lncRNA ZSWIM8-AS1对结直肠癌细胞RKO增殖、凋亡、迁移和放射敏感性的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)ZSWIM8-AS1对结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移和放射敏感性的影响及作用机制。方法:选取25例结直肠癌组织和对应的癌旁组织,采用qRT-PCR法检测组织中ZSWIM8-AS1和miR-15b表达水平。体外培养结直肠癌细胞RKO,双荧光素酶报告基因实验验证ZSWIM8-AS1和miR-15b调控关系。分组培养RKO细胞(pcDNA组、pcDNA-ZSWIM8-AS1组、anti-miR-NC组、anti-miR-15b组、pcDNA-ZSWIM8-AS1+miR-NC组和pcDNA-ZSWIM8-AS1+miR-15b组),采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各组细胞存活率,双染法检测各组细胞凋亡率,Transwell小室检测各组细胞迁移,克隆形成实验检测各组细胞放射敏感性,Western blot法检测各组细胞中Ki-67、Cleaved Caspase-3、N-cadherin、E-cadherin的蛋白表达水平。结果:与癌旁组织比较,结直肠癌组织中ZSWIM8-AS1表达降低(P<0.001),miR-15b表达升高(P<0.001)。ZSWIM8-AS1在RKO细胞中负调控miR-15b表达。与pcDNA组或anti-miR-NC组比较,pcDNA-ZSWIM8-AS1组和anti-miR-15b组细胞存活率、迁移数及Ki-67和N-cadherin蛋白表达均降低(P均<0.001),凋亡率及Cleaved Caspase-3和E-cadherin蛋白表达升高(P均<0.001),增敏比分别为1.747、1.977。与pcDNA-ZSWIM8-AS1+miR-NC组比较,pcDNA-ZSWIM8-AS1+miR-15b组细胞存活率、迁移数及Ki-67和N-cadherin蛋白表达升高(P均<0.001),凋亡率及Cleaved Caspase-3和E-cadherin蛋白表达降低(P均<0.001),增敏比为0.645。结论:ZSWIM8-AS1在结直肠癌组织中表达降低,上调其表达可通过靶向负调控miR-15b抑制结直肠癌细胞RKO增殖和迁移,并促进细胞凋亡和对放射线的敏感性。

lncRNA FUT8-AS1通过调控miR-142-5p/BCL2轴促进上皮性卵巢癌细胞增殖、侵袭和EMT

目的 观察FUT8-AS1基因在上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer, EOC)组织和细胞株中的表达,探讨影响EOC细胞增殖、侵袭和EMT的机制。方法 采用GEPIA2和Kaplan-Meier Plotter数据库分析FUT8-AS1在EOC组织中的表达及与患者生存期的关系。收集74例EOS组织标本和60例正常组织标本,应用RT-PCR法检测FUT8-AS1、miR-142-5p、BCL2和EMT相关基因的表达;运用CCK-8和Transwell实验检测敲低FUT8-AS1基因表达对EOC细胞CAOV3增殖和侵袭的影响。利用双荧光素酶报告分析FUT8-AS1与miR-142-5p的相互作用。结果 GEPIA2和Kaplan-Meier Plotter数据库分析发现,FUT8-AS1在EOC组织中的表达显著高于正常组织(P<0.05),FUT8-AS1高表达组的总生存率显著低于FUT8-AS1低表达组(P<0.01);FUT8-AS1基因在74例EOC组织中的表达明显高于正常组织[(2.547±1.370)vs(1.330±0.831),P<0.01],与大网膜转移、淋巴结转移、FIGO分期和总生存期均相关(P<0.01或P<0.05),敲低FUT8-AS1基因可以抑制CAOV3细胞的体外增殖、侵袭能力和EMT(P<0.01或P<0.05)。双荧光素酶报告分析系统检测显示,共转染miR-142-5p mimics和野生型FUT8-AS1-WT质粒,CAOV3细胞的荧光素酶活性明显降低(P<0.05),同时转染miR-142-5p mimics可抵消CAOV3细胞中由敲低FUT8-AS1导致的BCL2基因表达下调(P<0.05)。结论 FUT8-AS1基因在EOC中呈高表达且导致预后差,敲低FUT8-AS1基因可以抑制CAOV3细胞的体外增殖、侵袭能力和EMT,FUT8-AS1基因可能通过靶向miR-142-5p/BCL2分子轴促进EOC的进展。

沉默lncRNA PSMB8-AS1通过调控miR-144-5p表达对甲状腺癌细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)PSMB8-AS1通过靶向miR-144-5p对甲状腺癌细胞增殖和迁移的影响。方法研究时间为2023年3月至2024年5月,地点:青岛大学附属医院科研中心。采用GeneCards数据库分析PSMB8-AS1在甲状腺癌组织中的表达。采用实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测PSMB8-AS1在人正常甲状腺上皮细胞HTori-3以及甲状腺癌细胞系(8505C、FTC-133、KTC-1、TPC-1)中的表达。采用LncRBase和Cancer LncRNA Census数据库预测PSMB8-AS1的靶基因,用双荧光素酶基因报告实验验证。将FTC-133细胞根据转染物的不同分为si-NC组和si-PSMB8-AS1组,CCK-8法和划痕实验分别检测低表达PSMB8-AS1对FTC-133细胞增殖和迁移的影响,PSMB8-AS1与miR-144-5p的靶向关系。qPCR检测低表达PSMB8-AS1对FTC-133细胞中miR-144-5p和ITGA3 mRNA表达的影响。Western blot法检测低表达PSMB8-AS1对FTC-133细胞中ITGA3、Cyclin A、CDK2、FOXC2、Hedgehog蛋白表达的影响。结果PSMB8-AS1在甲状腺癌组织中表达高于癌旁组织(P<0.01)。PSMB8-AS1在甲状腺癌细胞质8505C、FTC-133、KTC-1、TPC-1中表达均高于HTori-3细胞(均P<0.01)。PSMB8-AS1能够靶向结合miR-144-5p(P<0.01)。si-PSMB8-AS1组FTC-133细胞中PSMB8-AS1表达低于si-NC组[(1.07±0.54)比(6.69±1.16),t=8.78,P<0.01]。低表达PSMB8-AS1后,si-PSMB8-AS1组FTC-133细胞的增殖水平均低于si-NC组(均P<0.01)。si-PSMB8-AS1组FTC-133细胞的迁移率低于si-NC组[(27.89±6.01)%比(68.08±6.16)%,t=4.67,P<0.01]。si-PSMB8-AS1组细胞中miR-144-5p表达高于si-NC组,ITGA3 mRNA表达低于si-NC组(t=7.45、3.13,均P<0.01)。低表达PSMB8-AS1能够抑制FTC-133细胞中ITGA3、Cyclin A、CDK2、FOXC2、Hedgehog蛋白表达(均P<0.01)。结论PSMB8-AS1在甲状腺癌组织和细胞系中表达显著上调,低表达PSMB8-AS1可通过靶向调控miR-144-5p抑制FTC-133细胞的增殖和迁移。

增强子RNA RASSF8-AS1在胃腺癌中的临床意义与分子机制

目的 探究增强子RNA RASSF8-AS1在胃腺癌(STAD)中的表达和关键靶基因预测,分析RASSF8-AS1与临床病理特征、预后的关系,探索RASSF8-AS1在STAD发生发展中的作用机制。方法在UCSC Xena数据库中下载33类肿瘤的表达数据、生存数据和临床数据。采用Kaplan-Meier生存分析和相关性分析确定关键eRNA及其调控基因为eRNA-靶基因对。使用R语言ggboxplot命令分析RASSF8-AS1表达与患者临床病理的相关性,利用GO和KEGG富集分析探索RASSF8-AS1在STAD中参与的信号途径。使用逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)验证RASSF8-AS1在正常和胃腺癌细胞系中的表达量。结果 RASSF8-AS1的表达水平与患者的年龄、临床分级、临床分期显著相关(χ^(2)=4.356、4.166、6.452,P均<0.05)。RT-qPCR结果表明,与正常细胞相比,胃癌细胞中RASSF8-AS1和RASSF8的表达水平显著降低,差异有统计学意义(HR=0.044,95%CI:0.032~0.056,P<0.05)。RASSF8-AS1高表达组患者的总体生存率显著低于低表达组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。GO分析结果表明,RASSF8-AS1参与了细胞外基质组织构建、细胞黏附、化学突触传递的调节、胶原代谢等多种生物过程。KEGG通路分析中,间质发展、细胞外基质组织、膜电位的调节等信号途径被富集。结论 RASSF8-AS1是胃癌中与生存相关的关键eRNA,可能成为胃癌患者早期诊断的潜在生物标志物和潜在的治疗靶点。

lncRNA PAX8-AS1对小鼠急性心肌梗死后心肌细胞凋亡的调控影响

目的观察lncRNA PAX8-AS1对小鼠急性心肌梗死(AMI)后心肌细胞凋亡的调控影响。方法通过左冠状动脉前降支结扎构建AMI模型小鼠。取AMI模型构建成功的雄性小鼠64只,随机选择48只小鼠,于术后0、1、2、3、4、5 d各处死8只小鼠,作为AMI组。小鼠选择方式同AMI组,并采取与AMI小鼠相同的手术方式,但不进行左冠状动脉前降支结扎,于术后0、1、2、3、4、5 d各处死8只小鼠,作为Sham组。Sham组中剩余小鼠随机分为Sham+Ad-shCon组(8只)、Sham+Ad-shPAX8-AS1组(8只);AMI组中小鼠随机分为AMI+Ad-shCon组(8只)、AMI+Ad-shPAX8-AS1组(8只)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测AMI组和Sham组小鼠术后心肌组织中PAX8-AS1水平变化。采用红四氮唑(TTC)染色法检测Sham+Ad-shCon组、Sham+Ad-shPAX8-AS1组、AMI+Ad-shCon组、AMI+Ad-shPAX8-AS1组小鼠梗死面积(IS)/危险区域(ARR);采用TUNEL染色法检测小鼠心肌细胞凋亡水平;采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫组化及蛋白质印迹法检测小鼠心肌组织PAX8-AS1(RT-PCR)、B淋巴细胞瘤-2相关x蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)及裂解的半胱天冬酶-3(cleaved-caspase3)表达水平。结果AMI组小鼠PAX8-AS1表达水平随着AMI术后时间的延长而增加,在术后第3天其PAX8-AS1表达水平达到最高值,并高于Sham组,差异有统计学意义(P<0.05)。与Sham+Ad-shCon组比较,Sham+Ad-shPAX8-AS1组PAX8-AS1表达下调,差异有统计学意义(P<0.05),AMI+Ad-shCon组及AMI+Ad-shPAX8-AS1组PAX8-AS1、IS/ARR、心肌细胞的凋亡指数、Bax及cleaved-caspase3均上调,Bcl-2下调,差异有统计学意义(P<0.05)。与AMI+Ad-shCon组比较,AMI+Ad-shPAX8-AS1组PAX8-AS1、IS/ARR、心肌细胞的凋亡指数、Bax及cleaved-caspase3下调,Bcl-2上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PAX8-AS1在AMI心肌组织中呈高表达,PAX8-AS1低表达可减少梗死面积,抑制心肌细胞凋亡,其作用可能与调节凋亡蛋白有关。

lncRNA SLC8A1-AS1在脓毒症大鼠心肌组织中的表达及其对心肌细胞凋亡和炎症因子分泌的影响

目的研究lncRNA SLC8A1-AS1在脓毒症大鼠心肌组织中表达及其对心肌细胞凋亡和炎症因子分泌的影响。方法qRT-聚合酶链反应(PCR)检测脓毒症大鼠心肌组织中SLC8A1-AS1表达水平。心肌H9C2细胞分成Control组(正常培养)、脂多糖(LPS)组(LPS诱导处理)、Vector+LPS组(转染阴性对照载体,LPS诱导处理)、SLC8A1-AS1+LPS组(转染SLC8A1-AS1过表达载体,LPS诱导处理)、SLC8A1-AS1+LPS+佛波酯(PMA)组[转染SLC8A1-AS1过表达载体,核转录因子(NF)-κB信号激活剂和LPS诱导处理]。四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖变化,流式细胞术检测细胞凋亡水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞分泌的白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,Western印迹检测酶切含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3、p65蛋白表达水平变化。结果脓毒症大鼠心肌组织中SLC8A1-AS1表达水平显著降低(P<0.05)。与Control组比较,LPS组心肌细胞增殖活性显著降低,细胞凋亡率显著升高,细胞分泌的IL-1β、IL-6、TNF-α显著增多,酶切Caspase-3、p65蛋白表达显著增多(均P<0.05)。与Vector+LPS组比较,SLC8A1-AS1+LPS组心肌细胞增殖活性显著升高,细胞凋亡率显著降低,细胞分泌的IL-1β、IL-6、TNF-α显著减少,酶切Caspase-3、p65蛋白表达显著减少(均P<0.05)。与SLC8A1-AS1+LPS组比较,SLC8A1-AS1+LPS+PMA组心肌细胞增殖活性显著降低,细胞凋亡率显著升高,细胞分泌的IL-1β、IL-6、TNF-α显著增多,酶切Caspase-3、p65蛋白表达显著增多(均P<0.05)。结论SLC8A1-AS1在脓毒症大鼠心肌组织中表达下降,上调SLC8A1-AS1通过抑制NF-κB信号减少心肌细胞凋亡和分泌炎症因子。

ST8SIA6-AS1与hnRNPA2B1相互作用通过激活AKT活性并下调P21促进肝癌进展

目的筛选肝癌中具有临床意义的潜在药物靶点并研究此靶点在肝癌发生、发展中的功能和分子机制。方法通过临床数据库GEPIA找到在肝癌中差异表达的lncRNA,进一步筛选到相比于肝正常组织表达差异性明显的lncRNA;通过细胞增殖实验筛选到影响肝癌细胞生长明显的lncRNA;通过GEPIA数据库探讨目的lncRNA在各肿瘤及肝癌中的表达情况及其与肝癌的临床预后相关性;最后通过与目的lncRNA相互作用的蛋白预测其参与的信号通路并进行Western blotting验证,从而说明目的lncRNA在肝癌中发挥功能的潜在分子机制。结果ST8SIA6-AS1、MIR4435-2HG和HULC在肝癌相比于肝正常组织中显著高表达;通过敲低ST8SIA6-AS1、MIR4435-2HG和HULC的细胞增殖实验结果显示,ST8SIA6-AS1显著促进肝癌细胞的生长,从而确定ST8SIA6-AS1为研究目的lncRNA;ST8SIA6-AS1在肝癌中显著高表达且具有明显的临床预后相关性即高表达预后差的特征;ST8SIA6-AS1与hnRNPA2B1相互作用,敲低ST8SIA6-AS1和hnRNPA2B1表达均可降低cleaved caspase-3和P21的表达从而激活PI3K/AKT信号通路,促进肝癌细胞生长增殖。结论ST8SIA6-AS1有望作为肝癌的潜在药物治疗靶点。

沉默lncRNA DNAH8-AS1靶向miR-186-5p/YY1调控前列腺癌细胞的增殖和侵袭

目的探讨lncRNA DNAH8-AS1与miR-186-5p之间的靶向关系及沉默lncRNA DNAH8-AS1对前列腺癌细胞增殖和侵袭的影响。方法采用GEPIA数据库分析lncRNA DNAH8-AS1在前列腺癌和癌旁组织中的表达及其与前列腺癌临床分期的关系。应用原位杂交实验检测lncRNA DNAH8-AS1在前列腺癌和癌旁组织中的表达差异。采用qRT-PCR检测lncRNA DNAH8-AS1在前列腺癌细胞系中的表达水平。采用MTT法和Transwell实验分别检测各组LNCaP细胞增殖和侵袭情况。应用生物信息学技术预测lncRNA DNAH8-AS1与miR-186-5p/YY1之间的靶向关系,并经双荧光素酶报告基因实验验证。结果与癌旁组织相比,前列腺癌组织中lncRNA DNAH8-AS1呈高表达(P<0.01),其与前列腺癌临床分期呈正相关(P<0.05)。与RWPE-1细胞相比,前列腺癌细胞中lncRNA DNAH8-AS1呈高表达(P<0.05)。Control组和si-DNAH8-AS1组LNCaP细胞中lncRNA DNAH8-AS1表达分别为6.44±0.56和1.08±0.37,si-DNAH8-AS1组lncRNA DNAH8-AS1表达比Control组显著降低(P<0.01)。si-DNAH8-AS1组LNCaP细胞的增殖能力,比Control组显著降低(P<0.05)。Control组和si-DNAH8-AS1组侵袭细胞数分别是(63.39±8.03)个和(23.94±3.86)个,si-DNAH8-AS1组LNCaP细胞的侵袭能力比Control组显著降低(P<0.01)。lncRNA DNAH8-AS1可靶向调控miR-186-5p的表达(P<0.01),miR-186-5p可靶向调控YY1的表达(P<0.01)。与Control组相比,si-DNAH8-AS1组LNCaP细胞中miR-186-5p的表达显著减少(P<0.01),YY1基因表达显著增加(P<0.01),Hippo信号通路蛋白表达显著减少(P<0.01)。结论lncRNA DNAH8-AS1在前列腺癌组织和细胞中高表达,与前列腺癌临床分期相关;沉默lncRNA DNAH8-AS1通过靶向miR-186-5p/YY1,有抑制前列腺癌细胞的增殖和侵袭能力。

ST8SIA6-AS1对骨肉瘤细胞增殖和转移的影响及其分子机制

目的探讨ST8SIA6-AS1对骨肉瘤细胞增殖和转移的影响及其分子机制。方法选取37例骨肉瘤患者的瘤组织及瘤旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测ST8SIA6-AS1、miR-223-3p的表达水平。将骨肉瘤细胞U2OS分为si-ST8SIA6-AS1组、si-NC组、miR-223-3p mimic组、miR-NC组、si-ST8SIA6-AS1+miR-223-3p inhibitor组、si-ST8SIA6-AS1+anti-miR-NC组。采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖抑制率;采用克隆形成实验检测细胞克隆形成数;采用划痕实验检测细胞划痕愈合率;采用Transwell检测细胞迁移数;采用双荧光素酶报告实验检测ST8SIA6-AS1与miR-223-3p的靶向关系。结果与瘤旁组织相比,骨肉瘤组织中ST8SIA6-AS1表达水平升高,miR-223-3p表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。沉默ST8SIA6-AS1或过表达miR-223-3p后,U2OS细胞增殖抑制率升高,U2OS细胞克隆形成数和迁移数减少,U2OS细胞划痕愈合率降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。ST8SIA6-AS1可靶向调控miR-223-3p;抑制miR-223-3p可逆转沉默ST8SIA6-AS1对U2OS的抑制作用。结论ST8SIA6-AS1在骨肉瘤中高表达,沉默ST8SIA6-AS1可通过调控miR-223-3p抑制骨肉瘤U2OS细胞增殖和迁移。

增强子RNA RASSF8-AS1在胃腺癌中的临床意义与分子机制

目的探究增强子RNA RASSF8-AS1在胃腺癌(STAD)中的表达和关键靶基因预测,分析RASSF8-AS1与临床病理特征、预后的关系,探索RASSF8-AS1在STAD发生发展中的作用机制。方法在UCSC Xena数据库中下载33类肿瘤的表达数据、生存数据和临床数据。采用Kaplan-Meier生存分析和相关性分析确定关键eRNA及其调控基因为e RNA-靶基因对。使用R语言ggboxplot命令分析RASSF8-AS1表达与患者临床病理的相关性,利用GO和KEGG富集分析探索RASSF8-AS1在STAD中参与的信号途径。使用逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)验证RASSF8-AS1在正常和胃腺癌细胞系中的表达量。结果RASSF8-AS1的表达水平与患者的年龄、临床分级、临床分期显著相关(χ^(2)=4.356、4.166、6.452,P均<0.05)。RT-qPCR结果表明,与正常细胞相比,胃癌细胞中RASSF8-AS1和RASSF8的表达水平显著降低,差异有统计学意义(HR=0.044,95%CI:0.032~0.056,P<0.05)。RASSF8-AS1高表达组患者的总体生存率显著低于低表达组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。GO分析结果表明,RASSF8-AS1参与了细胞外基质组织构建、细胞黏附、化学突触传递的调节、胶原代谢等多种生物过程。KEGG通路分析中,间质发展、细胞外基质组织、膜电位的调节等信号途径被富集。结论RASSF8-AS1是胃癌中与生存相关的关键eRNA,可能成为胃癌患者早期诊断的潜在生物标志物和潜在的治疗靶点。

LncRNA FUT8-AS1调控miR-139-5p促进糖尿病合并脑梗死大鼠血管生成的机制研究

目的:探讨lncRNA FUT8-AS1调控miR-139-5p对糖尿病(DM)合并脑梗死(CI)大鼠血管的影响。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为对照组、DM+CI组、Vector组、shFUT8-AS1组、miR-139-5p Agomir组、pcDNA-FUT8-AS1组和pcDNA-FUT8-AS1+miR-139-5p Agomir组。采用TTC染色检测CI面积,免疫组化染色检测血管内皮生长因子(VEGF)和FMS样酪氨酸激酶(FLT-1)蛋白表达,并检测内皮依赖性微血管密度(MVD)。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测FUT8-AS1、VEGF、FLT-1 mRNA表达。Western blotting检测VEGF蛋白表达。双荧光素酶实验检测FUT8-AS1与miR-139-5p的靶向关系。结果:与对照组比较,DM+CI组CI面积显著增加,脑组织FUT8-AS1、FLT-1 mRNA表达上调,VEGF mRNA及蛋白表达上调,miR-139-5p表达下调(均P<0.05)。与Vector组相比,pcDNA-FUT8-AS1组FLT-1和VEGF mRNA及蛋白表达上调,MVD增加(均P<0.05);shFUT8-AS1组和miR-139-5p Agomir组FLT-1和VEGF mRNA及蛋白表达下调,MVD减少(均P<0.05)。与pcDNA-FUT8-AS1组相比,pcDNA-FUT8-AS1+miR-139-5p Agomir组FLT-1和VEGF mRNA及蛋白表达下调,MVD减少(均P<0.05)。结论:过表达FUT8-AS1通过靶向miR-139-5p上调VEGF和FLT-1表达,促进DM合并CI大鼠血管生成。

lncRNA SLC8A1-AS1在脓毒症大鼠心肌组织中的表达及其对炎症因子分泌的影响

目的研究长链非编码RNA(lncRNA)溶质载体家族8成员A1反义RNA 1(SLC8A1-AS1)在脓毒症大鼠心肌组织中的表达及其对炎症因子分泌的影响。方法通过qRT-PCR方法检测脓毒症大鼠心肌组织中SLC8A1-AS1的表达。将心肌H9C2细胞分成对照组(Control)、脂多糖诱导组(LPS)、Vector+LPS(转染阴性对照载体,LPS诱导处理)、SLC8A1-AS1+LPS(转染SLC8A1-AS1过表达载体,LPS诱导处理)、SLC8A1-AS1+LPS+PMA组[转染SLC8A1-AS1过表达载体,核因子-κB(NF-κB)信号激活剂和LPS诱导处理]。酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞分泌的白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。结果脓毒症大鼠心肌组织中SLC8A1-AS1表达降低(P<0.05)。与对照组比较,LPS组细胞分泌的IL-1β、IL-6、TNF-α增多;与Vector+LPS组比较,SLC8A1-AS1+LPS组细胞分泌的IL-1β、IL-6、TNF-α减少;与SLC8A1-AS1+LPS组比较,SLC8A1-AS1+LPS+PMA组细胞分泌的IL-1β、IL-6、TNF-α增多(P<0.05)。结论SLC8A1-AS1在脓毒症大鼠心肌组织中表达下降,上调SLC8A1-AS1可通过抑制NF-κB信号,减少心肌细胞凋亡和炎症因子分泌。

Lnc-FOXD3-AS1通过激活SMAD1/5/8促进缺铁性贫血大鼠体内Hepcidin表达

目的:探讨长链非编码RNA FOXD3-AS1(lnc-FOXD3-AS1)对缺铁性贫血(IDA)大鼠模型Hepcidin表达调控作用。方法:无特定病原级(SD大鼠)接受反复放血和饲喂低铁饲料诱导IDA模型。将大鼠分为对照组、IDA组、IDA大鼠经lnc-FOXD3-AS1过表达治疗组(pcDNA-FOXD3-AS1+IDA组)、IDA大鼠经过表达空载体治疗组(pcDNA-null+IDA组)、IDA大鼠经pcDNA-FOXD3-AS1联合Smad1/5/8的激活抑制剂Compound C治疗组(pcDNA-FOXD3-AS1+Compound C+IDA组),每组n=8。试剂盒法检测各组大鼠血液中铁含量,用qRT-PCR法检测肝脏组织和血清中lnc-FOXD3-AS1的表达,western blot和ELISA法检测大鼠肝脏组织和血清Hepcidin以及SMAD1/5/8蛋白的表达和激活。结果:IDA组的大鼠IDA模型诱导成功。与对照组比,IDA组中大鼠肝脏组织和血清中铁含量维持在缺铁状态(均P<0.05),且Hepcidin、lnc-FOXD3-AS1和SMAD1/5/8的表达水平都显著降低(均P<0.05),另外SMAD1/5/8的磷酸化水平明显降低(P<0.05)。与pcDNA-null+IDA组比,pcDNA-FOXD3-AS1+IDA组的肝脏组织和血清中铁含量明显增加(均P<0.05),且Hepcidin、lnc-FOXD3-AS1和SMAD1/5/8的表达水平都显著升高(均P<0.05),另外SMAD1/5/8的磷酸化水平明显升高(P<0.05)。与pcDNA-FOXD3-AS1+IDA组比,pcDNA-FOXD3-AS1+Compound C+IDA组的肝脏组织和血清中铁含量明显减少(均P<0.05),且Hepcidin和和SMAD1/5/8的表达水平都显著降低(均P<0.05)。结论:lnc-FOXD3-AS1在IDA大鼠体内低表达,其通过激活SMAD1/5/8信号促进IDA大鼠体内Hepcidin的表达。本研究对于更深入地理解IDA发生的生物学网络机制具有重要意义。

3-碘-6-卤代咪唑并[1,2-a]吡啶-8-甲酸酯的合成

标题化合物是一类重要杂环化合物,具有较高的生物活性,广泛应用于抗肿瘤药物、抗菌、抗病毒等药物的生产。以2-氨基烟酸为起始原料,经过浓硫酸催化与醇类生成2-氨基烟酸酯,再与N-卤代丁二酰亚胺反应制备2-氨基-5-卤代烟酸酯,再与氯乙醛成环缩合生成6-卤代咪唑并[1,2-a]吡啶-8-甲酸酯,最后和N-碘代琥珀酰亚胺发生碘代反应,共4步制得标题化合物,总收率为58.9%~67.7%。产物结构经IR、1HNMR、13CNMR、元素分析进行了表征。合成路线方法新颖、操作简单、产率高、避免柱层析分离纯化,更适合工业化放大生产。

8-溴-6-甲基-2-(1-吡咯烷基羰基)咪唑并[1,2-a]吡啶的合成及晶体结构

以2-氨基-5-甲基吡啶为原料,经溴代、环合、水解及酰胺化反应合成了8-溴-6-甲基-2-(1-吡咯烷基羰基)咪唑并[1,2-a]吡啶,总收率32.82%,其结构经1H-NMR和MS确证,并用X-单晶衍射法测定了其晶体结构。结果表明:待测物块状晶体a(CCDC:2039002)属三斜晶系,空间群P-1,晶胞参数a=6.3447(2)A,b=8.6251(3)A,c=11.4553(4)A,β=88.2300(10)°,V=624.47(4)A3,Z=2,Rgt(F)=0.0261,ωRref(F2)=0.0637,F(000)=314,μ=3.283 mm^(-1)。该路线反应条件温和、后处理简便且收率较高,适合工业化生产。

一种新型有机电致磷光材料中间体8-甲基-1-苯基-[1,2,4]三唑[4,3-a]喹啉的合成研究

以苯甲酸乙酯与水合肼反应得苯甲酰肼、再与2-氯-7-甲基喹啉得到目标产物8-甲基-1-苯基-[1,2,4]三唑[4,3-a]喹啉,其结构经1HNMR确认。考察了水合肼用量对苯甲酰肼产率的影响、不同溶剂对8-甲基-1-苯基-[1,2,4]三唑[4,3-a]喹啉产率的影响。结果表明,水合肼与苯甲酸乙酯摩尔比为2.1制备苯甲酰肼结果最佳,正丁醇作溶剂制备8-甲基-1-苯基-[1,2,4]三唑[4,3-a]喹啉效果更好。

脱镁叶绿酸甲酯的Wittig反应及其红紫素-18酰亚胺衍生物的合成

以脱镁叶绿酸-a甲酯为原料,通过对其3-位乙烯基的氧化,得到3-(2,2-二甲氧基乙基)-去乙烯基脱镁叶绿酸-a甲酯,经过甲酸处理得到3-(2-氧代乙基)-去乙烯基脱镁叶绿酸-a甲酯,选择适当的条件,通过Witting反应合成了对应的3-(2-取代乙基)-去乙烯基脱镁叶绿酸-a甲酯。结合E环的改造,将其转变成酸酐环进而转变成N-取代的酰亚胺环。合成的一系列红紫素-18酰亚胺衍生物具有长波长的紫外吸收。

长链非编码RNAGAS8-AS1在甲状腺微小乳头状癌中的表达特点及临床意义分析

目的探讨长链非编码RNA（LncRNA）GAS8-AS1在甲状腺微小乳头状癌中的表达变化特点及临床意义。 方法收集70例甲状腺微小乳头状癌（PTMC）患者及24例良性结节患者的新鲜组织标本，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）技术检测GAS8-AS1的表达差异，分析其表达水平与临床病理特征的相关性。 结果GAS8-AS1在PTMC组织中表达与良性结节及癌旁组织比较均明显下降（P〈0.05），且癌组织中GAS8-AS1的降低程度与颈部中央区淋巴结转移相关（P〈0.05），多因素分析中GAS8-AS1仍为PTMC患者出现颈部中央区淋巴结转移的独立危险因素，GAS8-AS1鉴别PTMC患者是否出现淋巴结转移的ROC曲线下面积为0.7173（P〈0.05）。 结论GAS8-AS1有可能成为PTMC诊断及淋巴结转移预测的潜在分子标志物。

Notch-1/NICD信号在普罗布考保护大鼠急性脑缺血后再灌注损伤中的作用

目的：研究普罗布考对大鼠急性脑缺血再灌注损伤后大脑的保护作用及其与Notch-1/Notch胞内域（NICD）蛋白信号通路的关系。方法：SD大鼠随机分为假手术组、缺血组及普罗布考组。采用大脑中动脉闭塞（MCAO）法建立局灶性脑缺血再灌注模型，经普罗布考腹腔注射处理后，采用转角试验判断神经功能，2,3,5氯化三苯四氮唑（TTC）染色法测量脑梗死体积，干湿法测定脑组织含水量，免疫印迹检测Notch-1和NICD蛋白的表达，免疫酶联反应检测血清中炎症因子白介素8（IL-8）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量。结果：普罗布考可改善急性脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能，减轻脑水肿；与缺血组相比，普罗布考治疗组Notch-1/NICD蛋白表达降低，IL-8和TNF-α分泌也相应减少。结论：普罗布考可激活Notch-1/NICD信号通路，进而调节IL-8和TNF-α的表达，发挥对急性脑缺血再灌注损伤脑的保护作用。