大鼠局灶性脑缺血再灌注血脑屏障通透性变化及对Occludin、ZO-1和PKCδ蛋白水平的影响

目的探索大鼠局灶性脑缺血再灌注血脑屏障通透性的变化及可能的相关机制。方法Wistar健康雄性大鼠60只,制备局灶性脑缺血模型,观察并比较脑缺血再灌注6 h、12 h、24 h、48 h的血脑屏障通透性及紧密连接蛋白(Occludin)、胞质紧密黏连蛋白1抗体(ZO-1)和蛋白激酶(PK)Cδ表达的差异。结果脑缺血再灌注后脑组织含水量明显高于空白对照组,且随时间而升高(P<0.05);脑缺血再灌注后脑组织伊文思蓝(EB)含量明显高于空白对照组,且随时间而升高(P<0.05);脑缺血再灌注后脑组织Occludin蛋白、ZO-1蛋白表达量明显低于空白对照组(P<0.05);脑缺血再灌注后脑组织PKCδ蛋白表达量明显高于空白对照组(P<0.05)。结论局灶性脑缺血再灌注后脑组织含水量和血脑屏障通透性增加,可能与Occludin蛋白低表达、ZO-1蛋白和PKCδ蛋白高表达有关。

黄芪三七合剂改善结肠机械屏障紊乱治疗慢性肾病大鼠的初探

目的探讨黄芪三七合剂是否可通过改善结肠机械屏障结构紊乱而发挥治疗慢性肾病大鼠的作用。方法雄性SD大鼠30只随机分为5组:假手术组(Sham组)、模型组(I/R组)、黄芪三七合剂低剂量组(L-HSM组)和高剂量组(H-HSM组)、尿毒清组(NDQ组),采用右肾切除左肾缺血再灌注法建立慢性肾病(CKD)模型,分别于2周、4周、8周取血液测肌酐、尿素氮值,于第4周按照分组给予不同的灌胃处理,其中L-HSM组和H-HSM组分别给予黄芪三七合剂生药量18 g/(kg·d)和36 g/(kg·d),NDQ组给予尿毒清颗粒1.56 g/(kg·d),Sham组和I/R组给予等体积的蒸馏水,于第8周处死大鼠,取肾和结肠组织;检测肾功(血肌酐和尿素氮)、肾纤维化指标蛋白的表达(TGF-β1和α-SMA)、结肠组织炎症因子IFN-γ和IL-6的表达和结肠上皮紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1的表达。结果与模型组相比,高剂量黄芪三七合剂可有效恢复受损的肾功能,并能降低TGF-β1和α-SMA的蛋白表达,减轻肾纤维化;各组结肠炎症因子表达检测结果显示,模型组结肠组织中高表达的炎症因子IFN-γ和IL-6,在低剂量和高剂量黄芪三七合剂作用下均可有效降低;结肠上皮紧密连接蛋白的免疫组化和Western blot检测结果显示,与对照组相比,模型组中紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的表达均明显降低,表明黄芪三七合剂可在一定程度上恢复结肠机械屏障结构。结论黄芪三七合剂可能通过改善结肠机械屏障结构紊乱、减少炎症因子表达而起到防治慢性肾病大鼠的作用。