(OM)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠胰腺星状细胞LTC-14中细胞外基质(ECM)分泌的影响及其分子机制。方法取生长良好的LTC-14细胞株,分为对照组(正常培养的LTC-14细胞),TGF-β1组(10μg/L TGF-β1刺激12 h),TGF-β1+OM组(1 g/L OM预处理30 min,再加入10μg/L TGF-β1刺激12 h),TGF-β1+SiZNF850组(LTC-14细胞中瞬时转染ShRNA-ZNF580质粒,24 h后加入10μg/L TGF-β1刺激12h)。实时定量PCR、Western blot检测细胞内Smad2、Smad3、ZNF580、α-肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)的mRNA和蛋白表达情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测ECM中胶原蛋白-Ⅰ(Col-Ⅰ)、Col-Ⅲ、纤维连接蛋白(FN)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的分泌情况。结果 TGF-β1诱导的LTC-14细胞中Smad2、Smad3、ZNF580和α-SMA的mRNA和蛋白表达水平均升高(P<的分泌水平升高(P<0.05);而用OM预处理或沉默ZNF580基因后,LTC-14细胞中TGF-β1/Smads通路Smad2、Smad3、α-SMA和ZNF580的mRNA和蛋白表达水平均下调(P<0.05),MMP-2/TIMP1表达比值升高(P<0.05),细胞外基质Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、FN、TNF-α和IL-1β分泌水平均降低(P<0.05)。结论 OM通过抑制胰腺星状细胞LTC-14中TGF-β1/Smads通路激活,下调ZNF580,阻滞胰腺星状细胞的活化,使ECM分泌减少、降解增多,减轻胰腺纤维化。ZNF580可能是OM作用的分子靶点。 展开更多
关键词 氧化苦参碱 细胞外基质 转化生长因子Β1 znf580 胰腺星状细胞
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不同浓度TGF-β对内皮细胞锌指基因ZNF580表达的影响
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作者 韩国亮 任党丽 +3 位作者 赵英 张梅 张文成 罗玉玉 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1852-1854,共3页
目的探讨不同浓度转化生长因子(TGF-β)对内皮细胞锌指基因ZNF580表达的影响。方法以不同浓度(0.25~4 ng/ml)的TGF-β刺激EA.hy926内皮细胞12 h,提取细胞总RNA,通过半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析ZNF580基因在内皮细胞中的表达... 目的探讨不同浓度转化生长因子(TGF-β)对内皮细胞锌指基因ZNF580表达的影响。方法以不同浓度(0.25~4 ng/ml)的TGF-β刺激EA.hy926内皮细胞12 h,提取细胞总RNA,通过半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析ZNF580基因在内皮细胞中的表达情况。结果成功提取内皮细胞总RNA并进行RT-PCR反应;当TGF-β浓度从0.25~2 ng/ml逐渐增加时,ZNF580的表达呈逐渐下降趋势(P【0.05,P】0.01);但继续增加TGF-β刺激浓度至4 ng/ml,ZNF580的表达又有所回升(P【0.05)。结论随TGF-β刺激浓度逐渐升高,EA.hy926内皮细胞中ZNF580基因表达呈先降低后升高变化,表明ZNF580很可能是受TGF-β信号转导通路调控的核转录因子,ZNF580和Smad2间的相互作用及ZNF580转录活性的改变可能进一步影响下游相应靶基因的转录,进而影响内皮细胞的功能。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 znf580 TGF-Β 转录因子
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转录因子ZNF580促进血管内皮细胞eNOS的表达 被引量:1
13
作者 张磊 罗玉玉 +1 位作者 常鹏飞 孙世中 《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2015年第4期302-306,共5页
目的研究血管内皮细胞中锌指核转录因子(ZNF580)对内皮型一氧化氮合酶(e NOS)表达的影响。方法通过基因芯片技术检测ZNF580过表达的人血管内皮杂交瘤细胞系(EA.hy926)中基因表达谱的变化。采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹试... 目的研究血管内皮细胞中锌指核转录因子(ZNF580)对内皮型一氧化氮合酶(e NOS)表达的影响。方法通过基因芯片技术检测ZNF580过表达的人血管内皮杂交瘤细胞系(EA.hy926)中基因表达谱的变化。采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹试验(Western bolt)检测转染了携带有ZNF580的慢病毒载体(Lenti-GFP-ZNF580)和携带ZNF580小干扰RNA慢病毒载体(LentiRNAi-ZNF580)的EA.hy926中ZNF580和e NOS mRNA和蛋白的表达变化。结果多种基因表达在ZNF580过表达的EA.hy926细胞中发生了改变,其中e NOS等基因的表达明显上调。转染了携带有(Lenti-RNAi-ZNF580)的内皮细胞中ZNF580和e NOS表达显著下调,而转染了Lenti-GFP-ZNF580的内皮细胞中ZNF580和e NOS表达显著上调。结论转录因子ZNF580促进了血管内皮细胞中e NOS的表达。 展开更多
关键词 锌指核转录因子 内皮型一氧化氮合酶 脑血管痉挛
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TGFβ1刺激不同时间对胰腺腺泡细胞中ZNF580和EMT相关因子的影响 被引量:2
14
作者 张青 王亚丽 +4 位作者 卢美丽 许威 冀润利 牛海艳 陈凯 《武警后勤学院学报(医学版)》 CAS 2016年第12期959-963,共5页
【目的】探讨不同时间的转化生长因子β1(transforming growth factor beta1,TGFβ1)对胰腺腺泡细胞中ZNF580和上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关因子的影响。【方法】体外培养AR42J细胞,用TGFβ1刺激不同时间... 【目的】探讨不同时间的转化生长因子β1(transforming growth factor beta1,TGFβ1)对胰腺腺泡细胞中ZNF580和上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关因子的影响。【方法】体外培养AR42J细胞,用TGFβ1刺激不同时间,收集蛋白和m RNA,用Western blotting检测ZNF580、E-Cadherin和Vimentin的蛋白表达情况,用RT-PCR检测ZNF580、E-Cadherin和FSP1的m RNA水平。【结果】TGFβ1呈时间依赖性的下调ZNF580和E-Cadherin的表达,上调Vimentin和FSP1的表达。【结论】TGFβ1可能通过下调ZNF580促进胰腺腺泡细胞发生EMT。 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 znf580 上皮-间质转化
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ZNF580过表达对内皮细胞血管内皮生长因子的表达及增殖能力的影响 被引量:1
15
作者 韦淑萍 侯兵 +1 位作者 孙慧燕 张文成 《武警后勤学院学报(医学版)》 CAS 2013年第1期1-4,11,F0003,共6页
【目的】研究人锌指蛋白新基因ZNF580过表达对人脐静脉内皮细胞株EA.hy926血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达及增殖能力的变化,为探讨ZNF580基因功能提供科学依据。【方法】重组质粒pEGFP-ZNF580经Lipof... 【目的】研究人锌指蛋白新基因ZNF580过表达对人脐静脉内皮细胞株EA.hy926血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达及增殖能力的变化,为探讨ZNF580基因功能提供科学依据。【方法】重组质粒pEGFP-ZNF580经LipofectamineTM2000脂质体转染法转染EA.hy926细胞,48h后荧光显微镜下观察ZNF580-EGFP在内皮细胞中的表达情况;应用半定量RT-PCR、Western blotting及ELISE法检测转染前后内皮细胞ZNF580和VEGFmRNA、蛋白表达的变化;运用MTT实验检测转染前后内皮细胞增殖能力的改变。【结果】荧光显微镜下示融合蛋白ZNF580-EGFP在EA.hy926细胞核中表达;ZNF580基因过表达后,内皮细胞VEGFmRNA及蛋白的表达均上调(P<0.05),且其增殖能力显著升高(P<0.01)。【结论】ZNF580可以调控EA.hy926细胞VEGF的表达,且ZNF580在内皮细胞增殖过程中具有重要的调节作用。 展开更多
关键词 锌指蛋白 内皮细胞 znf580 血管内皮生长因子 增殖
原文传递
基于癌症基因组图集数据库分析锌指蛋白580 mRNA在肝细胞癌中的表达及意义
16
作者 毛骏 李仁礼 +3 位作者 李海 夏时海 张文成 向晓辉 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2019年第10期2231-2235,共5页
目的研究锌指蛋白580(ZNF580)mRNA在肝细胞癌中的表达以及临床价值,预测ZNF580mRNA在肝细胞癌发生发展中的作用。方法从癌症基因组图集(TCGA)数据库下载肝细胞癌数据集,获得ZNF580mRNA基因表达谱和临床信息。利用相关生物信息学方法,分... 目的研究锌指蛋白580(ZNF580)mRNA在肝细胞癌中的表达以及临床价值,预测ZNF580mRNA在肝细胞癌发生发展中的作用。方法从癌症基因组图集(TCGA)数据库下载肝细胞癌数据集,获得ZNF580mRNA基因表达谱和临床信息。利用相关生物信息学方法,分析ZNF580mRNA在肝细胞癌中表达的情况与临床病理指标的相关性以及对预后的影响。用基因富集化分析预测ZNF580mRNA在肝细胞癌中调控的可能通路。计量资料2组间比较采用t检验,计数资料组间比较采用χ^2检验,并运用Cox比例风险回归模型分析影响患者预后的危险因素,计算风险比(HR)及95%可信区间(95%CI)。结果在TCGA数据库中,ZNF580mRNA的表达水平在肝癌组织中明显高于癌旁组织(8.440±0.705vs7.736±0.387,P<0.05),其表达水平在不同肿瘤分级的患者中差异有统计学意义(t=-2.068,P<0.05)。ZNF580mRNA高表达患者的总体生存期明显低于ZNF580mRNA低表达患者(χ^2=5.456,P<0.05)。多因素Cox回归分析提示ZNF580mRNA的表达水平[HR(95%CI):1.600(1.079~2.372)]和TNM分期[HR(95%CI):2.006(1.394~2.888)]是影响肝细胞癌患者总体生存期的独立危险因素(P值均<0.05)。ZNF580mRNA高表达的样本存在核糖体、亨廷顿病两个通路基因集的富集(P值均<0.05,错误发现率分别为0.198、0.243)。结论ZNF580mRNA可能作为促癌基因在肝细胞癌中发挥作用,有望成为判断肝细胞癌预后的指标和潜在的新治疗靶点。 展开更多
关键词 肝细胞 锌指蛋白580mRNA 计算生物学 危险因素
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Polyethylenimine-modified graphene quantum dots promote endothelial cell proliferation
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作者 Qirong Xu Chen Li +2 位作者 Xiangyan Meng Xinghong Duo Yakai Feng 《Regenerative Biomaterials》 SCIE EI CSCD 2024年第2期137-146,共10页
Endothelial cell proliferation plays an important role in angiogenesis and treatment of related diseases.The aim of this study was to evaluate the effect of polyethylenimine(PEI)-modified graphene quantum dots(GQDs)ge... Endothelial cell proliferation plays an important role in angiogenesis and treatment of related diseases.The aim of this study was to evaluate the effect of polyethylenimine(PEI)-modified graphene quantum dots(GQDs)gene vectors on endothelial cell prolifera-tion.The GQDs-cationic polymer gene vectors were synthesized by amidation reaction,and used to deliver pzNF580 gene to Human umbilical vein endothelial cells(HUVECs)for promoting their proliferation.The chemical modification of GQDs can ad-just gene vectors'surface properties and charge distribution,thereby enhancing their interaction with gene molecules,which could effectively compress the pZNF580 gene.The CCK-8 assay showed that the cell viability was higher than 80%at higher vector concentration(40μg/mL),demonstrating that the GQDs-cationic polymer gene vectors and their gene complex nanoparticles(NPs)having low cytotoxicity.The results of the live/dead cell double staining assay were consistent with those of the CCK-8 assay,in which the cell viability of the A-GQDs/pZNF580(94.38±6.39%),C-GQDs-PEI-polylactic acid-co-polyacetic acid(PLGA)/pZNF580(98.65±6.60%)and N-GQDs-PEI-PLGA/pZNF580(90.08±1.60%)groups was significantly higher than that of the Lipofectamine 2000/pzNF580(71.98±3.53%)positive treatment group.The results of transfection and western blot experiments showed that the vector significantly enhanced the delivery of plasmid to HUVECs and increased the expression of pZNF580 in HUVECs.In addition,the gene NPs better promote endothelial cell migration and proliferation.The cell migration rate and proliferation ability of C-GQDs-PEI-PLGA/pZNF580 and N-GQDs-PEI-PLGA/pZNF580 treatment groupS were higher than those of Lipofectamine 2000/pDNA treatment group.Modified GQDs possess the potential to serve as efficient gene carriers.They tightly bind gene molecules through charge and other non-covalent interactions,significantly improving the effciency of gene delivery and ensuring the smooth release of genes within the cell.This innovative strategy provides a powerful means to promote endothelial cell proliferation. 展开更多
关键词 graphene quantum dots POLYETHYLENIMINE znf580 gene endothelial cell PROLIFERATION
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