目的探讨miR-127-3p调控Zeste white 10(ZW10)相互作用着丝粒蛋白1(Zwint-1)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法体外培养OSCC细胞系PE/CA-PJ15、CAL27,对其转染并分为空白对照组(NG组)、阴性转染组(NC组)、过表达m...目的探讨miR-127-3p调控Zeste white 10(ZW10)相互作用着丝粒蛋白1(Zwint-1)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法体外培养OSCC细胞系PE/CA-PJ15、CAL27,对其转染并分为空白对照组(NG组)、阴性转染组(NC组)、过表达miR-127-3p组(miR-127-3p-mimics组)。倒置荧光显微镜下观察转染效果;采用实时荧光定量PCR法检测miR-127-3p、Zwint-1 mRNA水平;MTT法检测各组细胞增殖情况;划痕实验检测PE/CA-PJ15、CAL27细胞迁移能力;Transwell实验检测PE/CA-PJ15、CAL27细胞侵袭能力;免疫印迹法检测人增殖细胞核抗原(Ki-67),凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2,侵袭及迁移相关蛋白E-钙粘附蛋白(E-cadherin)、N-钙粘附蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)及Zwint-1蛋白表达情况;应用TargetScan数据库预测miR-127-3p与Zwint-1靶向关系并用双荧光素酶报告基因实验验证。结果细胞转染成功;与NG组、NC组比较,miR-127-3p-mimics组PE/CA-PJ15、CAL27细胞miR-127-3p、增殖抑制率、E-cadherin、Bax蛋白表达显著升高(P<0.05),划痕治愈率、细胞侵袭数、Zwint-1 mRNA及其蛋白、Ki-67、N-cadherin、Vimentin、Bcl-2蛋白表达显著减少或降低(P<0.05)。TargetScan数据库预测显示Zwint-1是miR-127-3p的潜在靶基因,双荧光素酶报告基因实验证实二者存在靶向关系,且miR-127-3p可负向调控Zwint-1表达。结论上调miR-127-3p表达可靶向下调Zwint-1表达,并抑制OSCC细胞增殖、侵袭及迁移。展开更多
目的Zw10结合因子(Zeste white 10interactor,Zwint)在多种恶性肿瘤中高表达并与预后不良相关,但在三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)中Zwint的预后价值尚不明确。本研究旨在探讨TNBC中Zwint的表达情况及与预后的关系...目的Zw10结合因子(Zeste white 10interactor,Zwint)在多种恶性肿瘤中高表达并与预后不良相关,但在三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)中Zwint的预后价值尚不明确。本研究旨在探讨TNBC中Zwint的表达情况及与预后的关系。方法选取2009-01-01-2013-01-01湖北医药学院附属东风医院110例TNBC患者的完整临床及病理资料。采用免疫组织化学SP法检测Zwint在TNBC组织及配对癌旁乳腺组织中的表达情况,计算细胞染色强度和阳性细胞所占比例的积分,<4为Zwint低表达组,≥4为Zwint高表达组。应用Kaplan-Meier方法及Cox模型方法分析其与TNBC临床病例特征关系及预后的意义。结果Zwint在TNBC组织的表达56.3%(62/110)高于配对癌旁乳腺组织30%(33/110),差异有统计学意义,χ^2=4.091,P=0.014;Zwint高表达与患者年龄(χ^2=2.471,P=0.116)、化疗方案(χ^2=1.349,P=0.245)、手术方式(χ^2=2.848,P=0.092)差异无统计学意义,与组织学分级(χ^2=7.990,P=0.005)、临床分期(χ^2=4.578,P=0.032)、腋窝淋巴结转移(χ^2=6.914,P=0.009)、Ki-67(χ^2=7.990,P=0.005)差异有统计学意义;随访期间,Zwint高表达组,复发、转移12例,死亡11例,Zwint低表达组,复发、转移4例,死亡4例。Kaplan-Meier生存分析显示,Zwint高表达组的中位OS为75.516(95%CI:71.199~80.853)个月,Zwint低表达组为78.545(95%CI:76.238~82.834)个月,χ^2=6.361,P=0.012;Zwint高表达组的中位DFS为63.170(95%CI:57.043~69.296)个月,Zwint低表达组为78.019(95%CI:75.548~80.489),χ^2=5.321,P=0.021。单因素Cox模型分析显示,Zwint高表达(HR=0.283,95%CI:0.090~0.892,P=0.031)、临床分期Ⅲ期(HR=0.510,95%CI:0.089~0.804,P=0.042)、组织学分级Ⅲ级(HR=1.546,95%CI:1.031~3.354,P=0.037)、腋窝淋巴结转移(HR=0.335,95%CI:0.121~0.924,P=0.035)、Ki-67高表达(HR=0.508,95%CI:0.184~0.974,P=0.025)与TNBC的预后相关,均为预后的危险因素。多因素Cox模型分析显示,Zwint高表达(HR=0.177,95%CI:0.051~0.615,P=0.006)及腋窝淋巴结转移(HR=0.174,95%CI:0.058~0.520,P=0.002)是影响患者预后的独立因素。结论Zwint高表达与TNBC患者预后相关,Zwint高表达患者预后不良,Zwint可作为TNBC患者预后预测指标及潜在治疗靶点。展开更多
文摘目的探讨miR-127-3p调控Zeste white 10(ZW10)相互作用着丝粒蛋白1(Zwint-1)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法体外培养OSCC细胞系PE/CA-PJ15、CAL27,对其转染并分为空白对照组(NG组)、阴性转染组(NC组)、过表达miR-127-3p组(miR-127-3p-mimics组)。倒置荧光显微镜下观察转染效果;采用实时荧光定量PCR法检测miR-127-3p、Zwint-1 mRNA水平;MTT法检测各组细胞增殖情况;划痕实验检测PE/CA-PJ15、CAL27细胞迁移能力;Transwell实验检测PE/CA-PJ15、CAL27细胞侵袭能力;免疫印迹法检测人增殖细胞核抗原(Ki-67),凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2,侵袭及迁移相关蛋白E-钙粘附蛋白(E-cadherin)、N-钙粘附蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)及Zwint-1蛋白表达情况;应用TargetScan数据库预测miR-127-3p与Zwint-1靶向关系并用双荧光素酶报告基因实验验证。结果细胞转染成功;与NG组、NC组比较,miR-127-3p-mimics组PE/CA-PJ15、CAL27细胞miR-127-3p、增殖抑制率、E-cadherin、Bax蛋白表达显著升高(P<0.05),划痕治愈率、细胞侵袭数、Zwint-1 mRNA及其蛋白、Ki-67、N-cadherin、Vimentin、Bcl-2蛋白表达显著减少或降低(P<0.05)。TargetScan数据库预测显示Zwint-1是miR-127-3p的潜在靶基因,双荧光素酶报告基因实验证实二者存在靶向关系,且miR-127-3p可负向调控Zwint-1表达。结论上调miR-127-3p表达可靶向下调Zwint-1表达,并抑制OSCC细胞增殖、侵袭及迁移。
文摘目的Zw10结合因子(Zeste white 10interactor,Zwint)在多种恶性肿瘤中高表达并与预后不良相关,但在三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)中Zwint的预后价值尚不明确。本研究旨在探讨TNBC中Zwint的表达情况及与预后的关系。方法选取2009-01-01-2013-01-01湖北医药学院附属东风医院110例TNBC患者的完整临床及病理资料。采用免疫组织化学SP法检测Zwint在TNBC组织及配对癌旁乳腺组织中的表达情况,计算细胞染色强度和阳性细胞所占比例的积分,<4为Zwint低表达组,≥4为Zwint高表达组。应用Kaplan-Meier方法及Cox模型方法分析其与TNBC临床病例特征关系及预后的意义。结果Zwint在TNBC组织的表达56.3%(62/110)高于配对癌旁乳腺组织30%(33/110),差异有统计学意义,χ^2=4.091,P=0.014;Zwint高表达与患者年龄(χ^2=2.471,P=0.116)、化疗方案(χ^2=1.349,P=0.245)、手术方式(χ^2=2.848,P=0.092)差异无统计学意义,与组织学分级(χ^2=7.990,P=0.005)、临床分期(χ^2=4.578,P=0.032)、腋窝淋巴结转移(χ^2=6.914,P=0.009)、Ki-67(χ^2=7.990,P=0.005)差异有统计学意义;随访期间,Zwint高表达组,复发、转移12例,死亡11例,Zwint低表达组,复发、转移4例,死亡4例。Kaplan-Meier生存分析显示,Zwint高表达组的中位OS为75.516(95%CI:71.199~80.853)个月,Zwint低表达组为78.545(95%CI:76.238~82.834)个月,χ^2=6.361,P=0.012;Zwint高表达组的中位DFS为63.170(95%CI:57.043~69.296)个月,Zwint低表达组为78.019(95%CI:75.548~80.489),χ^2=5.321,P=0.021。单因素Cox模型分析显示,Zwint高表达(HR=0.283,95%CI:0.090~0.892,P=0.031)、临床分期Ⅲ期(HR=0.510,95%CI:0.089~0.804,P=0.042)、组织学分级Ⅲ级(HR=1.546,95%CI:1.031~3.354,P=0.037)、腋窝淋巴结转移(HR=0.335,95%CI:0.121~0.924,P=0.035)、Ki-67高表达(HR=0.508,95%CI:0.184~0.974,P=0.025)与TNBC的预后相关,均为预后的危险因素。多因素Cox模型分析显示,Zwint高表达(HR=0.177,95%CI:0.051~0.615,P=0.006)及腋窝淋巴结转移(HR=0.174,95%CI:0.058~0.520,P=0.002)是影响患者预后的独立因素。结论Zwint高表达与TNBC患者预后相关,Zwint高表达患者预后不良,Zwint可作为TNBC患者预后预测指标及潜在治疗靶点。
